獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)第二十章 實(shí)驗室生物安全與管理

第二十章實(shí)驗室生物安全與管理2021/11/231

從20世紀(jì)40年代起，微生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗室的感染問題已經(jīng)引起了多國政府的重視，70年代興起并迅速發(fā)展的以重組DNA技術(shù)為代表的現(xiàn)

代生物技術(shù)，引發(fā)了生命倫理、生態(tài)環(huán)境等社會、經(jīng)濟(jì)安全問題。

2003~2004年，新加坡、臺灣和北京發(fā)生的實(shí)驗室SARS冠狀病毒泄露而造成的實(shí)驗室人員感染事件，使實(shí)驗室生物安全問題變成了現(xiàn)實(shí)危害，引起了全世界的高度關(guān)注，也促使我國對實(shí)驗室生物安全管理立法，《病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例》（2004年頒布，2016年、2018年分別進(jìn)行了修訂）。2021/11/232一、實(shí)驗室生物安全二、生物安全實(shí)驗室建立與防護(hù)2021/11/234實(shí)驗室生物安全2021/11/235一、生物安全的概念與范圍（一）生物安全的概念

生物安全：指對病原微生物、轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品、外來有害微生物等

生物體對人類、動植物、微生物和生態(tài)環(huán)境可能產(chǎn)生的潛在風(fēng)險或現(xiàn)實(shí)危害的防范和控制。

廣義的生物安全（Biosecurity）:

指為了防止給國家、社會造成重大損失，針對偷竊生物因子和惡意使用生物因子而采取的綜合措施。

狹義的生物安全（biosafety）:指避免危險生物因子造成實(shí)驗室人員暴露、向?qū)嶒炇彝鈹U(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施。

主要指實(shí)驗室生物安全，包括病原微生物的實(shí)驗室生物安全和重組DNA分子的實(shí)驗室生物安全兩個方面。（二）生物安全的范圍（1）防范生物恐怖。（2）防止外來生物入侵。（3）保障轉(zhuǎn)基因生物體安全。（4）病原微生物的控制，高等級生物安全實(shí)驗室的建立及管理。（5）生物治療、干細(xì)胞、克隆技術(shù)等引發(fā)的生命倫理問題。2021/11/238二、實(shí)驗室生物安全的概念和術(shù)語（一）實(shí)驗室生物安全的概念

實(shí)驗室生物安全：指用以防止發(fā)生病原體或毒素?zé)o意中暴露及意外釋放的防護(hù)原則、技術(shù)以及實(shí)踐。2021/11/239（二）實(shí)驗室生物安全的有關(guān)術(shù)語（1）生物因子（bio-agents）：指一切微生物和生物活性物質(zhì)。（2）生物威脅（bio-threat）：指生物因子形成的使人憂慮的、可能發(fā)生的嚴(yán)重危害。（3）生物危險（bio-risk）：由生物因子形成的潛在的危害，是傷害發(fā)生的概率及其嚴(yán)重性的綜合。2021/11/2310（4）生物危害（bio-hazard）：由生物因子形成的傷害。狹義的生物危害是指病原微生物和具有潛在危險的重組DNA分子直接或間接地給人、動物或/和植物帶來的不良影響和損傷。

對人類及動物有危害的生物或生物性物質(zhì)

：包括但不限于動物

、植物

、微生物

、病毒及含有病原體的組織切片、體液

、固體廢棄物和

呼出氣等。（5）危險廢棄物（hazardouswaste）：

有潛在危險的廢物，即可燃、易燃、腐蝕、有毒、傳染、放射或有其他破壞作用的廢物。2021/11/2311（6）氣溶膠（aerosol）：懸浮于氣體介質(zhì)中粒徑一般為0.001～100

