出凝血監(jiān)測技術(shù)操作規(guī)范

出凝血監(jiān)測技術(shù)操作規(guī)范血液凝固簡稱為凝血(coagulation)，是一系列凝血因子被相繼酶解激活的復(fù)雜的生理過程，最終生成凝血酶，形成纖維蛋白凝塊，其過程是血液由液體狀態(tài)轉(zhuǎn)為凝膠狀態(tài)的過程。凝血系統(tǒng)包括凝血和抗凝兩個方面，兩者間的動態(tài)平衡是正常機體維持體內(nèi)血液液體流動狀態(tài)和防止血液丟失的關(guān)鍵。機體的正常止血、凝血，主要依賴于完整的血管壁結(jié)構(gòu)和功能、有效的血小板質(zhì)量和數(shù)量、正常的血漿凝血因子活性。 人類對于凝血機制的研究，主要經(jīng)歷基本概念形成階段、血液凝固經(jīng)典理論的引出階段和凝血瀑布學(xué)說提出階段。凝血瀑布學(xué)說的核心主要包括三個環(huán)節(jié):①凝血因子的激活；②凝血酶的生成；③纖維蛋白形成。隨著凝血因子結(jié)構(gòu)和功能以及因子間相互關(guān)系的逐步闡明，特別是組織因子途徑抑制物（TFPI）的發(fā)現(xiàn)與深入研究，迫使人們更新和修正了經(jīng)典的瀑布學(xué)說，提出了凝血過程的現(xiàn)代概念。血小板和凝血因子是生理性止凝血的重要成分。而抗凝系統(tǒng)不僅包括抗凝因子，還包括纖溶系統(tǒng)，其中任何一個或幾個環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常即表現(xiàn)為出血性疾病或血栓形成。出凝血監(jiān)測主要包括臨床監(jiān)測和實驗室監(jiān)測兩大類，臨床監(jiān)測為實驗室監(jiān)測提供線索，實驗室監(jiān)測為疾病診斷提供依據(jù)。1.監(jiān)測項目一、臨床監(jiān)測(1)出血情況：出血點、瘀斑、咯血、嘔血、便血、血尿。(2)出血部位：皮膚、黏膜(口腔、鼻膠)、肌肉、消化道、泌屎道、關(guān)節(jié)。(3)出血狀況：出血的時間、頻度、嚴(yán)重性，自發(fā)或外傷出血，拔牙后或手術(shù)后出血。(4)出血誘因；出血與食物、接觸物、藥物等關(guān)系。(5)過敏史：發(fā)生紫癜、出血的同時，是否伴蕁麻疹及低血壓狀態(tài)等。(6)職業(yè)史：是否從事與重金屬、有毒化學(xué)物品、有毒氣體接觸的職業(yè)。(7)用藥史：解熱鎮(zhèn)痛藥、抗癌藥、抗凝藥、抗血小板藥、血漿代用品、止血藥。(8)家族史：家族中有無類似出血情況。(9)既往史：尿毒癥、肝病、感染、惡性病史。(10)體格檢査：生命體征，皮膚黏膜出血點、瘀斑，淋巴結(jié)腫大、肝脾大，腹部、胸部體征等。2.出血原因(1)局部原因引起的出血：如術(shù)中止血不全、外傷、皮膚黏膜糜爛等。(2)出凝血機制異常引起的出血：①不能單純用局部因素來解釋的出血；②自發(fā)性出血或輕微創(chuàng)傷引起的出血不止；③同時有多個部位出血；④有家族遺傳史或常有出血史；⑤伴有易引起出血的全身性疾病，如嚴(yán)重肝病、尿毒癥.3.出凝血機制異常的環(huán)節(jié)分析主要包括以下幾個環(huán)節(jié)：(1)血管因素。(2)血小板計數(shù)異?；蚬δ苋毕荩孩僭l(fā)性或繼發(fā)性血小板減少癥；②原發(fā)性血小板增多癥；③血小板功能缺陷。(3)凝血因子缺乏。(4)纖維蛋白溶解亢進。4.病情動態(tài)監(jiān)測主要包括：(1)出血部位的監(jiān)測：皮膚、黏膜、傷口、消化道、泌尿道、鼻咽部等。(2)凝血功能實驗指標(biāo)監(jiān)測。(3)生命體征的監(jiān)測。(4)瞥惕并發(fā)癥的發(fā)生。