飼料中碘的測定

1飼料中碘的測定本文件描述了飼料中碘測定的電感耦合等離子體質(zhì)譜法和硫氰酸鐵-亞硝酸催化動力學(xué)法。本文件適用于配合飼料、濃縮飼料、精料補充料、添加劑預(yù)混合飼料和飼料原料中碘的測定。本文件電感耦合等離子體質(zhì)譜法的檢出限為0.05mg/kg、定量限為0.10mg/kg，硫氰酸鐵-亞硝酸催化動力學(xué)法的檢出限為0.10mg/kg、定量限為0.20mg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T20195動物飼料試樣的制備3定義和術(shù)語本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4電感耦合等離子體質(zhì)譜法（仲裁法）4.1原理試樣中的碘用四甲基氫氧化銨溶液提取，電感耦合等離子體質(zhì)譜儀測定，以碘元素特定質(zhì)量數(shù)127（質(zhì)荷比，m/z）定性，以碘元素和內(nèi)標元素質(zhì)譜信號的強度比值與碘元素的濃度成正比進行定量，測定試樣中碘的含量。4.2試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用優(yōu)級純試劑。4.2.1水：GB/T6682，一級。4.2.225%四甲基氫氧化銨（TMAH）溶液。4.2.3提取溶液：量取200mL25%TMAH溶液（4.2.2），用水稀釋、定容至500mL，混勻。4.2.4稀釋溶液：量取5mL25%TMAH溶液（4.2.2），用水稀釋、定容至500mL，混勻。4.2.5碘標準儲備溶液（1000mg/L）：稱取0.1685g經(jīng)180℃±2℃干燥至恒重的碘酸鉀2（KIO3，CAS：7758-05-6，基準試劑），或稱取0.1308g經(jīng)120℃干燥2h、于干燥器中冷卻的碘化鉀（KI，CAS：7681-11-0，基準試劑），用水溶解，移入100mL棕色容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。貯存于棕色瓶中，2℃~8℃保存，有效期3個月?；蛸徶玫庥凶C標準物質(zhì)。4.2.6碘標準中間溶液（10mg/L）：準確移取1mL碘標準儲備溶液（4.2.5），用稀釋溶液（5.2.4）稀釋、定容至100mL，混勻。臨用現(xiàn)配。4.2.7碘標準工作溶液（100μg/L）：準確移取1mL碘標準中間溶液（4.2.6），用稀釋溶液（5.2.4）稀釋、定容至100mL，混勻。臨用現(xiàn)配。4.2.8內(nèi)標元素標準儲備溶液（1000mg/L）：碲（Te）內(nèi)標標準儲備溶液。4.2.9內(nèi)標元素工作溶液：先用水將內(nèi)標元素標準儲備溶液（4.2.8）稀釋10倍或100倍，再從中取適量溶液用稀釋溶液（4.2.4）配制成適當濃度的內(nèi)標元素工作溶液。內(nèi)標元素工作溶液可由儀器在線加入，也可采用手動定量加入碘標準系列工作溶液及試樣溶液中，內(nèi)標元素工作溶液與碘標準工作溶液、樣品溶液混合后，內(nèi)標元素的參考濃度約為10μg/L～100μg/L。臨用現(xiàn)配。4.2.10碘標準系列溶液：分別準確移取適量體積碘標準工作溶液（4.2.7用稀釋溶液（4.2.4）配制成濃度分別為0ng/mL、1.00ng/mL、2.00ng/mL、5.00ng/mL、10.00ng/mL、20.00ng/mL、50.00ng/mL、100.00ng/mL碘標準系列溶液。臨用現(xiàn)配。4.2.11濾膜：0.45μm，水系。4.3儀器設(shè)備4.3.1電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（ICP-MS）。4.3.2分析天平：精度為0.0001g。4.3.3恒溫干燥箱或恒溫水浴鍋：控溫精度±3℃。4.3.4離心機：轉(zhuǎn)速不低于3000r/min。4.3.5超聲波清洗器。4.4樣品按照GB/T20195規(guī)定制備試樣，至少200g，粉碎使其全部過0.25mm分析篩，混合均勻，裝入密閉容器中，避光保存，備用。4.5試驗步驟4.5.1試樣溶液制備平行做兩份試驗。