藥理學(xué)研究的一般性問題

藥理學(xué)研究的科學(xué)訓(xùn)練1.科研全過程訓(xùn)練概況專業(yè)課程、專業(yè)外語、統(tǒng)計學(xué)、文獻(xiàn)檢索、常用軟件應(yīng)用〔Word,Excel,圖表制作軟件，Photoshop,SPSS,PowerPoint,etc〕閱讀文獻(xiàn)，確定課題〔查閱文獻(xiàn)能力〕設(shè)計實驗實驗研究〔取得初步結(jié)果，可以申請基金〕統(tǒng)計分析資料；撰寫論文辯論、會議報告〔Chinese,English〕2.一、藥理學(xué)研究的類型根據(jù)研究目的分類根底研究：受體、遞質(zhì)、蛋白質(zhì)、神經(jīng)通路、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因開發(fā)研究：圍繞新藥研發(fā)的藥理學(xué)研究應(yīng)用研究：提高治療效果、減少不良反響的臨床藥理學(xué)3.一、藥理學(xué)研究的類型根據(jù)研究內(nèi)容和研究方法分類藥效及作用機制研究藥動學(xué)研究實驗研究整體動物實驗離體器官、細(xì)胞實驗臨床研究4.二、定位與選題〝三定〞:明確的目標(biāo)定研究方向很穩(wěn)定定研究領(lǐng)域相對穩(wěn)定定研究課題非?；顫娙绾味ㄎ?學(xué)科開展的前景與可行性單位的可能條件個人興趣5.如何選題

導(dǎo)師：給方向、提供條件、審閱文章、組織辯論〔不同于technician〕根據(jù)導(dǎo)師的研究方向基金資助情況確有興趣的探索可以做出開創(chuàng)性的工作二、定位與選題6.三、要求獨立研究工作的根本能力掌握信息,復(fù)習(xí)文獻(xiàn)的能力科學(xué)實驗設(shè)計能力〔創(chuàng)新思維能力〕科學(xué)實驗操作能力科學(xué)論文撰寫發(fā)表能力科學(xué)基金申請能力良好的素質(zhì)，杜絕造假、剽竊文章的可信率、實驗的可重復(fù)率7.四、怎樣寫好實驗記錄認(rèn)真、客觀、全面的記錄。格式和內(nèi)容實驗方法試劑稱量配制時間氣候儀器設(shè)備動物結(jié)果8.四、怎樣寫好實驗記錄一般要求記錄本應(yīng)事先印有頁碼，不得撕掉或挪作他用，即使寫錯了亦應(yīng)如此。封面或首頁應(yīng)寫明科研課題名稱，開始工作年、月、日，工作者姓名，每本記錄前1～2頁應(yīng)留作寫實驗?zāi)夸浖绊摯沃?，便于查閱。所有?shù)據(jù)，必須立即用不掉色的筆直接清晰地記錄在記錄本上，嚴(yán)禁用鉛筆記錄，因為容易退色和被涂改。如有寫錯不得涂改擦抹，必須改正時，可在錯誤處畫道線或打×，然后寫上正確數(shù)據(jù)，并由課題負(fù)責(zé)人簽字，防止弄虛做假。電腦測得的數(shù)據(jù)應(yīng)輸入電腦，自動打印，貯存，最好拷貝一份，以防喪失或損壞。9.四、怎樣寫好實驗記錄寫記錄的要求立即不能先記在心上，實驗后補寫記錄，因為記憶有時不可靠。直接要直接寫在記錄本上，不能先寫在紙條上，然后重抄，因為重抄有時抄錯，有時甚至把紙條丟掉。清晰字體清楚，不要潦草，不要詞不達(dá)意，自己能看懂，別人也看得清楚，今天清楚，日后也看得懂。自動儀器打印的數(shù)據(jù)、結(jié)果、圖譜等必須將原件依順序貼在記錄本上，有條件的還可輸入電腦保存。10.四、怎樣寫好實驗記錄記錄的內(nèi)容年、月、日。有的實驗還應(yīng)注明室溫實驗名稱目的材料實驗方法，應(yīng)注明引用參考文獻(xiàn)；結(jié)果：包括原始數(shù)據(jù)，圖，表，統(tǒng)計方法討論或小結(jié)

