病原性球菌及檢驗

關于病原性球菌及檢驗1.簡述病原性球菌的概念及種類。2.熟悉常見病原性球菌的主要生物學特性、臨床意義。3.說出葡萄球菌、鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌的檢驗程序和檢驗方法。

學習目的與要求第2頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

對人有致病性的球菌主要引起化膿性炎癥,又稱化膿性球菌。主要包括有1、G+球菌：葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌。2、G-球菌：腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌等。第3頁,共120頁，2024年2月25日，星期天第一節(jié)葡萄球菌屬

(Staphylococcus)

第4頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（一）形態(tài)與染色

G+，球形，無鞭毛、無芽孢，呈葡萄串狀排列。一、生物學特性第5頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（二）培養(yǎng)特性

營養(yǎng)：要求不高，耐鹽。

液體：均勻渾濁生長

普通瓊脂平板：

血液瓊脂平板：高鹽甘露醇平板：金黃色葡萄球菌為淡橙黃色菌落；其他葡萄球菌為白色菌落。第6頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（三）生化反應

活潑

分解多種糖類、蛋白質、氨基酸。(如：葡萄糖，麥芽糖，蔗糖，甘露醇）

觸酶（＋）（區(qū)別于鏈球菌屬）第7頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（四）抗原構造１、蛋白抗原（ＳＰＡ）２、多糖抗原

金黃色葡萄球菌：核糖醇磷壁酸（檢測磷壁酸Ａｂ有助于金葡菌感染診斷）凝固酶（－）：甘油磷壁酸第8頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（五）分類:３２個種及亞種１、按色素分類：金、白、檸２、按凝固酶分類：凝固酶陰性、凝固酶陽性葡萄球菌３、按噬菌體分類：金葡菌分為5群26型

4.據色素、生化反應分：

金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌第9頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

三種葡萄球菌的主要性狀第10頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（六）抵抗力無芽胞菌中最強，耐干燥，對石炭酸、升汞、龍膽紫敏感。易產生耐藥性變異，如：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）。MRSA常呈多重耐藥，對青霉素、氧氟沙星及紅霉素的敏感率分別為1.3%、3%及14%。第11頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

長期住院、反復使用各種廣譜抗菌藥物、燒傷或有傷口的病人及與MRSA定植或感染的病人接觸都是造成院內MRSA流行的危險因素。MRSA定植或感染的人員及院內環(huán)境污染是引起院內流行的主要來源。

MRSA定植或感染的人員及院內環(huán)境污染是引起院內流行的主要來源。

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）第12頁,共120頁，2024年2月25日，星期天二、致病性和免疫性(一)致病物質金黃色葡萄球菌產生多種侵襲性酶與外毒素。

1．血漿凝固酶（coagulase)：分：結合型凝固酶、游離型凝固酶。

鑒別金黃色葡萄球菌的重要指標。

2．葡萄球菌溶血素（staphylolysin）第13頁,共120頁，2024年2月25日，星期天3．殺白細胞素（leukocidin）4．腸毒素（enterotoxin）：（A、B、C1、C2、C3、D、E、G、H9個血清型）5．表皮剝脫毒素（exfoliativetoxin）6.毒性休克綜合征毒素1（toxicshocksyndrometoxin1,TSST1）第14頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（二）所致疾病

1．侵襲性疾?。海?）皮膚軟組織感染

特點：病灶局限且膿汁粘稠

（2）內臟器官感染

（3）全身感染

（4）尿路感染第15頁,共120頁，2024年2月25日，星期天2．毒素性疾病

（1）食物中毒

（2）燙傷樣皮膚綜合征由表皮剝脫毒素引起。

（3）毒性休克綜合征由TSST1引起

（4）假膜性腸炎

第16頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

人類凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）感染中以表皮葡萄球菌的感染最為常見。

CNS主要引起以下幾種感染：泌尿系感染，細菌性心內膜炎，敗血癥等，其中大多為醫(yī)院內感染。此外，心臟起搏器安裝、置換人工心臟瓣膜、長期腹膜透析、靜脈滴注等亦可造成凝固酶陰性葡萄球菌的感染。3、凝固酶陰性葡萄球菌的致病性第17頁,共120頁，2024年2月25日，星期天三、微生物學檢驗（一）標本采集（二）檢驗程序（三）檢驗方法第18頁,共120頁，2024年2月25日，星期天三、微生物學檢驗（一）標本采集根據病情采集標本

