（高清版）GB 5009.11-2024 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定2024-02-08發(fā)布2024-08-08實(shí)施Ⅰ本標(biāo)準(zhǔn)代替GB5009.11—2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定》。本標(biāo)準(zhǔn)與GB5009.11—2014相比,主要變化如下:第一篇食品中總砷的測(cè)定—增加了石墨爐原子吸收光譜法為第三法;—?jiǎng)h除了食品中總砷測(cè)定的銀鹽法;—修改了氫化物發(fā)生原子熒光光譜法為第一法,修改了試樣消解方法;—修改了電感耦合等離子體質(zhì)譜法為第二法。第二篇食品中無機(jī)砷的測(cè)定—增加了第一法、第二法中稻米試樣中無機(jī)砷提取的微波輔助提取法;—修改了第一法、第二法的適用范圍、檢出限、定量限、精密度和分析結(jié)果表述;—修改了第一法、第二法中試樣的預(yù)處理方法、提取方法和分離測(cè)定條件。1食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)第一篇規(guī)定了食品中總砷的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)第一篇第一法、第二法適用于食品中總砷的測(cè)定,第三法適用于食品(乳粉和調(diào)制乳粉、油脂及其制品、調(diào)味品、特殊膳食用食品除外)中總砷的測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)第二篇規(guī)定了食品中無機(jī)砷的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)第二篇適用于谷物及其制品、水產(chǎn)動(dòng)物及其制品、食用菌及其制品、油脂及其制品、調(diào)味品、嬰幼兒輔助食品、藻類及其制品中無機(jī)砷的測(cè)定。第一篇食品中總砷的測(cè)定第一法氫化物發(fā)生原子熒光光譜法2原理試樣經(jīng)消解處理后,加入硫脲使五價(jià)砷預(yù)還原為三價(jià)砷,再加入硼氫化鈉或硼氫化鉀使三價(jià)砷還原生成砷化氫,由氬氣載入石英原子化器中分解為原子態(tài)砷,在砷空心陰極燈的發(fā)射光激發(fā)下產(chǎn)生原子熒光,其熒光強(qiáng)度在固定條件下與被測(cè)液中的砷濃度成正比,外標(biāo)法定量。3試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為優(yōu)級(jí)純,水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。3.1試劑3.1.1氫氧化鈉(NaOH)。3.1.2氫氧化鉀(KOH)。3.1.3硼氫化鉀(KBH4):分析純。3.1.4硫脲(CH4N2S):分析純。3.1.5鹽酸(HCl)。3.1.6硝酸(HNO3)。3.1.7硫酸(H2SO4)。3.1.8高氯酸(HClO4)。3.1.9過氧化氫(H2O2):30%。3.1.10硝酸鎂[Mg(NO3)2·6H2O]:分析純。3.1.11氧化鎂(MgO):分析純。3.1.12抗壞血酸(C6H8O6):分析純。23.2試劑配制3.2.1氫氧化鉀溶液(5g/L):稱取5.0g氫氧化鉀,溶于水并稀釋至1000mL,混勻。3.2.2硼氫化鉀溶液(20g/L):稱取20.0g硼氫化鉀,溶于1000mL5g/L氫氧化鉀溶液中,混勻。臨用現(xiàn)配。3.2.3硫脲+抗壞血酸溶液:稱取10.0g硫脲,加約80mL水,加熱溶解,待冷卻后加入10.0g抗壞血酸,稀釋至100mL,混勻。臨用現(xiàn)配。3.2.4氫氧化鈉溶液(100g/L):稱取10.0g氫氧化鈉,溶于水并稀釋至100mL,混勻。3.2.5硝酸鎂溶液(150g/L):稱取15.0g硝酸鎂,溶于水并稀釋至100mL,混勻。3.2.6鹽酸溶液(1+1):量取100mL鹽酸,緩緩倒入100mL水中,混勻。3.2.7硫酸溶液(1+9):量取100mL硫酸,緩緩倒入900mL水中,混勻。3.2.8硝酸溶液(2+98):量取20mL硝酸,緩緩倒入980mL水中,混勻。注:本方法也可用硼氫化鈉(20g/L)作為還原劑:稱取20g硼氫化鈉,溶于1000mL5g/L氫氧化鈉溶液中,混勻?？筛鶕?jù)儀器的靈敏度調(diào)整硼氫化鉀或硼氫化鈉溶液的濃度。臨用現(xiàn)配。3.3標(biāo)準(zhǔn)品三氧化二砷(As2O3,CAS號(hào):1327-53-3)標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥99.5%。3.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.4.1砷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L,以As計(jì)):準(zhǔn)確稱取于100℃干燥2h的三氧化二砷0.0132g,加1mL氫氧化鈉溶液(100g/L)和少量水溶解,轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中,加入適量鹽酸調(diào)整其酸度近中性,用水稀釋至刻度。于2℃~8℃冰箱中避光保存,有效期1年?；蚪?jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液。3.4.2砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L,以As計(jì)):準(zhǔn)確吸取1.00mL砷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L)于100mL容量瓶中,用硝酸溶液(2+98)稀釋定容至刻度。于2℃~8℃冰箱中避光保存,有效期3個(gè)月。3.4.3砷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液:取25mL容量瓶或比色管7支,依次準(zhǔn)確加入砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L)2.0μg/L、4.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、60.0μg/L和120.0μg/L),各加硫酸溶液(1+9)12.5mL,硫脲+抗壞血酸溶液2mL,補(bǔ)加水至刻度,混勻,放置30min后測(cè)定。臨用現(xiàn)配。注:可根據(jù)儀器的靈敏度及樣品中砷的實(shí)際含量微調(diào)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中砷的質(zhì)量濃度范圍。4儀器和設(shè)備4.1原子熒光光譜儀。4.2電子天平:感量為0.01mg、0.1mg和1mg。4.3勻漿機(jī)。4.4高速粉碎機(jī)。4.5電熱消解裝置:控溫電熱板或石墨消解儀,最高溫度不低于350℃,控溫精度±5℃。4.6馬弗爐。4.7恒溫干燥箱:控溫精度±2℃。4.8微波消解系統(tǒng):配有聚四氟乙烯消解內(nèi)罐。4.9壓力消解罐。注:玻璃器皿及聚四氟乙烯消解內(nèi)罐均需以(1+4)的硝酸溶液浸泡24h,用自來水反復(fù)沖洗,最后用水沖洗干凈。