實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀技術(shù)簡介-2

東勝創(chuàng)新實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀技術(shù)簡介聶尚海博士定量PCR儀組成概述光源光學(xué)元件反應(yīng)管光學(xué)元件熱循環(huán)儀東勝創(chuàng)新21、熱循環(huán)儀（PCR儀）2、檢測(cè)系統(tǒng)3、總結(jié)東勝創(chuàng)新3定量PCR原理及Opticon熱循環(huán)技術(shù)之東勝創(chuàng)新4PCR儀組成?加熱?制冷?控溫?zé)嵫h(huán)技術(shù)之

加熱?電阻絲加熱?半導(dǎo)體/電阻絲加熱東勝創(chuàng)新5熱循環(huán)技術(shù)之電阻絲加熱樣品模塊電阻絲風(fēng)扇毛細(xì)管風(fēng)扇電阻絲東勝創(chuàng)新6熱循環(huán)技術(shù)之電阻絲/半導(dǎo)體加熱樣品模塊Peltier模塊散熱槽風(fēng)扇電阻絲優(yōu)點(diǎn)：?升溫快速?準(zhǔn)確東勝創(chuàng)新7熱循環(huán)技術(shù)之

制冷東勝創(chuàng)新8?風(fēng)扇制冷?壓縮機(jī)制冷?半導(dǎo)體制冷熱循環(huán)技術(shù)之風(fēng)扇制泠毛細(xì)管風(fēng)扇電阻絲優(yōu)勢(shì)?價(jià)格低東勝創(chuàng)新9劣勢(shì)?精確性和均一性差?不能主動(dòng)致冷?控溫不能低于室溫?zé)嵫h(huán)技術(shù)之壓縮機(jī)制冷聚乙烯醇管壓縮機(jī)樣品模塊電阻絲優(yōu)勢(shì)?制冷快?精確性尚可接受劣勢(shì)?體積大?控溫易過頭(制冷時(shí)尤為如此)?違反蒙特利爾公約(破壞臭氧層)東勝創(chuàng)新10最大可過頭

3°-8Data

collected

by

CYCLERtest

BV熱循環(huán)技術(shù)之東勝創(chuàng)新11制冷過頭熱循環(huán)技術(shù)之半導(dǎo)體制冷優(yōu)勢(shì)?體積小?控溫性能出色?可低于室溫?可主動(dòng)致冷劣勢(shì)?技術(shù)要求高樣品模塊Peltier模塊散熱槽風(fēng)扇電阻絲東勝創(chuàng)新12Opticon儀器組成東勝創(chuàng)新13Opticon的PCR儀之

結(jié)構(gòu)東勝創(chuàng)新14Opticon的PCR儀結(jié)構(gòu)：?三傳感器和雙區(qū)域?

溫度控制技術(shù)?具有動(dòng)態(tài)溫度梯度Opticon的PCR儀之

壽命長Last

nearlytwice

aslong

as

thenearestcompetitorSlope

change

inresistance

isnearly

three

times

better東勝創(chuàng)新15Opticon的PCR儀之

小結(jié)東勝創(chuàng)新16?先進(jìn)的加熱技術(shù)---電阻絲/半導(dǎo)體加熱?先進(jìn)的致冷技術(shù)---半導(dǎo)體制冷?控溫技術(shù)---三點(diǎn)探測(cè)，雙區(qū)域控制控溫快速、準(zhǔn)確精確性、均一性能良好有溫度梯度壽命長檢測(cè)技術(shù)之原理概述光源光學(xué)元件反應(yīng)管光學(xué)元件熱循環(huán)儀東勝創(chuàng)新17檢測(cè)技術(shù)之東勝創(chuàng)新18原理概述?光源?熒光染料?檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)之

光源·三種類型?鎢燈?氬離子激光?發(fā)光二極管(LED)東勝創(chuàng)新19檢測(cè)技術(shù)之光源——鎢燈優(yōu)勢(shì)?常用?發(fā)出全光譜的光?價(jià)格適中?易更換劣勢(shì)?預(yù)熱耗時(shí)?壽命短?需濾光片?產(chǎn)熱東勝創(chuàng)新20檢測(cè)技術(shù)之光源——?dú)咫x子激光優(yōu)勢(shì)?亮度高?可發(fā)出單或雙波長的光?聚焦好劣勢(shì)?需要移動(dòng)掃描?價(jià)格昂貴?產(chǎn)熱?壽命短?耗電東勝創(chuàng)新21檢測(cè)技術(shù)之光源——發(fā)光二極管優(yōu)勢(shì)?價(jià)格便宜?壽命長穩(wěn)定?可輸出不同顏色的光東勝創(chuàng)新22?體積小?需要濾光片?更換困難?亮度低最高性價(jià)比！?產(chǎn)熱少劣勢(shì)檢測(cè)技術(shù)之東勝創(chuàng)新23熒光染料·工作原理?染料吸收光能躍遷至高能級(jí).?染料以熒光形式釋放能量以回到基態(tài)，發(fā)出熒光.?發(fā)射光和激發(fā)光的波長不同.?常用的染料:FAM,SYBR

Green，Pico

Green?