種類：膿液、傷口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、腦脊液、糞便等。

注意：無菌操作，避免污染。第19頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（二）葡萄球菌檢驗程序膿液、咽拭子、穿刺液尿液、痰液腦脊液血液糞便、嘔吐物直接涂片染色增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)（血平板）分離培養(yǎng)（高鹽甘露醇平板）取可疑菌落鑒定試驗藥敏試驗涂片染色血漿凝固酶耐熱核酸酶其他鑒定試驗報告初報第20頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（三）檢驗方法1、直接涂片適用于：正常情況下無菌的標本（如腦脊液）伴有炎癥細胞的其他體液標本、膿液等初步報告：“查見革蘭陽性葡萄狀排列球菌，疑為葡萄球菌”或：“查見類似葡萄球菌的革蘭陽性球菌”第21頁,共120頁，2024年2月25日，星期天2、分離培養(yǎng)

50ml葡萄糖肉湯（增菌）

渾濁無菌（7天）報告：無菌生長腦脊液、膿液、穿刺液、咽拭、尿液血平板血液標本5ml糞便、嘔吐物高鹽甘露醇平板第22頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（三）檢驗方法3、鑒定試驗（1）血漿凝固酶試驗：金黃色葡萄球菌（+）（2）甘露醇發(fā)酵試驗：金黃色葡萄球菌（+）（3）耐熱核酸酶試驗：金黃色葡萄球菌（+）（４）腸毒素測定：金黃色葡萄球菌產生（5）SPA檢測：金黃色葡萄球菌（6）凝固酶陽性和凝固酶陰性的葡萄球菌鑒定（7）API葡萄球菌鑒定試劑盒第23頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（四）結果評價和報告1、金黃色葡萄球菌：無論任何標本中分離到均應鑒定并報告臨床。2、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌：從輸液導管、人工植入組織中分離到，應視為致病菌。3、尿培養(yǎng)計數：>103-104為陽性菌尿標準。4、其他凝固酶陰性葡萄球菌：引起感染流行或治療失敗時，應鑒定到種。5、金黃色葡萄球菌（MRSA)：頭孢菌素類抗生素體外藥敏試驗為敏感時，不應報告，因體內試驗已證實MRSA對該類抗生素耐藥。第24頁,共120頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)鏈球菌屬

(Streptococcus)第25頁,共120頁，2024年2月25日，星期天一、鏈球菌第26頁,共120頁，2024年2月25日，星期天一、生物學特性（一）形態(tài)與染色

G+，球形或橢圓形，呈鏈狀排列，無鞭毛、無芽胞，有莢膜。第27頁,共120頁，2024年2月25日，星期天一、生物學特性（二）培養(yǎng)特性

條件：營養(yǎng)要求較高，多數為兼性厭氧菌，少數專性厭氧。

液體：沉淀生長（絮狀或顆粒狀）。

普通瓊脂平板：不生長。

血液瓊脂平板：第28頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（三）生化反應

活潑

分解多種糖類、蛋白質、氨基酸。菊糖（-）膽汁溶菌試驗（-）

optochin敏感試驗（-）

觸酶（-）（區(qū)別于葡萄球菌屬）（區(qū)別甲鏈與肺鏈）第29頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（四）抗原構造

１、多糖抗原（C抗原）：群特異性。２、蛋白抗原（M、T、R、S）型特異性，與致病有關的是M蛋白抗原。

3、核蛋白抗原：無特異性。

第30頁,共120頁，2024年2月25日，星期天多糖抗原蛋白質抗原核蛋白抗原鏈球菌抗原構造模式圖莢膜第31頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（五）分類40個種及亞種

