方曉玲新型外用劑型-脂質(zhì)體凝膠與微乳

新型外用劑型——

脂質(zhì)體凝膠與微乳復(fù)旦大學(xué)藥學(xué)院方曉玲，董平，白志華，沈蘊琪，徐白1微乳的性質(zhì)微乳(Micro-emulsion)由油相、水相、乳化劑及助乳化劑組成的一種外觀澄明、熱力學(xué)穩(wěn)定的系統(tǒng)。微乳體系有助于提高系統(tǒng)的穩(wěn)定性，能延長產(chǎn)品的有效期微乳在室溫下易于制備，對水溶性和脂溶性藥物都有溶解能力且具有較高的物理穩(wěn)定性，包裹其內(nèi)的藥物具有快速吸收，緩慢釋放的優(yōu)點2皮膚用微乳的特點：1.高滲透性、高水合保濕性能

——微乳的親脂區(qū)能以許多方式同角質(zhì)層相互作用，溶解在微乳脂性區(qū)的藥物能直接分配進角質(zhì)層的脂質(zhì)中，或脂質(zhì)載體本身能插入角質(zhì)層的脂質(zhì)區(qū)，這些相互作用能導(dǎo)致增加藥物的滲透。

——微乳的親水區(qū)能使角質(zhì)層很大程度的發(fā)生水合作用，微乳的水合保濕性能遠遠超過一般常用的制劑如溶液劑和乳劑，并且能顯著提高滲透速度促進了藥物的吸收。

3皮膚用微乳的特點2.微乳具有良好的角質(zhì)層和真皮貯藥功能3.微乳所使用的輔料如：油相，表面活性劑都是無毒安全的，便于大規(guī)模生產(chǎn)；產(chǎn)品外觀澄明，晶瑩透亮，尤其適合作皮膚局部使用4.微乳系統(tǒng)中所用的低級醇類能提高皮膚的通透性，促進載藥系統(tǒng)的整體經(jīng)皮轉(zhuǎn)運，微乳貯藏于皮內(nèi)，發(fā)揮貯庫作用，使藥物緩慢釋放，發(fā)揮長效作用4外用脂質(zhì)體和脂質(zhì)體凝膠脂質(zhì)體(liposome)：將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層形成的薄膜中所制成的超微型球狀藥物載體制劑，屬膠體給藥系統(tǒng)。脂質(zhì)體有許多皮膚局部用藥的優(yōu)點：能較好的包裹親水性或親油性藥物，降低藥物對皮膚的刺激性；對難溶性藥物有增溶性，能增加藥物在皮膚的滯留時間和滯留量；具有藥物全身吸收的限速膜屏障作用，減少藥物的全身吸收，從而降低藥物的不良反應(yīng)。脂質(zhì)體經(jīng)皮給藥制劑在化妝品、炎癥治療麻醉學(xué)、癌癥治療和基因治療等方面有很大潛力