35分析步驟5.1試樣制備5.1.1.1干樣谷物、干食用菌、水產(chǎn)動(dòng)物干制品等樣品,取可食部分粉碎均勻;對(duì)于固體乳制品、面粉、嬰幼兒谷類輔助食品等呈均勻狀的粉末樣品,搖勻。5.1.1.2鮮樣蔬菜、水果、水產(chǎn)動(dòng)物、鮮食用菌、肉類及蛋類等樣品,洗凈晾干,取可食部分勻漿至均質(zhì)。5.1.1.3速凍及罐裝食品經(jīng)解凍的速凍食品,取可食部分粉碎至均勻;罐裝食品粉碎或均漿至均勻。5.1.2液體樣品飲料、調(diào)味品、乳及其制品、油脂及其制品等樣品勻漿或均質(zhì)。5.1.3半固體樣品攪拌均勻。5.2試樣消解5.2.1濕法消解固體試樣稱取0.5g~2.5g(精確至0.001g),液體試樣稱取5.0g~10.0g(精確至0.001g)于消解瓶或消解管中,加20mL硝酸,4mL高氯酸,1.25mL硫酸,放置過夜。次日,于120℃~200℃逐級(jí)升溫加熱消解,若消解液處理至5mL左右時(shí)仍有未分解物質(zhì)或色澤變深,補(bǔ)加硝酸5mL~10mL,再消解至2mL左右,如此反復(fù)2次~3次,注意避免炭化,繼續(xù)加熱消解至消解液1mL左右,呈無色澄清,且消解瓶或消解管中充滿白煙(對(duì)于有機(jī)砷較高的水產(chǎn)動(dòng)物及其制品、食用菌及其制品、魚油及其制品、磷蝦油及其制品、藻類及其制品等樣品,將消解溫度升至280℃~300℃繼續(xù)加熱消解至消解液為0.5mL左右,呈無色澄清,且消解瓶或消解管中充滿白煙)。冷卻后,沿消解容器壁緩慢加水約10mL,再蒸發(fā)至消解瓶或消解管充滿白煙。冷卻,用水將消解液轉(zhuǎn)入25mL容量瓶或比色管中,加入2mL硫脲+抗壞血酸溶液,用水定容至刻度,混勻,放置30min,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。5.2.2干灰化法固體試樣稱取1.0g~2.5g(精確至0.001g),液體試樣(油脂樣品除外)稱取4.0g(精確至0.001g),置于50mL~100mL坩堝中。加10mL硝酸鎂溶液(150g/L)混勻,低熱蒸干,將1g氧化鎂覆蓋在干渣上(對(duì)于油脂樣品稱取1.00g于50mL~100mL坩堝中,直接加入0.2g氧化鎂覆蓋在油脂上),于電爐上炭化至無黑煙,移入550℃馬弗爐灰化4h。取出放冷,小心加入5mL~10mL鹽酸溶液(1+1)以中和氧化鎂并溶解灰分,轉(zhuǎn)入25mL容量瓶或比色管,向容量瓶或比色管中加入2mL硫脲+抗壞血酸溶液,另用硫酸溶液(1+9)分次洗滌坩堝后,合并洗滌液并定容至刻度,混勻,放置30min,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。45.2.3微波消解法固體試樣和油脂及其制品試樣稱取0.2g~0.8g(精確至0.001g),含水分較多的試樣或液體試樣稱取1.0g~3.0g(精確至0.001g)于消解罐中,加入5mL~8mL硝酸,放置30min以上。對(duì)于肉類、油脂等難消解的樣品再加入0.5mL~1mL過氧化氫,蓋好安全閥,將消解罐放入微波消解系統(tǒng)中。根據(jù)不同類型的樣品,設(shè)置適宜的微波消解程序(見附錄A表A.1),按相關(guān)步驟進(jìn)行消解,消解結(jié)束后,于135℃~145℃趕酸至1mL~2mL。將消化液轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶或比色管,用少量硫酸溶液(1+9)洗滌消解罐3次,合并洗滌液于容量瓶或比色管中并加入2mL硫脲+抗壞血酸溶液,用硫酸溶液(1+9)定容至刻度,混勻,放置30min,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。注:微波消解法不適用有機(jī)砷含量較高的水產(chǎn)動(dòng)物及其制品、食用菌及其制品、魚油、磷蝦油及其制品、水產(chǎn)調(diào)味品、藻類及其制品等基質(zhì)復(fù)雜的樣品。5.2.4壓力罐消解法固體試樣和油脂及其制品試樣稱取0.2g~1.0g(精確至0.001g),鮮樣或液體試樣稱取1.0g~5.0g(精確至0.001g)于消解內(nèi)罐中,加入5mL硝酸浸泡過夜。蓋好內(nèi)蓋,旋緊不銹鋼外套,放入恒溫干燥箱,140℃~160℃保持3h~4h,自然冷卻至室溫,然后緩慢旋松不銹鋼外套,將消解內(nèi)罐取出,放在控溫電熱板上135℃~145℃趕酸至1mL~2mL。將消化液轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶或比色管,用少量硫酸溶液(1+9)洗滌消解罐3次,合并洗滌液于容量瓶或比色管中并加入2mL硫脲+抗壞血酸溶液,用硫酸溶液(1+9)定容至刻度,混勻,放置30min,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。注:壓力罐消解法不適用有機(jī)砷含量較高的水產(chǎn)動(dòng)物及其制品、食用菌及其制品、魚油、磷蝦油及其制品、水產(chǎn)調(diào)味品、藻類及其制品等基質(zhì)復(fù)雜的樣品。5.3儀器參考條件負(fù)高壓:260V;砷空心陰極燈電流:50mA~80mA;載氣:氬氣;載氣流速:500mL/min;屏蔽氣流速:800mL/min;測(cè)量方式:熒光強(qiáng)度;讀數(shù)方式:峰面積。5.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作儀器預(yù)熱穩(wěn)定后,將試劑空白、標(biāo)準(zhǔn)系列溶液依次引入儀器進(jìn)行原子熒光強(qiáng)度的測(cè)定。以原子熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo),砷質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程。5.5試樣溶液的測(cè)定相同條件下,將空白溶液和樣品溶液分別引入儀器進(jìn)行測(cè)定。根據(jù)回歸方程計(jì)算出樣品中砷元素的質(zhì)量濃度。6分析結(jié)果的表述試樣中砷的含量按式(1)計(jì)算。X=…………(1)式中:X—試樣中砷的含量,單位為毫克每千克(mg/kg);ρ—試樣溶液中砷的含量,單位為微克每升(μg/L);5ρ0—空白液中砷的含量,單位為微克每升(μg/L);V—試樣消化液的定容體積,單位為毫升(mL);1000—換算系數(shù);m—試樣的稱樣量,單位為克(g)。當(dāng)砷含量≥1.00mg/kg時(shí),計(jì)算結(jié)果保留3位有效數(shù)字;當(dāng)砷含量<1.00mg/kg時(shí),計(jì)算結(jié)果保留2位有效數(shù)字。7精密度樣品中砷含量大于1.00mg/kg時(shí),在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10%;小于或等于1.00mg/kg且大于0.10mg/kg時(shí),在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的15%;小于或等于0.10mg/kg時(shí),在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的20%。