μm的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系。

氣體介質(zhì)稱連續(xù)相，通常是空氣；微粒或粒子（particles）稱分散相，成分很復(fù)雜。（7）生物氣溶膠（bio-aerosol）：在分散體系中微粒或粒子稱分散相，分散相內(nèi)含有微生物的氣溶膠稱為生物氣溶膠。2021/11/2312（8）高效空氣過濾器（highefficiencyparticulateairfilter，HEPA）：指通常以0.3μm微粒為測試物，在規(guī)定的條件下濾除效率高于99.97%的空氣過濾器。（9）生物安全防護(hù)（bir-safety

containment）：指避免生物危險因子，特別是偶然的和有意利用的生物因子，對生物體包括實(shí)驗室工作者在內(nèi)的人員的傷害和對環(huán)境的污染的意識和措施。

實(shí)驗室生物安全防護(hù)分為一級防護(hù)（屏障）（primary

barriers）和二級防護(hù)（屏障）（secondary

barriers）。2021/11/2313（10）一級防護(hù)（屏障）（prinary barriers）

：指實(shí)驗室的生物安全柜和

個人防護(hù)裝備等構(gòu)成的防護(hù)屏障。用以減少或消除危害性生物因子的暴露。（11）二級防護(hù)（屏障）（secondary barriers

）：指實(shí)驗室的設(shè)施結(jié)構(gòu)和通風(fēng)系統(tǒng)等構(gòu)成的防護(hù)屏障。除了能保護(hù)實(shí)驗室人員，還能保護(hù)周圍人或動物免受生物因子意外擴(kuò)散所造成的感染。2021/11/2314（12）生物安全柜（bio-safetycabinet，BSC）：負(fù)壓過濾排風(fēng)柜。防止操作者和環(huán)境暴露于實(shí)驗過程中產(chǎn)生的生物氣溶膠。生物安全柜是生物安全實(shí)驗室必備的裝備。2021/11/2315（13）安全罩（safetyhood）：置于實(shí)驗室工作臺或儀器設(shè)備上的負(fù)壓排風(fēng)罩，以減少實(shí)驗室工作者的暴露危險。2021/11/2316（14）實(shí)驗室分區(qū)（laboratoryarea）：

根據(jù)生物因子污染概率的大小，實(shí)驗室可進(jìn)行合理的分區(qū)。①

清潔區(qū)：指在正常情況下不可能有實(shí)驗因子污染的區(qū)域。人員通道、前室、控制室、機(jī)房、洗滌室等，此區(qū)可不做特殊個人防護(hù)。②半污染區(qū)：指在正常情況下只有輕微污染可能的區(qū)域。如第一緩沖間和準(zhǔn)備間屬于此區(qū)。此區(qū)的功能是大量的準(zhǔn)備工作，例如培養(yǎng)基、細(xì)胞、制劑的配制、低溫冰箱的放置等。③

污染區(qū)：指操作實(shí)驗因子的地方（BSL-3中心實(shí)驗室），在操作過程中一定會有污染的區(qū)域，一般情況下空氣有輕微污染，操作必須小心謹(jǐn)慎。在此區(qū)工作的人必須做好全部個人防護(hù)。2021/11/2317（15）氣鎖（airlock）：氣壓可調(diào)節(jié)的氣密室，用于聯(lián)結(jié)氣壓不同的兩個相鄰區(qū)域，其兩個門具有互鎖功能，不能同時處于開啟狀態(tài)。在實(shí)驗室中用作二區(qū)的過渡通道。（16）緩沖間（bufferroom）：

設(shè)在生物安全實(shí)驗室的清潔區(qū)與半污染區(qū)之間，或半污染區(qū)與污染區(qū)之間的類似于氣鎖的密閉小室，小室的兩門互鎖，且不能同時處于開啟狀態(tài)。2021/11/231821/11/23 1920（17）定向氣流（directionalairflow）：在氣壓低于外環(huán)境大氣壓的實(shí)驗室中，從污染概率小且相對壓力高處向污染概率高且相對壓力低處流動的氣流。（18）個人防護(hù)裝備（personalprotectiveequipment，PPE）：用于防止人員受到化學(xué)和生物等有害因子傷害的器材和裝備。如防護(hù)服，面罩，護(hù)目鏡等。2021/11/2320（19）硬件和軟件