5凝膠劑(Gel)：含有溶解、混懸或乳液狀態(tài)藥物的澄明或略有混濁的半固體制劑。對于局部用制劑來說，具有一定的黏度和觸變性是非常必要的。但脂質(zhì)體缺乏這些性質(zhì)，需要加入一些凝膠劑或增稠劑。國外已有含藥脂質(zhì)體的外用凝膠劑上市，一些化妝品也采用了脂質(zhì)體和凝膠技術(shù)以增強一些營養(yǎng)素的皮膚吸收6第一部分吡羅昔康微乳研究（數(shù)據(jù)和圖表有待加入）以LauroglycolFCC--水--Labrasol、CremophorEL--TranscutolHP、乙醇作為微乳的組成部分,對微乳偽三元相圖進行了研究,初步制備了吡羅昔康水包油微乳。7采用改良Franz擴散池，大鼠背部皮膚作為透皮模型,HPLC測定藥物透皮濃度,計算微乳的經(jīng)皮累積滲透量，進一步優(yōu)化處方。吡羅昔康系難溶性藥物，其外用凝膠劑需要加入Azone-丙二醇作為經(jīng)皮滲透促進劑吡羅昔康微乳有很強的透皮能力，其經(jīng)皮滲透速度遠遠大于凝膠劑，有望成為吡羅昔康的新型透皮給藥制劑。8第二部分三七皂苷復(fù)方微乳的研究選用卵磷脂（化學(xué)名稱磷脂酰膽堿Phosphatidylcholine）作為表面活性劑，肉豆蔻酸異丙酯（IsopropanolMyristateIPM）與ISOFOL16為油相，乙醇作助表面活性劑，制備了三七總皂苷、β-蛻皮激素－卵磷脂W/O型微乳。選用微乳作為載藥系統(tǒng)，以天然植物活性成分中水溶性化合物三七皂苷和β-蛻皮激素為模型藥物，為這類皮膚透過性不良的藥物探索一種新型的經(jīng)皮給藥系統(tǒng)9以藥物微乳體外透皮速度、透過量及皮膚蓄留量為考察指標，綜合理化性質(zhì)（電導(dǎo)率、折光率、粘度）考察了油相用量，表面活性劑/助表面活性劑比例和水相含量對微乳性質(zhì)的影響。10微乳的處方研究微乳相圖研究相圖繪制是研制微乳必要的處方前工作，可為確定微乳處方提供必要的指導(dǎo)。相圖有多種，其中最常用的是偽三元相圖，此相圖往往將表面活性劑與助表面活性劑按一定比例混合為一個組分，與另外兩組分油相和水相以滴定法繪制相圖11微乳相圖研究W/O型微乳除了要符合透明、粘度小的要求外，還有一個重要的指標：載水量，在相圖中即體現(xiàn)為W/O型微乳區(qū)的大小PNS最佳含量為2%，PNS最大溶解濃度約為400mg/ml

EDS最佳含量為0.2%，EDS最大溶解濃度約為30mg/ml

則微乳載水量至少應(yīng)該為7%12微乳處方研究以卵磷脂/乙醇作為混合表面活性劑采用偽三元相圖，以增溶水量為指標油相的選擇Km的選擇正交設(shè)計法L8（23）皮膚滲透參數(shù)優(yōu)化制劑處方微乳的理化性質(zhì)13油相選擇（IPM、ISOFOL16與Miglycol812N）結(jié)果：IPM與ISOFOL16作為油相，較MIGLYOL812N形成的微乳區(qū)大14油相選擇（IPM、ISOFOL16與Miglycol812N）結(jié)果：IPM與ISOFOL16作為混合油相，形成的微乳區(qū)較大15Km的選擇（Km=1：2、1：1、2：1）Km=1：2Km=2：1Km=1：1結(jié)果：當(dāng)Km為1：1時，形成的微乳區(qū)較大16在IPM、ISOFOL16/PC/ethanol/water微乳相圖制備的基礎(chǔ)上得到基本處方后，制備PNS/EDS-PC油包水微乳，以藥物在皮膚中的蓄積量為指標，結(jié)合微乳的理化性質(zhì)考察對處方設(shè)計作進一步探討，選出較優(yōu)處方。17PNS/EDS－PC微乳的制備方法按照IPM、ISOFOL16/PC/ethanol/water微乳相圖制備的基礎(chǔ)上得到基本處方，將適量的卵磷脂溶解于無水乙醇中，與一定量的IPM、ISOFOL16攪拌混溶，攪拌下向此混合溶液中滴加一定濃度的藥物溶液，即得PNS/EDS－PC油包水型微乳。18正交設(shè)計法正交設(shè)計法L8（23）

levelwater（%）IPM/ISOFOL16(％)Km（lecithin/ethanol）1271040551：11.5：119微乳處方正交設(shè)計結(jié)果-PNSNoWOKm

