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高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1江蘇省2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期期中模擬卷(考試時(shí)間:75分鐘試卷滿(mǎn)分:100分)注意事項(xiàng):1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)等填寫(xiě)在答題卡和試卷指定位置上。2.回答選擇題時(shí),選出每小題〖答案〗后,用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的〖答案〗標(biāo)號(hào)涂黑。如需改動(dòng),用橡皮擦干凈后,再選涂其他〖答案〗標(biāo)號(hào)。回答非選擇題時(shí),將〖答案〗寫(xiě)在答題卡上。寫(xiě)在本試卷上無(wú)效。3.考試結(jié)束后,將本試卷和答題卡一并交回。4.測(cè)試范圍:選擇性必修三一、單選題(本題共14小題,每小題2分,共28分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題意。)1.唐詩(shī)云“葡萄美酒夜光杯,欲飲琵琶馬上催”,可見(jiàn)果酒的制作在我國(guó)源遠(yuǎn)流長(zhǎng)。下列關(guān)于家庭制作果酒、果醋的敘述,正確的是()A.果酒制作過(guò)程中為防止雜菌污染,不能擰松發(fā)酵瓶蓋B.若最終獲得的果酒偏酸,可能的原因是醋酸菌無(wú)氧發(fā)酵產(chǎn)生了醋酸C.果酒制成后只需要將裝置移至溫度略高的環(huán)境中就能釀成果醋D.果酒不易變質(zhì)的原因是在酸性、缺氧及含酒精的發(fā)酵液中,微生物的繁殖受到抑制〖答案〗D〖祥解〗果酒制作過(guò)程中,酵母菌無(wú)氧發(fā)酵產(chǎn)生酒精和CO2,需定時(shí)擰松發(fā)酵瓶蓋,以釋放無(wú)氧發(fā)酵產(chǎn)生的CO2;隨著酒精發(fā)酵的進(jìn)行,發(fā)酵液呈酸性、缺氧及含酒精,各種微生物的繁殖受到抑制;由果酒制成果醋,需要將果酒制作裝置移至溫度略高的環(huán)境中,同時(shí)制造有氧環(huán)境,才能釀成果醋?!驹斘觥緼、果酒制作過(guò)程中需定時(shí)擰松發(fā)酵瓶蓋,以釋放發(fā)酵產(chǎn)生的CO2,A錯(cuò)誤;B、果酒偏酸,可能原因是醋酸菌有氧發(fā)酵產(chǎn)生了醋酸,B錯(cuò)誤;C、參與果醋制作的醋酸菌是嗜氧菌和嗜溫菌,果酒制成后需要將裝置移至溫度略高的環(huán)境中,同時(shí)制造有氧環(huán)境,才能釀成果醋,C錯(cuò)誤;D、隨著酒精發(fā)酵的進(jìn)行,發(fā)酵液呈酸性、缺氧及含酒精,各種微生物的繁殖受到抑制,D正確。故選D。2.用紙片擴(kuò)散法測(cè)定某病原菌對(duì)各種抗生素敏感性的實(shí)驗(yàn),是在某病原菌均勻分布的平板上,鋪設(shè)含有不同種抗生素的紙片后進(jìn)行培養(yǎng)。圖示為培養(yǎng)的結(jié)果,其中抑菌圈是在紙片周?chē)霈F(xiàn)的透明區(qū)域。下列分析正確的是()A.不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響B(tài).在圖示固體培養(yǎng)基上可用平板劃線(xiàn)法或涂布法接種病原菌C.未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異D.形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物較敏感〖答案〗A〖祥解〗紙片擴(kuò)散法是藥敏實(shí)驗(yàn)一種常用的方法,它將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測(cè)試菌的瓊脂平板上,紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周?chē)鷧^(qū)域擴(kuò)散,形成遞減的梯度濃度,在紙片周?chē)志鷿舛确秶鷥?nèi)的細(xì)菌生長(zhǎng)被抑制,形成透明的抑菌圈?!驹斘觥緼、紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周?chē)鷧^(qū)域擴(kuò)散,不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響,A正確;B、圖示固體培養(yǎng)基上用的是稀釋涂布平板法進(jìn)行接種病原菌,B錯(cuò)誤;C、病原菌發(fā)生抗性變異在接觸之前,未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌對(duì)該抗生素不敏感,C錯(cuò)誤;D、微生物對(duì)藥物較敏感形成的抑菌圈應(yīng)較大,形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物敏感程度較低,D錯(cuò)誤。故選A。3.為篩選高效降解淀粉的微生物,提高“生化"處理的效率,研究人員將廚余垃圾機(jī)械化處理后加入裝有無(wú)菌水的錐形瓶中制備廚余垃圾浸出液,然后進(jìn)行如圖所示操作。下列敘述錯(cuò)誤的是(
)A.廚余垃圾浸出液接種在X培養(yǎng)基上,采用的是稀釋涂布平板法B.X培養(yǎng)基中①處菌落的周?chē)鷽](méi)有透明圈,可能是自養(yǎng)型的雜菌C.獲得高效降解淀粉的微生物,應(yīng)挑⑤處的菌落接種到Y(jié)培養(yǎng)基D.微生物在Y培養(yǎng)基中與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)接觸更充分,更容易形成菌落〖答案〗D〖祥解〗微生物常見(jiàn)的接種的方法:①平板劃線(xiàn)法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板,接種,劃線(xiàn),在恒溫箱里培養(yǎng)。在線(xiàn)的開(kāi)始部分,微生物往往連在一起生長(zhǎng),隨著線(xiàn)的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?!驹斘觥緼、分析題圖可知,X培養(yǎng)基上接種細(xì)菌采用稀釋涂布平板法,A正確;B、X培養(yǎng)基中①處菌落的周?chē)鷽](méi)有透明圈,可能該微生物可以利用空氣中的二氧化碳作為碳源,是自養(yǎng)型的雜菌,B正確;C、⑤處透明圈最大,說(shuō)明降解淀粉的能力最強(qiáng),故為獲得高效降解淀粉的微生物,應(yīng)挑⑤處的菌落接種到Y(jié)培養(yǎng)基,C正確;D、Y培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基,不能形成菌落,D錯(cuò)誤。故選D。4.紅薯釀制的黃酒,酒精度約為9%,制作過(guò)程如下圖所示,下列敘述錯(cuò)誤的是(
)A.浸出液過(guò)濾后應(yīng)保存于密閉容器中,留1/3的空間B.麥芽中含有淀粉酶可將紅薯中的淀粉水解,利于酵母菌獲得更多發(fā)酵底物C.酵母菌繁殖的最適溫度是30℃,溫度上升至30℃有利于酵母菌大量繁殖D.溫度上升至30℃,此后每半天攪拌一次,攪拌的目的使酵母菌與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分混合〖答案〗C〖祥解〗1、果酒制作的菌種是酵母菌,來(lái)源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心,條件是無(wú)氧、適宜溫度是18~25℃,pH值呈酸性。2、在制作葡萄酒的過(guò)程中,葡萄汁裝入瓶中時(shí)要留出大約1/3的空間,這樣有利于酵母菌大量繁殖,并能防止發(fā)酵液溢出;酵母菌在無(wú)氧條件下進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和CO2,使培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)氣體增多,所以每隔12h左右將瓶蓋擰松一次,此后再擰緊,目的是放出發(fā)酵產(chǎn)生的CO2,同時(shí)盡量不讓O2進(jìn)入瓶中。【詳析】A、制造果酒利用的是酵母菌的無(wú)氧呼吸,因此浸出液過(guò)濾后應(yīng)保存于密閉容器中,但不能將容器裝滿(mǎn),要留1/3的空間,這樣有利于酵母菌大量繁殖,并能防止發(fā)酵液溢出,A正確;B、麥芽中含有淀粉酶,淀粉酶可以水解紅薯中的的淀粉得到葡萄糖,因此拌入麥芽利于酵母菌獲得更多發(fā)酵底物,B正確;C、酵母菌繁殖的最適溫度是20℃,因此20℃保持24h有利于提高發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量,溫度上升至30℃有利于酵母菌發(fā)酵,C錯(cuò)誤;D、溫度上升至30℃,有利于酵母菌發(fā)酵,此后每半天攪拌一次,攪拌有利于酵母菌與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分混合,D正確。故選C。5.肉蓯蓉是一種草本植物,具有較高的藥用價(jià)值,自然條件下產(chǎn)量較低,其次生代謝物苯乙醇苷是主要的活性成分。某實(shí)驗(yàn)小組欲利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)苯乙醇苷,簡(jiǎn)要流程如圖所示。下列敘述正確的是(