１、按溶血情況分類：（1）甲型溶血性鏈球菌：菌落周圍有1～2mm寬的草綠溶血環(huán)，稱甲型溶血或α溶血。為條件致病菌。

（2）乙型溶血性鏈球菌：菌落周圍形成一個2～4mm寬的透明溶血環(huán)，稱乙型溶血或β溶血。又稱溶血性鏈球菌。致病力強，引起多種疾病。（3）丙型鏈球菌：無溶血環(huán)，不致病第32頁,共120頁，2024年2月25日，星期天２、按抗原結構分類：

按C抗原分群：ABCD…20群，對人致病的以A群為主。按M蛋白分型：如A群：100個型，B群：4型，C群：13個型。（五）分類第33頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（六）抵抗力不強，60℃30min殺死，對多種消毒劑敏感。乙鏈：對青霉素、四環(huán)素、紅霉素等敏感。第34頁,共120頁，2024年2月25日，星期天二、致病性和免疫性（一）致病物質

1、鏈球菌溶血素（1）鏈球菌溶血素O(SLO)SLO抗體

抗鏈球菌溶血素O試驗：協助診斷風濕熱（>1:400)

（2）鏈球菌溶血素S(SLS)：無抗原性。2、致熱外毒素（猩紅熱毒素/紅疹毒素）3、M蛋白第35頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

4、透明質酸酶

5、鏈激酶

6、鏈道酶第36頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（二）所致疾病主要由A群鏈球菌引起。

1、化膿性感染：由皮膚傷口侵入，經呼吸道侵入，其他途徑（如產褥熱、蜂窩組織炎）特點：病灶界限不清,膿汁稀薄2．中毒性疾?。盒杉t熱由產生致熱外毒素的A族鏈球菌所致的急性呼吸道傳染病。第37頁,共120頁，2024年2月25日，星期天3．變態(tài)反應性疾?。猴L濕熱急性腎小球腎炎二、致病性和免疫性4．其他疾病：甲型（草綠色）鏈球菌：引起亞急性細菌性心內膜炎。第38頁,共120頁，2024年2月25日，星期天三、微生物學檢驗（一）標本采集（二）檢驗程序（三）檢驗方法第39頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（一）標本采集根據病情采集標本

種類：膿液、鼻咽拭子、血液等風濕熱查血清抗體第40頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（二）鏈球菌的檢驗程序痰、膿、穿刺液咽拭子等腦脊液血液直接涂片染色測抗原分離培養(yǎng)增菌培養(yǎng)(5%CO2葡萄糖肉湯)血平板（5%CO2）可疑菌落鑒定試驗初步報告血清學鑒定（分群）桿菌肽試驗

optochin膽汁溶菌試驗其他鑒定敏感試驗試驗第41頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（三）鏈球菌的檢驗方法（1）直接鏡檢：（痰、膿、穿刺液、咽拭子等）初報：發(fā)現G+球菌，呈鏈狀排列第42頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

（2）分離培養(yǎng)：①血液、腦脊液肉湯增菌

②膿液、咽拭子等血平板分離第43頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（3）鑒定鏈球菌的主要試驗：根據形態(tài)、菌落、溶血情況進行：①桿菌肽敏感試驗：A群敏感(d>10mm)②Optochin敏感試驗：肺炎鏈球菌d>18mm，

d<15mm為陰性。③膽汁溶菌試驗：肺炎鏈球菌+

④CAMP試驗：Ｂ群無乳鏈球菌為＋

第44頁,共120頁，2024年2月25日，星期天⑤血清學鑒定：試劑盒STREPTEX。用亞硝酸抽提待測菌的群特異性抗原，分別與包被有抗體的膠乳顆粒反應。⑥抗O試驗：風濕性關節(jié)炎、急性腎小球腎炎，效價>400為+第45頁,共120頁，2024年2月25日，星期天二、肺炎鏈球菌

(S.pneumoniae)

屬鏈球菌科，鏈球菌屬。廣泛分布于自然界，主要寄生于人類上呼吸道，多數不致病。第46頁,共120頁，2024年2月25日，星期天一、生物學特性（一）形態(tài)與染色