Jμg/cm2

hQμg

cm-2C殘μg/gConductanceμs

cm-1Refractiveiscositymm2

s-1

123456781111222211221122121212120.01550.00350.00790.00220.04940.04970.01170.00730.24150.13420.15170.09620.48050.48830.21000.14030.44080.35202.03270.99242.90002.56713.89702.67480.203×1020.135×1020.065×1020.060×1020.288×1020.205×1020.090×1020.045×102

1.42471.43131.42751.43101.42271.42941.42591.430914.91522.71214.75426.49717.59424.52516.42127.350結(jié)果：處方七微乳中Rg1在皮膚中的蓄積量最大20微乳處方正交設(shè)計結(jié)果-EDSNoWOKm

Jμg/cm2

hQμg

cm-2

C殘μg/gConductanceμs

cm-1Refractiveiscositymm2

s-1

123456781111222211221122121212120.0290.0230.0390.0110.0540.0410.0700.0420.3750.2950.3730.2110.3560.2980.4810.3330.3250.5350.9610.5941.3381.1801.8991.7620.203×1020.135×1020.065×1020.060×1020.288×1020.205×1020.090×1020.045×102

1.42471.43131.42751.43101.42271.42941.42591.430914.91522.71214.75426.49717.59424.52516.42127.350結(jié)果：處方七微乳中EDS在皮膚中蓄積量最大21PNS/EDS-PC微乳與PNS/EDS溶液的透皮考察

（n=5）（mean±SD）

Time（h）Rg1EDSmicroemulsionsolutionmicroemulsionsolution0.5124680.119±0.0060.133±0.0180.137±0.0180.147±0.0150.176±0.0180.217±0.0380.077±0.0030.081±0.0340.084±0.0050.087±0.0050.093±0.0090.106±0.0140.130±0.030.136±0.030.148±0.030.209±0.040.334±0.070.473±0.090.087±0.010.122±0.020.140±0.030.151±0.030.171±0.020.209±0.01J（μg/cm2/h）C殘（μg/g）0.046±0.0083.8970.018±0.0021.1320.066±0.011.8990.014±0.010.852結(jié)果：達到了載藥微乳在皮膚中蓄積，緩慢釋放藥物的目的22討論水溶性藥物三七皂苷和β-蛻皮激素制成W/O型微乳后，經(jīng)皮滲透速度提高，皮膚滯留量增加，有利于藥物透過皮膚，發(fā)揮局部或全身作用微乳作為一種新型外用制劑，不僅能夠改善難溶性藥物的經(jīng)皮吸收性質(zhì)，而且能夠增加水溶性藥物的透皮吸收23第三部分

三七皂苷復(fù)方脂質(zhì)體凝膠的研究24制備脂質(zhì)體凝膠的目的脂質(zhì)體雖然能夠大大提高藥物經(jīng)皮滲透性能，但對于局部用制劑來說，具有一定的黏度和觸變性是非常必要的。但脂質(zhì)體缺乏這些性質(zhì)，需要加入一些凝膠劑或增稠劑，而這些附加劑往往影響脂質(zhì)體的理化性質(zhì)和釋藥性，從而影響療效；本文選擇脂質(zhì)體凝膠作為三七總皂苷和β-蛻皮激素的載藥系統(tǒng)，希望憑借脂質(zhì)體的促滲作用和凝膠本身較好的生物粘附性，能夠增加藥物在皮膚的滯留量和滯留時間，更好地發(fā)揮藥物的局部作用。25三七總皂苷復(fù)方脂質(zhì)體的處方篩選

▲薄膜分散法制備脂質(zhì)體卵磷脂膽固醇

乙醚玻璃珠250mL茄形瓶

25℃水浴旋蒸真空干燥過夜

含藥水溶液25℃水化PNS/EDS脂質(zhì)體▲

單因素考察

pH

超聲強度和時間水化溫度25℃

不進行超聲處理

選用pH適中的去離子水為水相介質(zhì)

