第五章 黃酮類化合物

1第五章

黃酮類化合物（Flavonoids）22基本要求熟悉黃酮類化合物的含義、分布及生理活性。熟練掌握黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型和分類。掌握黃酮類化合物的理化性質(zhì)、檢識和結(jié)構(gòu)鑒定。側(cè)重掌握黃酮類化合物的提取、分離方法。3一、概述：

又稱黃堿素。化合物數(shù)目很多，在植物界和中草藥中分布很廣。

多存在于高等植物及羊齒類植物中；苔蘚類植物中所含黃酮類化合物較少；藻類、微生物、細(xì)菌中未發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物。多數(shù)黃酮類化合物是羥基衍生物，有的帶有甲氧基或其它取代基。此類化合物多與糖結(jié)合成苷，少部分以游離形式存在。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類4第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類（一）基本結(jié)構(gòu)

1952年以前，黃酮類化合物主要是指基本母核為2-苯基色原酮的一系列化合物。色原酮2-苯基色原酮（黃酮）5

最簡單的黃酮類化合物是黃酮(flavone),存在于櫻草屬（primula）的許多植物的莖及葉中。天然黃酮類化合物母核上常有-OCH3、OH等取代基，這些助色團的存在使黃酮類化合物多顯黃色，且結(jié)構(gòu)中具有堿性氧原子，故過去也曾把黃酮類化合物稱黃堿素類化合物。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類6第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類

現(xiàn)在的黃酮類化合物則泛指兩個苯環(huán)（A與B環(huán)）通過中央三碳鏈相互連接而成的一類化合物。

C6-C3-C67第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類二、生物合成途徑及分類：8查耳酮第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類分類的標(biāo)準(zhǔn)A中央三碳鏈的氧化程度BB環(huán)連接位置C三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀10第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類類型基本結(jié)構(gòu)類型基本結(jié)構(gòu)黃酮（flavone）黃酮醇（flavonol）二氫黃酮（flavanone）二氫黃酮醇（flavanonol）異黃酮（isoflavone）查耳酮（chalcone）二氫異黃酮(isoflavanone)二氫查耳酮（dihydrochalcone）11第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類類型基本結(jié)構(gòu)類型基本結(jié)構(gòu)花色素（anthocyanidin）黃烷-3-醇（flavan-3-ol）橙酮（噢口弄）（aurone）黃烷-3，4-二醇（flavan-3，4-diol）口山酮(xanthone)高異黃酮（homoisoflavone）12C3-位：有OH

黃酮醇

(Flavonol)

無OH

黃酮(Flavone)C2－3飽和：二氫黃酮（醇）(Flavanone)C3與B環(huán)相連：異黃酮（Isoflavone）C環(huán)開環(huán)：查耳酮（Chalcone）第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類C環(huán)還原：黃烷類其它類型：花色素類、橙酮類、奧弄類、高異黃酮、山酮類

13第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類木犀草素（luteolin），存在于忍冬藤、菊花、浮萍中，具有抗菌作用。

１．黃酮類（flavones）14第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類黃芩為清熱解毒類中藥，抗菌成分主要有黃芩苷(baicalin)、次黃芩素(wogonin)等。15

黃芩苷具有抗菌、解毒、降壓作用，是‘銀黃片’的主要成分；黃芩苷還有降轉(zhuǎn)氨酶的作用。

第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類16第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類２．黃酮醇類（flavonols）

槲皮素(quercetin)具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲皮素片用于治療支氣管炎。此外還有降低血壓、增強毛細(xì)血管抵抗力、減少毛細(xì)血管脆性、降血脂、擴張冠狀動脈、增加冠脈血流量等作用。蘆丁(rutin)是槲皮素的３－O蕓香糖苷。用于治療毛細(xì)管脆弱引起的出血病，并用作高血壓的輔助治療劑。17

豆科植物槐米中含有蘆丁和槲皮素。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類18３．二氫黃酮類(flavanones)二氫黃酮黃酮黃酮醇第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類19甘草含黃酮類化合物，主要有甘草苷（Liquiritin）、甘草苷元（Liquiritigenin）、異甘草苷（Iso-Liquiritin）、新甘草苷（Neo-Liquiritin）異甘草苷元（Iso-Liquiritigenin）、新異甘草苷（Neoisoliquiritin）等。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類20第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類

柚皮素（Naringenin）：來源于蕓香科植物柚(CitrusparadisiMacfadyen)的果實；具有抗菌,抗炎,抗癌,解痙和利膽作用.