G+，矛頭狀，成雙（或短鏈）排列，無鞭毛、無芽胞，有莢膜。第47頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（二）培養(yǎng)特性

條件：營養(yǎng)要求較高，兼性厭氧菌，5-10%C02生長最好。產生自溶酶。

液體：培養(yǎng)24h呈均勻混濁，后期因產生自溶而變得澄清。

普通瓊脂平板：不生長。

血液瓊脂平板：灰白色，圓形，扁平，較小，周圍有草綠色溶血環(huán)（α溶血）

第48頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（三）生化反應

活潑

分解多種糖類。菊糖（多數+）膽汁溶菌試驗（+）

Optochin試驗(+)區(qū)別甲鏈與肺鏈第49頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（四）抗原構造

１、莢膜多糖抗原：據此將肺炎鏈球菌分85型，對人致病的有20多型。Ⅰ-Ⅲ型引起大葉性肺炎。

２、菌體多糖抗原：可與CRP反應，產生沉淀。

3、M蛋白抗原：型特異性。

第50頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

（五）抵抗力較弱，加熱56℃，20min即死亡。對一般消毒劑敏感，對干燥抵抗力較強。莢膜變異：有莢膜的光滑（S）型菌有毒力，失去莢膜的粗糙（R）型毒力減低或消失。（六）變異性第51頁,共120頁，2024年2月25日，星期天二、致病性和免疫性（一）致病物質

1、莢膜：肺炎球菌的致病力，主要是莢膜的抗吞噬作用。

2、蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎鏈球菌溶素O等

溶血毒素“O”：自溶后釋放，能溶解人和動物的紅細胞，高濃度對動物有壞死及致死作用。第52頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（二）所致疾病

存在于正常人上呼吸道，為條件致病菌，僅在人體抵抗力下降時才引起疾病?？梢穑捍笕~性肺炎，胸膜炎，膿胸，慢性支氣管炎，中耳炎，腦膜炎，敗血癥等。第53頁,共120頁，2024年2月25日，星期天三、微生物學檢驗（一）標本采集痰液，膿液，血液，腦脊液等。（二）檢驗程序（三）檢驗方法第54頁,共120頁，2024年2月25日，星期天檢驗程序痰、膿腦脊液血液直接涂片分離培養(yǎng)革蘭染色、美蘭染色莢膜腫脹試驗增菌培養(yǎng)（葡萄糖肉湯、硫酸鎂肉湯）（血平板）挑選可疑菌落純培養(yǎng)初報兔血清肉湯小白鼠毒力試驗涂片莢膜腫脹試驗膽汁溶菌試驗菊糖發(fā)酵Optochin試驗藥敏試驗報告第55頁,共120頁，2024年2月25日，星期天檢驗方法1、直接鏡檢適用于：痰、膿、腦脊液標本。

報告：“找到肺炎鏈球菌”2、分離培養(yǎng)

硫酸鎂肉湯：均勻混濁生長，有綠色熒光。

血平板：灰白色，圓形，扁平，較小，周圍有草綠色溶血環(huán)（α溶血）

第56頁,共120頁，2024年2月25日，星期天3、鑒定試驗（1）莢膜腫脹試驗（2）膽汁溶菌試驗：+（3）Optochin試驗：+（4）菊糖發(fā)酵試驗：+（5）小鼠毒力試驗：有毒力的菌株，接種后12-36h，死亡。

第57頁,共120頁，2024年2月25日，星期天膽汁溶菌試驗陽性：

加入膽汁或10%去氧膽酸鈉，37℃，5-10min，激活本菌的自溶酶，出現溶菌現象。第58頁,共120頁，2024年2月25日，星期天Optochin敏感試驗陽性：取肉湯培養(yǎng)液均勻涂于血平板上用optochin紙片貼于接種區(qū)中央（或分區(qū)劃線法，紙片貼于1-2區(qū)），35℃需氧培養(yǎng)過夜，抑菌圈>18mm。第59頁,共120頁，2024年2月25日，星期天Optochintest