硬件：指實(shí)驗室的設(shè)備和個人防護(hù)裝備和設(shè)施。

軟件：實(shí)驗室的生物安全管理體系，如組織機(jī)構(gòu)、管理制度、操作規(guī)程、人員素質(zhì)等。2021/11/2321（20）生物安全實(shí)驗室（biosafety

laboratory）

指通過規(guī)范的實(shí)驗室設(shè)計建造、實(shí)驗設(shè)備的配置、個人防護(hù)裝備的使用，嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化的工作操作程序和管理規(guī)程等，確保操作生物危險因子的工作人員不受實(shí)驗對象的傷害，確保周圍環(huán)境不受其污染，確保實(shí)驗因子保持原有本性的實(shí)驗室。

包括：生物實(shí)驗室和動物實(shí)驗室。2021/11/2322三、實(shí)驗室感染的類型和來源（一）實(shí)驗室感染的類型

第一種是氣溶膠導(dǎo)致的實(shí)驗室感染，

第二種是事故性感染，

第三種是人為破壞。232021/11/23（二）實(shí)驗室感染的來源（1）標(biāo)本來源：包括檢測標(biāo)本和菌毒種；檢測標(biāo)本又包括實(shí)驗室研究標(biāo)本和臨床檢驗標(biāo)本。（2）儀器設(shè)備使用過程產(chǎn)生的污染

：如離心機(jī)使用不當(dāng)可產(chǎn)生氣溶膠、飛濺物等。（3）操作過程產(chǎn)生的污染：如用吸管吹吸微生物懸液可產(chǎn)生微生物氣溶膠。（4）實(shí)驗動物：飼養(yǎng)的動物將接種的病原體通過呼吸、糞、尿等途徑排出體外，污染環(huán)境，實(shí)驗室人員防護(hù)或操作不當(dāng)，接觸到污染物而被感染。2021/11/2324四、病原微生物實(shí)驗室的主要生物危險2021/11/2325

病原微生物實(shí)驗室許多操作過程中可以產(chǎn)生微生物氣溶膠，并隨空氣

擴(kuò)散而污染實(shí)驗室的空氣，當(dāng)工作人員吸入了污染的空氣，便可以引起實(shí)驗室相關(guān)感染。

病原微生物實(shí)驗室的主要生物危險是吸入感染性氣溶膠而引起的空氣傳播感染。（一）病原微生物實(shí)驗室產(chǎn)生微生物氣溶膠的類型（1）液滴核氣溶膠（dropletnucleiaerosol）（又稱為飛沫核氣溶膠）：是由于外力作用在含有微生物的液體（如液本標(biāo)本，培養(yǎng)液等）形成的顆粒進(jìn)入空氣。

較大的顆粒很快沉積在各種物體表面形成了含有微生物的塵埃。

較小的顆粒水份很快蒸發(fā)形成液滴核（粒徑<5μm）。它們分散漂浮在空氣中，漂浮時間長，傳播面積廣，分散距離長。2021/11/2326（2）粉塵氣溶膠（dust

aerosol）

由于外力作用于干燥的培養(yǎng)物或塵埃粒子，懸浮于空氣中形成粉塵氣溶膠。

經(jīng)過現(xiàn)代技術(shù)加工微生物干粉可能導(dǎo)致生成含水量很低、粒子大小適中，分散度強(qiáng)，易被吸收的干粉氣溶膠，而造成人體感染。2021/11/2327（二）影響實(shí)驗室氣溶膠危害性的因素?包括：微生物的致病力，氣溶膠濃度，氣溶膠粒徑，工作人員防護(hù)設(shè)備和實(shí)驗室內(nèi)環(huán)境條件等。（1）氣溶膠粒徑?粒徑在50～100