二、實驗室監(jiān)測實驗室監(jiān)測為疾病診斷提供依據(jù)，在疾病診斷中具有舉足輕重的地位。由于機體的止血/凝血機制十分復(fù)雜，參與止血/凝血反應(yīng)的因子極多，所以反映止血/凝血功能的監(jiān)測項S也很多。不同的監(jiān)測項目從不同的側(cè)面反映止血/凝血功能的變化。(一)I期止血的實驗室檢查I期止血障礙是指血小板和血管壁異常所致的止血障礙，常用下列檢査作為篩選實驗。1.出血時間(bloodingtime，BT)將皮膚刺破后，讓血液自然流出到血液自然停止所笛要的時間。BT的長短反映血小板的數(shù)景、功能以及血管壁的滲透性、脆性的變化；也反映血小板生成的丁乂么與血管壁生成的PGI￡的平衡關(guān)系.(1)參考范圍:WHO推薦用模板法或出血時間測定器法(templatebleedingtest，丁BT)測定BT。正常人BT為(6.9+2.Drain，超過9min為異常，(2)臨床意義：BT延長見于①血小板數(shù)量減少，如原發(fā)性或繼發(fā)性血小板減少性紫癜；②血小板功能異常，如血小板無力癥(glanzmann’sthrombasthenia，GT)和巨大血小板綜合征(Bernard-Souliersyndrome)；③某些凝血因子缺乏，如血管性血友病(vonWillebranddisease，vWD)、彌散性血管內(nèi)凝血(disseminatedin-travascularcoagulation，DTC)、低Fg血癥(<0.3g/L)和因子V、因子VBJ缺乏等；④血管異常：如遺傳性出血性毛細(xì)血管擴張癥(hereditaryhemorrhagictelangiecta-sia，HHT)；⑤藥物影響：如服用抗血小板藥(阿司匹林等)、抗凝藥(肝素、香豆素過量)和溶栓藥(rt-PA等)；⑥某些獲得性疾病如賊毒癥、重癥肝病、SLE、阻塞性黃疽、甲減等也可延長。(3)影響因素及注意事項：①穿刺部位應(yīng)避開淺表靜脈、瘢痕及炎癥組織；②皮膚溫度在25?35'C時結(jié)果穩(wěn)定|③常規(guī)篩選采用平行于血管走行切口；有出血患者采用垂直于血管走行切口更敏感；④血液應(yīng)自動流出，用濾紙吸去血滴時，應(yīng)避免接觸傷口；⑤實驗前1周內(nèi)禁服阿司匹林類藥物，已服用吋，應(yīng)在停藥1周后再檢測。2.血小板計數(shù)(plateletcount，PC)正常情況下，血小板在止血、凝血過程中起重要作用，血小板在止血過程中的作用主要與血管一起共同完成，包括黏附功能、聚集功能和釋放反應(yīng)等.在凝血過程中的作用主要依靠血小板的各種因子來完成，其中最重要的是血小板第三因子(PF3)，它可以參與因子X活化及凝血酶的形成，亦可參與因子Ka、因子柳a、Ca2.復(fù)合物的形成。另外血小板被激浩后，其顆粒中的許多物質(zhì)大量釋放，如血栓素A2(TXA2)、5-羥色胺(5-HT)、PF4、p-血小板球蛋白(卩-TG)等，都大大加速了凝血過程的始動和完成。(1)參考范圍：100~300X109/L。(2)臨床意義生理性變化：正常人血小板每日波動6%?10%，劇烈運動和飽餐后升高，30min后恢復(fù)正常。行經(jīng)前14d逐漸減少，行經(jīng)開始迅速上升。妊娠期輕度減少，分娩后中度升高。嬰幼兒3個月才達正常人水平，早產(chǎn)兒(<1700g)輕到中度減少。病理變化。①血小板減少多見于血小板的生成障礙：見于急性白血病和再生障礙性貧血等；血小板破坧過多！見于原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進、進行體外循環(huán)、藥物過敏、血小板同種抗體等疾??