第60頁,共120頁，2024年2月25日，星期天肺炎鏈球菌的主要鑒定依據1、鏡下形態(tài)：革蘭陽性球菌，矛頭狀成雙排列，平端相對，尖端向外；

2、血平板菌落特點：直徑0.5-1.5mm，灰白色，半透明，光滑（有些菌株為粘液狀），扁平，周圍有草綠色溶血環(huán)。培養(yǎng)或放置24h以上，菌落中央可塌陷，呈臍窩狀。

3、生化鑒定：

Optochin試驗+，膽汁溶菌試驗+。第61頁,共120頁，2024年2月25日，星期天肺炎鏈球菌與甲型溶血性鏈球菌的鑒別

形態(tài)菌落血清膽汁菊糖Opto-小鼠肉湯溶菌chin毒力試驗肺鏈甲鏈矛頭狀，稍大，濕潤渾濁++++成雙，扁平，有莢膜臍窩狀圓形，較小，稍干，沉淀————無莢膜圓，凸起第62頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（四）結果評價和報告

乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌為毒力強的致病菌，無論從任何臨床標本中分離出均應報告臨床。及時鑒定和報告咽部標本中分離出的化膿性鏈球菌，有利于早期治療，以減少并發(fā)癥（如風濕熱，腎小球腎炎）的產生。

草綠色鏈球菌在重癥感染時，應鑒定到種。第63頁,共120頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)腸球菌屬

是腸道中的正常菌群導致醫(yī)院內感染：如尿路感染、腹部和盆腔感染、敗血癥、腦膜炎。第64頁,共120頁，2024年2月25日，星期天一、生物學特性（一）形態(tài)染色

G+球菌，單個、成雙或短鏈狀排列。無莢膜、芽胞，部分菌株有鞭毛。第65頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

營養(yǎng)要求較高。能在高鹽（6.5%NaCl）、高堿（PH9.6）、高膽汁（40%）、10~45℃生長。

菌落：圓形、中等大小、灰白色、不透明、S型，有γ或α溶血。（二）培養(yǎng)特性第66頁,共120頁，2024年2月25日，星期天能分解多種糖類觸酶（-）PYR（吡咯烷酮-β-萘基酰胺）試驗（+）（三）生化反應第67頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

目前分18種。引起醫(yī)院內感染常見的是糞腸球菌和屎腸球菌。常用的分型方法：rRNA基因探針分型法。（四）分型（五）抵抗力

對理化因素抵抗力弱。但對大多數抗生素天然耐藥。第68頁,共120頁，2024年2月25日，星期天二、微生物學檢驗

（一）標本采集

尿液、血液、腦脊液、膿汁分泌物等。第69頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（二）檢驗程序尿液、膿汁、穿刺液血液涂片染色分離培養(yǎng)（血平板、5%CO2）初報挑選可疑菌落增菌培養(yǎng)（葡萄糖肉湯、5%CO2）PYR試驗膽汁七葉苷試驗6.5%NaCl生長試驗血清學試驗其他鑒定試驗報告第70頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（三）檢驗方法1、直接鏡檢適用于：痰、膿、腦脊液、穿刺液標本。2、分離培養(yǎng)

血平板：灰白色，圓形，中等大小，不透明，S型菌落，周圍有α溶血或γ溶血。選擇培養(yǎng)基：疊氮膽汁七葉苷瓊脂平板。第71頁,共120頁，2024年2月25日，星期天3、鑒定試驗（1）菌屬鑒定試驗：①PYR試驗：腸球菌、A群鏈球菌、某些凝固酶陰性葡萄球菌為（+）②膽汁七葉苷試驗：+③鹽耐受試驗：+（4）種間鑒定試驗：P175表17-3第72頁,共120頁，2024年2月25日，星期天第四節(jié)奈瑟菌屬

(Neisseria)

特點：為一群G-雙球菌，無鞭毛，無芽胞，有菌毛，需氧，氧化酶及觸酶+。

種類：共九種，主要致病菌是

腦膜炎奈瑟菌(merningococcus)

