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頭孢地尼和頭孢克洛對270株呼吸道致病菌體外抗菌活性研究中國醫(yī)學科學院中國真和醫(yī)科大學北京協(xié)和醫(yī)院檢驗科王澎謝秀麗王輝張悅賢原英張小江陳民鈞頭孢地尼和頭孢克洛作用與用途頭抱地尼(cefdinir)系1998年首次合成的廣譜口服三代頭抱菌素，1997年美國食品與藥物管理局批準用于治療社區(qū)獲得性肺炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作、急性支氣管炎、咽扁桃體炎、急性中耳炎及皮膚軟組織感染1。文獻報道其對葡萄球菌、肺炎鏈球菌、腸桿菌科等有較強的抗菌活性1。為了解頭抱地尼對中國臨床分離菌的體外抗菌譜，本研究對2002年本院就診患者呼吸道分離的常見致病菌，進行了頭抱地尼體外抗菌活性測定并與頭抱克洛進行比較。作用與用途一、菌株本研究共收集菌株270株，其中包括：肺炎球菌59株，流感嗜血桿菌26株，卡他莫拉菌20株，苯唑西林敏感的金黃色葡萄球菌(MSSA)51株，大腸埃希菌50株，肺炎克雷伯菌50株和0—溶血性鏈球菌14株。細菌鑒定采用常規(guī)鑒定法，必要時用VITEK儀器或crystal儀器補充鑒定。二、 藥敏試驗：采用瓊脂稀釋法測定頭抱地尼(cefdinir)，和頭抱克洛的最大抑菌濃度(MIC)，操作嚴格按美國臨床實驗室標準化委員會NCCLS推薦的指南進行2。當測試葡萄球菌時，加測苯唑西林篩選MSSA；測試肺炎鏈球菌時，加測青霉素Etest條(ABBiodiskCo.)，分別報告頭抱地尼和頭抱克洛對青霉素敏感、中介和耐藥的肺炎鏈球菌的敏感性。每種抗生素對不同的菌株采用不同的濃度稀釋，用點種器OrientalMotorIndicator日本佐久間制作所把菌懸液點種到含不同濃度抗生素的Mueller—Hinton(M-H)瓊脂(美國BD公司產(chǎn)品)表面，每個點點種約104CFU。流感嗜血桿菌加測氨芐西林，藥敏采用流感嗜血桿菌試驗培養(yǎng)基HTM，而0—溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌藥敏采用含5%脫纖維羊血的M-H瓊脂?？焐L菌的藥敏平皿在35T空氣環(huán)境中孵育16?22小時，而苛養(yǎng)菌在5%CO2環(huán)材料與方法 境中孵育20?24小時。按照文獻中規(guī)定的折點判定敏感、中介和耐藥(表1)。表1在NCCLS(2003)中頭抱地尼和頭抱克洛的MIC判定折點(mg/L)頭抱地尼頭抱克洛菌名敏感中介耐藥肺炎鏈球菌<0.51三32W12三34流感嗜血桿菌<1三32<816三332腸桿菌科菌和葡萄球菌屬<12三34<816三332三、超廣譜0—內酰胺酶(ESBL0及0—內酰胺酶試驗：ESBL檢測采用NCCLS推薦的紙片擴散表型確證試驗確定2：頭抱噻肟單藥與頭抱噻肟+克拉維酸的復合制劑，頭抱他啶

與頭抱他啶+克拉維酸的復合制劑英國OXoid公司產(chǎn)品，兩方案中任一組抗生素在加克拉維酸后抑菌圈擴大5mm以上時，判定為ESBL+。大腸埃希菌ATCC25922和肺炎克雷伯菌ATCC700603分別用作ESBL—和ESBL+對照。用Nitrocefin法檢測流感嗜血桿菌，卡他莫拉菌和金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的0—內酰胺酶。四、 質量保證：大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC29213、肺炎鏈球菌ATCC49619和流感嗜血桿菌ATCC49247用來評價整個試驗的準確性。6個質控MIC值均落在NCCLS質控允許的范圍內。因此，所有數(shù)據(jù)參加統(tǒng)計分析。五、 數(shù)據(jù)分析：文中的數(shù)據(jù)和表格采用世界衛(wèi)生組織耐藥監(jiān)測組ThomasO'Brien和JohnStelling提供的WHONET5軟件分析所得。對270株菌的全部研究結果：MIC50、MIC90、MIC范圍及MIC平均值，耐藥率、中介率和敏感率等列于表2。將270株菌分組進行觀察與分析，1組是常見的呼吸道病原菌：青霉素敏感、中介和耐藥的肺炎球菌，流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌；2組是ESBL+和ESBL-的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌；3組為苯唑西林敏感的金黃色葡萄球菌MSSA；4組為上呼吸道的條件致病菌0—溶血性鏈球菌。結果青霉素敏感的肺炎球菌(28)結果青霉素敏感的肺炎球菌(28)頭抱地尼0.00.0100.00.0640.05800.016?0.125頭抱克洛0.0 0.0 100.0 0.25 0.50.3380.125?0.5青霉素中介的肺炎球菌(27)頭抱地尼25.93.770.40.2540.3020.064?4頭抱克洛29.6 22.2 48.1 1.5 322.1420.5?48青霉素耐藥的肺炎球菌(4)頭抱地尼100.00.00.0484.7574?8表2?