稱取試樣0.2~0.5g，精確至0.0001g，置于50mL比色管中，加入4.0mL水，潤濕試樣，加入3.0mL提取溶液（4.2.3），渦旋混合1min，置于90℃±3℃恒溫干燥箱或恒溫水浴鍋中提取5h，取出，冷卻至室溫，用稀釋溶液（4.2.4）稀釋、定容至50mL，混勻，全部轉(zhuǎn)移至50mL離心管中，3000r/min離心10min，取上清液，過0.45μm濾膜，濾液為試樣溶液，24h內(nèi)上機測試。同時做空白試驗。4.5.2儀器參考條件3a）射頻功率：1550W；b）等離子氣流速：15L/min；c）載氣流速：0.80L/min~0.90L/min；d）輔助氣流速：0.30L/min~0.40L/min；e）分析時泵速：0.10r/s；f）采樣深度：8mm~10mm；g）He氣流速：4mL/min-5mL/min；液清洗進樣系統(tǒng)1h~2h，直至127I的信號穩(wěn)定；2.每測一個樣品，進樣系統(tǒng)沖洗時間大于64.5.3測定將儀器調(diào)節(jié)至最佳工作狀態(tài)，在調(diào)諧儀器達到測定要求后，選擇碘元素同位素（127I）及內(nèi)標碲同位素（125Te、130Te依次將碘標準系列溶液、試劑空白溶液和試樣溶液注入電感耦合等離子體質(zhì)譜儀中，測定碘元素和內(nèi)標元素的信號響應(yīng)值，以碘元素的質(zhì)量濃度為橫坐標，碘元素與內(nèi)標元素響應(yīng)值之比值為縱坐標，繪制標準曲線。標準曲線相關(guān)系系數(shù)r≥0.99。根據(jù)標準曲線得到試樣溶液中碘元素的質(zhì)量濃度。當試樣溶液的響應(yīng)值超出曲線線性范圍時，可用稀釋溶液（4.2.4）適度稀釋后測定，確保試樣測試溶液的響應(yīng)值在標準曲線線性范圍之內(nèi)。4.6試驗數(shù)據(jù)處理試樣中碘的含量以質(zhì)量分數(shù)w1表示，單位為毫克每千克（mg/kg），按式（1）計算：w1=(10V0 式中：ρ——試樣溶液中碘的濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；ρ0——空白溶液中碘的濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；V1——試樣溶液的體積，單位為毫升（mL）；m1——試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；n——稀釋倍數(shù)。測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留3位有效數(shù)字。4.7精密度在重復(fù)性條件下，當?shù)夂啃∮诨虻扔?.00mg/kg時，兩次獨立測定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對差值不超過該算術(shù)平均值的15%；當?shù)夂看笥?.00mg/kg時，兩次獨立測定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對差值不超過該算術(shù)平均值的10%。5硫氰酸鐵-亞硝酸催化動力學(xué)法5.1原理4試樣中的碘用碳酸鉀固定，經(jīng)干灰化處理釋放出的碘離子在適量亞硝酸存在的稀硝酸溶液中，能催化硫氰酸鐵褪色，在一定范圍內(nèi)，硫氰酸鐵的褪色速度與碘離子濃度呈線性關(guān)系，用分光光度計測定吸光度值，與標準系列溶液比較定量。5.2試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。5.2.1水：GB/T6682，二級。5.2.2碳酸鉀溶液（300g/L稱取150g碳酸鉀，溶于300mL水中，用水稀釋至500mL，混勻。5.2.3硫酸鋅溶液：稱取5g七水硫酸鋅，溶于500mL水中，混勻。5.2.4硫氰酸鉀溶液：稱取0.97g硫氰酸鉀，用水溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶，用水稀釋至刻度，混勻。5.2.5硫氰酸鉀-亞硝酸鈉溶液：稱取0.05g亞硝酸鈉，溶于水，加入硫氰酸鉀溶液（5.2.4）5mL，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。臨用現(xiàn)配。5.2.6硫酸鐵銨-硝酸溶液：稱取6g十二水硫酸鐵銨，加少量水溶解，慢慢加入硝酸47mL，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。臨用現(xiàn)配。5.2.7顏色固定劑：量取300mL水，緩慢加入50mL硫酸，攪拌均勻，依次加入25g氯化鈉、5g鹽酸羥胺、10g氯化亞錫，充分溶解后，用水稀釋至500mL，混勻，備用。5.2.8碘標準儲備溶液（1mg/mL）：稱取0.1308g經(jīng)120℃干燥2h、于干燥器中冷卻的碘化鉀（KI）（CAS號：7681-11-0，基準試劑），用水溶解，移入100mL棕色容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。貯存于棕色瓶中，2℃~8℃保存，有效期3個月?；蛸徺I碘（I-）有證標準物質(zhì)。5.2.9碘標準中間溶液（100μg/mL準確移取10mL碘標準儲備溶液（5.2.8）于100mL棕色容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。臨用現(xiàn)配。5.2.10碘標準工作溶液（1μg/mL）：準確移取1mL碘標準中間溶液（5.2.9）于鎳坩堝中，烘箱中烘干，待完全干燥后，加蓋放入馬弗爐中，升溫至580℃±20℃,保持3h，取出，冷卻。加10mL水，移至電爐上加熱至微沸，冷卻后用少許60℃~80℃熱水沖洗鎳坩堝3次~5次，洗液入棕色容量瓶中；重復(fù)加10mL水后過程3次，洗液并入棕色容量瓶中，冷卻至室溫，定容，搖勻。臨用現(xiàn)配。5.3儀器設(shè)備5.3.1分光光度計：波長精度為±2nm。5.3.2分析天平：精度為0.0001g。5.3.3馬弗爐：控溫精度±20℃。5.3.4烘箱：控溫精度±2℃。5.3.5鎳坩堝：30mL。5.3.6水浴鍋：控溫精度±2℃5.3.7秒表。5.3.8渦旋混合器。55.4樣品按照GB/T20195規(guī)定制備試樣，至少200g，粉碎使其全部過0.425mm分析篩，混合均勻，裝入密閉容器中，避光保存，備用。5.5試驗步驟5.5.1試樣溶液制備平行做兩份試驗。配合飼料、濃縮飼料、精料補充料和飼料原料稱取試樣2g~4g、添加劑預(yù)混合飼料稱取試樣0.5g~1.0g，精確至0.0001g，置于鎳坩堝中，加入1mL碳酸鉀溶液（5.2.2）、1mL硫酸鋅溶液（5.2.3），用玻璃棒將試樣攪成糊狀且完全濕潤（如濕潤不充分，可滴加少量水），用少許水把玻璃棒上的殘留物洗入鎳坩堝中。將鎳坩堝置于103℃±2℃烘箱中干燥完全，取出，冷卻。在電爐上慢慢炭化，完全炭化后，加蓋，轉(zhuǎn)移至馬弗爐中，于580℃±20℃灰化3h，取出，冷卻。加20mL水，將灼燒殘渣研碎，移至電爐上加熱至微沸，中速定性濾紙過濾，用少許60℃~80℃熱水重復(fù)沖洗濾渣，收集濾液至100mL棕色容量瓶中，冷卻至室溫，用水定容至刻度，混勻，作為試樣溶液，待測。5.5.2測定5.5.2.1碘標準工作曲線繪制準確移取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.20mL、1.80mL碘標準工作溶液（5.2.10）于25mL比色管中，加水至10mL，準確加入1.2mL硫氰酸鉀-亞硝酸鈉溶液（5.2.5），渦旋混合10s，置于25℃±2℃水浴中，放置10min，取出，在每個比色管中準確加入2.4mL硫酸鐵銨-硝酸溶液（5.2.6），渦旋混合10s，再置于25℃±2℃水浴中，用秒表記時，反應(yīng)20min，分別準確加入1mL顏色固定劑（5.2.7每個比色管中加入硫酸鐵銨-硝酸溶液與加入顏色固定劑的時間間隔應(yīng)嚴格控制一致），用水定容，混勻，用1cm比色皿，用水調(diào)零，在460nm處測定吸光度值，以碘的質(zhì)量(μg）為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制碘標準工作曲線，相關(guān)系數(shù)r≥0.99。5.5.2.2試樣溶液測定準確移取1mL~5mL試樣溶液（5.5.1）于25mL比色管中，以下按5.5.2.1中“加水至10mL”及之后操作，測定試樣溶液的吸光度值，在碘標準工作曲線上查得試樣溶液中的碘的質(zhì)量。當試樣溶液的吸光度值超出碘標準工作曲線線性范圍時，重新分取試樣溶液體積，按照5.5.2.2重新測定。5.6試驗數(shù)據(jù)處理試樣中碘的含量以質(zhì)量分數(shù)w2表示，單位為毫克每千克（mg/kg），按式（1）計算