8其他當(dāng)固體樣品稱樣量為1.0g,定容體積為25mL時(shí),方法檢出限為0.01mg/kg,方法定量限為0.04mg/kg。當(dāng)液體樣品取樣量為2g,定容體積為25mL時(shí),方法檢出限為0.005mg/kg,方法定量限為0.02mg/kg。第二法電感耦合等離子體質(zhì)譜法參見GB5009.268第一法。第三法石墨爐原子吸收光譜法9原理試樣消解處理后,經(jīng)石墨爐原子化,在193.7nm處測(cè)定吸光度。在一定濃度范圍內(nèi)砷的吸光度值與砷含量成正比,外標(biāo)法定量。10試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為優(yōu)級(jí)純,水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。10.1.1硝酸(HNO3)。10.1.2過氧化氫(H2O2):30%。10.1.3硝酸鈀[Pd(NO3)2]。10.1.4氫氧化鈉(NaOH)。10.2試劑配制10.2.1硝酸溶液(2+98):量取20mL硝酸,緩緩倒入980mL水中,混勻。610.2.2硝酸溶液(3+97):量取30mL硝酸,緩慢加入到970mL水中,混勻。10.2.3氫氧化鈉溶液(100g/L):稱取10.0g氫氧化鈉,用水溶解并定容至100mL,混勻。10.2.4硝酸鈀溶液(1g/L):稱取0.1g硝酸鈀,用硝酸溶液(3+97)稀釋至100mL,混勻。10.3標(biāo)準(zhǔn)品三氧化二砷(As2O3,CAS號(hào):1327-53-3)標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥99.5%。10.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制10.4.1砷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L,以As計(jì)):同3.4.1。10.4.2砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L,以As計(jì)):同3.4.2。10.4.3砷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液:分別吸取適量砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L),用硝酸溶液(3+97)配制砷的質(zhì)量濃度分別為0.0μg/L、2.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L和30.0μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。注:可根據(jù)儀器的靈敏度及樣品中砷的實(shí)際含量微調(diào)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中砷的質(zhì)量濃度范圍。11儀器和設(shè)備11.1原子吸收光譜儀:配石墨爐原子化器。11.2電子天平:感量為0.01mg、0.1mg和1mg。11.3控溫電熱板:控溫精度±5℃。11.4微波消解系統(tǒng)。11.5恒溫干燥箱:控溫精度±2℃。11.6壓力消解罐。11.7勻漿機(jī)。11.8高速粉碎機(jī)。注:玻璃器皿及聚四氟乙烯消解內(nèi)罐均需以(1+4)的硝酸溶液浸泡24h,用自來水反復(fù)沖洗,最后用水沖洗干凈。12分析步驟12.1試樣制備12.2試樣消解12.2.1微波消解法固體試樣和油脂及其制品試樣稱取0.2g~0.8g(精確至0.001g),含水分較多的試樣或液體試樣稱取1.0g~3.0g(精確至0.001g)于消解罐中;加入5mL~8mL硝酸,放置30min以上,對(duì)于肉類、水產(chǎn)動(dòng)物及其制品等難消解的樣品再加入0.5mL~1mL過氧化氫,蓋好安全閥,將消解罐放入微波消解系統(tǒng)中。根據(jù)不同類型的樣品,設(shè)置適宜的微波消解程序(見表A.2),按相關(guān)步驟進(jìn)行消解,消解完全后于140℃~145℃趕酸至0.5mL~1mL,用水定容至25mL,混勻備用。同時(shí)做空白試驗(yàn)。12.2.2壓力罐消解法固體試樣和油脂及其制品試樣稱取0.2g~1.0g(精確至0.001g),鮮樣或液體試樣稱取1.0g~5.0g7(精確至0.001g)于消解內(nèi)罐中,加入5mL硝酸浸泡過夜。蓋好內(nèi)蓋,旋緊不銹鋼外套,放入恒溫干燥箱,140℃~160℃保持3h~4h,自然冷卻至室溫,然后緩慢旋松不銹鋼外套,將消解內(nèi)罐取出,放在控溫電熱板上140℃~145℃趕酸至0.5mL~1mL,用水定容至25mL,混勻備用。同時(shí)做空白試驗(yàn)。12.3儀器參考條件儀器參考條件見附錄B中表B.1。采用氘燈、自吸收或塞曼效應(yīng)扣除背景。12.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作吸取20μL砷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和5μL硝酸鈀溶液(1g/L)(可根據(jù)所使用的儀器確定最佳進(jìn)樣量),按質(zhì)量濃度由低到高的順序分別注入石墨爐,原子化后測(cè)其吸光度值,以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。12.5試樣溶液的測(cè)定在與測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液相同的實(shí)驗(yàn)條件下,吸取20μL空白溶液或試樣溶液和5μL硝酸鈀溶液(可根據(jù)所使用的儀器確定最佳進(jìn)樣量)注入石墨爐,原子化后測(cè)其吸光度值,與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。13分析結(jié)果的表述試樣中砷的含量按式(2)計(jì)算。X=…………(2)式中:X—試樣中砷的含量,單位為毫克每千克(mg/kg);ρ—試樣溶液中砷的含量,單位為微克每升(μg/L);ρ0—空白液中砷的含量,單位為微克每升(μg/L);V—試樣消化液的定容體積,單位為毫升(mL);1000—換算系數(shù);m—試樣的稱樣量,單位為克(g)。當(dāng)砷含量≥1.00mg/kg時(shí),計(jì)算結(jié)果保留3位有效數(shù)字;當(dāng)砷含量<1.00mg/kg時(shí),計(jì)算結(jié)果保留2位有效數(shù)字。14精密度同第7章。15其他當(dāng)固體樣品稱樣量為0.5g,定容體積為25mL時(shí),方法檢出限為0.03mg/kg,方法定量限為0.09mg/kg。當(dāng)液體樣品取樣量為2g,定容體積為25mL時(shí),方法檢出限為0.008mg/kg,方法定量限為0.03mg/kg。第二篇食品中無機(jī)砷的測(cè)定第一法液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用法16原理試樣中無機(jī)砷經(jīng)稀硝酸提取后,以液相色譜進(jìn)行分離,分離后的目標(biāo)化合物在酸性環(huán)境下與硼氫化鉀或硼氫化鈉反應(yīng),生成氣態(tài)砷化合物,以原子熒光光譜儀進(jìn)行測(cè)定。