)A.苯乙醇苷是肉蓯蓉生長(zhǎng)和生存所必需的B.可選擇肉蓯蓉莖尖作為外植體并對(duì)其消毒C.經(jīng)射線(xiàn)處理①即可獲得高產(chǎn)苯乙醇苷的細(xì)胞D.也可將懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞置于低滲溶液中漲破以提取苯乙醇苷〖答案〗B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過(guò)程是:離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織,然后再分化生成根、芽,最終形成植物體,植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性?!驹斘觥緼、苯乙醇苷是肉蓯蓉的次生代謝物,次生代謝物不是生物生長(zhǎng)和生存所必需的,A錯(cuò)誤;B、肉蓯蓉莖尖可作為外植體,需要對(duì)其消毒,B正確;C、①為愈傷組織,經(jīng)射線(xiàn)處理后可能發(fā)生突變,進(jìn)而獲得高產(chǎn)苯乙醇苷的細(xì)胞,C錯(cuò)誤;D、植物細(xì)胞具有細(xì)胞壁,無(wú)法用低滲溶液進(jìn)行漲破以提取苯乙醇,D錯(cuò)誤。故選B。6.胞質(zhì)雜種是指兩個(gè)原生質(zhì)體融合產(chǎn)生的雜種細(xì)胞,其中一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核消失后,兩個(gè)原生質(zhì)體的細(xì)胞質(zhì)雜交得到的個(gè)體??蒲腥藛T利用雄性不育的品種A與可育的品種B通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了雄性不育的胞質(zhì)雜種“華柚2號(hào)”,制備過(guò)程如下圖所示,其中GFP(綠色熒光蛋白)基因轉(zhuǎn)入了品種A的細(xì)胞核基因組中。經(jīng)檢測(cè),“華柚2號(hào)”的細(xì)胞核和葉綠體基因來(lái)自品種B,線(xiàn)粒體基因來(lái)自品種A,下列說(shuō)法正確的是()A.上述過(guò)程包括有絲分裂、細(xì)胞分化、減數(shù)分裂等B.雜種細(xì)胞的形成是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)完成的標(biāo)志C.“華柚2號(hào)”的獲得說(shuō)明控制雄性不育的基因可能位于線(xiàn)粒體中D.應(yīng)篩選發(fā)綠色熒光的雜種細(xì)胞C經(jīng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得“華柚2號(hào)”〖答案〗C〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交,又稱(chēng)原生質(zhì)體融合,是指將植物不同種屬,甚至科間的原生質(zhì)體通過(guò)人工方法誘導(dǎo)融合,然后進(jìn)行離體培養(yǎng),使其再生雜種植株的技術(shù)。植物細(xì)胞具有細(xì)胞壁,未脫壁的兩個(gè)細(xì)胞是很難融合的,植物細(xì)胞只有在脫去細(xì)胞壁成為原生質(zhì)體后才能融合,所以植物的細(xì)胞融合也稱(chēng)為原生質(zhì)體融合?!驹斘觥緼、上述過(guò)程中發(fā)生了有絲分裂和細(xì)胞分化,但沒(méi)發(fā)生有減數(shù)分裂,A錯(cuò)誤;B、植物體的形成標(biāo)志著植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的完成,B錯(cuò)誤;C、雄性不育的胞質(zhì)雜種華柚2號(hào)的細(xì)胞核和葉綠體基因來(lái)自品種B,線(xiàn)粒體基因來(lái)自品種A,融合后品種A的細(xì)胞核消失,控制雄性不育的基因可能位于線(xiàn)粒體中,C正確;D、GFP(綠色熒光蛋白)基因轉(zhuǎn)入了品種A的細(xì)胞核基因組中,而融合后的華柚2號(hào)不含品種A的細(xì)胞核,因此發(fā)綠色熒光的雜種細(xì)胞應(yīng)被淘汰,D錯(cuò)誤。故選C。7.猴痘是一種病毒性人畜共患病,在人類(lèi)中出現(xiàn)的癥狀與過(guò)去在天花患者身上所看到的癥狀相似,B6R蛋白是猴痘病毒的抗原。為制備抗B6R蛋白的單克隆抗體,研究人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),如圖所示,其中①~④表示細(xì)胞。下列敘述正確的是()A.細(xì)胞①含有從小鼠的脾中得到的能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞B.誘導(dǎo)細(xì)胞①②融合的常用方法與誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法相同C.可將抗體檢測(cè)呈陰性的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)D.圖中的培養(yǎng)瓶需要置于含有95%CO2和5%O2的混合氣體中培養(yǎng)〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng),之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞;誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行抗體檢測(cè),篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?!驹斘觥緼、單克隆抗體制備過(guò)程中需要將產(chǎn)生特定抗體的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,給小鼠注射B6R蛋白的目的是使小鼠針對(duì)該抗原產(chǎn)生特異性免疫,從而使體內(nèi)出現(xiàn)能產(chǎn)生抗B6R蛋白抗體的漿細(xì)胞,因此從小鼠脾臟提取的細(xì)胞①含有能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞,A正確;B、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是滅活的病毒,因此誘導(dǎo)細(xì)胞①②融合的常用方法與誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法不完全相同,B錯(cuò)誤;C、抗體檢測(cè)呈陰性的雜交瘤細(xì)胞說(shuō)明其產(chǎn)生的抗體不是所需的抗體,因此不能培養(yǎng)該雜交瘤細(xì)胞,應(yīng)將抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠的腹腔內(nèi)大量培養(yǎng),C錯(cuò)誤;D、圖中的培養(yǎng)瓶需要置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體中培養(yǎng),D錯(cuò)誤。故選A。8.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。下列有關(guān)敘述正確的是(