11.五、研究設(shè)計三要素處理因素〔自變量〕試驗對象〔人、動物；器官、組織、細(xì)胞、分子〕試驗效應(yīng)〔因變量〕藥物、方法和模型的關(guān)系12.六、實驗設(shè)計的根本原那么對照原那么并行對照配對對照自身對照前后對照潛在對照13.六、實驗設(shè)計的根本原那么隨機原那么排除實驗者的主觀性，使每個實驗單位都有同等時機被分配到實驗組和對照組。重復(fù)原那么實驗的取樣例數(shù)或?qū)嶒灤螖?shù)14.

如何針對課題復(fù)習(xí)文獻(xiàn)15.1.站在巨人肩上看世界知識爆炸時代:廣博、交叉學(xué)科

知識廣博與深入、專業(yè)化間的矛盾〝開卷有益〞？16.2.按科研需要來復(fù)習(xí)文獻(xiàn)充分占有文獻(xiàn)〝方向〞─專業(yè)人員水平領(lǐng)域─專家水平課題─No.1專家水平17.2.按科研需要來復(fù)習(xí)文獻(xiàn)文獻(xiàn)分類書教科書:相關(guān),交叉學(xué)科的根底知識專著編著(資料性)著作(文獻(xiàn)性)(方向)(領(lǐng)域)綜述資料性(方向)(領(lǐng)域)文獻(xiàn)性(領(lǐng)域,課題)Originalpaper課題領(lǐng)域(個別)Datapaper快報摘要會議匯編自己定位不要變,別被文獻(xiàn)牽著走18.3.如何看文獻(xiàn)精讀與瀏覽看懂:問題的提出(Background)目的設(shè)計思想與依據(jù)研究對象與方法重要結(jié)果結(jié)論與啟示熟悉程度方向:一般涉及;根底知識;學(xué)科水準(zhǔn);當(dāng)前重大進展與趨勢領(lǐng)域:了解焦點與熱點;已/正/將進行的課題課題:(全面)歷史現(xiàn)狀展望；主要方法、手段19.4.如何收集文獻(xiàn)檢索重要文獻(xiàn);實驗室或?qū)W者追蹤;確定本學(xué)科的重要(核心)期刊分層次收集資料課題有關(guān)文獻(xiàn);盡可能收集原著/快報;要新,全本領(lǐng)域非課題文獻(xiàn);新綜述,影響大的原著本方向非本領(lǐng)域文獻(xiàn):經(jīng)典專著/綜述不同方向相關(guān)知識:專著,教科書20.5.文獻(xiàn)整理運用自己專業(yè)知識按照文獻(xiàn)的熱點與焦點參照相關(guān)綜述模式例TGFβ在腎纖維化中的意義(作用)

㈠背景知識

①腎纖維化

②TGFβ的理化特征

③TGFβ的生成與代謝、組織分布等

㈡腎纖維化病程中TGFβ的變化

①血漿的和腎組織的，蛋白與基因表達(dá)

②病程中的動態(tài)變化與臨床病理生理表現(xiàn)

的〔相關(guān)〕關(guān)系21.5.文獻(xiàn)整理㈢TGFβ的生物學(xué)〔腎〕效應(yīng)：整體，器官，細(xì)胞及分子效應(yīng)

①外源或刺激內(nèi)源TGFβ的效應(yīng)〔在正常和疾病條件〕

②拮抗或促失活的效應(yīng)㈣TGFβ效應(yīng)的機理

受體及細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機理

TGFβ的基因表達(dá)和細(xì)胞表型改變的機理㈤腎臟疾病的TGFβ高/低表達(dá)的機理㈥TGFβ與其他腎纖維化因子間的關(guān)系〔包括遺傳易感因素〕22.5.文獻(xiàn)整理㈦TGFβ參與腎纖維化發(fā)病的臨床意義：診斷，治療，預(yù)防策略此外，常用方法學(xué)和技術(shù)的整理