保留時(shí)間定性,外標(biāo)法定量。17試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為優(yōu)級(jí)純,水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。17.1.1磷酸二氫銨(NH4H2PO4):分析純。17.1.2磷酸氫二銨[(NH4)2HPO4]:分析純。17.1.3硝酸銨(NH4NO3):分析純。17.1.4磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O):分析純。17.1.5硼氫化鉀(KBH4):分析純。17.1.6氫氧化鉀(KOH)。17.1.7硝酸(HNO3)。17.1.8過氧化氫(H2O2):30%。17.1.9鹽酸(HCl)。17.1.10氨水(NH3·H2O)。17.1.11正己烷[CH3(CH2)4CH3]:色譜純。17.2試劑配制17.2.1鹽酸溶液(7+93):量取70mL鹽酸,溶于水并稀釋至1000mL,混勻。17.2.2硝酸溶液(0.15mol/L):量取10mL硝酸,溶于水并稀釋至1000mL,混勻。17.2.3硝酸+過氧化氫溶液(0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫):量取10mL硝酸,15mL30%過氧化氫,加水稀釋至1000mL,混勻。臨用現(xiàn)配。17.2.4氫氧化鉀溶液(100g/L):稱取10g氫氧化鉀,溶于水并稀釋至100mL,混勻。17.2.5氫氧化鉀溶液(5g/L):稱取5g氫氧化鉀,溶于水并稀釋至1000mL,混勻。17.2.6硼氫化鉀溶液(20g/L):稱取20g硼氫化鉀,用5g/L氫氧化鉀溶液溶解并定容至1000mL,混勻。臨用現(xiàn)配。i,.g。磷酸二氫銨,溶于1000mL水中,以i,.g。磷酸氫二銨,溶于1000mL水中,以817.2.10流動(dòng)相D(5mmol/L磷酸氫二鉀+1mmol/L硝酸銨,pH=10.9):稱取1.14g磷酸氫二鉀和890.08g硝酸銨,溶于1000mL水中,以氨水調(diào)節(jié)pH至10.9,混勻。于超聲水浴中超聲脫氣30min,備用。3.2g硝酸銨,溶于1000mL水中,以氨水調(diào)節(jié)pH至9.2,混勻。于超聲水浴中超聲脫氣30min,備用3.2g硝酸銨,溶于1000mL水中,以氨水調(diào)節(jié)pH至9.2,混勻。于超聲水浴中超聲脫氣30min,備用。注:本方法也可用硼氫化鈉(20g/L)作為還原劑,稱取20g硼氫化鈉,溶于1000mL5g/L氫氧化鈉溶液中,混勻?？筛鶕?jù)儀器的靈敏度調(diào)整硼氫化鉀或硼氫化鈉溶液的濃度。臨用現(xiàn)配。17.3標(biāo)準(zhǔn)品17.3.1三氧化二砷(As2O3,CAS號(hào):1327-53-3)標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥99.5%。17.3.2砷酸二氫鉀(KH2AsO4,CAS號(hào):7784-41-0)標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥99.5%。17.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制17.4.1亞砷酸鹽[As(Ⅲ)]標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L,以As計(jì)):準(zhǔn)確稱取于100℃干燥2h的三氧化二砷0.0132g,加100g/L氫氧化鉀溶液1mL和少量水溶解,轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中,加入適量鹽酸調(diào)整其酸度近中性,加水稀釋至刻度。于2℃~8℃冰箱中避光保存,有效期1年?；蚪?jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的亞砷酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液。17.4.2砷酸鹽[As(Ⅴ)]標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L,以As計(jì)):準(zhǔn)確稱取于100℃干燥2h的砷酸二氫鉀0.0240g,用水溶解,轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中并用水稀釋至刻度。于2℃~8℃冰箱中避光保存,有效期1年。或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的砷酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液。17.4.3有機(jī)砷標(biāo)準(zhǔn)溶液:一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、砷甜菜堿(AsB),購(gòu)買經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)溶液。17.4.4有機(jī)砷標(biāo)準(zhǔn)中間液(10.0mg/L,以As計(jì)):分別準(zhǔn)確吸取一定量的一甲基砷、二甲基砷、砷甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)溶液,用適量水稀釋配制成10.0mg/L的有機(jī)砷中間液。于2℃~8℃冰箱中避光保存,有效期6個(gè)月。17.4.5有機(jī)砷混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L,以As計(jì)):分別準(zhǔn)確吸取1.00mL一甲基砷標(biāo)準(zhǔn)中間液(10.0mg/L)、1.00mL二甲基砷標(biāo)準(zhǔn)中間液(10.0mg/L)、1.00mL砷甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)中間液(10.0mg/L)于10mL容量瓶中,用水稀釋定容至刻度。臨用現(xiàn)配。17.4.6As(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L,以As計(jì)):分別準(zhǔn)確吸取1.00mLAs(Ⅲ)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L)、1.00mLAs(Ⅴ)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L)于100mL容量瓶中,用水稀釋定容至刻度。臨用現(xiàn)配。17.4.7五種砷形態(tài)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(10.0μg/L或50μg/L,以As計(jì)):根據(jù)測(cè)定需要,分別準(zhǔn)確吸取一定量的有機(jī)砷混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L)和As(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L),用硝酸溶液(0.15mol/L)配制成10.0μg/L或50μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。