)A.一般選擇幼齡動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng),原因是其細(xì)胞分化程度低B.進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞每傳一代,細(xì)胞數(shù)目增加一倍C.傳代培養(yǎng)前需用胰蛋白酶處理貼壁細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液D.為保證無(wú)菌的環(huán)境,需要定期更換培養(yǎng)液,清除代謝物〖答案〗C〖祥解〗1、選用幼齡動(dòng)物的器官或組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),是因?yàn)橛g動(dòng)物的器官或組織的分裂能力強(qiáng);2、為保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,需要對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理及在無(wú)菌條件下操作,定期更換培養(yǎng)液?!驹斘觥緼、選用幼齡動(dòng)物的器官或組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),是因?yàn)橛g動(dòng)物的器官或組織的分裂能力強(qiáng),A錯(cuò)誤;B、細(xì)胞培養(yǎng)中每更換一次培養(yǎng)瓶算是傳一代,并不是細(xì)胞分裂一次,B錯(cuò)誤;C、貼壁細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)相互抑制現(xiàn)象,需用胰蛋白酶處理進(jìn)行傳代培養(yǎng),C正確;D、為保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,需要對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理及在無(wú)菌條件下操作,而不是更換培養(yǎng)液,定期更換培養(yǎng)液,其目的是便于清除代謝物,防止代謝物積累對(duì)細(xì)胞的毒害,D錯(cuò)誤。故選C。9.隨著生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,生產(chǎn)動(dòng)物新個(gè)體的方式變得越來(lái)越多樣化。下圖表示胚胎工程技術(shù)研究及應(yīng)用的相關(guān)情況,供體1是良種荷斯坦高產(chǎn)奶牛,供體2是健康的黃牛,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.應(yīng)用1中獲得的良種小牛為雌性,是無(wú)性生殖的產(chǎn)物B.應(yīng)用2、3、4所用的受精卵可以不通過(guò)人工授精獲得C.應(yīng)用3過(guò)程中對(duì)桑葚胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí),要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割D.應(yīng)用4中胚胎干細(xì)胞具有分化為成年牛體內(nèi)的任何一種類(lèi)型細(xì)胞的潛能〖答案〗C〖祥解〗分析題圖:應(yīng)用1中:供體1提供細(xì)胞核,供體2提供細(xì)胞質(zhì),經(jīng)過(guò)核移植技術(shù)形成重組細(xì)胞,并發(fā)育形成早期胚胎,再胚胎移植到受體子宮發(fā)育成小牛,稱(chēng)為克隆牛;應(yīng)用2中:優(yōu)良公牛和供體1配種形成受精卵,并發(fā)育成早期胚胎,再胚胎移植到受體子宮發(fā)育成小牛,屬于有性生殖;應(yīng)用3中:采用了胚胎分割技術(shù);應(yīng)用4中:從早期胚胎和原始性腺中獲取胚胎干細(xì)胞,并進(jìn)行體外干細(xì)胞培養(yǎng)。【詳析】A、應(yīng)用1中獲得的小牛為克隆牛,其細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來(lái)源于供體1(荷斯坦高產(chǎn)奶牛),所以良種小牛是雌性,是無(wú)性生殖的產(chǎn)物,A正確;B、應(yīng)用2、3、4所用的受精卵不一定來(lái)源于人工授精,也可以來(lái)自體內(nèi)受精,B正確;C、對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)需要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割,否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育,C錯(cuò)誤;D、應(yīng)用4中細(xì)胞為胚胎干細(xì)胞,具有分化為成年牛體內(nèi)的任何一種類(lèi)型細(xì)胞的潛能,D正確。故選C。10.某細(xì)菌DNA分子上有4個(gè)Sau3AⅠ的酶切位點(diǎn),經(jīng)Sau3AⅠ處理后會(huì)形成4個(gè)大小不同的DNA片段。若是用BamHⅠ處理,則只會(huì)形成2個(gè)大小不同的DNA片段。Sau3AⅠ和BamHⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示。下列敘述不正確的是(
)限制酶名稱(chēng)識(shí)別序列及切割位點(diǎn)BamHⅠG↓GATCCSau3AⅠ↓GATCA.上述兩種限制酶切割后可形成相同的黏性末端B.該DNA分子上有兩個(gè)BamHⅠ的酶切位點(diǎn)C.黏性末端能通過(guò)T4DNA連接酶連接D.若用兩種酶共同處理,會(huì)形成6個(gè)大小不同的DNA片段〖答案〗D〖祥解〗限制酶主要從原核生物中分離純化出來(lái)。特異性:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂,形成黏性末端和平末端兩種。【詳析】A、BamHI和Sau3AI兩種限制酶切割后形成的黏性末端均為GATC,A正確;B、該DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn),經(jīng)Sau3AI處理后形成4個(gè)DNA片段,可知該DNA分子為環(huán)狀DNA,用BamHI處理后,得到2個(gè)DNA片段,說(shuō)明該DNA分子上有兩個(gè)BamHI的酶切位點(diǎn),B正確;C、T4DNA連接酶能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來(lái),此外還可以連接平末端,但連接平末端時(shí)的效率比較低,C正確;D、該DNA分子上有4個(gè)Sau3AI的酶切位點(diǎn),有2個(gè)BamHI的酶切位點(diǎn),但是BamHI識(shí)別序列中包含Sau3AI的識(shí)別序列,所以同時(shí)用兩種酶共同處理,不會(huì)形成6個(gè)大小不同的DNA片段,D錯(cuò)誤。故選D。11.PCR引物的3'端為結(jié)合模板DNA的關(guān)鍵,5'端無(wú)嚴(yán)格限制,可用于添加限制酶切點(diǎn)等序列,dNTP是DNA合成的原料,還可供能。下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是(
