DNA粗提取與鑒定

實(shí)驗(yàn)九

DNA的粗提取與鑒定成紀(jì)中學(xué)：姚軍文考綱考情考點(diǎn)高考要求高考統(tǒng)計(jì)知道識(shí)記理解應(yīng)用實(shí)驗(yàn)原理+2007江蘇21目的與要求+材料用具+2006江蘇4方法步驟+結(jié)論與分析+1.

考查內(nèi)容：因?yàn)樵搶?shí)驗(yàn)為高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中較難較復(fù)雜，在高考中屬于難點(diǎn)和冷點(diǎn)，試題的難度一般較低。如2006江蘇4

。2．考查題型：有選擇題和非選擇題兩種題型。在新的命題思想指導(dǎo)下，會(huì)結(jié)合其它有機(jī)物鑒定實(shí)驗(yàn)結(jié)合考查。3．賦分和難度：考查落在該考點(diǎn)，最多6分，難度不大。1、知識(shí)目標(biāo)進(jìn)一步理解DNA提取和鑒定的原理。2、能力目標(biāo)（1）初步掌握DNA的粗提取和鑒定的方法。（2）在對(duì)實(shí)驗(yàn)原理、步驟的理解和分析過程中發(fā)展科學(xué)思維。（3）通過和對(duì)比聯(lián)系，發(fā)展綜合分析、解決問題能力3、情感、態(tài)度、價(jià)值觀在科學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致、實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度。復(fù)習(xí)目標(biāo)

考綱：DNA的粗提取與鑒定1、DNA的粗提取的原理2、DNA鑒定的原理當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為2mol/L時(shí)DNA的溶解度最大，濃度為

時(shí)，DNA的溶解度最低。利用這一原理，可以使DNA在鹽溶液中溶解或析出。DNA酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。0.14mol／L不溶于在

條件下，DNA遇________呈現(xiàn)__________

沸水浴二苯胺藍(lán)色基礎(chǔ)過關(guān)3.幾種化學(xué)試劑的作用0.015mol/L的NaCl溶液____________________；0.1g/ml的檸檬酸鈉：_______________；體積分?jǐn)?shù)為95℅的酒精：_______________；二苯胺試劑：___________________。溶解DNA防止凝血提純DNA鑒定DNA一、實(shí)驗(yàn)原理1．血細(xì)胞在蒸餾水中易吸水而導(dǎo)致細(xì)胞膜和核膜的破裂。利用此特性可得到含核DNA的溶液。2．DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液的濃度不同而改變。其變化曲線可表示為：疑難點(diǎn)撥二、實(shí)驗(yàn)材料的選擇1.具有細(xì)胞核的動(dòng)物血細(xì)胞，如雞血細(xì)胞。2.植物：新鮮的菜花，菠菜葉。3．DNA不溶于酒精溶液，可是細(xì)胞中的多數(shù)物質(zhì)可溶于酒精溶液，因而可進(jìn)一步提取含雜質(zhì)較少的DNA。4．DNA遇二苯胺(沸水浴)被染成藍(lán)色。所以二苯胺可用作鑒定DNA存在的試劑。②雞血細(xì)胞極易吸水脹破，而用動(dòng)物肝臟細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料常常需要?jiǎng)驖{和離心，對(duì)設(shè)備要求較高，操作繁瑣，歷時(shí)較長(zhǎng)討論：雞血細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料的原因？①雞血細(xì)胞核的DNA含量豐富，材料易得歸納1：說出你知道的與紅細(xì)胞有關(guān)的知識(shí)成熟的哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞無細(xì)胞核；蛙紅細(xì)胞進(jìn)行無絲分裂；紅細(xì)胞的起源和分化………三、實(shí)驗(yàn)流程提取核物質(zhì)：雞血細(xì)胞攪拌過濾濾物濾液（含DNA）+攪拌+H2O過濾濾物（含DNA粘稠物）濾液2mol/LNaCl溶液+攪拌2mol/LNaCl溶液過濾濾物濾液（DNA）+冷酒精攪拌白色絲狀物析出+0.015mol/LNaCl溶液二苯胺藍(lán)色粗提取再提取鑒定攪拌++H2O攪拌沸水浴實(shí)驗(yàn)名稱過濾材料目的還原糖的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定一層紗布獲得富含還原糖、蛋白質(zhì)的濾液葉綠體中色素的提取與分離一層尼龍布獲得富含色素的濾液DNA粗提取與鑒定三次紗布分離出富含DNA的成分歸納2：課本實(shí)驗(yàn)中過濾材料的選用及注意事項(xiàng)無橘黃色/紅色蘇丹Ⅲ/Ⅳ染液脂肪脂肪的鑒定需要（加熱煮沸）藍(lán)色二苯胺試劑DNADNA的粗提取與鑒定無紫色雙縮脲試劑蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的鑒定需要（加熱煮沸）磚紅色斐林試劑（班氏試劑）還原糖無藍(lán)色碘液淀粉生物組織中糖類的鑒定水浴加熱顏色試劑鑒定對(duì)象實(shí)驗(yàn)名稱歸納3：說出課本中與顏色有關(guān)的實(shí)驗(yàn)及試劑、顏色現(xiàn)象提取含雜質(zhì)較少的DNA體積分?jǐn)?shù)為95%、冷DNA的粗提取與鑒定洗去浮色體積分?jǐn)?shù)為50%脂肪鑒定解離液體積分?jǐn)?shù)為95%觀察植物細(xì)胞的有絲分裂消毒體積分?jǐn)?shù)為75%微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)作用酒精濃度實(shí)驗(yàn)名稱歸納4：課本中與酒精有關(guān)的實(shí)驗(yàn)及作用(2007·江蘇生物，21)在采用雞血為材料對(duì)DNA進(jìn)行粗提取的實(shí)驗(yàn)中，若需要進(jìn)一步提取含雜質(zhì)較少的DNA，可以依據(jù)的原理是 (

)A.在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的氯化鈉溶液中DNA的溶解度最小B.DNA遇二苯胺在沸水浴的條件下會(huì)染成藍(lán)色C.DNA不溶于酒精而細(xì)胞中的一些物質(zhì)易溶于酒精D.質(zhì)量濃度為0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液具有抗凝血作用C練習(xí)：(2006·江蘇生物，4)做DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)材料用雞血而不用豬血的原因是(

)A．雞血的價(jià)格比豬血的價(jià)格低B．豬的血紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核，不易提取到DNAC．雞血不凝固，豬血會(huì)凝固D．用雞血提取DNA比用豬血提取操作簡(jiǎn)便B（2010·石家莊高二檢測(cè)）下列圖示中能反映DNA的溶解度與NaCl溶液濃度之間關(guān)系的是（）

CDNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)原理DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同DNA與其他細(xì)胞成分在酒精中溶解度不同DNA與二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)DNA粗提取選擇適宜材料破碎細(xì)胞DNA的溶解和析出D