臨用現(xiàn)配。17.4.8As(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液:分別準(zhǔn)確吸取適量體積的As(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L),用硝酸溶液(0.15mol/L)稀釋配制成質(zhì)量濃度為0.0μg/L、2.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。臨用現(xiàn)配。注:可根據(jù)樣品中As(Ⅲ)和As(Ⅴ)的實(shí)際含量適當(dāng)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中As(Ⅲ)和As(Ⅴ)的質(zhì)量濃度。18儀器和設(shè)備18.1液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用儀(LC-AFS):由液相色譜儀與原子熒光光譜儀組成。18.2組織勻漿器。18.3高速粉碎機(jī)。1018.4微波消解系統(tǒng):配有微波萃取罐。18.5離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥8000r/min。18.6pH計(jì):精度為0.01。18.7電子天平:感量為0.01mg、0.1mg和1mg。18.8恒溫干燥箱:控溫精度±2℃。18.9超聲波清洗器。18.10濾膜:0.45μm。18.11篩網(wǎng);粒徑≤425μm(篩孔≥40目)。注:玻璃器皿及微波萃取內(nèi)罐均需以(1+4)的硝酸溶液浸泡24h,用自來水反復(fù)沖洗,最后用水沖洗干凈。19分析步驟19.1試樣制備19.1.1.1干樣谷物、干食用菌、嬰幼兒谷類輔助食品、水產(chǎn)動(dòng)物干制品、藻類等樣品,取可食部分粉碎均勻,粒徑達(dá)425μm以下(相當(dāng)于40目以上);當(dāng)采用熱浸提法處理谷物試樣時(shí),試樣需粉碎至粒徑達(dá)250μm以下(相當(dāng)于60目以上)。19.1.1.2鮮樣鮮食用菌、水產(chǎn)動(dòng)物等樣品,洗凈晾干,取可食部分勻漿至均質(zhì)。19.1.1.3速凍及罐裝食品經(jīng)解凍的速凍食品,取可食部分粉碎至均勻;罐裝食品粉碎或均漿至均勻。19.1.2液體樣品調(diào)味品、油脂及其制品等勻漿或均質(zhì)。19.1.3半固體樣品攪拌均勻。19.2試樣提取19.2.1谷物及其制品19.2.1.1熱浸提法稱取試樣約0.5g~1.0g(準(zhǔn)確至0.001g)于50mL聚丙烯離心管中,加入20mL0.15mol/L硝酸溶液。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5h,每0.5h振搖1min。提取完畢,取出冷卻至室溫,8000r/min離心15min,取上層清液,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。19.2.1.2微波輔助提取法稱取試樣約0.5g~0.8g(準(zhǔn)確至0.001g)于微波萃取罐中,加入15mL0.15mol/L硝酸溶液,蓋好內(nèi)蓋,旋緊外蓋,置于微波消解儀中,采用梯度升溫方式進(jìn)行提取,微波輔助提取程序見附錄C中11表C.1。提取完畢,冷卻后取出,8000r/min離心15min,取上層清液,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。19.2.2水產(chǎn)動(dòng)物及其制品稱取試樣約0.5g~1.0g(準(zhǔn)確至0.001g)于50mL聚丙烯離心管中,加入20mL0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫溶液。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5h,每0.5h振搖1min。提取完畢,取出冷卻至室溫,8000r/min離心15min。取5mL上清液置于離心管中,加入5mL正己烷,振搖1min后,8000r/min離心15min,棄去上層正己烷。按此過程重復(fù)一次。吸取下層清液,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。19.2.3嬰幼兒輔助食品19.2.3.1嬰幼兒谷類輔助食品(添加藻類的產(chǎn)品除外)稱取試樣約1.0g(準(zhǔn)確至0.001g)于50mL聚丙烯離心管中,加入20mL0.15mol/L硝酸溶液,于90℃恒溫箱中熱浸提2.5h,每0.5h振搖1min。提取完畢,取出冷卻至室溫。8000r/min離心15min。吸取上層清液,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。19.2.3.2嬰幼兒谷類輔助食品(添加藻類的產(chǎn)品)稱取試樣約0.5g~1.0g(準(zhǔn)確至0.001g)于50mL聚丙烯離心管中,加入20mL0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫溶液。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5h,每0.5h振搖1min。提取完畢,取出冷卻至室溫,8000r/min離心15min。吸取上層清液,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。19.2.3.3嬰幼兒罐裝輔助食品稱取試樣約0.5g~1.0g(準(zhǔn)確至0.001g)于50mL聚丙烯離心管中,加入20mL0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫溶液。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5h,每0.5h振搖1min。提取完畢,取出冷卻至室溫,8000r/min離心15min。吸取上層清液,經(jīng)0.45μm有機(jī)濾膜過濾,待測(cè)。按同一操作方法做空白試驗(yàn)。必要時(shí)可按19.2.2中“取5mL上清液置于離心管中……吸取下層清液,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,19.2.4食用菌及其制品稱取干試樣0.2g~0.5g或鮮試樣1.0g~2.0g(準(zhǔn)確至0.001g)于15mL聚丙烯離心管中,加入10mL0.15mol/L硝酸溶液,置于60℃超聲水浴中提取1h,每20min振搖1次。提取完畢,取出冷卻至室溫,8000r/min離心10min,吸取上層清液,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。19.2.5調(diào)味品稱取試樣約1.0g(準(zhǔn)確至0.001g)于50mL聚丙烯離心管中,加入20mL0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫溶液。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5h,每0.5h振搖1min。