214．二氫黃酮醇類(flavanonols)二氫黃酮醇二氫黃酮第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類22

水飛薊素具有保肝作用，用于治療急、慢性肝炎及肝硬化，代謝中毒性肝損傷。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類235．查爾酮類（chalcones）

查爾酮為苯甲醛縮苯乙酮類化合物。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類24

二氫黃酮的吡酮環(huán)在堿的作用下易開環(huán)生成6’-羥基查耳酮，由無色轉(zhuǎn)為深黃色;6’-羥基查耳酮經(jīng)酸化又能轉(zhuǎn)化為原來的二氫黃酮。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類25

紅花所含的色素紅花苷是第一個發(fā)現(xiàn)的查耳酮類成分。

紅花在開花初期，花冠呈淡黃色；開花中期，花冠呈深黃色；開花后期或采收干燥過程中由于酶的作用，氧化成紅色。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類266．異黃酮類(isoflavones)

主要存在于豆科、鳶尾科等植物中。異黃酮黃酮第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類276．異黃酮類(isoflavones)主要存在于豆科、鳶尾科等植物中。異黃酮黃酮第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類28葛根總黃酮具有擴冠、增加冠脈流量及降低心肌耗氧量等作用。大豆素具有類似罌粟堿的解痙作用。大豆苷、葛根素及大豆素均能緩解高血壓患者的頭痛等癥狀。297．二氫異黃酮類二氫異黃酮異黃酮第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類308．雙黃酮類

由二分子黃酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植物中。銀杏中含有多種雙黃酮，如銀杏素。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類319．花色素類(anthocyanidins)

是使花、葉、果、莖等呈現(xiàn)藍、紫、紅等顏色的色素。以苷的形式存在于細(xì)胞液中，經(jīng)水解可生成苷元——花色素及糖。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類3210．黃烷-3-醇(flavan-3-ols)及黃烷-3，4-二醇(flavan-3,4-diols)類（-）表兒茶素（+）兒茶素第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類3311．苯駢色酮(xanthanes)

異芒果素(isomengiferin)石韋中的異芒果素具有止咳祛痰的功效。

第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類3412．橙酮類化合物硫磺菊素(sulphuretin)第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類35黃酮黃酮醇二氫黃酮二氫黃酮醇異黃酮二氫異黃酮查耳酮二氫查耳酮花色素黃烷-3-醇黃烷-3，4-二醇橙酮黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型歸納:3536二、組成黃酮苷的糖類

單糖類：D-葡萄糖D-半乳糖D-木糖L-鼠李糖L-阿拉伯糖D-葡萄糖醛酸3637多以苷的形式存在：O-苷和C-苷苷中常見糖的種類：

單糖：D-葡萄糖，D-半乳糖，D-木糖，L-鼠李糖，L-阿拉伯糖，D-葡萄糖醛酸

雙糖：槐糖（glcβ1→2glc），龍膽二糖（glcβ1→6glc），蕓香糖（Rha1→6Glc），新橙皮糖（Rha1—2Glc）等

三糖：龍膽三糖，槐三糖

?；牵?-乙酰葡萄糖，咖啡?；咸烟堑谝还?jié)結(jié)構(gòu)與分類三、存在形式38取代基團：OH、OCH3

、異戊烯基、CH3

、亞甲二氧基取代位置：OH、OCH3

等含氧基團：A環(huán)：5,7位B環(huán)：3′,4′位烷基：A環(huán)：6,8位B環(huán)：3′位第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類四、常見的取代基第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類五、生物活性第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類1.對心血管系統(tǒng)的作用

Vp樣作用：蘆丁、橙皮苷等有Vp樣作用，能降低血管脆性及異常通透性，可用作防治高血壓及動脈硬化的輔助治療劑。

擴冠作用：蘆丁、槲皮素、葛根素、人工合成的力可定。

降血脂及膽固醇：木樨草素41第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類2.