淋病奈瑟菌(gonorrhoeae)第73頁,共120頁，2024年2月25日，星期天一、腦膜炎奈瑟菌

(N.meningitidis)即腦膜炎球菌，是流行性腦脊髓膜炎的病原體第74頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（一）生物學性狀1．形態(tài)結構2．培養(yǎng)特性3．生化反應4.抗原結構5.抵抗力特點

第75頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

（一）形態(tài)結構G-，腎形成雙排列在患者腦脊液標本中位于中性粒細胞內無芽胞、無鞭毛，具有莢膜、菌毛。

第76頁,共120頁，2024年2月25日，星期天2．培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高，必須在含有血清或多種氨基酸、無機鹽的培養(yǎng)基上生長良好。血平板：半透明，灰褐色，圓形，濕潤光滑露滴樣菌落。易自溶。第77頁,共120頁，2024年2月25日，星期天巧克力平板：圓形，扁平，藍灰色，半透明，光滑濕潤的菌落。卵黃雙抗（EPV）平板：較大，無色，光滑濕潤，扁平，邊緣整齊的菌落。血清肉湯：呈微混濁。第78頁,共120頁，2024年2月25日，星期天3.生化反應分解葡萄糖、麥芽糖：+硝酸鹽還原試驗陰性，不分解尿素氧化酶試驗陽性第79頁,共120頁，2024年2月25日，星期天4.抗原結構可分9個血清群，對人致病的主要是A群5．抵抗力特點

對寒冷、光、熱力，干燥等十分敏感。室溫3h，60℃5min死亡。采集標本：注意保溫迅速送檢。對磺胺類、青霉素、鏈霉素均敏感。

第80頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（二）致病性與免疫性1．致病物質：菌毛、莢膜、內毒素

2．所致疾病：傳染源、傳播途徑寄生在正常人鼻咽部，存在易患人群，與患者補體介導的殺菌活性缺陷有關。約2%-3%的人表現為流腦癥狀。

3.免疫性病原可產生群特異性抗體，但不持久。第81頁,共120頁，2024年2月25日，星期天(三)微生物學檢驗1．標本采集

菌血癥期病人采集血液有出血點或瘀斑者，可取瘀斑滲出液有腦膜刺激癥狀，抽取腦脊液帶菌者：咽拭子第82頁,共120頁，2024年2月25日，星期天注意事項：立即送檢注意保溫（勿放冰箱）防干燥防紫外線第83頁,共120頁，2024年2月25日，星期天２、腦膜炎球菌的檢驗程序

血液增菌培養(yǎng)（葡糖肉湯）分離培養(yǎng)（巧克力、血平板）鑒定試驗涂染檢氧化酶葡、麥糖多價血清藥敏試驗

結果報告

鼻咽拭子

卵黃雙抗平板5~10%co237℃18~24h37℃18~24h37℃18~24h腦脊液瘀血點離心上沉清淀液物5~10%ＣＯ2涂片染色初步報告直接凝集第84頁,共120頁，2024年2月25日，星期天腦膜炎球菌的鑒定依據菌落特征符合形態(tài)染色符合分解葡、麥糖產酸氧化酶、觸酶陽性血清凝集試驗陽性第85頁,共120頁，2024年2月25日，星期天二、淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）

即淋球菌為淋病的病原體，人是唯一天然宿主和傳染源第86頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（一）生物學性狀1．形態(tài)結構2．培養(yǎng)特性3.生化反應4．抵抗力特點

第87頁,共120頁，2024年2月25日，星期天1．形態(tài)結構G-，球形或腎形，成對排列有莢膜，無芽胞和鞭毛第88頁,共120頁，2024年2月25日，星期天2．培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高，30-37℃生長，須在含有血液或血清的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，常用血液、巧克力等培養(yǎng)基初次分離，須5-10%CO2才能生長發(fā)育菌落：凸起，光滑、圓形，灰褐色，半透明第89頁,共120頁，2024年2月25日，星期天3.生化反應

氧化酶試驗：（+）觸酶：（+）葡萄糖（+），麥芽糖（-）易自溶第90頁,共120頁，2024年2月25日，星期天4．抵抗力特點

抵抗力弱，在干燥環(huán)境中僅能存活1-2h，濕熱55℃5min,100℃立即死亡。室溫下存活1-2d。對消毒劑極敏感

第91頁,共120頁，2024年2月25日，星期天１、致病物質：菌毛、外膜蛋白、等２、所致疾?。呵址溉祟惷谀蛏诚到y(tǒng)引起淋病(首位性病)

新生兒眼炎（二）致病性與免疫性

第92頁,共120頁，2024年2月25日，星期天1．標本采集標本：男性：尿道分泌物女性：陰道分泌物全身性淋病：血液、泌尿、生殖道的各種分泌物、尿液立即送檢

２．檢驗程序(三)微生物學檢驗第93頁,共120頁，2024年2月25日，星期天膿汁、分泌物直接涂片染色

分離培養(yǎng)血、巧克力、TM平板5－10%co235℃18－24h鑒定試驗涂染檢氧化酶糖發(fā)酵藥敏試驗報告

初步報告35℃18－24h第94頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（１）直接涂片鏡檢急性淋病：嗜中性粒細胞內大量G-，腎形雙球菌——具有診斷意義慢性淋?。虹R檢較困難３．檢驗方法第95頁,共120頁，2024年2月25日，星期天（２）分離培養(yǎng)

即采集即培養(yǎng)，常用含有兩種以上抗生素（萬古霉素、粘菌素、磺胺類等）的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)（如ML、TM）5-10%CO2培養(yǎng)基先預溫。第96頁,共120頁，2024年2月25日，星期天氧化酶試驗：（+）觸酶：（+）（多數奈瑟菌為陰性）

葡萄糖（+），麥芽糖（-）

PCR：靈敏，特異，標本不受限制(不需活菌)

（３）鑒定第97頁,共120頁，2024年2月25日，星期天

1.名詞解釋：血漿凝固酶、SPA、抗鏈“o”試驗、Optochin試驗。

2.根據色素和生化反應將葡萄球菌分成哪幾種？

3.金黃色葡萄球菌的鑒定依據有哪些？

4.根據鏈球菌在血平板上的溶血現象，將其分成哪些類型？甲鏈和乙鏈有何區(qū)別？

5.簡述鏈球菌的檢驗程序和檢驗方法。

6.腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌有哪些異同點？

7.采集腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的標本進行細菌檢驗應該注意哪些問題？為什么？

復習思考題第98頁,共120頁，2024年2月25日，星期天中等大，突起，有色素，S型菌落。葡萄球菌菌落形態(tài)（普通瓊脂平板）第99頁,共120頁，2024年2月25日，星期天金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌第100頁,共120頁，2024年2月25日，星期天金黃色葡萄球菌有透明溶血環(huán)。表皮葡萄球菌無溶血環(huán)。第101頁,共120頁，2024年2月25日，星期天葡萄球菌A蛋白（SPA）的意義：（1）降低抗體的調理作用，抗吞噬（2）協同凝集試驗:輔助診斷疾病。第102頁,共120頁，2024年2月25日，星期天血漿凝固酶試驗［原理］致病性葡萄球菌能產生２種血漿凝固酶：

一種為結合型凝固酶（凝聚因子）：細菌表面的纖維蛋白原受體與血漿中的纖維蛋白原結合，導致細菌凝集。另一種為游離型凝固酶，可被人或兔血漿中的協同因子激活，成為凝血酶樣物質，使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白，從而使血漿凝固。

［檢測方法］結合型凝固酶：玻片法游離型凝固酶：試管法第103頁,共120頁，2024年2月25日，星期天耐熱核酸酶試驗液體培養(yǎng)物煮沸15min

37℃3h甲苯胺藍核酸瓊脂第104頁,共120頁，2024年2月25日，星期天腸毒素測定病人嘔吐物、糞便、剩余食物高鹽肉湯37℃24h分離培養(yǎng)肉湯煮沸30min，離心，取上清夜幼貓觀察癥狀（4h出現）第105頁,共120頁，2024年2月25日，星期天SPA的檢測致病性葡萄球菌（SPA)兔抗羊紅