；血小板消耗增加：見于彌散性血管內(nèi)凝血、血栓性血小板減少性紫癜等；血小板分布異常：脾大如肝硬化、Banti綜合征等血小板潴留在脾臟內(nèi)，而致血液中的減少；假性血小板減少癥：因使用EDTA抗凝劑，誘導(dǎo)血小板聚集，引起血細(xì)胞分析儀不能計數(shù)聚集的血小板，出現(xiàn)假性血小板減少，但在血涂片中可見較多聚集的血小板。②血小板增多見于原發(fā)性增多：見于原發(fā)性血小板增多癥、慢性粒細(xì)胞性白血病、真性紅細(xì)胞增多癥和特發(fā)性骨髓纖維化等；繼發(fā)性增多：見于急性和慢性炎癥、缺鐵性貧血、急性大失血及溶血之后和脾切除術(shù)后、惡性腫瘤早期等；藥源性如注射腎上腺素后可增多20%?50%。3.血塊收縮試驗(clotretractiontest，CRT)在富含血小板的血漿中加人Ca?和凝血酶，使血漿凝固成凝塊。血小板收縮蛋白使血小板伸出偽足，偽足前端連接到纖維蛋白束上，當(dāng)偽足向心性收縮使纖維蛋白網(wǎng)眼縮小，檢測析出血清的容積可反映血小板血塊收縮的能力。(1)參考范圍。凝塊法：血塊收縮率(％)=[血清(ml)/全血(ml)X(100%-Hct%)]X100%。正常值：65.8%士11.0；血塊收縮時間：2h開始收縮，18?24h完全收縮。(2)臨床意義①血塊收縮不良或不收縮：血小板功能缺陷，收縮蛋白作用減弱，使血塊收縮受限，如血小板無力癥等。血小板數(shù)量減少，使血塊收縮作用減弱，當(dāng)血小板數(shù)<50X109/L時，血塊收縮明顯減退，如原發(fā)性血小板減少性紫癜等。嚴(yán)重凝血障礙者，血液不能正常凝固，使血塊收縮受限，如顯著的凝血因子缺乏、低(無)纖維蛋白原血癥等，紅細(xì)胞增多癥時，由于血塊內(nèi)紅細(xì)胞多，體積大，影響血塊收縮。②血塊收縮過度：凝血因子珊缺乏時，凝固的血液沒有形成纖維蛋白交聯(lián)網(wǎng)，使血塊空隙減小，收縮過度。嚴(yán)重貧血或失血者，紅細(xì)胞少，使血塊收縮程度增加。(3)影響因素及注意事項：一般采集安靜狀態(tài)下空腹靜脈血。4.血小板黏附(plateletadhesiontest，PAdT)血小板黏附是指血小板黏附于異物表面，是血小板的一項重要的止血功能。受檢血液以一定速度通過檢測儀玻璃柱前后血液中含血小板的數(shù)差，該差數(shù)為黏附于玻璃和塑料管的血小板數(shù)，由此可計算出占血小板總數(shù)的百分比，即為血小板黏附率(％)。(1)參考范圍：①玻璃球法，男性34.9%+6.0%；女性39.4%±5.2%；②玻璃珠柱法＞62.5%=86%；③玻璃濾器法，3L9%±10.9。(2)臨床意義：①PAdT升高：見于高凝狀態(tài)及血栓性疾病，如心肌梗死、心絞痛、腦血管疾病、糖屜病、深靜脈血栓形成、肺栓塞、口服避孕藥、恃小球腎炎及妊娠高血壓綜合征等；②PAdT降低：見于血管性血友病、巨大血小板綜合征，以及肝硬化、尿毒癥、骨髓增生異常綜合征(myeledysplasticsyndrome，MDS)、服用血小板抑制藥物及進食魚油后等。(3)影響因素及注意事項：測定前10d內(nèi)不宜服用阿司匹林。5.血小板裝集(plateletaggregationtest，PAgT)血小板的聚集可以由于各種誘導(dǎo)劑與血小板膜受體之間的相互作用，這種相互作用通過C膜的傳遞而激活血小板，使其膜表面另一個受體糖蛋白Ub/nia活化，再與血漿巾的纖維蛋白原結(jié)合，介導(dǎo)血小板聚集，比濁法檢測血小板聚集是近幾十年在臨床和研究中最常用的方法。(1)參考范圍，各實驗室根據(jù)自己的儀器及方法建立自己的正常值。不同誘導(dǎo)劑最大聚集率(MAR)為：ADP(終濃度2Mmol/L)為70%+17%?