腎纖維化整體活離體模型；相關(guān)細(xì)胞的培養(yǎng)；細(xì)胞增殖表型轉(zhuǎn)變；膠元測定；

TGFβ受體表達(dá)與活性檢測……23.三.如何撰寫文獻(xiàn)綜述目的學(xué)科帶頭人與學(xué)科骨干寫科研工作人員開題前寫科學(xué)情報人員寫研究生畢業(yè)論文(?)基層人員為寫而寫文獻(xiàn)性與資料性,大綜述與小專論24.三.如何撰寫文獻(xiàn)綜述小專論內(nèi)容

審定好內(nèi)容與題目(如上述例子)

要有思路，有觀點，提煉科學(xué)問題，要告訴讀者什么？概述問題的提出--研究的歷史與背景--本問題(課題)的意義背景知識及相關(guān)根本知識〔不要寫成教科書或講義〕本專論要論述的主要內(nèi)容,注意從課題與背景聯(lián)系的學(xué)科高度分析小結(jié)存在的問題與今后的方向25.三.如何撰寫文獻(xiàn)綜述資料處理按專業(yè)知識列好提綱;文獻(xiàn)(作的摘要)編號后按提綱歸類背景材料,根底知識,立論依據(jù);權(quán)威甚或經(jīng)典;“教科書式或講義式〞語言不同意見,學(xué)術(shù)觀點與資料如何處理資料的準(zhǔn)確性,尤其是翻譯,講不清楚不如不講老課題文獻(xiàn)多,新課題文獻(xiàn)太少26.三.如何撰寫文獻(xiàn)綜述如何表達(dá)自己的學(xué)術(shù)觀點:評述?自引?邏輯分析內(nèi)容集中,目標(biāo)明確,不要廣證博引(與研究生論文不同)參考文獻(xiàn):新(5年內(nèi)2/3);背景材料,

立論依據(jù);權(quán)威經(jīng)典;

專論內(nèi)容:新,反映進展,可引會議,摘要及個人咨詢,準(zhǔn)確發(fā)表:刊登進展/綜述的專業(yè)雜志(如“進展〞“國外醫(yī)學(xué)〞);專業(yè)論文雜志;查閱國內(nèi)類似綜述有無,防止重復(fù).按雜志稿約修改(留底)27.四.如何進行科研課題設(shè)計原那么:目標(biāo)明確;構(gòu)思新穎;立論依據(jù)充分;實驗方法恰當(dāng)選題(科研目標(biāo),目的)目標(biāo)具體:用實驗手段解決科學(xué)問題,問題是什么,攻關(guān)，攀科學(xué)頂峰，“關(guān)〞、“頂峰〞是什么,在哪里?(目的與手段,工具的關(guān)系)射箭中的,忌打哪兒指哪兒，看看有什么變化，研究甚少，填補空白等?！叭è暩咨厦鞔_該課題的學(xué)科地位(與原創(chuàng)新關(guān)系);注意工作的積累和開展;可參考文獻(xiàn)整理中發(fā)現(xiàn)的和未解決的問題；將確定的目標(biāo)逐字推敲寫下來。28.四.如何進行科研課題設(shè)計創(chuàng)新構(gòu)思Idea的來源:臨床;文獻(xiàn);交叉學(xué)科啟迪;(學(xué)科開展)自己工作的連續(xù)性，防止被文獻(xiàn)牽著鼻子走，或趕時髦;新技術(shù)應(yīng)用更重視新思維;交叉學(xué)科別交叉走了(轉(zhuǎn)向)29.四.如何進行科研課題設(shè)計設(shè)計思想合理,依據(jù)充分