)A.圖示環(huán)節(jié)所需的溫度比上一個(gè)環(huán)節(jié)的低B.引物的設(shè)計(jì)要有一段已知目的基因的核苷酸序列C.耐高溫Taq酶只能從引物的3'端開(kāi)始延伸DNA鏈D.1個(gè)循環(huán)后,子代DNA雙鏈的脫氧核苷酸數(shù)量相同〖答案〗D〖祥解〗1、PCR全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在體外復(fù)制特定的DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理:DNA復(fù)制。3、條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Tag酶)?!驹斘觥緼、圖示環(huán)節(jié)為引物與模板堿基互補(bǔ)配對(duì),表示的是復(fù)性環(huán)節(jié),復(fù)性的上一環(huán)節(jié)為變性,復(fù)性的溫度比變性的溫度低,A正確;B、引物的設(shè)計(jì)要有一段已知目的基因的核苷酸序列,保證其與已知模板能堿基配對(duì),在后續(xù)擴(kuò)增的過(guò)程中才能進(jìn)行子鏈的延伸,B正確;C、子鏈?zhǔn)菑?'-3'端延伸的,耐高溫Tag酶只能從引物的3'端開(kāi)始延伸DNA鏈,C正確;D、由于兩個(gè)引物均不在該片段的端點(diǎn),因此一個(gè)循環(huán)后,子代DNA雙鏈的脫氧核苷酸數(shù)量不相同,D錯(cuò)誤。故選D。12.幽門(mén)螺桿菌(Hp)感染會(huì)引發(fā)胃炎、消化性潰瘍等多種疾病。研究人員將Hp的Ipp20基因作為目的基因,用限制酶XhoI和XbaI切割,通過(guò)基因工程制備相應(yīng)的疫苗,質(zhì)粒及操作步驟如圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.Ipp20基因整合到大腸桿菌的DNA中屬于基因重組B.基因表達(dá)載體導(dǎo)入之前,可用Ca2+處理大腸桿菌C.培養(yǎng)基A中添加了氯霉素,培養(yǎng)基B中添加了潮霉素D.能用來(lái)生產(chǎn)Hp疫苗的大腸桿菌在菌落3和5中〖答案〗C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟:1.目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法?!驹斘觥緼、基因重組是指控制不同性狀的基因發(fā)生重新組合,主要發(fā)生在有性生殖過(guò)程中,但通過(guò)基因工程將不同來(lái)源的DNA拼接,可以賦予生物新的遺傳特性,也屬于基因重組的范疇,故利用基因工程將Ipp20基因整合到大腸桿菌的DNA中屬于基因重組,A正確;B、原核細(xì)胞作為受體細(xì)胞時(shí),可用Ca2+處理受體細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),更容易將基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中,B正確;CD、該過(guò)程使用了限制酶XhoI和XbaI切割質(zhì)粒和Ipp20基因,結(jié)合圖示可知,在構(gòu)建目的基因表達(dá)載體的過(guò)程中氯霉素抗性基因被切割掉,保留了潮霉素抗性基因,不管是正常質(zhì)粒還是重組質(zhì)粒都含有潮霉素抗性基因,但只有正常質(zhì)粒才同時(shí)含有氯霉素抗性基因,因此,可以先用含有潮霉素的培養(yǎng)基A篩選出導(dǎo)入正常質(zhì)粒、重組質(zhì)粒的大腸桿菌,再采用同位影印接種到含有氯霉素的培養(yǎng)基B和含有潮霉素的培養(yǎng)基A中,此時(shí)含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能在含有氯霉素的培養(yǎng)基B上生長(zhǎng),從而與培養(yǎng)基A(對(duì)照)相比會(huì)消失一些菌落,對(duì)照兩個(gè)平板上減少的菌落就是符合要求的大腸桿菌菌落,結(jié)合圖示可知,符合要求的大腸桿菌菌落是3和5,C錯(cuò)誤,D正確。故選C。13.如圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌細(xì)胞B內(nèi)制“工程菌”的示意圖。已知細(xì)菌細(xì)胞B內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因。下列說(shuō)法正確的是(
)
A.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞B常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法B.將完成導(dǎo)入過(guò)程后的細(xì)菌涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上,能生長(zhǎng)的只是導(dǎo)入了普通質(zhì)粒的細(xì)菌C.為防止特異性引物的特異性差,PCR獲取人生長(zhǎng)激素基因設(shè)計(jì)的特異性引物不宜過(guò)長(zhǎng)D.目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是受體細(xì)胞中含有人的生長(zhǎng)激素基因〖答案〗B〖祥解〗據(jù)圖分析,質(zhì)粒A有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因,而目的基因插入的位點(diǎn)是抗四環(huán)素基因,則重組質(zhì)粒只有抗氨芐青霉素基因,所以完成導(dǎo)入重組質(zhì)粒A的細(xì)菌能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),而不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基中生長(zhǎng);導(dǎo)入質(zhì)粒A的細(xì)菌能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),也能在含四環(huán)素培養(yǎng)基中生長(zhǎng)?!驹斘觥緼、將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)菌B之前,一般要先用Ca2+處理細(xì)胞,使其處于感受態(tài),而農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的常用方法,A錯(cuò)誤;B、由于重組質(zhì)粒構(gòu)建過(guò)程中抗四環(huán)素基因被破壞,所以能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的是導(dǎo)入普通質(zhì)粒A的細(xì)菌,B正確;C、PCR引物的設(shè)計(jì)是獲得大量高純度目的基因的關(guān)鍵,引物中堿基數(shù)量越多,則引物的特異性越高,為防止特異性引物的特異性差,PCR獲取人生長(zhǎng)激素基因設(shè)計(jì)的特異性引物不宜過(guò)短,C錯(cuò)誤;D、基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì),目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是受體細(xì)胞中表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì),D錯(cuò)誤。故選B。14.下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性問(wèn)題的敘述,不正確的是()A.食品安全涉及轉(zhuǎn)基因生物是否會(huì)產(chǎn)生出毒性蛋白或過(guò)敏蛋白B.環(huán)境安全主要是指轉(zhuǎn)基因生物可能對(duì)環(huán)境造成新污染或破壞C.生物安全主要是指當(dāng)?shù)匚锓N會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)基因生物的生存構(gòu)成威脅D.我國(guó)為保證轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性采取的措施之一是頒布了相關(guān)的法規(guī)〖答案〗C〖祥解〗針對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù),各個(gè)國(guó)家都制定了符合本國(guó)利益的法規(guī)和政策,我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的,就是研究上要大膽,堅(jiān)持自主創(chuàng)新;推廣上要慎重,做到確保安全;管理上要嚴(yán)格,堅(jiān)持依法監(jiān)管。