腎上腺素(終濃度2Pniol/L)為65%士20%；Col(終濃度 為60%士13；AA(終濃度0.5mmol/L)為65%十20%。(2)臨床意義：血小板聚集試驗主要反映血小板的聚集功能，以及對出血性疾病的診斷和鑒別診斷具有重要的意義。①結(jié)果增高見于：糖尿病、急性心肌梗死、靜脈血栓形成、高卩脂蛋白血癥、抗原-抗體復(fù)合物反應(yīng)、人工瓣膜、口服避孕藥、高脂飲食及吸煙等。②結(jié)果降低見于：血小板無力癥、巨大血小板綜合征、儲存池病.May-Heegg-lin異常、低(無)纖維蛋白原血癥、肝硬化、尿毒癥、感染性心內(nèi)膜炎、服用抗血小板藥物等。③抗血小板藥物監(jiān)測：噻氯匹定(ticlopidine)250?500mg/d口服，開始用藥1?2周內(nèi)每周檢測PAgT—次，維持PAgT在30%?50%；BT維持在正常值的1.5?2.0倍；血小板降低至正常低限(100X109/L)的40%?50%為宜；小劑最阿司匹林80?325mg/d或雙嘧迖莫100?150mg/d，不需監(jiān)測。6.血小板第3因子(platelet factor 3，PF3) 血小板第3因子(PF3)是血小板活化過程中形成的一種膜表面磷脂，是人體凝血的重要組成部分，是凝血因子V的固定部位，可加速凝血活酶的生成，促進凝血過程。(1)參考范圍：采血者與正常人富含血小板血漿(PRP)及貧血血小板血漿(PPP)交叉試驗，凝血時間延長不超過5s，為PF3aT正常。(2)臨床意義①PF3活性增高：食用飽和脂肪酸、II型高脂血癥、一過性腦缺血發(fā)作、心肌梗死、糖塚病伴血管及動脈粥樣硬化等。②PF3活性降低：先天性因子m缺乏癥、巨大血小板綜合征、血小板無力癥、肝硬化、尿毒癥、骨髓增生癥、多發(fā)性骨髓瘤、巨蛋白血癥、再生障礙性貧血、先天性貧血異常蛋白血癥血小板無力、先天性血小板病、尿毒癥、慢性肝病、SLE、血小板減少性紫癜等。7.血漿p-血小板球蛋白(p-thromboglobulin，p-TG〉和血小板第4因子(plate-letfactor4，PF4){3血小板球蛋白和血小板第4因子均來自血小板的a顆粒，是血小板特異蛋白質(zhì)。血漿中兩者濃度的高低取決于血小板合成和釋放量，也可與腎臟的排泄和體內(nèi)的清除率有關(guān)。用抗pTG或抗PF4抗體包被酶標(biāo)板，加人受檢血漿，血漿中(3-TG或PF4結(jié)合，再加人酶標(biāo)記的抗p-TG或抗PF4抗體，最后加人底物顯色，顯色的深淺與受檢血漿中PTG或PF4的含量呈正相關(guān)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計算受檢血漿中P-TG或PF4的含量。(1)參考范圍:ELISA法，p~TG:(16.4士9.8)Mg/L；PF4：(3.2士2.3)pg/Lo(2)臨床意義:p-TG和PF4臨床意義相同。①降低：見于先天性或獲得性貯存池病(血小板顆粒缺乏癥)。②升高：提示血小板被激活及其釋放反應(yīng)亢進，見于高凝狀態(tài)或血栓栓塞病，如急性心肌梗死、腦血管病變、尿毒癥、妊娠高血壓綜合征、腎病綜合征、糖屈病、靜脈血栓形成等。8.血小板質(zhì)膜/顆粒糖蛋白測定(glycoprotein，GP)血小板膜糖蛋白主要有GPIb/V-IX復(fù)合物、GPHb/IUa復(fù)合物和GPIUa；血小板顆粒膜主要有a-顆粒膜糖蛋白(GPM140)或P-選擇素和溶酶體顆粒膜(CD63)等。這些糖蛋白多用流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry，F(xiàn)CM)測定。