提取完畢,取出冷卻至室溫,8000r/min離心15min。后續(xù)步驟同19.2.2“取5mL上清液置于離心管中……同時(shí)做空白試驗(yàn)”。19.2.6油脂及其制品稱取試樣約0.3g~1.0g(準(zhǔn)確至0.001g)于50mL聚丙烯離心管中,加入20mL0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫溶液。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5h,每0.5h振搖1min。提取完畢,取出冷卻至室溫,8000r/min離心15min。后續(xù)步驟同19.2.2“取5mL上清液置于離心管中……同時(shí)做空白試驗(yàn)”。1219.2.7藻類及其制品稱取試樣約0.2g~0.5g(準(zhǔn)確至0.001g)于50mL聚丙烯離心管中,加入20mL0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫溶液。于90℃恒溫箱中熱浸提2.5h,每0.5h振搖1min。提取完畢,取出冷卻至室溫,8000r/min離心15min。吸取上層清液,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。注:試樣提取時(shí)可根據(jù)樣品中砷含量適當(dāng)調(diào)整加入提取試劑(0.15mol/L硝酸溶液或0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫溶液)的體積。19.3儀器參考條件19.3.1液相色譜參考條件液相色譜分離體系(一):a)色譜柱:填料為季銨化的苯乙烯和二乙烯基苯共聚物的陰離子交換色譜柱(250mm×4.1mm,10μm)或等效柱,陰離子交換色譜保護(hù)柱(20mm×2.1mm,10μm)或等效柱;100μL。等度洗脫適用于谷類及其制品和嬰幼兒谷類輔助食品(添加藻類的產(chǎn)品除外);b)等度洗脫:流動(dòng)相A:15mmol/L磷酸二氫銨溶液,pH=6.0;流速:1.0mL/min;100μL。等度洗脫適用于谷類及其制品和嬰幼兒谷類輔助食品(添加藻類的產(chǎn)品除外);用于所有試樣。用于所有試樣。液相色譜分離體系(二):a)色譜柱:填料為季銨化的苯乙烯和二乙烯基苯共聚物的陰離子交換色譜柱(50mm×4mm,5μm)或等效柱,陰離子交換色譜保護(hù)柱(50mm×4mm,5μm)或等效柱;,2。;流速:1.2mL/min;進(jìn)樣量:100μL。注:根據(jù)各自實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備情況適當(dāng)調(diào)整流動(dòng)相濃度及pH,以保證分離度及靈敏度滿足試驗(yàn)要求。b)梯度洗,2。;流速:1.2mL/min;進(jìn)樣量:100μL。注:根據(jù)各自實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備情況適當(dāng)調(diào)整流動(dòng)相濃度及pH,以保證分離度及靈敏度滿足試驗(yàn)要求。19.3.2原子熒光光譜參考條件原子熒光檢測(cè)參考條件如下:a)負(fù)高壓:280V~300V;b)砷燈總電流:90mA;c)主電流/輔助電流:50/40mA;d)原子化方式:火焰原子化;e)原子化器溫度:200℃;f)載液:5%~7%鹽酸溶液;g)還原劑:20g/L硼氫化鉀溶液;h)載氣(氬氣)流速:400mL/min;i)輔助氣(氬氣)流速:600mL/min。19.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作設(shè)定儀器最佳條件,待基線穩(wěn)定后,測(cè)定砷形態(tài)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/L或50μg/L),確定各砷形態(tài)完全分離后,將As(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按質(zhì)量濃度由低到高分別注入液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用儀中進(jìn)行測(cè)定,以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)化合物的濃度為橫坐標(biāo),以色譜峰面積為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見附錄D中圖D.1~圖D.4。13注:當(dāng)測(cè)定有機(jī)砷含量較高的水產(chǎn)動(dòng)物及其制品、食用菌及其制品、魚油、磷蝦油及其制品、水產(chǎn)調(diào)味品制品等復(fù)雜基質(zhì)樣品中無機(jī)砷時(shí),需采用質(zhì)量濃度為50μg/L的砷形態(tài)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液確定分離度。19.5試樣溶液的測(cè)定吸取試樣溶液100μL注入液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用儀中,得到色譜圖,以保留時(shí)間定性。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣溶液中As(Ⅲ)與As(Ⅴ)含量。20分析結(jié)果的表述試樣中As(Ⅲ)或As(Ⅴ)含量按式(3)計(jì)算。X=…………(3)式中:X—試樣中As(Ⅲ)或As(Ⅴ)的含量(以As計(jì)),單位為毫克每千克(mg/kg);ρ—測(cè)定溶液中As(Ⅲ)或As(Ⅴ)的質(zhì)量濃度,單位為微克每升(μg/L);ρ0—空白溶液中As(Ⅲ)或As(Ⅴ)的質(zhì)量濃度,單位為微克每升(μg/L);V—試樣提取液的體積,單位為毫升(mL);1000—換算系數(shù);m—試樣的稱樣量,單位為克(g)。無機(jī)砷含量等于As(Ⅲ)含量與As(Ⅴ)含量之和。當(dāng)無機(jī)砷含量≥1.00mg/kg時(shí),計(jì)算結(jié)果保留3位有效數(shù)字,當(dāng)無機(jī)砷含量<1.00mg/kg時(shí),計(jì)算結(jié)果保留2位有效數(shù)字。21精密度樣品中無機(jī)砷含量大于1.00mg/kg時(shí),在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10%;小于或等于1.00mg/kg且大于0.10mg/kg時(shí),在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的15%;小于或等于0.10mg/kg時(shí),在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的20%。22其他當(dāng)稱樣量為1.0g,加入提取試劑體積為20mL時(shí),方法檢出限為0.02mg/kg,方法定量限為0.05mg/kg。