【詳析】A、食物安全是指公眾擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物會(huì)產(chǎn)生出毒性蛋白或過(guò)敏蛋白,同時(shí)也擔(dān)心轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)發(fā)生改變,A正確;B、轉(zhuǎn)基因生物可能對(duì)環(huán)境造成新污染或破壞,引發(fā)環(huán)境安全,如重組的微生物在降解某些化合物的過(guò)程中所產(chǎn)生的中間產(chǎn)物可能會(huì)對(duì)人類(lèi)生活環(huán)境造成二次污染,B正確;C、生物安全是指轉(zhuǎn)基因生物可能會(huì)對(duì)生物的多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)和威脅,C錯(cuò)誤;D、為保障轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性,可采取頒布相關(guān)法規(guī)等措施,保障消費(fèi)者的權(quán)益,D正確。故選C。二、多項(xiàng)選擇題本部分包括4題,每題3分,共計(jì)12分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意,每題全選對(duì)者得3分,選對(duì)但不全的得1分,錯(cuò)選或不答的得0分。15.將兩種氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌(菌株a和b)進(jìn)行如下圖所示實(shí)驗(yàn)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.實(shí)驗(yàn)中接種至培養(yǎng)基方法是平板劃線(xiàn)法B.菌株a和b需要的生長(zhǎng)因子一定有所不同C.基本培養(yǎng)基出現(xiàn)的少量菌落是單菌落D.基本培養(yǎng)基中包含菌株a和b的生長(zhǎng)因子〖答案〗ACD〖祥解〗稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法是最常用的兩種接種方法。分析題圖:?jiǎn)为?dú)培養(yǎng)菌株a和b時(shí),培養(yǎng)基中均無(wú)法生長(zhǎng)菌落,而當(dāng)a和b共同培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中有少量菌落產(chǎn)生,因此培養(yǎng)基中無(wú)法提供它們單獨(dú)生長(zhǎng)的因子,a和b混合培養(yǎng)能生長(zhǎng),說(shuō)明它們能夠相互提供相應(yīng)的生長(zhǎng)因子,而無(wú)法獨(dú)立生長(zhǎng),因此它們所需要的生長(zhǎng)因子一定有所不同?!驹斘觥緼、根據(jù)菌株a和菌株b混合后菌落的分布情況可知,接種至基本培養(yǎng)基時(shí)宜用稀釋涂布平板法,A錯(cuò)誤;B、a單獨(dú)培養(yǎng)和b單獨(dú)培養(yǎng)均不能生長(zhǎng),a和b混合培養(yǎng)能生長(zhǎng),說(shuō)明它們能夠相互提供相應(yīng)的生長(zhǎng)因子,而無(wú)法獨(dú)立生長(zhǎng),因此它們所需要的生長(zhǎng)因子有所不同,B正確;C、基本培養(yǎng)基出現(xiàn)的少量菌落不一定都為單菌落,也有可能是重疊的菌落,C錯(cuò)誤;D、單獨(dú)培養(yǎng)菌株a和b時(shí),培養(yǎng)基中均無(wú)法生長(zhǎng)菌落,而當(dāng)a和b共同培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中有少量菌落產(chǎn)生,因此培養(yǎng)基中無(wú)法提供它們單獨(dú)生長(zhǎng)的因子,D錯(cuò)誤。故選ACD。16.紫花苜蓿(2n=32)是應(yīng)用較為廣泛的豆科牧草,但易造成家畜鼓脹病。百脈根(2n=12)富含單寧,單寧可與植物蛋白質(zhì)結(jié)合,不會(huì)引起家畜采食后鼓脹。科研人員利用野生型清水紫花苜蓿和里奧百脈根為材料培育抗鼓脹病的苜蓿新品種。研究流程如圖(注:IOA可抑制植物細(xì)胞呼吸第一階段,R-6G可阻止線(xiàn)粒體的呼吸作用,二者抑制不同植物細(xì)胞正常代謝的臨界濃度不同),下列說(shuō)法不正確的是()A.用纖維素酶和果膠酶處理實(shí)驗(yàn)材料獲得的原生質(zhì)體由細(xì)胞膜、液泡膜及兩膜之間的細(xì)胞質(zhì)組成B.②和③過(guò)程所需的植物激素比例不同C.②③過(guò)程需要在有光照、植物激素的作用下才能脫分化和再分化形成完整植株D.②過(guò)程的細(xì)胞中染色體數(shù)目最多有88條,③過(guò)程產(chǎn)生的再生植株是可育的多倍體〖答案〗AC〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù):就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。【詳析】A、原生質(zhì)層是由細(xì)胞膜、液泡膜及兩膜之間的細(xì)胞質(zhì)組成,原生質(zhì)體是由植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁后形成的,包括細(xì)胞核等結(jié)構(gòu),A錯(cuò)誤;BC、②③過(guò)程分別表示脫分化和再分化,兩個(gè)過(guò)程所需的植物激素比例不同,通常,脫分化所需的生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值為1,再分化時(shí),提高該比值有利于根的分化,降低該比值有利于芽的分化,脫分化過(guò)程不需要光照,B正確,C錯(cuò)誤;D、紫花苜蓿染色體數(shù)目為32條,百脈染色體數(shù)目為12條,融合之后細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目為32+12=44條,②過(guò)程表示脫分化,進(jìn)行的是有絲分裂,此時(shí)染色體數(shù)目最多有44×2=88條,紫花苜蓿是二倍體,百脈是二倍體,③過(guò)程產(chǎn)生的再生植株是可育的多倍體(四倍體),D正確。故選D。17.細(xì)胞毒素類(lèi)藥物能有效殺傷腫瘤細(xì)胞,但也會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害,科學(xué)家將細(xì)胞毒素與單克隆抗體結(jié)合制成抗體藥物偶聯(lián)物(ADC),ADC可選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞,其作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是(
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A.ADC中的抗體能特異性識(shí)別并殺傷腫瘤細(xì)胞B.ADC進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的過(guò)程需要蛋白質(zhì)參與并消耗能量C.含ADC的小泡與溶酶體融合后,溶酶體裂解釋放藥物引起細(xì)胞壞死D.利用放射性同位素或熒光標(biāo)記的單克隆抗體可定位診斷腫瘤等疾病〖答案〗BD〖祥解〗題意分析,高效的細(xì)胞毒素類(lèi)藥物可有效殺傷腫瘤細(xì)胞,但同時(shí)也會(huì)對(duì)正常細(xì)胞產(chǎn)生傷害,而將細(xì)胞毒素與抗體結(jié)合,抗體與靶細(xì)胞膜上的特異性受體結(jié)合通過(guò)胞吞的方式把細(xì)胞毒素一并帶進(jìn)靶細(xì)胞,引起靶細(xì)胞溶酶體膜的破裂,最后導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷?!驹斘觥緼、ADC中的抗體能特異性識(shí)別腫瘤抗原,ADC中的細(xì)胞毒素類(lèi)藥物能殺死腫瘤細(xì)胞,A錯(cuò)誤;B、ADC進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的過(guò)程,需要抗體與靶細(xì)胞膜上的特異性受體結(jié)合,方式為胞吞,需要消耗腫瘤細(xì)胞代謝產(chǎn)生的ATP,而受體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),B正確;C、ADC進(jìn)入靶細(xì)胞的過(guò)程中含ADC的小泡與溶酶體融合后,引起靶細(xì)胞溶酶體膜的破裂,最后導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷,C錯(cuò)誤;D、利用放射性同位素或熒光標(biāo)記的單克隆抗體可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病,其原理是抗原-抗體特異性結(jié)合的原理,D正確。故選BD。18.科研人員將釀酒酵母質(zhì)粒上的丙酮酸脫氫酶基因(PD)替換為植物乳桿菌中的乳酸脫氫酶基因(LPG),可獲得乳酸乙酯(白酒香味的主要來(lái)源)高產(chǎn)菌株,過(guò)程如圖。下列分析合理的是()