抗肝臟毒作用

從水飛薊種子中得到的水飛薊素具有保肝作用，用于治療急、慢性肝炎、肝硬化及多種中毒性肝損傷。

（+）-兒茶素(catergen)也可抗肝臟毒作用，治療脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起的中毒性肝損傷。水飛薊423.抗炎蘆丁及其衍生物羥乙基蘆丁、二氫槲皮素等具抗炎作用。

4.抗菌及抗病毒作用如木樨草素、黃芩苷、黃芩素

5.解痙作用異甘草素、大豆素：解除平滑肌痙攣；大豆苷、葛根素及葛根總黃酮可緩解高血壓患者的頭痛等癥狀；杜鵑素、川陳皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、羥基芫花素：止咳祛痰。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類436.雌性激素樣作用大豆素(daidzein)等異黃酮具有雌性激素樣作用，可能與它們與己烯雌酚結(jié)構(gòu)類似。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類447.清除人體自由基作用

黃酮類化合物多具有酚羥基，易氧化成醌類而提供氫離子，故有顯著的抗氧特點。

另外還有降血脂、血糖，抗動脈粥樣硬化及抗癌抗突變等作用。第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類458.抗腫瘤作用

Flavopiridol來自印度“紅果樫木”（CDYSOXYLUMBINECTARIFERUM）的。目前正被用于十幾項一期和二期的癌癥臨床試驗。

Flavopiridol能夠阻斷幫助DNA轉(zhuǎn)錄成mRNA的一個蛋白，而這是蛋白質(zhì)合成中的第一步，是所有細(xì)胞要存活下去所必須的。自從1998年以來，它已經(jīng)被用于腎臟癌、前列腺癌、結(jié)腸癌和其他一些癌癥的臨床試驗。目前臨床主要采用Flavopiridol聯(lián)合標(biāo)準(zhǔn)化療方案的方法來提高療效。Flavopiridol第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類知識擴展－曲克蘆丁

蘆丁是從中國所獨有的國槐的花蕾中提取的植物藥，也稱維生素P，具有降低毛細(xì)血管的異常通透性和脆性的作用，是心腦血管保護藥，國內(nèi)用于心腦血管藥品制劑的主要成分，國外還大量用于食品添加劑和化妝品。

曲克蘆丁

【通用名】曲克蘆丁【英文名】Troxerutin【中文別名】曲克蘆丁、三氧乙基蘆丁、托克蘆丁、維腦路通、維生素P4、羥乙基蘆丁【化學(xué)名稱】3′，4′，7-三[O-（2-羥乙基）-5羥基黃酮-3]-

蕓香苷?！舅幤奉悇e】抗凝血藥及溶栓藥【藥理作用】本品系蘆丁經(jīng)羥乙基化制成的半合成黃酮化合物，具有抑制紅細(xì)胞和血小板凝聚作用，防止血栓形成，同時能增加血中氧的含量，改善微循環(huán)，促進新血管生成以增進側(cè)支循環(huán)。它對內(nèi)皮細(xì)胞有保護作用，能對抗5-羥色胺和緩激肽引起的血管損傷，增加毛細(xì)血管的抵抗力，降低毛細(xì)血管的通透性，有防止因血管通透性升高而引起的水腫的作用，并有抗放射性損傷、抗炎癥、抗過敏、抗?jié)兊茸饔谩?/p>