μm的液滴，能很快沉降在各種物體表面上，如果沉降在傷口或黏膜表面上，感染的可能性最大；?粒徑在

10～50μm的飛沫，可在空氣中擴(kuò)散，但不易吸入呼吸道，最終也沉降在各種物體表面上；2021/11/2328?1～5

μm粒子可直接進(jìn)入肺泡；?6～10

μm易沉著于小支氣管；?10～30

μm會沉積在支氣管內(nèi)。（2）一般來講，微生物氣溶膠顆粒越多，粒徑越小，實(shí)驗室的環(huán)境越適合微生物生存，引起實(shí)驗室感染的可能性就越大。2021/11/2329（三）實(shí)驗室感染的主要原因?對276種實(shí)驗室操作進(jìn)行測試，其中有239種操作可以產(chǎn)生微生物氣溶膠，占全部實(shí)驗室操作的86.6%。?將上述各種實(shí)驗操作歸納為21大項，根據(jù)其操作中產(chǎn)生微生物氣溶膠的數(shù)量可分為重度、中等、輕度三個等級。2021/11/2330輕度（<10個顆粒）中度（11～100個顆粒）重度（>100個顆粒）玻片凝集試驗傾倒病毒液火焰上灼熱接種環(huán)顱內(nèi)接種接種雞胚或抽取培養(yǎng)液腹腔接種動物，局部不涂消毒劑試驗動物尸體解剖用乳缽研磨動物組織離心沉淀前后注入、傾到、混懸病毒液病毒液滴落在不同表面上用注射器從安瓿中抽取毒液接種環(huán)接種平皿、試管或三角燒瓶等打開培養(yǎng)容器的螺旋瓶蓋摔碎帶有培養(yǎng)物的平皿離心時離心管破裂打碎干燥菌種安瓿打開干燥菌種安瓿攪拌后立即打開攪拌器蓋小白鼠鼻內(nèi)接種注射器針尖脫落噴出病毒液刷衣服、拍打衣服2021/11/2331表1 可產(chǎn)生各種嚴(yán)重程度微生物氣溶膠的實(shí)驗室操作?一次可產(chǎn)生大量微生物氣溶膠的操作危害程度固然較大，而那些一次操作產(chǎn)生微生物氣溶膠量較少，卻需要多次重復(fù)的操作，也可以在短暫的時間內(nèi)產(chǎn)生大量的微生物氣溶膠，對工作人員的危害也較大。?微生物氣溶膠在一個實(shí)驗室內(nèi)產(chǎn)生后，還可以通過氣流轉(zhuǎn)移到同一建筑物的其他地方，甚至污染整個建筑物的空氣。?布魯菌屬、Q熱立克次體、鸚鵡熱衣原體和結(jié)核分支菌等病原體的大部分實(shí)驗室感染暴發(fā)都是由感染性氣溶膠引起。2021/11/2332生物安全實(shí)驗室建立與防護(hù)2021/11/2333一、實(shí)驗室生物安全防護(hù)的基本原理（一）實(shí)驗室生物安全防護(hù)的構(gòu)成?

構(gòu)成實(shí)驗室生物安全防護(hù)的因素包括硬件和軟件兩方面。2021/11/232021/11/2335（二）生物安全實(shí)驗室的組成?一般由主實(shí)驗室（核心工作間）、其他實(shí)驗室和輔助用房組成。（三）實(shí)驗室生物安全防護(hù)水平分級?我國與國際通行的實(shí)驗室生物安全防護(hù)水平分級標(biāo)準(zhǔn)一致，分別為BSL-1（實(shí)驗室一級生物安全防護(hù)水平）、BSL-2（實(shí)驗室二級生物安全防護(hù)水平）、BSL-3（實(shí)驗室三級生物安全防護(hù)水平）、BSL-4（實(shí)驗室四級生物安全防護(hù)水平）。?實(shí)驗室生物安全防護(hù)水平（biosafetylevel，BSL）分為四級，一級防護(hù)水平最低，四級防護(hù)水平最高。2021/11/23361.

