芍藥苷藥理作用研究進(jìn)展

芍藥苷藥理作用研究進(jìn)展

牡丹甾醇是常用的抗高血壓藥物，是一種單抗高血壓藥物。近年來,國內(nèi)外學(xué)者對(duì)芍藥苷的藥理作用展開了較為深入的研究,發(fā)現(xiàn)芍藥苷具有抗自由基損傷,抑制細(xì)胞內(nèi)鈣超載和抗神經(jīng)毒性等活性,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明其有降低血液黏度、抗血小板聚集、擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)、抗氧化、抗驚厥等多種生物學(xué)效應(yīng),并且毒副作用較小?，F(xiàn)經(jīng)國內(nèi)外進(jìn)一步研究,發(fā)現(xiàn)其具有神經(jīng)保護(hù)作用,但對(duì)于其神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制及作用路徑研究尚不明確。目前芍藥苷作為芍藥總苷的主要成分,已被科研工作者重視,為了解芍藥苷的藥理作用,為進(jìn)一步開發(fā)提供依據(jù),本文對(duì)芍藥苷藥理作用研究概況作一綜述。1局灶性腦缺血?jiǎng)游飳O蓉等觀察PF對(duì)腦缺血后再灌流期間血腦屏障及腦缺血神經(jīng)病理改變癥狀、腦血流量的影響。發(fā)現(xiàn)PF對(duì)腦缺血后血腦屏障、大腦局部血流量、腦水腫具有保護(hù)作用。局灶性腦缺血?jiǎng)游飸?yīng)用PF?？梢悦黠@減輕腦水腫程度,降低腦梗塞范圍,增加大腦局部血流量,改善神經(jīng)行為學(xué)癥狀、血腦屏障通透性。顯示PF對(duì)局灶性腦缺血損傷有明顯的保護(hù)作用,其保護(hù)機(jī)制可能與抑制細(xì)胞內(nèi)鈣離子超載,抗自由基,改善由缺血、缺氧引起的腦血管縮舒功能障礙,保護(hù)腦缺血后再灌流期間的血腦屏障,促進(jìn)再灌流早期腦血流的恢復(fù)等作用有關(guān),但是PF抑制細(xì)胞內(nèi)鈣超載的機(jī)制,對(duì)腦組織中抗自由基機(jī)制有哪些,對(duì)腦血管功能的作用如何,均還有待進(jìn)一步研究。2對(duì)小鼠細(xì)胞作用PC12細(xì)胞為腎上腺嗜鉻瘤克隆化細(xì)胞株,可制備為缺氧損傷、自由基損傷、caf損傷、缺糖損傷、NO損傷及Glu毒性損傷模型。在以往研究中發(fā)現(xiàn)PF對(duì)6種腦缺血樣損傷模型中PC12細(xì)胞具有明顯保護(hù)作用,MTT染色提示PF可顯著提高損傷模型中PC12細(xì)胞的存活數(shù),降低胞漿釋放的LDH水平。除缺氧損傷外,PF對(duì)其他PC12細(xì)胞缺血樣損傷有顯著的保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與抑制損傷后期出現(xiàn)的胞內(nèi)鈣超載相關(guān)。楊軍等進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),通過制備氯化鉀及N-甲基-D-門冬氨酸誘導(dǎo)的鈣超載損傷模型,在形態(tài)學(xué)檢查中,PF對(duì)2種不同類型的鈣超載損傷模型中PC12細(xì)胞均具有明顯保護(hù)作用,MTT法活細(xì)胞測定提示12.5~200μg/mL的PF可顯著提高損傷模型中PC12細(xì)胞存活數(shù),減少胞內(nèi)乳酸脫氫酶滲漏,并顯著減少胞內(nèi)鈣離子濃度。孫蓉等探討一氧化氮誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡及PF保護(hù)作用的機(jī)制。500μmol/L硝普鈉(SNP)可誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡,使細(xì)胞線粒體跨膜電位明顯下降。預(yù)先經(jīng)過0.1、1和10μmol/L濃度的PF處理后,SNP誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡明顯減少,同時(shí)明顯減弱一氧化氮對(duì)線粒體跨膜電位的影響。提示其作用機(jī)制可能與其穩(wěn)定細(xì)胞線粒體跨膜電位有關(guān)。馬偉等研究發(fā)現(xiàn)用Aβ1-40誘導(dǎo)PC12細(xì)胞α7nAChR缺失,建立AD早期細(xì)胞模型;分別用濃度為50、100和200μM的芍藥苷預(yù)處理,光鏡觀察細(xì)胞形態(tài),MTT比色法測定細(xì)胞活性,MTB比色法測定細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量,免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察α7nAChR的表達(dá)情況。