如:證明某因子(TGFβ)是某疾病(腎纖維化)的發(fā)病因素.設(shè)計:疾病時高表達(dá),與病程開展以及某些病理變化相關(guān)外源TGFβ或誘導(dǎo)內(nèi)源TGFβ高表達(dá)加劇發(fā)病拮抗TGFβ或抑制內(nèi)源TGFβ生成或促進滅活,消除疾病上述思路與文獻(xiàn)(or臨床)是否相悖?30.四.如何進行科研課題設(shè)計方法恰當(dāng)(方法先進)

方法選擇：目的決定方法選擇；實驗條件選方法；工作者熟練程度選方法；假設(shè)全部順利，所得結(jié)果能否到達(dá)設(shè)計目標(biāo)？模型經(jīng)典與新建；是否需與人一致或接近；可行性；模型與分組適合研究目的為原那么觀察指標(biāo)多〔廣〕或少〔精〕好？明確每個指標(biāo)的原理和意義背景指標(biāo)如證實疾病模型復(fù)制成功的指標(biāo)；反映質(zhì)控的指標(biāo)；反映陰性或陽性的對照指標(biāo)等→必須是肯定的結(jié)果探索性指標(biāo)前瞻性指標(biāo)31.四.如何進行科研課題設(shè)計建立操作程序落實每個方法預(yù)試成熟，建立程序設(shè)計實驗記錄與觀察內(nèi)容實驗記錄表；單項歸納表；匯總表No.ControlGroup1Group2123432.6.總體設(shè)計的預(yù)測評估

⑴預(yù)期結(jié)果陰性或陽性的解釋與再證實；審定設(shè)計能否到達(dá)目標(biāo)

⑵預(yù)期結(jié)果追蹤深入研究的方向和可行性

⑶預(yù)期結(jié)果圖表設(shè)計〔發(fā)表是否薄弱〕

⑷預(yù)期結(jié)果的學(xué)術(shù)價值和地位

〔寫論文的Introduction,M&M〕33.藥物效應(yīng)的測量34.

一、藥物-受體相互作用的測定生化結(jié)合研究〔全部受體〕功能研究〔局部受體〕realtimemeasurementstoptimemeasurement35.1種配體與3種不同受體群的相互作用

36.配體與受體結(jié)合的特異性是相對的，與藥物濃度有關(guān)37.二、放射受體結(jié)合研究20世紀(jì)60年代，125I-ACTH、125I-血管緊張素;preparation:制備根本原理：配基與受體特異性結(jié)合，以放射性強弱表示結(jié)合容量。與放免分析相似〔1955年創(chuàng)造，Yalow〕38.

放射配基結(jié)合過程圖解

39.藥物濃度，可得到受體結(jié)合劑量-反響曲線參加大劑量非標(biāo)記配基，封閉受體，得到非特異性結(jié)合相應(yīng)公式計算非特異性結(jié)合、總結(jié)合固定配基濃度，改變受體量符合一級動力學(xué)：隨時間增加，結(jié)合達(dá)最大值；能被無藥物介質(zhì)逆轉(zhuǎn)40.受體結(jié)合研究時的平衡情形

41.

放射性配基結(jié)合實驗中不同水平的特異性結(jié)合

42.特別注意點去除非特異性結(jié)合在一定濃度的敏感“窗〞內(nèi)進行43.三、功能性研究測定功能性反響方法多樣經(jīng)典生理反響酶活性第二信使水平反響、表達(dá)產(chǎn)物測定報告物質(zhì)〔酶、基因等〕44.要求： 大的信-噪比：機體、儀器 根底狀態(tài)穩(wěn)定方法：找出衰減規(guī)律 設(shè)對照〔不常用〕 也必須在穩(wěn)定的“窗〞內(nèi)進行45.