(1)參考范圍:FCM法，GPIb(CD42b)、GPIb(CD42a).GPIIb(CD41a)GPDla(CD61)的陽性血小板百分率為95%?99%；P-選擇索(CD62p)<2%o(2)臨床意義①遺傳性血小板功能缺陷：巨大血小板綜合征(BSS)、血小板無力癥(GT)、a顆粒缺陷癥，可出現(xiàn)相應(yīng)的陽性血小板百分率減低或缺如，這是診斷上述疾病的重要分子標(biāo)志物。②血栓病和血栓前狀態(tài)：如急性心肌梗死、心絞痛、缺血性腦卒中、糖尿病、卨血壓、外周動脈血管病變等，此時循環(huán)血小板被活化，可見CD42b、CD42a、CD41a、D61、CD62P的陽性血小板的百分率增高。（二）n期止血的實驗室檢查n期止血障礙是指凝血和抗凝血異常所致的止血障礙，常用下列檢查作為篩選試驗、1.活化的部分凝血活酶時間（activatedpartialthromboplastintime?APTT）應(yīng)用纖維蛋白凝固法，在受檢血漿中加人APTT試劑（接觸因子激活劑和部分磷脂）和Ca2.后，觀察血漿凝固的時間。是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的一個較為敏感和最常用的篩選試驗。（1）參考范圍：32，8-40.3s0須設(shè)正常對照值，測定值與正常對照值比較，延長超過10s以上為異常。（2）臨床意義：活化部分凝血活酶時間主要反映內(nèi)源性凝血是否正常。①APTT延長血漿因子珊、因子IX和因子XI水平減低：如血友病A、血友病B及因子XI缺乏癥。嚴(yán)重的凝血酶原（因子11）、因子V、因子X和纖維蛋白原缺乏：肝臟疾病、阻塞性黃疽、新生兒出血癥、腸道滅菌綜合征、吸收不良綜合征、口服抗凝劑及低（無）纖維蛋白血癥等。纖維蛋白溶解活力增強：如繼發(fā)性、原發(fā)性纖維蛋白溶解功能亢進等。血液循環(huán)中有抗凝物質(zhì)：如抗凝因子孤或因子IX抗體等。系統(tǒng)性紅斑狼瘡及一些免疫性疾病。②APTT縮短高凝狀態(tài)：如促凝物質(zhì)進入血液及凝血因子的活性增高等情況，血栓性疾病：如心肌梗死、不穩(wěn)定型心絞痛、腦血管病變、糖尿病伴血管病變、肺梗死、深靜脈血栓形成。妊娠高血壓綜合征和腎病綜合征等。③APTT是監(jiān)測普通肝素的首選指標(biāo)，應(yīng)用小劑量肝素（5000?10OOOU/d）可不做實驗室監(jiān)測；應(yīng)用低分子量肝素（Mr4000-8⑻0）或肝素鈣5000U/d對APTT無明顯影響》應(yīng)用10000U/d者，APTT可延長至正常參考值的1.5?1.7倍，也不致引起出血并發(fā)癥；應(yīng)用巾等劑量（10000?20000U/d）和大劑M（20000?30000U/d）肝素時，必須做實驗室監(jiān)測。APTT較正常參考值延長1.5?2.0倍，此時血漿肝素濃度為0.2?0.5U/d，既可取得最佳抗凝療效又無嚴(yán)重出血風(fēng)險。蛇毒抗栓酶類藥物治療監(jiān)測，維持APTT在正常參照的1.5-2.5倍。(3)影響因素①標(biāo)本放置時間：血漿標(biāo)本須在3h內(nèi)測定完畢。②溫育時間：不宜小于3min(國際方法為lOmin)，時間過短會影響測定結(jié)果。③靜脈取血不順利，TF進入血液可致APTT縮短或慢性消耗凝血因子而延2.血漿凝血酶原時間(prothrombintime^PT)在被檢血漿中加人Ca^和組織因子(組織凝血活酶，tissuethromboplastin)，觀察血漿的凝固時間B它是外源性凝血系統(tǒng)的一個較為敏感和最常用的篩選試驗。(1)參考范圍，手X法和血液凝固儀法?13s。須設(shè)正常對照值，測定值超過正常對照值3s以上為異常。①凝血酶原時間比值(prothrombintimeratio，PTR)受檢血漿的凝血酶原時間G)/正常人血漿的凝血酶原時間(s)的比值、參考范圍為1.0±0，05。