A.轉(zhuǎn)入的LPG基因表達(dá)產(chǎn)物不能影響釀酒酵母的活性B.LPG基因替換質(zhì)粒上的PD基因需要兩端攜帶相同基因片段C.標(biāo)記基因Ampr可檢測(cè)是否成功構(gòu)建乳酸乙酯高產(chǎn)菌株D.可以利用PCR技術(shù)篩選含有LPG基因的受體細(xì)胞〖答案〗ABD〖祥解〗分析題圖:圖示是采用基因工程技術(shù)將釀酒酵母質(zhì)粒上的丙酮酸脫氫酶基因(PD)替換為植物乳桿菌中的乳酸脫氫酶基因(L-PG),從而獲得乳酸乙酯高產(chǎn)菌株?!驹斘觥緼、目的基因表達(dá)產(chǎn)物不能影響受體細(xì)胞的生存和活性,因此轉(zhuǎn)入的L-PG基因表達(dá)產(chǎn)物不能影響釀酒酵母活性,A正確;B、LPG基因替換質(zhì)粒上的PD基因需要兩端攜帶相同基因片段,即相同的黏性末端,B正確;C、標(biāo)記基因Ampr可篩選含有目的基因的受體細(xì)胞,但不能檢測(cè)是否成功構(gòu)建乳酸乙酯高產(chǎn)菌株,C錯(cuò)誤;D、PCR技術(shù)是一項(xiàng)體外擴(kuò)增基因的技術(shù),依據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,可以用于篩選含有L-PG基因的受體細(xì)胞,D正確。故選ABD。三、非選擇題:本部分包括5題,共60分。19.如圖為某工廠(chǎng)生產(chǎn)葡萄酒和葡萄醋的基本工藝流程,請(qǐng)回答:(1)果酒的制作離不開(kāi)酵母菌。酵母菌從異化作用看是一類(lèi)型微生物。在無(wú)氧條件下,酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸,其反應(yīng)式為,該過(guò)程在酵母菌細(xì)胞的中進(jìn)行。(2)發(fā)酵一段時(shí)間后,觀察甲罐中液體不再有,說(shuō)明發(fā)酵完畢。(3)在圖示“葡萄→葡萄汁”的過(guò)程中輔以纖維素酶、果膠酶處理可提高出汁率,原因是。(4)圖示甲罐的液面位置表示加入葡萄汁的量,這種做法的目的是既,又可以防止。(5)待甲罐發(fā)酵結(jié)束后,可轉(zhuǎn)為果醋發(fā)酵,這利用了醋酸菌可以將酒精轉(zhuǎn)化為,再進(jìn)而產(chǎn)生醋酸。轉(zhuǎn)為果醋發(fā)酵除了要接種醋酸菌外,還要改變發(fā)酵條件,方案為。(6)甲罐連接的雙U型管中一側(cè)注滿(mǎn)水的作用是。(7)為驗(yàn)證櫻桃酒制作是否成功,可將發(fā)酵液在酸性條件下用溶液來(lái)鑒定,若出現(xiàn)色,則說(shuō)明有果酒產(chǎn)生?!即鸢浮?1)兼性厭氧C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)(2)氣泡冒出(3)纖維素酶、果膠酶分解細(xì)胞壁,有利于榨汁處理過(guò)程中色素釋放(4)為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣發(fā)酵旺盛時(shí)汁液溢出(5)乙醛將發(fā)酵液溫度提高至30-35℃,通入無(wú)菌空氣。(6)防止空氣、雜菌進(jìn)入,便于排氣減壓(7)重鉻酸鉀灰綠〖祥解〗果酒的制作離不開(kāi)酵母菌,酵母菌是兼性厭氧微生物,在有氧條件下,酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,大量繁殖,把糖分解成二氧化碳和水;在無(wú)氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精,酵母菌最適宜生長(zhǎng)繁殖的溫度范圍是18~25℃;生產(chǎn)中是否有酒精的產(chǎn)生,可用酸性重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn),該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。【詳析】(1)酵母菌屬于兼性厭氧型微生物,有氧條件下大量繁殖,無(wú)氧條件下產(chǎn)生酒精和CO2,酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸的反應(yīng)式為C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量,無(wú)氧呼吸發(fā)生在酵母菌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。(2)發(fā)酵過(guò)程中,酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸,其產(chǎn)物有CO2,故發(fā)酵一段時(shí)間后,觀察甲發(fā)酵罐中液體不再有氣泡冒出,說(shuō)明發(fā)酵完畢。(3)因?yàn)槔w維素酶、果膠酶分解細(xì)胞壁,有利于榨汁處理過(guò)程中色素釋放,故“葡萄→葡萄汁”的過(guò)程中輔以纖維素酶、果膠酶處理可提高出汁率。(4)圖示甲罐的液面位置表示加入葡萄汁的量,這樣可為酵母菌大量有氧呼吸提供適量的氧氣,使酵母菌可以大量繁殖,還可以防止由于發(fā)酵過(guò)程中氣體的產(chǎn)生而導(dǎo)致發(fā)酵液溢出。(5)在氧氣充足、糖源不足的條件下,醋酸菌可以將酒精轉(zhuǎn)化為乙醛,進(jìn)而轉(zhuǎn)化為乙酸(醋酸)。果酒發(fā)酵轉(zhuǎn)為果醋發(fā)酵時(shí),除了要接種醋酸菌外,還要將發(fā)酵溫度提高至30~35℃,并通入無(wú)菌空氣。(6)甲罐連接的雙U型管中一側(cè)注滿(mǎn)水可以防止空氣、雜菌進(jìn)入,便于排氣減壓。(7)酒精和酸性的重鉻酸鉀反應(yīng)溶液由橙色變成灰綠色,因此櫻桃果酒制作是否成功,發(fā)酵后可在酸性條件下用重鉻酸鉀溶液來(lái)鑒定。20.抗癌藥物紫杉醇是從紅豆杉樹(shù)皮中提取出來(lái)的生物活性物質(zhì),與化學(xué)藥抗癌原理不同的是,紫杉醇能與細(xì)胞內(nèi)的微管蛋白結(jié)合,使微管在細(xì)胞內(nèi)大量積累,這些微管的積累導(dǎo)致細(xì)胞停留在G2期和M期直至死亡。由于紅豆杉生長(zhǎng)緩慢,資源短缺,生長(zhǎng)過(guò)程中易發(fā)生立枯病、莖腐病、白絹病、疫霉病等病害,使紫杉醇的提取受到了極大限制??蒲腥藛T正試圖通過(guò)多種方法提高紫杉醇的產(chǎn)量。I、利用組織培養(yǎng)技術(shù):有研究數(shù)據(jù)表明,通過(guò)下圖所示的方法來(lái)生產(chǎn)紫杉醇,組培細(xì)胞中的紫杉醇含量是野生成年紅豆杉樹(shù)皮中含量的12倍。組織培養(yǎng)已成為擴(kuò)大紫杉醇來(lái)源的一條重要途徑。Ⅱ、利用微生物發(fā)酵途徑植物體內(nèi)普遍存在內(nèi)生真菌,它們可以產(chǎn)生與宿主相同或相似的生物活性物質(zhì)。近年來(lái),研究人員從紅豆杉樹(shù)皮中分離到了能產(chǎn)生抗癌藥物紫杉醇的內(nèi)生真菌。這一發(fā)現(xiàn)為解決紅豆杉資源短缺,尋找紫杉醇供應(yīng)問(wèn)題,開(kāi)辟了一條用微生物發(fā)酵生產(chǎn)的新途徑。具體過(guò)程如下:(1)紫杉醇屬于紅豆杉屬植物體產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。紫杉醇能促進(jìn)微管聚合并使之穩(wěn)定,阻礙了紡錘體的形成,從而阻礙腫瘤細(xì)胞的分裂,直至死亡。(2)外植體常選取紅豆杉植物的莖尖,其優(yōu)點(diǎn)是(寫(xiě)出兩點(diǎn))。圖中①過(guò)程稱(chēng)為。若再利用上圖中愈傷組織進(jìn)一步獲得紅豆杉植株的過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)愈傷組織只分裂而不能分化出芽和根,則最可能的原因是。(3)菌株的分離與純化取紅豆杉的老樹(shù)皮,后,削去表層從內(nèi)部切取小塊,斜插入半固體培養(yǎng)基中。