圖5

生物制備的穩(wěn)定窗

46.不同受體制備進行實驗的前提敏感性和反響性不變〔實際不可能〕糾正系統(tǒng)不穩(wěn)定性平衡周期達(dá)穩(wěn)態(tài)對照47.圖6移動基線對劑量-反響曲線的影響48.沖動劑作用后指數(shù)性細(xì)胞死亡對劑量－反響曲線的影響49.組織失去敏感性后，最大反響也喪失一個系統(tǒng)不太可能充當(dāng)不同組織間根底反響變化的良好對照數(shù)據(jù)必須在穩(wěn)定的“窗〞內(nèi)進行，防止繼發(fā)作用靠一個劑量得到的反響不能下結(jié)論50.圖8生物制備反響窗51.圖9劑量－反響曲線形狀的改變顯示繼發(fā)反響52.生物放大的根本原那么具有終端器官反響的細(xì)胞體系具有很大價值53.圖10細(xì)胞代謝指示物氫離子從細(xì)胞釋放調(diào)控示意圖

54.四、藥物反響的表述根底與給藥狀態(tài)的差值原發(fā)反響變異性較大利用差值較好有多種轉(zhuǎn)換方法55.圖11兩種描述藥物反響的方法56.圖12生物制備劑量－反響曲線誤差范圍57.

實驗的藥物數(shù)據(jù)的不同處理直接反響以對數(shù)濃度作圖有較高精確性藥物反響減去根底值降低反響測量誤差反響值以根底水平的百分?jǐn)?shù)表示變異大以最大反響值的百分?jǐn)?shù)表示較好；需要較少的實驗次數(shù)58.圖13直接反響以對數(shù)濃度作圖59.圖14從圖13顯示的數(shù)據(jù)所計算的delta反響60.圖15反響以根底值的百分率表示61.圖16Delta反響以最大delta反響的百分?jǐn)?shù)計算62.圖17連續(xù)累積劑量－反響曲線63.研究結(jié)果的表達(dá)64.一、研究文章的撰寫確定投哪本雜志文章的質(zhì)量與雜志的檔次要相稱發(fā)表周期65.論文撰寫根本格式與要求Bacon:Writingmakesanexactman.66.二、根本要求值得研究數(shù)據(jù)真實、經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)處理按照國際科學(xué)界公認(rèn)的格式編排文體要好，含義確切、符合邏輯67.1978年1月美、加、英醫(yī)學(xué)期刊編輯：?溫哥華宣言?1991年國際醫(yī)學(xué)期刊編輯委員會修改BrMedJ1991;302:338-3411995年人民軍醫(yī)出版社?醫(yī)學(xué)生物學(xué)文獻(xiàn)方法學(xué)?68.題目〔title〕作者姓名〔author’sname〕作者單位地址〔address〕摘要〔abstract〕關(guān)鍵詞〔keywords〕引言〔introduction〕Nature例外材料與方法〔materialsandmethods〕結(jié)果〔results〕討論〔discussion〕總結(jié)或結(jié)論〔conclusionorsummary〕致謝〔acknowledgement〕參考文獻(xiàn)〔reference〕69.題目〔title〕：短！具體；簡潔：通常不超過20個字確切；通常在論文寫完后確定“甲氨蝶呤加四物湯治療白血病46例〞防止“關(guān)于……的研究、調(diào)查、分析、觀察〞作者姓名〔author’sname〕：第一作者……correspondence;contributedequally作者單位地址〔address〕70.摘要〔abstract〕目的、方法、結(jié)果、結(jié)論。150～250個字符，或不超過1000個英文字母。關(guān)鍵詞〔keywords〕：3～7個。引言〔introduction〕：背景、本項研究的理論根底、為什么要進行此研究或提出假說。全部論文的1/10左右篇幅。引言的最后一句：目的。71.材料與方法〔materialsandmethods〕動物：種類、數(shù)量、來源、性別、年齡、體重、飼養(yǎng)條件微生物、細(xì)胞：種、型、株、系、培養(yǎng)條件技術(shù)、方法的步驟、條件控制儀