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本章內(nèi)容

第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類第二節(jié)理化性質(zhì)第三節(jié)提取分離方法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定49一、性狀形態(tài)：多為結(jié)晶，少數(shù)為無定形粉末。顏色：結(jié)構(gòu)存在交叉共軛體系，因此化合物多有顏色。

黃酮（醇）及其苷：呈黃色-灰黃色

查耳酮：黃-橙色

二氫黃酮（醇）：無色

異黃酮：微黃色

花色素可隨著pH值的變化顏色有所不同：

紅色（pH<7），紫色(pH8.5)，藍色(pH>8.5)第二節(jié)理化性質(zhì)50一、性狀紅花不同時期顏色有所不同：第二節(jié)理化性質(zhì)新紅花苷（無色）紅花苷（黃色）醌式紅花苷（紅色）

旋光性取決于不對稱碳原子的有無

有無

所有黃酮苷（糖）

游離黃酮游離黃酮黃酮二氫黃酮黃酮醇二氫黃酮醇異黃酮二氫異黃酮查耳酮（二氫）黃烷醇類橙酮花色素類等

二．旋光性52三溶解度黃酮(醇),查耳酮：平面型分子二氫黃酮(醇)：非平面型分子花色素：離子

苷元：難溶于水，易溶于乙醇、甲醇、乙酸乙酯，乙醚等有機溶劑中

苷：易溶于水、乙醇、甲醇中，糖鏈越長水溶性越大。第二節(jié)理化性質(zhì)水中溶解度增加53四、酸堿性酸性：來源分子中的酚羥基；可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺。酸性強弱的比較：取決于羥基的數(shù)目和位置：

7,4′-OH>7-或4′-OH>一般OH>5-OH第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)（可用于提取、分離及鑒定工作）7，4′-OH>7或4′-OH>其他位-OH>5-OHNaHCO3+---Na2CO3++--NaOH++++

應(yīng)用：pH梯度法分離

四、酸堿性第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)55來源：1-位氧原子的未共用電子對，顯微弱的堿性，可與強酸生成（金羊）鹽而溶于酸水中。第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)

堿性：四、酸堿性H+56五、顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)HCl-Mg反應(yīng)HCl－Zn四氫硼鈉（NaBH4)

為（+）的反應(yīng)，顏色多為橙紅-紫紅

第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)57五、顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)HCl-Mg反應(yīng)黃酮（醇）、二氫黃酮（醇）及其苷類化合物（+）查耳酮、橙酮、兒茶素（-)注意:花色素類及部分橙酮、查耳酮類等單純在濃鹽酸酸性下也會發(fā)生顏色變化。

第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)58五、顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)HCl－Zn

二氫黃酮醇，黃酮醇-3-O-糖苷（+）紅色-紫色二氫黃酮醇-3-O-糖苷，黃酮醇（-）第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)59五、顯色反應(yīng)（一）還原反應(yīng)四氫硼鈉（NaBH4)

二氫黃酮類（+）紫-紫紅色。（二氫黃酮類與磷鉬酸反應(yīng)呈棕褐色）

第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)60HCl+MgHCl＋ZnNaBH4

＋

－＋－＋－黃酮（醇）類（苷）異黃酮（少數(shù)顯色）黃酮醇-3-O-糖苷黃酮醇二氫黃酮類注：二氫黃酮與磷鉬酸試劑反應(yīng)呈棕褐色其它黃酮化合物二氫黃酮（醇）類（苷）黃烷醇類二氫黃酮醇二氫黃酮醇-3-O-糖苷查耳酮橙酮應(yīng)用：可用于各類化合物的鑒別61第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)五、顯色反應(yīng)（二）絡(luò)合反應(yīng)黃酮類化合物分子結(jié)構(gòu)中多具有下列結(jié)構(gòu)：可與金屬鹽類試劑產(chǎn)生絡(luò)合反應(yīng)（1）鋯鹽（4）鎂鹽（2）鋁鹽（5）氯化鍶（3）鉛鹽（6）三氯化鐵反應(yīng)62（1）鋯鹽第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)63（2）鋁鹽（3）鉛鹽黃紅第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)64（4）鎂鹽