一級生物安全防護(hù)水平（BSL-1）?實(shí)驗室操作、安全設(shè)備和設(shè)施適用于從事已熟悉其生物學(xué)特征的、通常對健康成人不致疾病的生物因子（對應(yīng)于我國的第四類危害的微生物）研究的生物安全防護(hù)水平。2021/11/2337?BSL-1適用于進(jìn)行基礎(chǔ)的教學(xué)和研究。?BSL-1不需要特殊的一級和二級屏障，主要是依靠標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作來獲得基本的防護(hù)水平（不是簡單的依賴于洗手池等清洗設(shè)施）。2021/11/23382.二級生物安全防護(hù)水平

（BSL-2）?實(shí)驗室操作、安全設(shè)備和設(shè)施適用于操作對實(shí)驗室人員和動物致病性低，對環(huán)境有輕微危害（對應(yīng)于我國的第三類危害的微生物）的病原微生物工作的生物安全防護(hù)水平。?BSL-2適用于對人血液、體液和組織等是否存在未知感染性生物因子的標(biāo)本進(jìn)行的操作。2021/11/2339?BSL-2條件下的主要危險是意外地經(jīng)皮膚或黏膜接觸或攝入感染性物質(zhì)。?對于污染的針頭或利器應(yīng)采取及其嚴(yán)格的防范措施，采用良好的微生物學(xué)技術(shù)，便可在開放實(shí)驗臺上進(jìn)行BSL-2

的操作。?但是當(dāng)可能生成氣溶膠時，需增加BSC、高壓滅菌器、安全離心機(jī)罩帽、防濺罩或面罩等進(jìn)行防護(hù)。2021/11/23403.三級生物安全防護(hù)水平

（BSL-3）?實(shí)驗室操作、安全設(shè)備和設(shè)施適用于操作具有潛在的呼吸道傳染性、可引起嚴(yán)重或致死性疾病的病原微生物（對應(yīng)于我國的第二類危害的微生物）工作的生物安全防護(hù)水平。?BSL-3條件下的主要危險是自身接種（自傷或經(jīng)破損皮膚））、經(jīng)口攝入和暴露于感染性氣溶膠。?BSL-3實(shí)驗室有嚴(yán)格的一級防護(hù)屏障和二級防護(hù)屏障的要求，以防止實(shí)驗室操作人員、相鄰區(qū)域的工作人員、社區(qū)和環(huán)境暴露于可能的感染性氣溶膠。如應(yīng)用BSC，特殊通風(fēng)系統(tǒng)等。2021/11/234111/232021/424.四級生物安全防護(hù)水平

（BSL-4）?實(shí)驗室操作、安全設(shè)備和設(shè)施適用于操作對個體具有高度危害性、并可通過空氣途徑進(jìn)行傳播或傳播途徑不明的、無有效預(yù)防和治療措施的病原微生物（對應(yīng)于我國的第一類危害的微生物）工作的生物安全防護(hù)水平。2021/11/2343?BSL-4條件下的主要危險是呼吸道暴露于感染性氣溶膠、黏膜暴露于感染性飛沫和自身接種。?BSL-4實(shí)驗室一般是獨(dú)立建筑物或處于完全隔離的區(qū)域，并有復(fù)雜的特殊通風(fēng)系統(tǒng)和廢棄物處理系統(tǒng)。?通過Ⅲ級生物安全柜或Ⅱ級生物安全柜加正壓防護(hù)服把實(shí)驗室操作人員與傳染性氣溶膠完全隔離開。2021/11/23442021/11/2345二、實(shí)驗室生物安全標(biāo)志2021/11/2346?在BSL-2～BSL-4實(shí)驗室的門上，應(yīng)標(biāo)有國際通用的生物危險警告標(biāo)志，在生物危險符號的下方應(yīng)同時標(biāo)明實(shí)驗室名稱、操作的病原體名稱、生物危害等級、預(yù)防措施負(fù)責(zé)人姓名、緊急聯(lián)絡(luò)方式等有關(guān)信息。?國際通用的生物危險警告標(biāo)志的顏色為黑色，背景為黃色，見圖1。實(shí)驗室名稱預(yù)防措施負(fù)責(zé)人病原體名稱緊急聯(lián)絡(luò)方式生物危害等級圖1 國際通用的生物危害警告標(biāo)志授權(quán)人員方可進(jìn)入2021/11/2347三、生物安全實(shí)驗室的個人防護(hù)2021/11/2348（一）個體防護(hù)裝備的概念?個體防護(hù)裝備（personalprotection