結(jié)果表明芍藥苷預(yù)處理組細(xì)胞活性、α7nAChR平均灰度值(AVG)均隨芍藥苷濃度的增加而增加,且Aβ1-40+PF100μM組和Aβ1-40+PF200μM組增加明顯(P<0.05);芍藥苷預(yù)處理組細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量均降低(P<0.05)。結(jié)論:芍藥苷抑制細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載和Aβ1-40的神經(jīng)毒性作用,改善PC12細(xì)胞的活性,保護(hù)α7nAChR,是其防治AD的重要機(jī)制。目前有關(guān)芍藥苷的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制主要來自于對(duì)缺血缺氧性腦損傷、帕金森等疾病的實(shí)驗(yàn)及PC12細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及鼠大腦皮層神經(jīng)元等體外實(shí)驗(yàn)研究,證實(shí)其在體內(nèi)可以通過血腦屏障,進(jìn)而通過(1)平衡離子通道:防止細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載、調(diào)節(jié)鈉離子通道、調(diào)節(jié)L型Ca2+通道;(2)抗氧化:降低氧自由基水平、調(diào)節(jié)一氧化氮及一氧化氮合酶含量;(3)活化腺苷A1受體;(4)改善膽堿神經(jīng)功能;在體外通過(1)抑制細(xì)胞凋亡:防止線粒體損傷、調(diào)節(jié)P38MAPKs,JNKs,ERK等細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)通路;(2)促進(jìn)神經(jīng)生長:促進(jìn)外周神經(jīng)再生、影響大腦皮層神經(jīng)元生長;(3)抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞活性等發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。故芍藥苷在神經(jīng)保護(hù)方面有深入研究的價(jià)值,芍藥苷可通過多途徑、多靶點(diǎn)抑制神經(jīng)細(xì)胞損傷及凋亡,對(duì)神經(jīng)保護(hù)有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。但芍藥苷是否在抑制神經(jīng)細(xì)胞的損傷及凋亡方面有其獨(dú)特的作用靶點(diǎn),目前尚不完全清楚,故對(duì)其神經(jīng)保護(hù)機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究。3pf對(duì)k-ras基因突變的抑制作用PF對(duì)腫瘤細(xì)胞有一定的抑制作用,PF能抑制腫瘤細(xì)胞膜上ATP酶的活性及升高腺苷酸,環(huán)化酶(AC)活性的作用。該藥抑制腫瘤細(xì)胞生成、與抑制膜上Na,K-ATPase并激活A(yù)C密切相關(guān)。方申存等探索PF對(duì)人胃癌SGC7901/VCR細(xì)胞增殖抑制及凋亡的影響,結(jié)果顯示PF對(duì)人胃癌SGC7901/VCR細(xì)胞生長有明顯的抑制作用并促進(jìn)其凋亡,這種作用呈現(xiàn)劑量依賴性;Westernblot和ELISA均證實(shí)PF對(duì)NF-κB有明確抑制作用;隨著濃度增加NF-κB和Bcl-2表達(dá)水平逐漸下調(diào)(P<0.01),但對(duì)Bax沒有明顯影響。PF可明顯抑制SGC7901/VCR細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)其凋亡;其機(jī)制部分可能與阻斷NF-κB通路所介導(dǎo)的Bcl-2分子上調(diào)有關(guān)。晏雪生等應(yīng)用PF對(duì)人肝癌細(xì)胞株Bel-7402和HepG2細(xì)胞增殖的影響。