二氫黃酮(醇),顯天藍色熒光,有5-OH更明顯黃酮(醇)、異黃酮，顯黃~橙、黃~褐色第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)（5）氯化鍶65（三）硼酸顯色反應(yīng)——鑒別5-OH黃酮和2′-OH查耳酮在酸存在下，生成亮黃色。第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)五、顯色反應(yīng)66（四）堿性試劑

NH3蒸氣：顏色加深，可逆；Na2CO3反應(yīng)不可逆。

二氫黃酮遇堿開環(huán)：生成查耳酮，顯橙黃色。

黃酮類：在3-OH-易氧化，溶液即轉(zhuǎn)變成棕色。第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)五、顯色反應(yīng)67

HCl-Mg反應(yīng)HCl-Zn反應(yīng)NaBH4反應(yīng)鋯-枸櫞酸反應(yīng)SrCl2反應(yīng)硼酸+草酸反應(yīng)Molish反應(yīng)（+）（+）（-）黃色，加枸櫞酸,褪色（+）（+）黃色（+）第二節(jié)理化性質(zhì)與顏色反應(yīng)練習(xí)：下面的一個化合物可能發(fā)生的反應(yīng)68

本章內(nèi)容

第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類第二節(jié)理化性質(zhì)第三節(jié)提取分離方法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定69

一、提取

根據(jù)化合物的性質(zhì)，可采取以下提取方法

化合物：極性——溶劑萃取

酸性——堿提酸沉

解離性—離子交換（一）乙醇或甲醇提取法90%～95%醇游離黃酮。60%濃度的醇黃酮苷。醇提液，可用石油醚處理，以便除去葉綠素、胡蘿卜素等脂溶性色素。第三節(jié)提取分離方法70（二）熱水提取法熱水僅限于提取黃酮苷類。熱水提取出的雜質(zhì)較多。水溶液則可加入多倍量濃醇，以沉淀除去蛋白質(zhì)、多糖類等水溶性雜質(zhì)。第三節(jié)提取分離方法71（三）堿提酸沉法第三節(jié)提取分離方法72原理：酚羥基與堿成鹽，溶于水；加酸后析出。堿：常用Ca(OH)2，或CaO水溶液。優(yōu)點：①可使含酚羥基化合物成鹽溶解②可使含COOH雜質(zhì)（如果膠、粘液質(zhì)、蛋白質(zhì)等）形成沉淀而除去。注意：堿性不宜過強，以免破壞黃酮母核；酸化時，酸性不宜過強，pH3~4即可，以免形成鹽而溶解。應(yīng)用：蘆丁和槲皮素的提取分離。（三）堿提酸沉法第三節(jié)提取分離方法73二、分離

（一）采用各種色譜方法：硅膠色譜：按極性大小分離，主要分離極性小和中等極性的化合物?？捎肅C(柱層析)，PTLC（制備薄層層析，PrepareThinLayerChromatography）。

吸附規(guī)律：極性大吸附能力強。

第三節(jié)提取分離方法74聚酰胺：其洗脫順序先—后

(1)苷元相同,三糖苷>雙糖苷>單糖苷>苷元(2)母核上羥基增加，洗脫速度減慢(3)羥基數(shù)目相同,有締合羥基>無締合羥基(4)不同類型黃酮的洗脫順序：

異黃酮>二氫黃酮（醇）>查耳酮>黃酮>黃酮醇（芳香核、共軛雙鍵多者吸附力強）第三節(jié)提取分離方法76習(xí)題：下列黃酮化合物，

（1）用聚酰胺柱色譜，含水甲醇梯度洗脫，（2）用硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，分別寫出洗脫順序第三節(jié)提取分離方法77答案：聚酰胺柱色譜洗脫順序：由先到后