equipment，PPE）是指為了保護(hù)實(shí)驗室工作人員免受化學(xué)、生物與物理等有害因子傷害的器材和用品。?所采用個體防護(hù)裝備，主要是用于保護(hù)實(shí)驗人員免于暴露在生物危害物質(zhì)，如氣溶膠、噴濺物以及意外接種、感染動物的手術(shù)及解剖等危險的一種物理屏障。2021/11/2349502021/11/23二、防護(hù)的部位?個人防護(hù)裝備所要防護(hù)的部位主要包是眼睛、頭面部、軀體、手、足、耳（聽力）以及呼吸道。三、個人防護(hù)裝備?裝備防護(hù)包括眼鏡（安全眼鏡、護(hù)目鏡）、口罩、面罩、防毒面具、帽子、防護(hù)衣（實(shí)驗服、隔離衣、連體衣、圍裙）、手套、鞋套以及聽力保護(hù)器等。2021/11/2351四、不同生物安全等級實(shí)驗室的個人防護(hù)要求（一）BSL-1實(shí)驗室（1）進(jìn)入實(shí)驗室時應(yīng)穿工作服，工作服不能穿到實(shí)驗區(qū)外；（2）實(shí)驗操作中應(yīng)戴上手套，必要時應(yīng)配戴防護(hù)眼鏡。2021/11/2352（二）BSL-2實(shí)驗室?

在BSL-1上增加：（1）工作服外加穿罩衫或穿防護(hù)服，

戴帽子、口罩

；（2）在BSC外操作微生物時，必須使用面部保護(hù)裝置（如護(hù)目鏡、面罩等）。2021/11/2353（三）BSL-3實(shí)驗室?在BSL-2上增加：（1）進(jìn)入實(shí)驗室時必須使用個體防護(hù)裝備，包括兩層防護(hù)服（如后開口服、全身覆蓋服、兩件套服、連衣褲）、兩層手套、生物安全專業(yè)防護(hù)口罩（不能使用醫(yī)用外科口罩等）；（2）在有傳染性動物的動物室內(nèi)應(yīng)戴模壓面罩或防毒面具；（3）動物實(shí)驗時需加戴防撕咬手套；（4）穿專用靴子等防護(hù)性鞋罩。2021/11/23542021/11/2355（四）BSL-4實(shí)驗室?在BSL-3上增加：（1）工作人員必須接受最高水平的生物安全知識培訓(xùn)；（2）工作人員必須進(jìn)行醫(yī)學(xué)監(jiān)測；（3）進(jìn)入實(shí)驗室時要更換全套服裝，包括內(nèi)衣褲的全部日常服裝，并換上專用防護(hù)服；（4）室內(nèi)有傳染性靈長類動物時，必須使用面部保護(hù)裝置；（5）進(jìn)行容易產(chǎn)生高危險氣溶膠的操作時，都要同時使用BSC或其他物理防護(hù)設(shè)備和個人防護(hù)器具（例如口罩和面罩）。2021/11/23562021/11/23572021/11/2358五、實(shí)驗室生物安全操作技術(shù)規(guī)范2021/11/2359（一）實(shí)驗室中樣品的操作規(guī)范1.

樣品容器（1）樣品容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品；（2）樣品容器應(yīng)當(dāng)堅固，正確地用蓋子或塞子蓋好后應(yīng)無泄漏；（3）在容器外部不能有殘留物；（4）容器上應(yīng)當(dāng)正確地粘貼標(biāo)簽以便于識別；（5）樣品的要求或說明書不能夠卷在容器外面，而是要分開放置，最好放置在防水的袋子里。（二）樣品接收?