第二法液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用法23原理試樣中無機(jī)砷經(jīng)稀硝酸等提取后,以液相色譜進(jìn)行分離,分離后的目標(biāo)化合物經(jīng)過霧化由載氣送入電感耦合等離子體-炬焰中,經(jīng)過蒸發(fā)、解離、原子化、電離等過程,經(jīng)離子采集系統(tǒng)進(jìn)入質(zhì)譜儀,質(zhì)譜儀根據(jù)質(zhì)荷比進(jìn)行分離測(cè)定。以保留時(shí)間和質(zhì)荷比定性,外標(biāo)法定量。1424試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為優(yōu)級(jí)純,水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。24.1試劑24.1.1磷酸氫二銨[(NH4)2HPO4]:分析純。24.1.2硝酸(HNO3)。24.1.3過氧化氫(H2O2):30%。24.1.4正己烷[CH3(CH2)4CH3]:色譜純。24.1.5甲醇(CH3OH):色譜純。24.1.6氨水(NH3·H2O)。24.1.7氫氧化鉀(KOH)。24.1.8鹽酸(HCl)。24.1.9碳酸銨[(NH4)2CO3]:分析純。24.1.10磷酸氫二鉀(K2HPO4·3H2O):分析純。24.1.11硝酸銨(NH4NO3):分析純。24.2試劑配制24.2.1硝酸溶液(0.15mol/L):量取10mL硝酸,加水稀釋至1000mL,混勻。24.2.2硝酸+過氧化氫溶液(0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫):量取10mL硝酸,15mL30%過氧化氫,加水稀釋至1000mL,混勻。臨用現(xiàn)配。1000mL容量瓶中,用水溶解,加入10mL甲醇,用水稀釋定容至刻度,氨水調(diào)節(jié)pH至8.4,混勻1000mL容量瓶中,用水溶解,加入10mL甲醇,用水稀釋定容至刻度,氨水調(diào)節(jié)pH至8.4,混勻。于超聲水浴中超聲脫氣30min,備用。30min,備用。中超聲脫氣30min,備用。L容用水稀釋定容至刻度,氨水調(diào)節(jié)pH至9.0,混勻。于超聲水浴中超聲脫氣30min,備用。24.2.7流動(dòng)相E(60mmol/L硝酸銨,pH=用水稀釋定容至刻度,氨水調(diào)節(jié)pH至9.0,混勻。于超聲水浴中超聲脫氣30min,備用。24.2.8氫氧化鉀溶液(100g/L):稱取10g氫氧化鉀,加水溶解并稀釋至100mL,混勻。24.3標(biāo)準(zhǔn)品24.3.1三氧化二砷(As2O3,CAS號(hào):1327-53-3)標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥99.5%。24.3.2砷酸二氫鉀(KH2AsO4,CAS號(hào):7784-41-0)標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥99.5%。24.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制24.4.1亞砷酸鹽[As(Ⅲ)]標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L,以As計(jì)):準(zhǔn)確稱取于100℃干燥2h的三氧化二15砷0.0132g(精確至0.0001g),加1mL氫氧化鉀溶液(100g/L)和少量水溶解,轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中,加入適量鹽酸調(diào)整其酸度近中性,加水稀釋至刻度。于2℃~8℃冰箱中避光保存,有效期1年?；蚪?jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的亞砷酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液。24.4.2砷酸鹽[As(Ⅴ)]標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L,以As計(jì)):準(zhǔn)確稱取于100℃干燥2h的砷酸二氫鉀0.0240g(精確至0.0001g),水溶解,轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中并用水稀釋至刻度。于2℃~8℃冰箱中避光保存,有效期1年?；蚪?jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的砷酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液。24.4.3有機(jī)砷標(biāo)準(zhǔn)溶液:一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、砷甜菜堿(AsB),購(gòu)買經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。24.4.4有機(jī)砷標(biāo)準(zhǔn)中間液(10.0mg/L,以As計(jì)):分別準(zhǔn)確吸取一定量的一甲基砷、二甲基砷、砷甜菜堿溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),用適量水稀釋配制成10.0mg/L的單標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。于2℃~8℃冰箱中避光保存,有效期6個(gè)月。24.4.5有機(jī)砷混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L,以As計(jì)):分別準(zhǔn)確吸取1.00mL一甲基砷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(10.0mg/L)、1.00mL二甲基砷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(10.0mg/L)、1.00mL砷甜菜堿的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(10.0mg/L)于10mL容量瓶中,用水稀釋定容至刻度。臨用現(xiàn)配。24.4.6As(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L,以As計(jì)):分別準(zhǔn)確吸取1.00mLAs(Ⅲ)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L)、1.00mLAs(Ⅴ)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100mg/L)于100mL容量瓶中,用水稀釋定容至刻度。臨用現(xiàn)配。24.4.7五種砷形態(tài)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(10.0μg/L,以As計(jì)):分別準(zhǔn)確吸取1.00mL有機(jī)砷混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L)、1.00mLAs(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L)于100mL容量瓶中,用硝酸溶液(0.15mol/L)[或水(僅限食用菌測(cè)定時(shí))]稀釋定容至刻度。