觀察3種措施(陰性無藥對(duì)照、陽性阿霉素對(duì)照及PF)腫瘤細(xì)胞的增殖結(jié)果,其中PF(2mg/mL、1mg/mL、0.5mg/mL)對(duì)Bel-7402和HepG2細(xì)胞增殖有顯著抑制作用,其最大抑制率分別為33.78%和31.45%。增殖抑制作用隨藥物濃度增高而加強(qiáng),呈顯著的量效關(guān)系。研究結(jié)果提示PF能在一定程度上抑制人肝癌細(xì)胞的增殖以延緩肝癌的進(jìn)程。并可誘導(dǎo)HepG2凋亡,并能上調(diào)凋亡相關(guān)基因P53和bax表達(dá),下調(diào)抗凋亡基因bcl-2表達(dá)。4對(duì)aa大鼠細(xì)胞增殖的影響PF具有是一定的免疫調(diào)節(jié)功能。葛志東等用適量刀豆素誘導(dǎo)佐劑性關(guān)節(jié)炎,PF在體外作用脾細(xì)胞懸液和腹腔巨噬細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)對(duì)大鼠脾淋巴細(xì)胞IL-2和大鼠腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1,均有增強(qiáng)作用,量效曲線成鐘罩狀。而且對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)有誘導(dǎo)作用,并且能使AA大鼠大量的低下的脾淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)恢復(fù)和接近正常水平,表明PF具有濃度和機(jī)能依賴性的雙向免疫調(diào)節(jié)作用。王麗雯等研究發(fā)現(xiàn)不同濃度(1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5mol·L-1)PF體外可不同程度抑制1μg·L-1rhIL-1β對(duì)人外周淋巴細(xì)胞促增殖反應(yīng)和IL-2產(chǎn)生;但可促進(jìn)IL-10產(chǎn)生。結(jié)論:rhIL-1β體外,可促進(jìn)人外周淋巴細(xì)胞的增殖,升高IL-2水平;而降低IL-10水平。PF體外可逆轉(zhuǎn)rhIL-1β對(duì)其增殖及產(chǎn)生IL-2和IL-10的影響。人外周淋巴細(xì)胞是PF在體內(nèi)發(fā)揮作用的主要靶細(xì)胞之一,PF可能通過抑制IL-1促人外周淋巴細(xì)胞過度增殖,恢復(fù)Th1/Th2細(xì)胞因子的平衡,發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)作用,為PF可能用于治療RA提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。5膜超極化和膜去極化PF可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞膜Ca2+/Na+交換來舒張平滑肌細(xì)胞,PF具有舒張平滑肌細(xì)胞的作用,且[Ca2+]的減低在PF的舒張平滑肌細(xì)胞作用中起重要作用。在胃腸道平滑肌細(xì)胞中,膜電位通過影響平滑肌細(xì)胞的興奮性而決定了胃腸道的收縮和舒張功能。離子和離子通道是細(xì)胞興奮性的基礎(chǔ),亦即產(chǎn)生生物電現(xiàn)象的基礎(chǔ)?？缒a2+濃度恒定時(shí),細(xì)胞外鈣內(nèi)流主要由膜電位(membranepotential,Em)決定。在平滑肌細(xì)胞中,膜超極化使[Ca2+]i降低,反之,膜去極化可以使[Ca2+]IPF可以使膜超極化,這揭示了PF舒張胃腸道平滑肌細(xì)胞的一個(gè)可能機(jī)制,即除了通過IP3依賴的Ca2+釋放途徑外,PF還可以直接調(diào)控平滑肌細(xì)胞Kv通道,通過開放Kv通道,使膜超極化,抑制Ca2+內(nèi)流,從而降低[Ca2+]i,實(shí)現(xiàn)了對(duì)平滑肌的舒張作用。PF其藥理作用主要為抑制副交感神經(jīng)興奮,降低平滑肌張力和抑制其運(yùn)動(dòng)。目前,已有一些實(shí)驗(yàn)證實(shí)PF對(duì)大鼠輸精管附睪部和前列腺部平滑肌的強(qiáng)直性收縮具有抑制作用;對(duì)豚鼠、大鼠的離體腸管和在體胃運(yùn)動(dòng)以及大鼠子宮平滑肌具有抑制作用;同時(shí)也曾有學(xué)者應(yīng)用白芍組成的方劑治療腸易激綜合征和膽石癥術(shù)后復(fù)發(fā)性絞痛等疾病,均取得一定療效。