②國際正?；戎?internationalnormalizedratiofINR)INR—P"CR151。參考范圍為1.0±0.1。國際靈敏度指數(shù)(internationalsensitivityindex，ISI)越小，組織凝血活酶的靈敏度越高。(2)臨床意義①PT延長：主要見于先天性因子II、V、MI、X減少及纖維蛋白原的缺乏(低或無纖維蛋白血癥〉；獲得性凝血因子缺乏，如DIC、原發(fā)性纖溶亢進癥、肝病中的阻塞性黃疽和維生素K缺乏、血循環(huán)中抗凝物質(zhì)增多等。②PT縮短：見于先天性因子V增多；DIC早期(高凝狀態(tài))；口服避孕藥、其他血栓前狀態(tài)及血栓性疾病(凝血因子和血小板活性增高，血管損傷等均為血栓形成的基礎(chǔ))。③用于香豆素類等口服抗凝藥的監(jiān)控。一般認(rèn)為以維持PT值在參考值的2倍左右(1.3?2.5倍)即25-308，或PTR為1.3?1.5(最大不超過2)為宜、PT%應(yīng)控制在40%以上，減低到40%有出血傾向。不同情況下口服抗凝藥治療的最佳抗凝強度時INR的范圍：術(shù)前兩周或術(shù)中口服抗凝藥，INR為1.5?3.0；原發(fā)或繼發(fā)靜脈血栓的預(yù)防，INR為2-3；活動性靜脈血栓、肺梗塞、復(fù)發(fā)性靜脈血栓的預(yù)防，INR為2?動脈血栓栓塞的預(yù)防，心臟換瓣術(shù)后，INR為3?4.5d3.血漿纖維蛋白原測定(fibrinogen，F(xiàn)g)在受檢血漿中加人一定量的凝血酶，后者便血漿中的纖維蛋原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，通過比濁原理計算Fg的含量。(1)參考范圍，WHO推薦用Clauss法(凝血酶比濁法)：2?4g/U(2)臨床意義①Fg病理性增高：血栓前狀態(tài)和血栓性疾病時，機體凝血功能增強，血漿纖維蛋白原增多，如急性心肌梗死、糖尿病、妊娠高血壓綜合征、動脈粥樣硬化、惡性腫瘤等；蛋白合成增多，如結(jié)締組織病、多發(fā)性骨髓瘤等；反應(yīng)性增多，如急性感染、急性腎炎、燒傷、休克、大手術(shù)后等。②Fg減低：見于DIC、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎和肝硬化等。③用藥監(jiān)測：是蛇毒和溶栓治療監(jiān)測指標(biāo)之一，二者治療Fg均應(yīng)維持在1.2—1.5g/L。4.凝血酶-抗凝血酶HI復(fù)合物測定(thrombin'-antithrombinDJcomplex，TAT)凝血酶-抗凝血酶HI復(fù)合物測定(TAT)，采用兔抗人凝血酶抗體包被酶標(biāo)板，加人待測樣品，再加人帶有辣根過氧化物酶的鼠抗人AT-DI抗體，洗滌后，待測樣品中若有凝血酶，則首先與凝血酶抗體結(jié)合，帶有辣根過氧化物酶AT-m抗體通過絲氨酸蛋白酶活性中心與凝血酶結(jié)合，結(jié)合強度、顯色強度以及凝血酶含量三者呈正相關(guān)。(1)參考范圍：Polzer，1.45±0.4pig/L；Hock，2，lpg/L。(2)臨床意義：凝血酶能與它的主要拮抗物抗凝血酶ni(AT-in)以1:1摩爾結(jié)合形成TAT，是反映凝血酶生成和活性增高的分子標(biāo)志物，〉2.9pg/L為增高有助于血栓前狀態(tài)的診斷，在DIC診斷中敏感性88%，特異性63%，陽性預(yù)示值79%，陰性預(yù)示值88%，升高也可見于肺栓塞，動脈、靜脈血栓，腫瘤等較敏感特異。異常降低見于口服抗凝藥患者、肝功能低下、先天性AT-IH缺乏等。5.