D，E，C，B，A

2.用硅膠柱色譜洗脫順序：由先到后

A，B，C，D，E第三節(jié)提取分離方法78常用型號：Sephadex-G，Sephadex-LH20機理：

分離游離黃酮－－靠吸附作用。吸附程度取決于游離酚羥基數(shù)目，苷元的羥基數(shù)越多,越難洗脫。

分離黃酮苷－－分子篩起主導(dǎo)作用。在洗脫時，黃酮苷類按分子量由大到小的順序流出柱體。葡聚糖凝膠第三節(jié)提取分離方法79

應(yīng)用：分離酸性強弱不同的黃酮苷元酸性比較：7,4’-OH>7-或4’-OH>一般OH>5-OH溶于NaHCO3Na2CO3

不同濃度的NaOH樣品乙醚乙醚液依次萃取5%NaHCO35%Na2CO30.2%NaOH4%NaOH分別酸化各部分黃酮（二）梯度pH萃取法第三節(jié)提取分離方法80

藥材甲醇或乙醇提取，回收醇（三）溶劑萃取法第三節(jié)提取分離方法81醋酸鉛沉淀法：鄰二酚羥基黃酮＋醋酸鉛沉淀不具有鄰二酚羥基＋堿式醋酸鉛沉淀

沉淀懸浮于乙醇，通H2S。（四）根據(jù)特征的官能團第三節(jié)提取分離方法82習(xí)題：從某植物中分離出四種化合物，其結(jié)構(gòu)如下：試比較四種化合物的酸性大小比較極性大小比較它們的Rf值大小順序：

1）硅膠TLC2）聚酰胺TLCAR1=R2=HBR1=H,R2=RhaCR1=Glc,R2=HDR1=Glc,R2=Rha酸性A>C>B>D極性D>C>B>ARf：A>B>C>DD>B>C>A第三節(jié)提取分離方法83

本章內(nèi)容

第一節(jié)結(jié)構(gòu)與分類第二節(jié)理化性質(zhì)第三節(jié)提取分離方法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定84一、色譜法的應(yīng)用硅膠TLC聚酰胺TLC雙向紙色譜法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定85

第一向展開：正相分配色譜，醇性溶劑為展開劑。如：n-BuOH-HAc-H2O上層溶液。

Rf：苷元>單糖苷>雙糖苷第二向展開：反相分配色譜。水性溶劑為展開劑。如：2~6%HAc，3%NaCl等。

Rf：(1)苷元在原點附近，糖鏈越長，Rf越大；

(2)苷元：黃酮(醇)，查耳酮<二氫黃酮(醇)，二氫查耳酮雙向紙色譜法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定86二、紫外光譜法

黃酮存在桂皮?；氨郊柞；M成的交叉共軛系統(tǒng)，在200~400nm間，有兩個主要的紫外吸收帶A環(huán)苯甲酰系統(tǒng)峰帶II，240~280nmB環(huán)桂皮?；到y(tǒng)峰帶I，300~400nm共性：

B環(huán)OH增加，峰帶I

紅移，特別是4′-OH，紅移大；

A環(huán)OH增加，峰帶II紅移。（一）第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定871.黃酮、黃酮醇類帶I

：黃酮類304~350nm

黃酮醇（3-OH被取代）328~357

黃酮醇（3-OH游離）352~385帶II

：240~285nm峰帶I和II強度相似nmIII第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定88黃酮及黃酮醇類化合物的紫外光譜帶（λMeOHmax，nm）89

取代基的影響：

帶I：母核上的－OH、-OCH3等供電基，可引起相應(yīng)吸收帶紅移。氧取代程度越高，帶I紅移越大。羥基甲基化或苷化，將引起紫移。

帶II：峰位主要受A-環(huán)氧取代程度的影響，氧取代程度越高，帶II越向紅移。B環(huán)的取代基只影響峰形。如：只有4′-OR時，為單峰；3′，4′-OR時，為雙峰。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定902.查耳酮、橙酮類nmIII

