實(shí)驗(yàn)3-環(huán)境微生物的檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)三環(huán)境微生物的檢測(cè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解周圍環(huán)境中微生物的分布情況。2.懂得無(wú)菌操作在微生物實(shí)驗(yàn)中的重要性。3.了解四大類微生物的菌落特征。二、實(shí)驗(yàn)原理在我們周圍的環(huán)境中存在著種類繁多的、數(shù)量龐大的微生物。土壤、江河湖海、塵埃、空氣、各種物體的表面以及人和動(dòng)物體的口腔、呼吸道、消化道等都存在著各種微生物。由于它們體積微小，人們用肉眼無(wú)法觀察到它們個(gè)體的存在。但是只要稍加留意，我們就可以在發(fā)霉的面包、朽木上看到某些微生物群體。這些現(xiàn)象表明，自然界只要有微生物可以利用的物質(zhì)和環(huán)境條件，微生物就可以在其上生長(zhǎng)繁殖。據(jù)此，我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室里就可以用培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)微生物。培養(yǎng)基是用人工配制的、適合微生物生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合養(yǎng)料。其中含有微生物所需要的六大營(yíng)養(yǎng)要素：碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、氣體和水分。此外，根據(jù)不同的微生物的要求，在配制培養(yǎng)基時(shí)還需用酸液或堿液調(diào)節(jié)至適宜的pH。配制好的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌。所謂滅菌是指采用各類的物理或化學(xué)因素，使物體內(nèi)外的所有微生物喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施。經(jīng)過(guò)滅菌后的物體是無(wú)菌的。消毒是與滅菌完全不同的概念，它是指用較溫和的物理因素殺死物體表面和內(nèi)部病原微生物的一種常用的衛(wèi)生措施。滅菌的方法較多，廣泛使用的是高溫滅菌，其中最常用的是高壓蒸汽滅菌法。此法是把待滅菌的物品放在一個(gè)可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進(jìn)行的。在1.05kg/cm2的蒸汽壓力下，溫度可達(dá)121℃。一般只要維持15~20min，就可殺死一切微生物的營(yíng)養(yǎng)體和它們的各種孢子。微生物的接種技術(shù)是生物科學(xué)研究中的一項(xiàng)最基本操作技術(shù)。為了確保純種不被雜菌污染，在整個(gè)接種過(guò)程中，必須進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須牢固樹(shù)立無(wú)菌概念，經(jīng)常保持實(shí)驗(yàn)臺(tái)及周圍環(huán)境的清潔，嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免雜菌的污染，這是保證實(shí)驗(yàn)成功的必要條件。如將微生物接種到適合其生長(zhǎng)的固體培養(yǎng)基表面，在適宜的溫度下(一般細(xì)菌37℃：霉菌等28℃)，培養(yǎng)一段時(shí)間(一般24~48h)后，少量分散的菌體或孢子就可生長(zhǎng)繁殖成肉眼可見(jiàn)的細(xì)胞群體，此即菌落。如平板上的菌落是由單個(gè)細(xì)胞(或單個(gè)孢子)生長(zhǎng)繁殖而成的，就是一個(gè)純種細(xì)胞群或克?。蝗襞囵B(yǎng)后大量菌落聚集在一起形成的為菌苔。不同種的微生物可形成大小、形態(tài)各異的菌落，根據(jù)微生物菌落形態(tài)的不同，可初步鑒別出四大類微生物：細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌。細(xì)菌的菌落呈圓形、較小而薄、透明或不透明、質(zhì)地“細(xì)膩”，有的具有色澤，有的邊緣不整齊，有的表面濕潤(rùn)、光滑，有的表面干燥有褶皺。此外，細(xì)菌常因分解含氮化合物而產(chǎn)生臭味。酵母菌的菌落通常比細(xì)菌菌落大，圓形、厚、不透明、色素單一，多為乳白，少數(shù)為橙或紅色。酵母菌因普遍能發(fā)酵含碳有機(jī)物產(chǎn)醇，故菌落多伴有酒香味。防線菌菌落小而致密，或堅(jiān)硬、或呈粉狀。不少放線菌還產(chǎn)生特殊的土腥味。霉菌菌落大而疏松、或大而緊密。氣生菌絲會(huì)發(fā)育形成一定形狀、構(gòu)造和色澤的子實(shí)器官，所以菌落表面往往有肉眼可見(jiàn)的構(gòu)造和顏色。三、實(shí)驗(yàn)材料人體表和空氣中的微生物。四、實(shí)驗(yàn)器材與試劑1.器材恒溫培養(yǎng)箱、無(wú)菌平皿、電爐、酒精燈、火柴、無(wú)菌棉簽和記號(hào)筆。2.試劑牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、酵母膏葡萄糖培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱YPD)、高氏一號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基。五、實(shí)驗(yàn)操作=1\*ROMANI.融化培養(yǎng)基將裝有無(wú)菌培養(yǎng)基的三角瓶置水浴中煮沸，待培養(yǎng)基融化后取出，當(dāng)冷至50~60℃左右時(shí)，進(jìn)行下一步。面生長(zhǎng)的各種微生物，然后