諸琦等比較PF與生長抑素及其類似物對(duì)實(shí)驗(yàn)性SAP犬Oddi括約肌的影響,研究結(jié)果顯示,PF能顯著降低SAP時(shí)的Oddi括約肌基礎(chǔ)壓,給藥后10min已有明顯降壓效果,通過比較給藥后Oddi括約肌基礎(chǔ)壓降低的差值,其總的降壓作用與奧曲肽和生長抑素?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。因此有理由推測,PF通過松弛Oddi括約肌,有益于急性胰腺炎時(shí)膽汁、胰液的排泌,從而減少胰酶激活,減輕胰腺腺泡損害,最終降低急性胰腺炎的嚴(yán)重程度。6小鼠骨髓epo和g-csf基因表達(dá)郭平采用3.5Gy60Coγ射線全身1次性照射,制備小鼠血虛證模型,檢測外周血象,骨髓集落培養(yǎng)觀察并計(jì)數(shù)CFU-GM、BFU-E、CFU-E、CFU-mix,RT-PCR觀察并檢測骨髓Epo和G-CSF基因表達(dá)。PF顯著升高放射線致血虛證小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)量和骨髓CFU-GM、BFU-E、CFU-E、CFU-mix數(shù)量,上調(diào)骨髓Epo和G-CSF基因表達(dá)。骨髓造血生長因子Epo和G-CSF基因的表達(dá),是升高放射致血虛證小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)量、促進(jìn)各種造血祖細(xì)胞增殖的機(jī)制之一。7-去苯甲?；鵳f的抗高血壓作用從芍藥根分離出的PF及8-去苯甲?；鵓F能降低鼠的血糖。PF靜脈注射能明顯降低鏈脲霉素誘發(fā)的糖尿病小鼠的血糖,血漿中含糖量也隨著用藥時(shí)間的延長而逐漸降低。在用藥后25min時(shí)作用最強(qiáng)。靜注8-去苯甲酰基芍藥苷觀察結(jié)果類似,只是血漿中的含糖量在用藥后3h恢復(fù)至用藥前水平,未觀察到不可逆反應(yīng)。PF降低血漿中含糖量水平,作用與量有關(guān)(1~10mg/kg體重)。對(duì)正常大鼠也觀察到了類似的效果,但與劑量無關(guān)。PF以1mg/kg體重靜注能明顯降低血漿中葡萄糖水平,然而隨著劑量的增加作用越不明顯。因而PF可以用作抗高血糖,對(duì)正常鼠的作用機(jī)制尚不明確。8-去苯甲酰基PF的抗糖尿病活性比PF要弱得多。實(shí)驗(yàn)表明PF降血糖作用機(jī)制與胰島素?zé)o關(guān)。8肺癌a549細(xì)胞系統(tǒng)近些年來的研究還發(fā)現(xiàn)PF具有保肝作用;能夠抑制肺癌A549細(xì)胞系細(xì)胞的分裂;能夠刺激培養(yǎng)的脂肪細(xì)胞釋放腺苷從而促進(jìn)糖代謝;能夠保護(hù)培養(yǎng)的胸腺細(xì)胞免受放射損害。9對(duì)正常胸腺細(xì)胞和細(xì)胞的毒性作用用簡化機(jī)率法求得小鼠靜脈和腹腔給藥LD50分別為150mg/kg和230mg/kg,灌胃2500mg/kg觀察1周,未見明顯中毒癥狀也無死亡。長期毒性實(shí)驗(yàn)采用大鼠(每日ig500、1000和2000mg/kg,連續(xù)給藥30與90d)和狗(每日ig280與560mg/kg,連續(xù)給藥90d),長期給藥后這兩種動(dòng)物除血小板數(shù)目增高外,它們的攝食、體重、血尿常規(guī)、肝腎功能均無明顯改變,對(duì)兩種動(dòng)物的心、腦、肝、腎等18個(gè)重要臟器與組織的病理組織學(xué)觀察亦無明顯毒性作用。有研究表明在培養(yǎng)的正常胸腺細(xì)胞中加入0.1~1000mg·L-1的PF沒有發(fā)生毒性反應(yīng);在U937細(xì)胞系(人骨髓單核細(xì)胞系)中加入160~640mg·L-1濃度的PF也沒有發(fā)生毒性反應(yīng)。但作者的研究發(fā)現(xiàn),在HEK293細(xì)胞系上,當(dāng)PF的終濃度>500μmol·L-1(相當(dāng)于240.23mg·L-1)時(shí)即可導(dǎo)致細(xì)胞的死亡。結(jié)果提示針對(duì)不同的細(xì)胞,PF可能呈現(xiàn)不同的毒性反應(yīng)?？梢娚炙庈赵谟行舛认戮哂械投镜膬?yōu)點(diǎn),在臨床治療中可能具有應(yīng)用前景,今后將進(jìn)一步開展芍藥苷對(duì)化療藥物增敏作用的研究工作。10相關(guān)細(xì)胞保護(hù)作用芍藥苷是中藥芍藥的主要有效成分,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其具有多種生物學(xué)效應(yīng),但目前尚不清楚針對(duì)不同的生物學(xué)效應(yīng),真正起效的是芍藥苷本身,還是其