查耳酮

帶I340~390nm(有裂分)帶II220~270nm

橙酮370~430nm(3~4個峰)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定帶I強，帶II次強峰91查耳酮一橙酮---異黃酮一二氫黃酮---923.異黃酮、二氫黃酮(醇)類nmIII只有A-環(huán)苯甲酰系統(tǒng)，帶II為主峰帶II：異黃酮245~270nm

二氫黃酮（醇）270~295nm帶I：肩峰帶I弱，帶II強峰第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定93（二）利用診斷試劑，判斷羥基位置1.甲醇鈉（NaOMe）黃酮類化合物上所有酚羥基，均可在NaOMe中成鹽，引起紅移。確定4′-OH第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定黃酮醇類：

a.帶I位移40~60nm,強度不降。示有4′-OH.b.帶I紅移50~60nm,強度下降。示有3-OH,但無

4′-OH。

94二氫黃酮（醇）、異黃酮類:a.帶II紅移35~40nm。示有5,7-OH。

b.帶I移至400nm。示無5-OH。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定c.320~330nm,有峰，7-OH。d.3,4′-OH,3,3′,4′-OH,3′,4′,5′-OH等,隨時間延長,

峰衰退.黃酮醇類：952.醋酸鈉（NaOAc）

NaOAc堿性較NaOMe弱，只能使7-OH，4′-OH解離。由于未熔融的NaOAc中含微量HOAc，限制4′-OH的解離。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定（二）利用診斷試劑，判斷羥基位置確定7-OH

黃酮（醇）：帶II紅移5~20nm，示有7-OH。二氫黃酮（醇）：帶II紅移60nm，示有7-OH。帶II紅移35nm，示有5，7-OH。96第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定異黃酮：帶II紅移6~20nm，示有

7-OH，。有5,6,7-三OH，6,7,8-三OH或3,3′,4′-三OH

時，峰隨時間衰退。2.醋酸鈉（NaOAc）3.NaOAc/H3BO3

鄰二酚羥基在NaOAc堿性下，可與H3BO3螯合，引起紅移。黃酮（醇）：帶I紅移12~30nm；B環(huán)具鄰二酚羥基。帶II紅移5~10nmA環(huán)具鄰二酚羥基

(除5,6-二OH)。確定鄰二OH97第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定異黃酮，二氫黃酮（醇）：帶II紅移10~15nm，A環(huán)具鄰二酚羥基(除5,6-二OH)。3.NaOAc/H3BO34.AlCl3及AlCl3/HClAlCl3與引起絡(luò)合。98生成鋁絡(luò)合物的穩(wěn)定性順序：

3-OH(黃酮醇)>5-OH(黃酮)>5-OH(二氫黃酮)>鄰二酚OH>3-OH(二氫黃酮醇)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定99鄰二酚OH和二氫黃酮醇的3-OH形成的絡(luò)合物遇酸分解。當(dāng)3-OH與5-OH共存時，優(yōu)先生成3-OH-4-酮基絡(luò)合物。3-OH或5-OH及鄰二酚OH同時存在，形成二絡(luò)合物。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定應(yīng)注意以下規(guī)律：100a.AlCl3/HCl與MeOH中光譜比較

相同時：示無3-OH或5-OH。

不同時：帶I紅移33~55nm，示只有5-OH，無3-OH時。帶I紅移17~20nm，示有5-OH，且6-氧代；帶I紅移50~60nm，示有5-OH、3-OH；帶I紅移60nm，示只有3-OH時。3-OH,5-OH第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定4.AlCl3及AlCl3/HCl101b.AlCl3/HCl與AlCl3中光譜比較

相同時：無鄰二酚羥基；

不同時：帶I紫移30~40nm，示B環(huán)有鄰二酚羥基；帶I紫移50~60nm，示A，B環(huán)同時有鄰二酚羥基。第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定4.AlCl3及AlCl3/HCl102練習(xí)：UVmax,nm:MeOH259,266sh,299sh,359NaOMe272,327,410NaOAc271,325,393NaOAc/H3BO3262,298,387AlCl3275,303sh,433AlCl3/HCl271,300,364sh,402某化合物HCl-Mg反應(yīng)（+），Molish反應(yīng)（+），ZrOCl2反應(yīng)黃色，加入枸櫞酸褪色，酸水解檢出Glc。紫外譜圖數(shù)據(jù)如下，試推斷其結(jié)構(gòu)第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定103黃酮或3-O-苷

I=410-359=51nm，4′OHII=271-259=12nm,7-OHI=387-359=28nm,B環(huán)有鄰二OHAlCl3/HCl與AlCl3相比，

I=402-433=-31nm,B環(huán)有鄰二OHAlCl3/HCl與MeOH相比，

I=402-359=43nm,有5-OH，無3-OH第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定分析：104溶劑

DMSO-d6：適用于苷和苷元。

CDCl3：適用于極性小的苷元。

其他：Acetone-d6，CD3OD等三核磁共振法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定1051.核磁共振氫譜（1HNMR）A環(huán)質(zhì)子(1).5,7-二OH

H-6,85.70~6.90,d,J=2.5Hz

H-8>H-67-OH糖苷化后，H-6,H-8均向低場位移。三核磁共振法第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定1061.核磁共振氫譜（1HNMR）A環(huán)質(zhì)子(1).5,7-二OH三核磁共振法化合物H-6H-8黃酮，黃酮醇，異黃酮6.00～6.20d6.30～6.50d上述化合物的7-0-葡萄糖苷6.20～6.40d6.50～6.90d二氫黃酮、二氫黃酮醇5.75～5.95d5.90～6.10d上述化合物的7-0-葡萄糖苷5.90～6.10d6.10～6.40d第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定107(2).7-OH

H-5：7.70~8.20,d,J=8Hz

H-6：6.30~7.10,dd,J=8and2Hz

H-8：6.30~7.10,d,J=2HzH-5受C環(huán)C=O的去屏蔽作用而處于低場，化學(xué)位移大。A環(huán)質(zhì)子1.核磁共振氫譜（1HNMR）第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定108(2).7-OHA環(huán)質(zhì)子1.核磁共振氫譜（1HNMR）化合物H-5H-6H-8黃酮、黃酮醇、異黃酮7.90～8.20d6.70～7.10q6.70～7.00d二氫黃酮、二氫黃酮醇7.70～7.90d6.40～6.50q6.30～6.40d第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定109B環(huán)質(zhì)子4?-OR

2?,6?-H

7.10~8.10,d,J=8Hz3?,5?

-H

6.50~7.10,d,J=8Hz（兩組峰，每個峰有兩個H，AA

?

BB

?系統(tǒng)）第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定110B環(huán)質(zhì)子4?-OR化合物H-2′、6′H-3′、5′二氫黃酮類7.10～7.30d6.50～7.10d二氫黃酮醇類7.20～7.40d6.50～7.10d異黃酮類7.20～7.50d6.50～7.10d查耳酮(H-2、

6和H-3、

5)類7.40～7.60d6.50～7.10d橙酮類7.60～7.80d6.50～7.10d黃酮類7.70～7.90d6.50～7.10d黃酮醇類7.90～8.10d6.50～7.10d第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定1113?,4?–二OR

1)黃酮（醇）H-2

?

7.20,d,J=2.5HzH-5

?

6.70~7.10,d,J=8.5HzH-6

?

7.90,dd,J=8.5,2.5Hz2)異黃酮，二氫黃酮（醇）

H-2

?

,5

?

,6

?

6.70~7.10m（峰復(fù)雜）B環(huán)質(zhì)子第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒定1123′,4′,5′-三OR

H-2

?

,6

?

：6.50~7.50R=R′′,為一個單峰s(2H);RR′′

，間位偶合為兩個二重峰d(J=2Hz)B環(huán)質(zhì)子第四節(jié)結(jié)構(gòu)鑒