平面色譜法中展開劑的應(yīng)用

平面色譜法中展開劑的應(yīng)用

由于該層析成像設(shè)備簡單且易于操作，該層析成像的初始識別和實驗方法具有高度的特異性。由于樣品少，化學(xué)合成和天然藥物的定性和純度試驗，以及鉻光刻的重要性，因此在分析中得到了很好的應(yīng)用。這主要是由于分離效果，分離效果主要由三個因素決定。樣品、吸附劑和廣告劑。三者中樣品的性質(zhì)（如溶解度、酸堿性及極性）是固定的。吸附劑的活性和非活性，在吸附薄層色譜中通常以硅膠為主，故種類也是有限的。而展開劑種類則千變?nèi)f化，并且受制約的因素比較多，主要的還是樣品的性質(zhì)和吸附劑。因此可以這樣說能找到與樣品及吸附劑相匹配的展開劑就能對樣品的分離起決定性作用。以下就對展開劑的選擇作一探討：一、作為一種開口劑，應(yīng)滿足以下條件1助劑對芳香烴及其衍生物的分離至少要用AR試劑，展開劑如有雜質(zhì)，則會直接影響分離效果。如三氯甲烷、乙酸乙酯和乙醚中含有少量的醇和水會使其極性增大；芳香烴中含有雜環(huán)化合物和酚類物質(zhì)，鹵化烴中含有游離酸也會使極性增大；三氯甲烷中的光氣、乙醚中的過氧化物有可能氧化或破壞被分離組分等。2適當?shù)姆€(wěn)定性一般不用三氯甲烷，因其中的乙醇量不夠則易生成光氣。3低粘度4影響顯色和定量展開后能快速地在薄層上揮發(fā)樣品，不影響顯色和定量；揮發(fā)性過弱，飽和時間過長，不利于展開，過強則在展開過程中易沖蓋而導(dǎo)致系統(tǒng)不飽和致使實驗失敗。5.嘗試盡量減少6.二、展開劑的使用、洗脫和分離采用“相似相溶”原則來選擇展開劑，也就是說極性強的組分需用極性強的展開劑，極性弱組分需用極性弱的展開劑。在TLC實驗中，更多地采用試驗方法，在薄層板上進行實驗。在吸附薄層上先用單一的弱極性溶劑展開：若所選展開劑混合物的點都移到溶劑的前沿，則說明溶劑的極性過強，如果所選的展開劑幾乎不能使混合物中的組分移動，則說明溶劑極性過弱。然后再按溶劑的洗脫順序依次更換極性較大的溶劑進行試驗。若用單一溶劑不能分離時，可用兩種以上的多元展開劑，并不斷地改變多元展開劑的組成和比例，使待測組分的Rf值在0.2～0.8之間，定量測定應(yīng)在0.3～0.5之間，最終能使各組分之間有效地分離。但混合展開劑配制的比例要精確，特別是比例小的，如1～10ml的應(yīng)用吸管移取，現(xiàn)用現(xiàn)配。1物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)由于物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，則極性有所不同，為了更好地分析物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)與底劑之間的關(guān)系，表1是有關(guān)文獻中定性地給出典型化學(xué)結(jié)構(gòu)和底劑之間的強度因子ε0值。表中可見不同的化合物都有相應(yīng)的ε0值。參照表1分析物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)，根據(jù)物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)在表1中確定相對應(yīng)的ε0值，然后用ε0值在表2中確定接近ε0值的溶劑作為底劑，取ε0值盡可能低些的無氫鍵的的溶劑為底劑。