等多種染料檢測(cè)技術(shù)之檢測(cè)系統(tǒng)·三種類型?Charged

Coupled

Device

(CCD)?光電二極管?光電倍增管(PMT)東勝創(chuàng)新24檢測(cè)技術(shù)之檢測(cè)系統(tǒng)——CCD優(yōu)勢(shì)?靈敏?可檢測(cè)一定范圍的光譜?體積小?穩(wěn)定–劣勢(shì)?檢測(cè)范圍窄?對(duì)強(qiáng)光和弱光?

分辨率低?背景高東勝創(chuàng)新25檢測(cè)技術(shù)之檢測(cè)系統(tǒng)——半導(dǎo)體二極管半導(dǎo)體二極管通過吸收光子產(chǎn)生電流優(yōu)勢(shì)?體積小?價(jià)格便宜?耐用劣勢(shì)?靈敏度低?一次只能掃描一個(gè)樣品東勝創(chuàng)新26檢測(cè)技術(shù)之檢測(cè)系統(tǒng)——PMT通過把光能轉(zhuǎn)化成電子能使信號(hào)得到擴(kuò)增，所以PMT檢測(cè)非常靈敏優(yōu)勢(shì)?超靈敏:可檢測(cè)到單個(gè)光子?檢測(cè)范圍廣劣勢(shì)?體積大?一次只能讀一個(gè)樣品東勝創(chuàng)新27檢測(cè)技術(shù)之東勝創(chuàng)新28Opticon檢測(cè)系統(tǒng)?最高性價(jià)比的光源---LED?最靈敏、最實(shí)用的檢測(cè)技術(shù)---PMT超靈敏、檢測(cè)范圍最廣?掃描的時(shí)機(jī)、頻率、次數(shù)、間隔、時(shí)間等都可控制?每2秒鐘掃描一遍，

96個(gè)發(fā)光管依發(fā)光?無機(jī)械部分VVVVVVVVVVVV東勝創(chuàng)新29Opticon實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀之檢測(cè)系統(tǒng)確定初始模板的濃度東勝創(chuàng)新30Opticon實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀之分析方法-標(biāo)準(zhǔn)曲線熒光檢測(cè)

熱循環(huán)儀光色:單色光均一性:

±0.4°C染料:FAM,

SYBR

Green,Molecular

beaconsTaqMan

Probes精確性:

±0.3°C發(fā)射光波長:515-545nm升降溫速率: 達(dá)

3°C/秒.靈敏度:<5nM的熒光素溫度梯度:

有檢測(cè)范圍:100

-108

拷貝容量:96樣品反應(yīng)管:0.2mL反應(yīng)管&

96孔板操作系統(tǒng):Windows

NT東勝創(chuàng)新31Opticon

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀之

小結(jié)Opticon

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀之

總結(jié)東勝創(chuàng)新32熒光技術(shù)?96個(gè)LED對(duì)應(yīng)不同的孔?通過PMT檢測(cè) (515-545nm)?通過把光信號(hào)轉(zhuǎn)化成電信號(hào)來檢測(cè)?適用于SYBR

green、FAM染料；TaqManProbes?

和Molecular

beacons等探針熱循環(huán)技術(shù)?半導(dǎo)體/電阻絲,

三傳感器?PCT200質(zhì)量可靠總結(jié)——MJ公司DNA

Engine

Opticon?優(yōu)勢(shì)非常靈敏檢測(cè)范圍廣無移動(dòng)部分占地面積小熱循環(huán)儀技術(shù)可靠可升級(jí)有溫度梯度高性價(jià)比可用機(jī)器人操作東勝創(chuàng)新33Opticon

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀之

應(yīng)用東勝創(chuàng)新34?可廣泛應(yīng)用于臨床觀測(cè)病情發(fā)展及預(yù)后?多種疾病的診斷?判斷藥物療效?基礎(chǔ)研究?其他北京總部

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