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實驗五苦味酸法測定血清肌酐1整理課件肌酐〔CRE〕是人體內(nèi)肌酸代謝的最終產(chǎn)物,由腎排出,少局部來自食物,大局部在體內(nèi)生成,血肌酐的濃度主要取決于GFR。血肌酐的測定對中晚期腎疾病臨床意義較大。肌酐測定方法有化學(xué)法和酶法。酶法主要有三種類型:肌氨酸氧化酶法、肌酐氨基水解酶法和肌酐亞氨基水解酶法。2整理課件一、實驗?zāi)康?.掌握血清肌酐的測定原理和方法。2.了解肌酐測定的參考范圍及臨床意義。3整理課件二、實驗原理在堿性條件下,血清中的肌酐〔Cre〕苦味酸反響,生成橘紅色的苦味酸肌酐復(fù)合物。檢測505nm波長處吸光度的變化,可知被測血清中的肌酐的濃度。其反響式如下:肌酐+堿性苦味酸紅色物質(zhì)OH-4整理課件1、主要器具微量移液器三、器材試管與試管架三用水浴箱可見分光光度計5整理課件四、試劑1.試劑:R1:氫氧化鈉R2:苦味酸工作液:將R1與R2按1:1的比例混合面成。2.肌酐標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(133μmol/L)
6整理課件五、操作步驟取試管5支,按下表操作加入物(ml)空白管標(biāo)準(zhǔn)管測定管(U)S1S2U1U2血清——————0.150.15133μmol/L肌酐標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液——0.150.15————生理鹽水0.15————————R1R20.750.750.750.750.750.750.750.750.750.75混勻后,37度水浴箱放置,2分鐘后,波長505nm處,空白管調(diào)零,先讀取S1、U1吸光度,5分鐘后再讀取S2、U2吸光度。7整理課件六、計算
參考區(qū)間:男性:62-115μmol/L
女性:53-97μmol/L血清肌酐〔mmol/L〕=ΔAU/ΔAS×133μmol/L8整理課件七、本卷須知1.血標(biāo)本無溶血,應(yīng)及時處理。2.工作液開蓋混合后,應(yīng)置2-8度避光保存,穩(wěn)定期3天。9整理課件八、臨床意義肌酐經(jīng)腎小球濾過后不被腎小管重吸收,通過腎小管排泄。只有當(dāng)GFR下降到正常的1/3時,Scr才明顯上升,是反眏GFR減退的后期指標(biāo)。增高:見于各種原因引起的腎小球濾過功能減退:各種腎病,急慢性腎衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎等。降低:見于尿崩癥、進行性肌萎縮、白血病、貧血等10整理課件九、方法學(xué)評價1.化學(xué)法:即苦味酸法,該法本錢低廉,方法簡
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