28℃培養(yǎng)3—7d,挑取向培養(yǎng)基基質(zhì)生長(zhǎng)的菌絲體于固體培養(yǎng)基中,純化2—3次。培養(yǎng)時(shí),通常會(huì)添加一定濃度的青霉素和鏈霉素,主要作用是。(4)菌株的鑒定:將分離的菌株置于固體培養(yǎng)基上,經(jīng)培養(yǎng)后觀察?!即鸢浮?1)次生(2)細(xì)胞分化程度低,全能性高,容易誘導(dǎo)形成愈傷組織;莖尖中含病毒極少,甚至無(wú)病毒脫分化細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的用量比例不合適(或植物激素比例不合適)(3)(表面)消毒抑制細(xì)菌生長(zhǎng)(4)(4)菌落形態(tài)〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術(shù):(1)過(guò)程:離體的植物組織,器官或細(xì)胞(外植體)→愈傷組織→胚狀體→植株(新植體);(2)原理:植物細(xì)胞的全能性;(3)條件:①細(xì)胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等);②一定的營(yíng)養(yǎng)(無(wú)機(jī)、有機(jī)成分)和植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素);(4)植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用:植物繁殖的新途徑(包括微型繁殖,作物脫毒、人工種子等)、作物新品種的培育(單倍體育種、突變體的利用)、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn)?!驹斘觥浚?)次生代謝物質(zhì)是生物體產(chǎn)生的一大類(lèi)并非生長(zhǎng)發(fā)育所必需的小分子有機(jī)化合物。紫杉醇是紅豆杉屬植物產(chǎn)生的一種復(fù)雜的次生代謝產(chǎn)物。(2)植物生長(zhǎng)點(diǎn)附近的病毒濃度很低甚至無(wú)病毒。莖尖屬于植物生長(zhǎng)點(diǎn),故取一定大小的莖尖進(jìn)行培養(yǎng),再生的植株有可能不帶病毒,從而獲得脫病毒苗,再用脫病毒苗進(jìn)行繁殖,則種植的作物就不會(huì)或極少發(fā)生病毒;另外莖尖細(xì)胞分裂能力強(qiáng),全能性高,容易誘導(dǎo)成愈傷組織。離體條件下已分化的細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo),失去特有的結(jié)構(gòu)和功能,重新獲得分裂能力,稱(chēng)為脫分化(去分化),脫分化的細(xì)胞不斷分裂增殖,產(chǎn)生無(wú)組織結(jié)構(gòu)、松散的薄壁細(xì)胞團(tuán),稱(chēng)為愈傷組織;圖中①過(guò)程稱(chēng)為脫分化或去分化。植物生長(zhǎng)素類(lèi)和細(xì)胞分裂素類(lèi)物質(zhì)是植物組織培養(yǎng)不可缺少的兩類(lèi)調(diào)節(jié)物質(zhì),兩者的濃度和配比在脫分化和再分化中起著關(guān)鍵作用;生長(zhǎng)素類(lèi)和細(xì)胞分裂素類(lèi)物質(zhì)的比值大時(shí),有利于根的形成;比值小時(shí),則促進(jìn)芽的形成;生長(zhǎng)素類(lèi)和細(xì)胞分裂素類(lèi)物質(zhì)的比值相同時(shí),有利于愈傷組織的形成。若再利用上圖中愈傷組織進(jìn)一步獲得紅豆杉植株的過(guò)程中,發(fā)現(xiàn)愈傷組織只分裂而不能分化出芽和根,則最可能的原因是細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的用量比例不合適。(3)植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,需要對(duì)外植體進(jìn)行消毒處理,故取紅豆杉的老樹(shù)皮消毒后,削去表層從內(nèi)部切取小塊,斜插入半固體培養(yǎng)基中。青霉素和鏈霉素屬于抗生素,可以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。(4)平板屬于固體培養(yǎng)基,可以讓人們清楚地觀察到在培養(yǎng)基表面由單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖成的菌落,因此常用于微生物的分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)等。不同的菌株形成的菌落不同,將分離的菌株置于固體培養(yǎng)基上,經(jīng)培養(yǎng)后觀察菌落形態(tài)。21.抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)是一類(lèi)通過(guò)連接頭將細(xì)胞毒性藥物連接到單克隆抗體的靶向生物藥劑,能對(duì)靶向細(xì)胞進(jìn)行選擇性殺傷。第三代ADC具有更低的偶聯(lián)脫落速度,更高的藥物活性以及低抗原水平下的高細(xì)胞活性。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。(1)ADC藥物所需抗體分子的基本要求是優(yōu)先結(jié)合靶細(xì)胞上的抗原,從而將細(xì)胞毒藥物濃縮在腫瘤部位,即單克隆抗體要具有的特點(diǎn)。藥物在靶細(xì)胞內(nèi)釋放并起作用,同時(shí)誘導(dǎo)破裂,加速了癌細(xì)胞的凋亡。(2)我國(guó)科興及北京生物兩款新冠滅活疫苗均使用Vero細(xì)胞(非洲綠猴腎細(xì)胞的傳代細(xì)胞系)進(jìn)行病毒擴(kuò)增培養(yǎng)(見(jiàn)圖)。
①動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有多種,其中是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。Vero細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)在培養(yǎng)箱中進(jìn)行,箱內(nèi)的氣體環(huán)境條件為。②Vero細(xì)胞的傳代培養(yǎng)過(guò)程中需要使用酶使細(xì)胞分散,并在合成培養(yǎng)基中加入等天然成分。此外,在培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,目的是。③將已對(duì)新冠病毒發(fā)生免疫的B淋巴細(xì)胞和Vero細(xì)胞系獲得雜交細(xì)胞,再經(jīng)過(guò)篩選、克隆化培養(yǎng)和檢測(cè),獲得產(chǎn)生特定抗體的,用以生產(chǎn)單克隆抗體?!即鸢浮?1)特異性強(qiáng)、靈敏度高溶酶體(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)5%CO2、95%空氣胰蛋白(或膠原蛋白)血清(血漿)防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害選擇培養(yǎng)基專(zhuān)一抗體雜交瘤細(xì)胞〖祥解〗1、單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng),之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞;誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行抗體檢測(cè),篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿(mǎn)足以下條件:①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境;②營(yíng)養(yǎng);③溫度:36.5℃±0.5℃;④氣體環(huán)境:95%空氣+5%CO2?!驹斘觥浚?)單克隆抗體能夠優(yōu)先結(jié)合靶細(xì)胞上的抗原,從而將細(xì)胞毒藥物濃縮在腫瘤部位,即單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn),此外還可大量制備;細(xì)胞凋亡與溶酶體破裂,釋放水解酶使靶細(xì)胞裂解并釋放有關(guān)。