HPLC應(yīng)用與維護(hù)課件

HPLC應(yīng)用條件與維護(hù)技術(shù)魏少勇paul@廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司

GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd目錄1、液相色譜柱注意要點(diǎn)2、如何延長色譜柱壽命3、如何保護(hù)色譜柱廣州菲羅門科學(xué)儀器有限公司

GuangzhouFLMScientificInstrumentCo.,Ltd液相色譜柱注意要點(diǎn)新柱子的接收確認(rèn)色譜柱是您訂購的嗎？規(guī)格是否正確？相正確與否？在標(biāo)準(zhǔn)條件下使用標(biāo)準(zhǔn)品測試色譜柱的性能Phenomenex

每一根色譜柱都是經(jīng)過單獨(dú)測試的管路和接頭色譜性能取決于整個(gè)系統(tǒng)而不僅僅是色譜柱本身管路和接頭會(huì)影響系統(tǒng)的死體積系統(tǒng)死體積會(huì)導(dǎo)致：峰展寬峰變形柱效降低靈敏度下降

液相色譜柱注意要點(diǎn)

管路選擇管路類型和內(nèi)徑泵到進(jìn)樣器較大內(nèi)徑管路（0.010“)比較合適進(jìn)樣器到色譜柱最小化管路內(nèi)徑典型使用的是（0.007“)和（0.005“)內(nèi)徑色譜柱到檢測器最小化管路內(nèi)徑較大內(nèi)徑會(huì)減小已獲得的分離度典型使用的是（0.007“)和（0.005“)內(nèi)徑檢測器到廢液口較大內(nèi)徑比較合適（>=0.010“)液相色譜柱注意要點(diǎn)

接頭不是所有色譜柱的端尾接頭都是一樣的使用不同種類/形狀的卡套不同長度的活塞（0.080“）或（0.130“)活塞長度非常重要管路必須與色譜柱的塞板齊平如果管路與色譜柱的塞板不能齊平會(huì)導(dǎo)致死體積的增加或流動(dòng)相的泄漏手緊接頭液相色譜柱注意要點(diǎn)液相色譜柱注意要點(diǎn)流動(dòng)相使用新的色譜柱時(shí),至少需用10-30柱體積HPLC級試劑使用所有的流動(dòng)相前必須先過濾并脫氣確認(rèn)流動(dòng)相中緩沖鹽的溶解性確認(rèn)樣品在流動(dòng)相中的溶解性液相色譜柱注意要點(diǎn)

其它注意事項(xiàng)pH值保持在2-8之間(A型硅膠)或1.5-10.0之間(B型硅膠)低pH值會(huì)水解你的固定相高pH值會(huì)溶解硅膠背壓必須保持在3500psi以下避免壓力的突變液相色譜柱注意要點(diǎn)保養(yǎng)與保存切忌用緩沖鹽保存色譜柱用5倍柱體積不含緩沖溶液的流動(dòng)相來沖洗，除去緩沖鹽反相柱儲(chǔ)存液：65/35有機(jī)溶液/水正相柱儲(chǔ)存液：異丙醇或正已烷離子交換儲(chǔ)存液：甲醇SEC或Diol儲(chǔ)存液:0.05%NaN3水溶液或10%甲醇液相色譜柱注意要點(diǎn)如何延長色譜柱壽命

使用合適的流動(dòng)相注射樣品前的處理經(jīng)常監(jiān)測背壓典型背壓（在65/35的乙腈/水)150*4.6mm3um硅膠典型背壓:980psi150*4.6mm5um硅膠典型背壓:710psi250*4.6mm5um硅膠典型背壓:1180psi使用合適的溶劑保存色譜柱如何延長色譜柱壽命及時(shí)清洗色譜柱(使用Phenomenex色譜柱時(shí)，我們建議反沖)反相柱用下列10倍柱體積的溶劑清洗:95%水/5%ACNTHF(可省略)95%ACN/5%水流動(dòng)相正相柱用下列10倍柱體積的溶劑清洗:正已烷二氯甲烷異丙醇二氯甲烷流動(dòng)相其它類型色譜柱的沖流方法請聯(lián)系廣州FLM公司如何保護(hù)色譜柱

保護(hù)色譜柱的原因延長色譜柱的壽命減少系統(tǒng)損失長期來看，可以節(jié)省時(shí)間和費(fèi)用得到最優(yōu)化的結(jié)果如何保護(hù)色譜柱流動(dòng)相進(jìn)口端使用過濾網(wǎng)在線過濾使用保護(hù)柱對流動(dòng)相進(jìn)行脫氣對所有樣品進(jìn)行過濾處理如何保護(hù)色譜柱保護(hù)柱優(yōu)點(diǎn)：去除強(qiáng)保留雜質(zhì)延長色譜柱壽命保持高柱效降低分析成本如何保護(hù)色譜柱SecurityGuard通用的保護(hù)柱芯系統(tǒng)直接與色譜柱相連，減少死體積100%穩(wěn)定，生物兼容性流徑，對金屬敏感樣品適用專利設(shè)計(jì)使用簡單價(jià)格適中固定相選擇多樣化如何保護(hù)色譜柱如何保護(hù)色