需要接收大量樣品的實(shí)驗室應(yīng)當(dāng)安排專門的房間或空間。（三）

樣品包裝的打開?

接收和打開樣品的人員應(yīng)當(dāng)了解樣品對身體健康的潛在危害，并接受過如何采用標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法的培訓(xùn)，尤其是處理破碎或泄漏的容器時更應(yīng)如此。?樣品的內(nèi)層容器要在BSC內(nèi)打開，并準(zhǔn)備好消毒劑。2021/11/2360六、實(shí)驗室防護(hù)設(shè)備和儀器的使用規(guī)范2021/11/2361（一）生物安全柜的使用規(guī)范（1）向使用者介紹BSC的使用方法和局限性，給工作人員發(fā)放書面的規(guī)章、安全手冊或操作手冊；BSC運(yùn)行正常時才能使用；（2）BSC在使用中不能打開玻璃觀察擋板；（3）BSC內(nèi)應(yīng)盡量少放置器材或標(biāo)本，不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)；（4）BSC內(nèi)不能使用本生燈或酒精燈，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器，但最好使用一次性無菌接種環(huán)；（5）所有工作必須在工作臺面的中后部進(jìn)行，能夠通過玻璃觀察擋板看到；（6）盡量減少操作者身后的人員活動；（7）操作者不應(yīng)反復(fù)移出和伸進(jìn)手臂以免干擾氣流；2021/11/2362（8）不要使實(shí)驗記錄本﹑移液管以及其他物品阻擋空氣格柵，這將干擾氣體流動，引起物品的潛在污染和操作者的暴露；（9）工作完成后以及每天下班前，應(yīng)使用適當(dāng)?shù)南緞SC的表面進(jìn)行擦拭；（10）在BSC內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，BSC的風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行5

min；（11）在BSC內(nèi)操作時，不能進(jìn)行文字工作。2021/11/23632021/11/2364（二）離心機(jī)的使用規(guī)范2021/11/2365（1）使用實(shí)驗室離心機(jī)時，儀器良好的機(jī)械性能是保障微生物安全的前提條件；（2）應(yīng)按照操作手冊來操作離心機(jī)；（3）離心機(jī)放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個子工作人員也能夠看到離心機(jī)內(nèi)部，以正確放置十字軸和離心桶；（4）離心管和盛放離心標(biāo)本的容器應(yīng)當(dāng)由厚壁玻璃制成，或最好為塑料制

品，并且在使用前應(yīng)檢查是否破損；（5）用于離心的試管和樣品容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊（最好使用螺旋蓋）；（6）離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在BSC內(nèi)進(jìn)行；（7）操作指南中應(yīng)給出液面距離心管管口需要留出的空間大?。唬?）對于危險度Ⅲ級和Ⅳ級的微生物，必須使用可封口的離心桶（安全杯）；（9）當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時，必須小心不能將離心管裝得過滿，否則會導(dǎo)致漏液；2021/11/2366（10）應(yīng)當(dāng)每天檢查離心機(jī)內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯，應(yīng)重新評估離心操作規(guī)范；（11）應(yīng)當(dāng)每天檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細(xì)微裂痕；（12）每次使用后，要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機(jī)腔的污染；（13）當(dāng)使用離心機(jī)時，可能噴射出可在空氣中傳播的感染性顆粒。2021/11/2367?如果將離心機(jī)放置在傳統(tǒng)的前開式的Ⅰ級或Ⅱ級BSC內(nèi)，這些粒子由于運(yùn)動過快而不能被BSC內(nèi)的氣流截留。?良好的離心操作技術(shù)和牢固加蓋的離心管可以提供足夠的保護(hù)，以防止感染性氣溶膠和可擴(kuò)散粒子的產(chǎn)生。2021/11/2368（三）移液管和移液輔助器的使用規(guī)范（1