(2)①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能夠得到多個(gè)細(xì)胞,是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ);Vero細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)在培養(yǎng)箱中進(jìn)行,箱內(nèi)的氣體環(huán)境條件為95%空氣和5%CO2,其中二氧化碳可維持培養(yǎng)液的pH。②根據(jù)酶的專(zhuān)一性可知,在傳代培養(yǎng)過(guò)程中可利用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行處理,使細(xì)胞分散開(kāi);為保證細(xì)胞正常生長(zhǎng),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)還需在培養(yǎng)基中加入動(dòng)物血清等天然成分;在培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,目的是清除代謝廢物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。③將已對(duì)新冠病毒發(fā)生免疫的B淋巴細(xì)胞和Vero細(xì)胞系獲得雜交細(xì)胞,再經(jīng)過(guò)培養(yǎng)基篩選(該培養(yǎng)基上未融合的細(xì)胞和同種融合的細(xì)胞都死亡)、克隆化培養(yǎng)和專(zhuān)一抗體(依據(jù)抗原-抗體特異性結(jié)合的原理)檢測(cè),獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,用以生產(chǎn)單克隆抗體。22.杜泊羊以其生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn),成為受廣大消費(fèi)者喜歡的綿羊品種??蒲泄ぷ髡咄ㄟ^(guò)胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)采集的精子需要經(jīng)過(guò)后才能參與受精,用處理雌性杜泊羊可以促進(jìn)排卵,如果卵子來(lái)自卵巢,則需要培養(yǎng)至才能參與受精。(2)圖中①表示,②過(guò)程的實(shí)質(zhì)是。除了圖中技術(shù)以外還有(答出2條即可)技術(shù),需要進(jìn)行②操作才能獲得后代。(3)進(jìn)行②過(guò)程需要對(duì)雌性杜泊羊和當(dāng)?shù)仄胀ňd羊進(jìn)行處理,通常選期進(jìn)行②操作。(4)為了提高早期胚胎的利用率,可以對(duì)早期胚胎進(jìn)行,在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行此操作時(shí),要注意將均等操作?!即鸢浮?1)獲能處理促性腺激素MⅡ期(2)體外受精早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)基因、核移植(3)同期發(fā)情桑葚胚或囊胚(4)胚胎分割內(nèi)細(xì)胞團(tuán)〖祥解〗體外受精主要包括:卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精,(1)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng):主要方法是用促性腺激素處理,使其超數(shù)排卵,然后,從輸卵管中沖取卵子.第二種方法是從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞或直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。(2)精子的采集和獲能:收集精子的方法:假陰道法、手握法和電刺激法,對(duì)精子進(jìn)行獲能處理:包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。(3)受精:在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^(guò)程?!驹斘觥浚?)體外受精主要包括:精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、受精,采集的精子需要經(jīng)過(guò)獲能處理后才能參與受精,對(duì)精子進(jìn)行獲能處理包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。常用促性腺激素處理,使雌性杜泊羊超數(shù)排卵,如果卵子來(lái)自卵巢,則需要培養(yǎng)至MⅡ期才能參與受精。(2)圖中①是精子和卵細(xì)胞結(jié)合,形成受精卵,表示體外受精。②過(guò)程是胚胎移植,胚胎移植的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。除了體外受精獲得胚胎需要②胚胎移植操作才能獲得后代,通過(guò)核移植技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得的胚胎也需要胚胎移植操作才能獲得后代。(3)②過(guò)程是胚胎移植,在進(jìn)行胚胎移植時(shí),需要對(duì)雌性杜泊羊和當(dāng)?shù)仄胀ňd羊進(jìn)行同期發(fā)情處理,這能為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。胚胎移植需要根據(jù)胚胎發(fā)育情況來(lái)確定,通常選選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚進(jìn)行②胚胎移植操作。(4)胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等,經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù),為了提高早期胚胎的利用率,可以對(duì)早期胚胎進(jìn)行胚胎分割。進(jìn)行胚胎分割時(shí),應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚.對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割,否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。23.1965年中國(guó)科學(xué)家人工合成了具有生物活性的結(jié)晶牛胰島素,摘取了人工合成蛋白質(zhì)的桂冠。此后科學(xué)家又提出了利用基因工程改造大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素的兩種方法:“AB”法是根據(jù)胰島素A、B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段,利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素;“BCA”法是利用胰島B細(xì)胞中的mRNA得到胰島素基因,利用工程菌獲得胰島素。這兩種方法使用同一種質(zhì)粒作為載體。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)下圖是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素過(guò)程中使用的質(zhì)粒及目的基因的部分結(jié)構(gòu)。在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)最好添加限制酶的識(shí)別序列,選擇依據(jù)是。(2)目前,科學(xué)家已通過(guò)將B鏈第28位氨基酸—脯氨酸(密碼子為CCU)替換為天冬氨酸(密碼子為GAU),有效抑制了胰島素的聚合,研發(fā)出速效胰島素類(lèi)似物產(chǎn)品。在改造用BCA法獲得的胰島素基因時(shí),可運(yùn)用大引物PCR進(jìn)行定點(diǎn)突變,相關(guān)原理如下圖所示。為保證有效抑制胰島素的聚合,進(jìn)行第一次PCR時(shí)所用的突變上游引物的合理設(shè)計(jì)
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