頭抱地尼和頭抱克洛對270株菌的體外抗菌活性(mg/L)I菌名抗生素耐藥％中介％敏感％MIC50MIC90MIC平均值MIC范圍株數(shù)頭抱克洛100.0 0.0 0.0頭抱克洛100.0 0.0 0.06425676.10932?256流感嗜血桿菌(26)頭抱地尼0.0 0.0 100.0 0.25 10.286 0.064?1頭抱克洛0.0 3.8 96.228 2.682 0.5—16卡他莫拉菌(20)頭抱地尼0.064 0.125 0.083 0.008—0.25頭抱克洛 0.5 0.5 0.42 0.25—0.5ESBL-大腸埃希菌(21)頭抱地尼4.8 14.3 81.0 0.52 0.552 0.125?4頭抱克洛19.0 14.3 66.7832 82?32ESBL+大腸埃希菌(29)頭抱地尼100.0 0.0 0.0 256 256 192.166 64?512頭抱克洛100 0.0 0.0 256 512 288.497 256?512ESBL-肺炎克雷伯菌(24)頭抱地尼0.0 0.0 100.0 0.125 0.25 0.158 0.064?1頭抱克洛0.0 4.2 95.8 281.493 1?16ESBL+肺炎克雷伯菌(26)頭抱地尼100.0 0.0 0.0 512 512 234.09 4-512頭抱克洛100.0 0.0 0.0 512 512 498.531256?512MSSA(51)頭抱地尼0.0 0.0 100.0 0.25 0.5 0.257 0.125?0.5頭抱克洛0.0 0.0 100.022 10653 1?40—溶血性鏈球菌(14)頭抱地尼0.064 0.064 0.05 0.016?0.064頭抱克洛 0.51 0.552 0.25?11?頭抱地尼和頭抱克洛對常見呼吸道病原菌的體外抗菌活性肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌是中耳炎、鼻竇炎、會厭炎、咽炎和肺炎的常見病原菌。它們對0—內酰胺類的耐藥性，近年來在很多地區(qū)，如美國和歐洲，增長很快。這些菌因發(fā)生青霉素結合蛋白(PBP0)改變(如肺炎鏈球菌)或產(chǎn)生0—內酰胺酶(如流感嗜血桿菌及卡他莫拉菌)而耐藥。肺炎鏈球菌 所有測試的59株肺炎鏈球菌的MIC,分別按青霉素敏感、中介和耐藥分3組分析，其結果(表2)顯示，28株青霉素敏感的肺炎球菌對頭孢地尼和頭砲克洛均敏感，但頭砲地尼的MIC50、MIC90、MIC平均值和MIC范圍低于頭抱克洛3?9?7?8倍。27株青霉素中介的肺炎球菌對頭抱地尼和頭砲克洛均耐藥，耐藥率分別為25?9%和29.6%,但頭抱地尼和頭抱克洛的中介率和敏感率分別為3.7%和70.4%對22.2%和48.1%，說明頭抱地尼對PISP株的抗菌活性明顯強于頭抱克洛。4株青霉素耐藥的肺炎球菌對這兩種頭抱菌素均耐藥，但對頭抱克洛比頭抱地尼的耐藥性更高，頭抱克洛的MIC50、MIC90、MIC平均值和MIC范圍比頭抱地尼高8?32倍。流感嗜血桿菌26株流感嗜血桿菌中，有5株對氨芐西林耐藥，且Nitrocefin試驗+0—內酰胺酶陽性率為19.2% 5/26株，對頭抱地尼和頭抱克洛的敏感率分別為100%和96.2%，未見對二者耐藥的流感嗜血桿菌菌株，且頭抱地尼的MIC50、MIC90、MIC平均值和MIC范圍低于頭抱克洛7.8?16倍?？ㄋ狙芯恐?0株卡他莫拉菌0—內酰胺酶陽性率為90.0%18/20株，由于目前NCCLS沒有判定折點，無法分析敏感率，這兩種頭抱菌素有較低的MIC值，且頭抱地尼的MIC50、MIC90、MIC平均值和MIC范圍〔(0.008?0.25)mg/L〕明顯低于頭抱克洛〔(0.25?0.5)mg/L〕。2.頭抱地尼和頭抱克洛對大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的抗菌活性本研究共測試了50株

大腸埃希菌和50株肺炎克雷伯菌，把這兩種菌分為ESBL(-)和ESBL(+)組分別進行統(tǒng)計分析(表2)。大腸埃希菌：ESBL(-)和ESBL(+)組的藥敏譜明顯不同。頭抱地尼對21株ESBL菌保持很高的活性耐藥率僅為4.8%mic90值為2mg/L,MIC范圍為(0.125?4)mg/L。而頭抱克洛比頭抱地尼顯示較高的耐藥性，耐藥率為19%MIC90為32mg/L,MIC為(2?32)mg/L。29株ESBL+菌體外對這2種抗生素均耐藥。肺炎克雷伯菌：頭抱地尼和頭抱克洛對24株ESBL-的肺炎克雷伯菌有極好的抗菌活性，未發(fā)現(xiàn)耐藥菌株，敏感率分別為100%和95.8%。而這2種抗生素對26株ESBL+菌體外高水平耐藥，沒有敏感的菌株發(fā)現(xiàn)。3?頭抱地尼和頭抱克洛對MSSA的體外抗菌活性MSSANCCLS2推薦不論0—內酰胺藥在耐苯唑西林藥的葡萄球菌菌株中的體外活性是敏感還是耐藥，都應向臨床報告為耐藥株，因此本研究只評估了對MSSA的抗菌活性,51株MSSA對所測試的2種頭抱菌素都高度敏感，敏感率均為100%,但頭抱地尼的MIC50、MIC90、MIC平均值和MIC范圍低于頭抱克洛4?8倍。4.頭抱地尼和頭抱克洛對B群0—溶血性鏈球菌的體外抗菌活性頭抱地尼和頭抱克洛無判定折點。2種頭抱菌素的抗菌活性都很高而頭抱地尼的MIC50、MIC90、MIC平均值和MIC范圍低于頭抱克洛(7.8?15.6)倍。[1]DavidRPGPharmD.Cefdinirana