使用表1和表2時應(yīng)注意以下幾點：（1）烴基和鹵素取代芳香族化合物ε0值的改變不超過原來的±0.05；(2）典型的脂肪族化合物R=C6H13，化合物中R=2～20碳的化合物ε0值不超過典型化合物ε0值的±0.05；(3）物質(zhì)的母核相同，分子中極性基團較多，則分子的極性越大。一般情況下，與溶劑易形成氫鍵的官能團數(shù)目增加分子極性增大，但在分子內(nèi)形成氫鍵的，則分子極性減弱，相似的分子結(jié)構(gòu)中，芳香、共軛雙鍵多的極性增強。2加入調(diào)節(jié)劑：對被分離物質(zhì)進行調(diào)節(jié)在吸附薄層中，調(diào)節(jié)劑在吸附和解吸附過程中起了主要作用，選擇哪一種溶劑調(diào)節(jié)劑直接影響物質(zhì)的分離效果。加入極性太強的調(diào)節(jié)劑，則調(diào)節(jié)劑物質(zhì)優(yōu)先占領(lǐng)吸附點；加入極性太弱的調(diào)節(jié)劑則物質(zhì)較溶劑優(yōu)先占領(lǐng)吸附點，這兩種情況都不利于物質(zhì)的分離，只有加入的溶劑與分離物質(zhì)有相同或相似的官能團時，分離效果會較好。這樣一方面有利于物質(zhì)和調(diào)節(jié)劑競爭吸附點，另一方面物質(zhì)與調(diào)節(jié)劑相似性結(jié)構(gòu)增強，物質(zhì)在展開劑溶解度也相應(yīng)增大。加入調(diào)節(jié)劑應(yīng)注意以下四個方面的內(nèi)容,且這四個方面是相互聯(lián)系的:(1)加入的調(diào)節(jié)劑與被分離物質(zhì)應(yīng)有相同或相似的官能團;(2)被分離物質(zhì)具有兩種或者兩種以上的官能團時,加入一種調(diào)節(jié)劑,調(diào)節(jié)劑的官能團與被分離物質(zhì)中一種官能團相同或相似,當加入第二種調(diào)節(jié)劑時,調(diào)節(jié)劑官能團與被分離組分的各種官能團相同或相似均可;(3)被分離物質(zhì)具有多種官能團,如天然藥物,一般情況下選擇極性最強的官能團即加入調(diào)節(jié)劑的官能團與物質(zhì)極性最強的官能團相同或相似;(4)被分離物質(zhì)具有強極性的官能團時,任選一種官能團即可。3.拖尾抑制劑的篩選展開劑中加入少量酸或堿,一般的酸有乙酸、乙二酸、磷酸、甲酸等,堿包括三乙胺、二乙胺、吡啶、氨試液等,這類溶劑可抑制某些酸堿性物質(zhì)或其鹽類解離而產(chǎn)生斑點拖尾,故稱之為拖尾抑制劑。4鹽酸普魯卡因為底劑的初步篩選鹽酸普魯卡因檢查雜質(zhì)“對氨基苯甲酸”時給出了苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14:1:1:4）的展開劑。根據(jù)上述理論分析，鹽酸普魯卡因的基本結(jié)構(gòu)酸為“”。從表1中找到“”的結(jié)構(gòu)，確定ε0值在0.25左右的溶劑為底劑，即苯為底劑。由于其具“”的結(jié)構(gòu)，因此加入了相同官能團的冰醋酸為調(diào)節(jié)劑。三、．展開劑的選擇1．對普通酸性的組分，特別是離解度較大的弱酸性組分，在展開劑中加入一定比例的酸，可防止拖尾現(xiàn)象；對于多元展開劑，例如：苯-丙酮，則可加入二乙胺來調(diào)整展開劑的pH值，使分離集中。2．在分離堿性物質(zhì)，如生物堿，多數(shù)情況下是以氧化鋁為吸附劑，則要選用中性溶劑為展開劑；若采用硅膠為吸附劑，則選用堿性展開劑為宜。例如：鹽酸小檗堿的展開劑為：乙酸乙酯-三氯甲烷-甲醇-二乙胺（8:2:2:1）；茶堿的展開劑為：正丁醇-丙酮-三氯甲烷-濃氨溶液（4:3:3: