HLA-B27檢測(cè)方法及意義

2/2HLA-B27檢測(cè)方法及意義HLA抗原是人類主要組織相容性復(fù)合體的表達(dá)產(chǎn)物，在免疫系統(tǒng)中主要負(fù)責(zé)細(xì)胞之間的相互識(shí)別和誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的功能。根據(jù)HLA抗原結(jié)構(gòu)，功能與組織分布的不同，可分為三類：Ⅰ類分子為HLA-A、-B、-C系列抗原，廣泛分布于各組織有核細(xì)胞表面，包括血小板和網(wǎng)織紅細(xì)胞，成熟的紅細(xì)胞一般不含HLA抗原；Ⅱ類分子為HLA-D/DR、-DP、DQ系列抗原，主要在B細(xì)胞和抗原提呈細(xì)胞上表達(dá)，這兩類抗原都與移植有關(guān)，其中Ⅱ類抗原更為重要；Ⅲ類分子為補(bǔ)體成分。

近年來(lái)研究HLA與疾病相關(guān)性的資料表明，某些疾病的發(fā)生率與一些特殊型別的HLA檢出率有關(guān)，這些病人大多是發(fā)病機(jī)理不明并伴有免疫功能異常和有遺傳傾向性的疾病，因此，分析HLA抗原表達(dá)情況不僅有助于了解發(fā)病機(jī)理，對(duì)于疾病的診斷、預(yù)防和預(yù)后判斷都有重要意義。

HLA-B27基因?qū)儆冖裥蚆HC基因，基本上表達(dá)在機(jī)體中所有有核的細(xì)胞上，尤其是淋巴細(xì)胞的表面有豐富的含量。早在二十多年前，人們就已發(fā)現(xiàn)HLA-B27抗原的表達(dá)與強(qiáng)直性脊椎炎有高度相關(guān)性，超過(guò)90%的強(qiáng)直性脊椎炎患者其HLA-B27抗原表達(dá)為陽(yáng)性，普通人群中僅5-10%的為陽(yáng)性，而強(qiáng)直性脊椎炎由于癥狀與許多疾病相似而難以確診，因此HLA-B27的檢測(cè)在病中的診斷中有著重要意義。在脊椎性關(guān)節(jié)病這一類的疾病中除了強(qiáng)直性脊椎炎以外，還有許多其它的疾病與HLA-B27抗原的表達(dá)有著或多或少的相關(guān)性，因此HLA-B27的檢測(cè)在這些疾病的診斷中是一個(gè)非常有價(jià)值的指標(biāo)。HLA-B27的檢測(cè)方法常規(guī)檢測(cè)HLA抗原的方法為Terasaki

和McClelland提出的微量細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn).

單克隆抗體和熒光素的開(kāi)發(fā)使得流式細(xì)胞儀在各個(gè)領(lǐng)域得到空前的發(fā)展，多參數(shù)同時(shí)測(cè)定使得流式細(xì)胞術(shù)得以快速，靈敏，特異地檢測(cè)某一特定細(xì)胞群中某一特異性抗原的表達(dá)。與傳統(tǒng)方法相比，用流式細(xì)胞儀來(lái)檢測(cè)HLA-B27的表達(dá)，靈敏度可達(dá)100%，特異性達(dá)97.4%,陰性結(jié)果強(qiáng)直性脊柱炎的排除率為99.9%；結(jié)果穩(wěn)定，樣本之間，不同儀器之間，不同實(shí)驗(yàn)室之間可重復(fù)性高。測(cè)定值高于參比值者為陽(yáng)性，反之為陰性。HLA-B27與遺傳的關(guān)系

遺傳因素在AS的發(fā)病中具有重要作用。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，AS病人HLA-B27陽(yáng)性率高達(dá)90%～96%，而強(qiáng)直性脊柱炎普通人群HLA-B27陽(yáng)性率僅4%～9%；HLA-B27陽(yáng)性者AS發(fā)病率約為10%～20%，而普通人群發(fā)病為1‰～2‰，相差約100倍。有報(bào)道，AS一組親屬患AS的危險(xiǎn)性比一般人高出20～40倍，國(guó)內(nèi)調(diào)查AS一級(jí)親屬患病率為24.2%，比正常人群高出120倍。HLA-B27陰性健康者，親屬發(fā)生AS的機(jī)率遠(yuǎn)比HLA-B27陽(yáng)性AS病人親屬低。所有這些說(shuō)明HLA-B27在AS發(fā)病中是一個(gè)重要因素。但是應(yīng)當(dāng)看到，一方面HLA-B27陽(yáng)性者并不全部都發(fā)生脊柱關(guān)節(jié)病，另一方面約有5%～20%脊柱關(guān)節(jié)病病人檢測(cè)HLA-B27呈陰性，提示除遺傳因素外，還有其他因素影響AS的發(fā)病，因此HLA-B27在AS表達(dá)中是一個(gè)重要的遺傳因素，但并不是影響本病的唯一因素。有幾種假設(shè)可以解釋HLA-B27與脊柱關(guān)節(jié)病的關(guān)節(jié)：①、HLA-B27充當(dāng)一種感染因子的受體部位；②、HLA-B27是免疫應(yīng)答基因的標(biāo)志物，決定對(duì)環(huán)境激發(fā)因素的易感性；③、HLA-B27可與外來(lái)抗原交叉反應(yīng)，從而誘導(dǎo)產(chǎn)生對(duì)外來(lái)抗原的耐受性；

④、HLA-B27增強(qiáng)中性白細(xì)胞活動(dòng)性。籍助單克隆抗體、細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞、免疫電泳及限制片段長(zhǎng)度多形態(tài)法(restrictionfragmentlengthpolymorphism)，目前已確定HLA-B27約有7種或8種亞型。HLA-B27陽(yáng)性的健康者與脊柱病病人可能有遺傳差別，例如所有HLA-B27個(gè)體都有一個(gè)恒定的HLA-B27M1抗原決定簇，針對(duì)此抗原決定簇的抗體可與HLA-B27交叉反應(yīng)。多數(shù)HLA-B27分子還有M2抗原決定簇。HLA-B27M2陰性分子似乎比其他HLA-B27亞型與AS有更強(qiáng)的聯(lián)系，尤其是亞洲人，而HLA-B27M2陽(yáng)性亞型可能對(duì)Reiter綜合征的易感性增強(qiáng)?，F(xiàn)已