血漿因子VH、K、XI和XB促凝活性(factor珊、K、XI、鄧procoagulantactivi-ty^!：C.FIX：C.FXI：C，F(xiàn)Xtt：C)測定受檢血漿中分別加人缺乏FW.FK.FXI和F鄧的基質(zhì)血漿、白陶土磷脂懸液和溶液，分別記錄開始出現(xiàn)纖維蛋白絲所需的時間。然后從各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線中分別計算出受檢血漿中FVD:C、FK，C、FXI:C.FM：C相當(dāng)于正常人的百分率(％)。(1)參考范圍：一期法，F(xiàn)W；C為103.3%±25.7%；FIX：C為98.1%士30.4%；FXLC為100.0%土18，4%；F1；C92.4%±20.7%。(2)臨床意義①增高：見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，如靜脈血栓形成、肺梗死、妊高征、晚期妊娠、口服避孕藥、腎病綜合征、惡性腫瘤等。②減低：FVffl:C減低見于血友病A、血管性血友病、血中存在因子硼抗體、QIC等；FK:C減低見于血友病B、肝臟病、維生素K缺乏癥、DIC、口服抗凝藥物等；FXI：C減低見于因子XI缺乏癥、肝臟疾病、DIC等；FM:C減低見于先天性因子XI缺乏癥、肝臟疾病、DIC和某些血栓性疾病等。(三)生理性抗凝血因子和病理性抗凝物質(zhì)檢測1.血漿抗凝血酶ni(AT-ni)含量測定采用免疫濁度法。(1)參考范圍：210?360mg/L。(2)臨床意義:AT-DI免疫測定是遺傳性AT-in缺乏診斷第二步測定的內(nèi)容。①AT-ni含量在遺傳性AT-ni缺乏類型I和nPS中降低，在類型11婦和11}105正常。②獲得性AT-ID減低見于Die、肝病、毒血癥、血栓形成、口服避孕藥等。③at-in增高見于尿毒癥、腎移植、心瓣膜病、再生障礙性貧血等。2.ProCGlobal試驗(ProCGlobaltest)采用凝固法。(1)參考范圍:PCAT(proteinCactivitydependentdotingtime)為85?200s；PCAT/O(血漿不依賴PC活性的血漿凝固時間)為33?55s。(2)臨床意義：本試驗用于蛋白C系統(tǒng)的篩選試驗，其特異性為79%.3.血漿游離蛋白S(freeproteinS，F(xiàn)PS)和總蛋白S(totalproteinS，TPS)測定采用火箭電泳法。(1)參考范圍：FPS為100.9%士11.6%；TPS為96.6%士9.8%。(2)臨床意義：FPS減低見于先天性和獲得性PS缺陷癥，后者見于肝病、口服抗凝藥等。4.抑制劑篩選試驗以APTT試驗進行抑制劑篩選。凝血抑制劑對APTT的影響可以是即刻作用，也可以是時間依賴性反應(yīng)。即刻糾正者，提示是內(nèi)源凝血因子缺乏；即刻不能糾正者為抗磷脂抗體；如果即刻部分糾正，而隨著溫育時間的延長，APTT呈進行性延長，提示抗凝物質(zhì)為因子抗凝物。(1)參考范圍：凝固時間縮短50%以上為糾正。(2)臨床意義：本試驗可以確定有無抗凝物、抗凝物的性質(zhì)。5.血漿游離肝素時間(freeheparintime)又稱甲苯胺藍糾正試驗，甲苯胺藍可以中和肝素。(1)檢驗結(jié)果：TT延氏的受檢血漿中加人甲苯胺藍后，TT縮短5s以上，提示受檢血漿中類肝素或肝素物質(zhì)增多；如果TT不縮短，提示延長的TT不是由肝素類物質(zhì)所致。(2)臨床意義：血中肝素類物質(zhì)增多見于嚴(yán)重肝病、DIC、過敏性休克、使用氮芥類藥物、放療后、肝葉切除后、肝移植后等。臨床應(yīng)用肝素時，延長的TT也被甲苯胺藍糾正。6.抗心鱗脂抗體(anti-cardiolipinantibodies，ACEA)測定ACLA是抗磷脂抗體(anti-phosphoii