26卵磷脂與膽固醇用量比

n=3

兩者比例對包封率影響較大，隨著大豆卵磷脂用量的增大，溶液透明度減小，當(dāng)比例為9：1時，包封率最高大豆卵磷脂與膽固醇的用量比

包封率(%)Rg1EDS1:135.83±0.7738.49±1.322:147.28±0.4952.45±0.624:149.76±1.0956.52±0.388:147.07±0.6753.45±0.829:156.78±0.8161.82±0.1127藥物濃度

n=3

藥物濃度（mg/ml）包封率(%)Rg1EDS2037.83±1.0425.39±0.514040.46±1.8748.27±0.998043.95±0.1953.65±1.4416030.94±0.8646.98±1.35

藥物濃度過高過低，都會使包封率下降，當(dāng)濃度為80mg/ml時，包封率最大28

脂質(zhì)與藥物用量比

n=3

隨著脂質(zhì)用量的增加，產(chǎn)品的粘稠度增大，包封率增加，當(dāng)脂藥比為5:1時，包封率最大脂藥比包封率(%)Rg1EDS0.5:140.01±1.9644.80±0.981.25:141.62±0.6748.90±1.162.5:143.51±0.2349.16±1.375.0:179.79±0.9664.84±0.1729▲正交實驗

根據(jù)單因素試驗結(jié)果，影響藥物包封率的主要因素有大豆卵磷脂與膽固醇的用量比、脂質(zhì)與藥物的用量比以及藥物濃度。

處方篩選結(jié)果：卵磷脂與膽固醇用量比為9:1，Rg1濃度為40mg/mL，EDS濃度為3mg/mL，脂藥比為5:1

處方重復(fù)結(jié)果：Rg1的包封率為(79.79±0.96)%，EDS的包封率為(66.95±1.65)%（n=3）

30▲脂質(zhì)體的粒徑

取PNS脂質(zhì)體適量，去離子水稀釋，置NICOMP測定管、粒度測定儀中測定脂質(zhì)體的粒徑大小。脂質(zhì)體的粒徑大小介于2180～2781nm之間

SizedistributionofPNS/EDSliposome31三七總皂苷復(fù)方脂質(zhì)體凝膠的處方篩選

▲脂質(zhì)體凝膠劑的處方制備

脂質(zhì)體凝膠，PNS的含量為2%，β-蛻皮激素的含量為0.15%

卡波姆-934卡波姆-940重量比分別為0.5%、1%、2%燒杯少量蒸餾水溶脹、過夜2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH在6-7空白凝膠基質(zhì)脂質(zhì)體優(yōu)選處方研和均勻32采用ZTY智能透皮試驗儀（立式）取樣時間點：1、2、4、6、8h擴散介質(zhì)：pH7.4PBS皮膚:大鼠背部皮膚水浴溫度:32±0.5℃▲離體大鼠皮膚透皮實驗

33▲脂質(zhì)體凝膠劑的處方篩選

Carbomer–9348hCumulativeamount（μg）0.5%1%2%Rg119.74±0.4539.84±1.8824.90±1.61EDS1.89±0.0393.64±0.202.27±0.069Cumulationofdrugfromdifferentformulationacrossratskin(8h)

以卡波姆-940為基質(zhì)形成的脂質(zhì)體凝膠，藥物8h皮膚透過量很小，低于最低檢測限。34Drugcontentsintheskinandcorium(8h)

Cumulation(8h)DrugCarbomer-934Carbomer-9400.5%1%2%0.5%1%2%skinRg1(μg/g)87.93±1.34123.14±1.5844.83±0.6764.37±0.64108.63±1.5148.79±0.74EDS(μg/g)10.29±0.1814.09±0.235.10±0.107.11±0.0611.22±0.175.64±0.09coriumRg1(μg/