臨用現(xiàn)配。24.4.8As(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液:分別準(zhǔn)確吸取適量體積的As(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00mg/L),用硝酸溶液(0.15mol/L)或水(僅限食用菌測(cè)定時(shí))稀釋配制成質(zhì)量濃度為0.0μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。臨用現(xiàn)配。注:可根據(jù)樣品中As(Ⅲ)和As(Ⅴ)的實(shí)際含量適當(dāng)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中As(Ⅲ)和As(Ⅴ)的質(zhì)量濃度。25儀器和設(shè)備25.1液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-ICP/MS):由液相色譜儀與電感耦合等離子體質(zhì)譜儀組成。25.2組織勻漿器。25.3高速粉碎機(jī)。25.4離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥8000r/min。25.5pH計(jì):精度為0.01。25.6電子天平:感量為0.01mg、0.1mg和1mg。25.7恒溫干燥箱:控溫精度±2℃。25.8微波消解系統(tǒng):配有微波萃取罐。25.9超聲波清洗器。25.10濾膜:0.45μm。25.11篩網(wǎng):粒徑≤425μm(篩孔≥40目)。注:玻璃器皿及微波萃取罐均需以(1+4)的硝酸溶液浸泡24h,用自來水反復(fù)沖洗,最后用水沖洗干凈。26分析步驟26.1試樣制備1626.2試樣提取26.2.1谷物及其制品26.2.1.1熱浸提法26.2.1.2微波輔助提取法26.2.2水產(chǎn)動(dòng)物及其制品26.2.3嬰幼兒輔助食品26.2.4食用菌及其制品稱取干試樣0.2g~0.5g或鮮試樣1.0g~2.0g(準(zhǔn)確至0.001g)于15mL聚丙烯離心管中,加入10mL水,置于60℃超聲水浴中提取1h,每20min振搖1次。提取完畢,取出冷卻至室溫,8000r/min離心10min,吸取上層清液,經(jīng)0.45μm濾膜過濾,待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。26.2.5調(diào)味品26.2.6油脂及其制品26.2.7藻類及其制品注:試樣提取時(shí)可根據(jù)樣品中砷含量適當(dāng)調(diào)整加入提取試劑(0.15mol/L硝酸溶液或0.15mol/L硝酸+0.45%過氧化氫溶液)的體積。26.3儀器參考條件26.3.1液相色譜參考條件液相色譜分離體系(一)適用于除食用菌及其制品外的試樣,參考如下:a)色譜柱:填料為季銨化的苯乙烯和二乙烯基苯共聚物的陰離子交換色譜柱(250mm×4.1mm,10μm)或等效柱,陰離子交換色譜保護(hù)柱(20mm×2.1mm,10μm)或等效柱;c)洗脫方式:梯度洗脫,梯度洗脫程序見表C.4;b)A,p:o;l/L磷酸氫二銨+1%甲醇,pH=8.4;c)洗脫方式:梯度洗脫,梯度洗脫程序見表C.4;d)進(jìn)樣量:25μL。液相色譜分離體系(二)適用于食用菌及其制品試樣,參考如下:a)色譜柱:填料為季銨化的苯乙烯和二乙烯基苯共聚物的陰離子交換色譜柱(250mm×4mm,175μm)或等效柱,陰離子交換色譜保護(hù)柱(50mm×4mm,5μm)或等效柱;c)洗脫方式:等度洗脫;b)流動(dòng)相C:20mmol/L碳酸銨+1%甲醇c)洗脫方式:等度洗脫;d)流速:1mL/min;e)進(jìn)樣量:25μL。液相色譜分離體系(三)適用于所有試樣,參考如下:a)色譜柱:填料為季銨化的苯乙烯和二乙烯基苯共聚物的陰離子交換色譜柱(50mm×4mm,5μm)或等效柱,陰離子交換色譜保護(hù)柱(50mm×4mm,5μm)或等效柱;c)洗脫方式:梯度洗脫,梯度洗脫程序見表C.5;b)流動(dòng)相D:10mmol/L磷酸氫二鉀,pH=10.9;流動(dòng)相E:c)洗脫方式:梯度洗脫,梯度洗脫程序見表C.5;d)流速:1.0mL/min;e)進(jìn)樣量:25μL。注:根據(jù)各自實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備情況適當(dāng)調(diào)整流動(dòng)相濃度及pH,以保證分離度及靈敏度滿足試驗(yàn)要求。26.3.2電感耦合等離子體質(zhì)譜參考條件電感耦合等離子體質(zhì)譜儀參考條件如下:a)射頻功率:1200W~1550W;b)采樣深度:8mm;c)霧化室溫度:2℃;d)載氣(氬氣)流量:0.85L/min;e)補(bǔ)償氣(氬氣)流量:0.25L/min;f)積分時(shí)間:0.5s;g)檢測(cè)質(zhì)荷比(m/z):75(As)和35(Cl)。26.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作設(shè)定儀器最佳條件,待基線穩(wěn)定后,測(cè)定五種砷形態(tài)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/L),確定各砷形態(tài)完全分離后,將As(Ⅲ)和As(Ⅴ)混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按質(zhì)量濃度由低到高分別注入液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用儀中進(jìn)行測(cè)定,以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)化合物的濃度為橫坐標(biāo),以色譜峰面積為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見附錄E中圖E.1~圖E.3。26.5試樣溶液的測(cè)定依次將空白溶液和試樣溶液注入液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用儀中,得到色譜圖,以保留時(shí)間定性。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣溶液中As(Ⅲ)與As(Ⅴ)含量。27分析結(jié)果的表述試樣中As(Ⅲ)或As(Ⅴ)的含量按式(4)計(jì)算?！?4)式中:X—試樣中As(Ⅲ)或As(Ⅴ)的含量(以As計(jì)),單位為毫克每千克(mg/kg);ρ—測(cè)定溶液中As(Ⅲ)或As(Ⅴ)的質(zhì)量濃度,單位為微克每升(μg/L);ρ0—空白溶液中As(Ⅲ)或As(Ⅴ)的質(zhì)量濃度,單位為微克每升(μg/L);18V—試樣提取液的體積,單位為毫升(mL);1000—換算系數(shù);m—試樣的稱樣量,單位為克(g)。無機(jī)砷含量等于As(Ⅲ)含量與As(Ⅴ)含量之和。當(dāng)無機(jī)砷含量≥1.00mg/kg時(shí),計(jì)算結(jié)果保留3位有效數(shù)字,當(dāng)無機(jī)砷含量<1.00mg/kg時(shí),計(jì)算結(jié)果保留2位有效數(shù)字