HJ 704-2014 土壤 有效磷的測定 碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗分光光度法（正式版）

中華人民共和國國家環(huán)境保護標準土壤有效磷的測定碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗分光光度法Soilquality—Determinationof 2014-09-15發(fā)布2014-12-01實施 1適用范圍 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 14方法原理 15干擾和消除 6試劑和材料 17儀器和設(shè)備 2 39分析步驟 310結(jié)果計算與表示 411精密度和準確度 412質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 413注意事項 5附錄A(資料性附錄)平行樣測定結(jié)果允許差范圍 6為貫徹《中華人民共和國環(huán)境保護法》,保護環(huán)境，保障人體健康，規(guī)范土壤中有效磷的測定方法，制定本標準。本標準規(guī)定了測定土壤中有效磷的碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗分光光度法。本標準為首次發(fā)布。本標準附錄A為資料性附錄。本標準由環(huán)境保護部科技標準司組織制訂。本標準主要起草單位：南通市環(huán)境監(jiān)測中心站。本標準驗證單位：江蘇省環(huán)境監(jiān)測中心、揚州市環(huán)境監(jiān)測中心站、鎮(zhèn)江市環(huán)境監(jiān)測中心站、南通市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗測試中心、蘇州市環(huán)境監(jiān)測中心站和南通市通州區(qū)環(huán)境監(jiān)測站。本標準環(huán)境保護部2014年9月15日批準。本標準自2014年12月1日起實施。本標準由環(huán)境保護部解釋。1土壤有效磷的測定碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗分光光度法1適用范圍本標準規(guī)定了測定土壤中有效磷的碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗分光光度法。本標準適用于石灰性和中性土壤中有效磷的測定。當(dāng)取樣量為2.50g,使用50ml碳酸氫鈉溶液浸提，采用10mm比色皿時，本方法檢出限為0.5mg/kg,測定下限為2.0mg/kg2規(guī)范性引用文件本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。HJ/T166土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ613土壤干物質(zhì)和水分的測定重量法NY/T395—2012農(nóng)田土壤環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)范3術(shù)語和定義土壤有效磷availablephosphorous縮寫為A-P,也稱為速效磷，在植物生長期內(nèi)能夠被植物根系吸收的土壤磷，即在本標準規(guī)定的條件下浸提出來土壤溶液中的磷、弱吸附態(tài)磷、交換性磷和易溶性固體磷酸鹽等。4方法原理用0.5mol/L碳酸氫鈉溶液(pH=8.5)浸提土壤中的有效磷。浸提液中的磷與鉬銻抗顯色劑反應(yīng)生成磷鉬藍，在波長880nm處測量吸光度。在一定濃度范圍內(nèi)，磷的含量與吸光度值符合朗伯-比爾定律。5干擾和消除當(dāng)浸提液中砷含量大于2mg/L有干擾，可用硫代硫酸鈉除去；硫化鈉含量大于2mg/L有干擾，在酸性條件下通氮氣可以除去；六價鉻大于50mg/L有干擾，用亞硫酸鈉除去；鐵含量為20mg/L,使結(jié)果偏低5%。6試劑和材料除非另有說明，分析時均使用符合國家標準的分析純化學(xué)試劑。實驗用水為新制備的去離子水或蒸餾水。26.4磷酸二氫鉀(KH?PO?):優(yōu)級純。取適量磷酸二氫鉀于稱量瓶中，置于105℃烘干2h,干燥箱內(nèi)冷卻，備用。6.5氫氧化鈉溶液：w(NaOH)=10%。稱取10g氫氧化鈉溶于水中，用水稀釋至100ml,貯于聚乙烯瓶中。于800ml水中，在不斷攪拌下緩慢加入55ml硫酸(6.1),待溶液冷卻后，加水至1000ml,混勻。6.7硝酸溶液：1+5(VIV)。用硝酸(6.2)配制。稱取42.0g碳酸氫鈉溶于約800ml水中，加水稀釋至約990ml,用氫氧化鈉溶液(6.5)調(diào)節(jié)至pH=8.5(用pH計測定),加水定容至1L,溫度控制在25℃±1℃。貯存于聚乙烯瓶中，該溶液應(yīng)在4h內(nèi)使用。稱取0.5g酒石酸銻鉀溶于100ml水中。6.10鉬酸鹽溶液量取153ml硫酸(6.1)緩慢注入約400ml水中，攪勻，冷卻。另取10.0g鉬酸銨溶于300ml約60℃的水中，冷卻。然后將該硫酸溶液緩慢注入鉬酸銨溶液中，攪勻，再加入100ml酒石酸銻鉀溶液(6.9),最后用水定容至1L。該溶液中含10g/L鉬酸銨和2.75mol/L硫酸。該溶液貯存于棕色瓶中，可保存一年。稱取10g抗壞血酸溶于水中，加入0.2g乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)和8ml冰乙酸(6.3),加水定容至100ml。該溶液貯存于棕色試劑瓶中，在4℃下可穩(wěn)定3個月。如顏色變黃，則棄去重配。6.12磷標準貯備溶液：p(P)=100mg/L。稱取0.4394g磷酸二氫鉀(6.4)溶于約200ml水中，加入5ml硫酸(6.1),然后移至1000ml容量瓶中，加水定容，混勻。該溶液貯存于棕色試劑瓶中，有效期為1年?；蛑苯淤徺I市售有證標準物質(zhì)。6.13磷標準使用液：p(P)=5.00mg/L。量取5.00ml磷標準貯備溶液(6.12)于100ml容量瓶中，用浸提劑(6.8)稀釋至刻度。臨用現(xiàn)配。6.14指示劑：2,4-二硝基酚或2,6-二硝基酚(C?H?N?O?),w=0.2%。稱取0.2g2,4-二硝基酚或2,6-二硝基酚溶于100ml水中，該溶液貯存于玻璃瓶中。7儀器和設(shè)備實驗中的玻璃器皿需先用無磷洗滌劑洗凈，再用硝酸溶液(6.7)浸泡24h,使用前再依次用自來水和去離子水洗凈。7.1分光光度計：配備10mm比色皿。7.2恒溫往復(fù)振蕩器：頻率可控制在150～250r/min。7.3土壤樣品粉碎設(shè)備：粉碎機、瑪瑙研缽。7.4分析天平：精度為0.0001g。7.5土壤篩：孔徑1mm或20目尼龍篩。7.6具塞錐形瓶：150ml。37.7一般實驗室常用儀器和設(shè)備。7.8濾紙：經(jīng)檢驗不含磷的濾紙。8樣品8.1采集與保存按HJ/T166的相關(guān)規(guī)定進行采集和保存土壤樣品。8.2試樣的制備試樣的制備按《農(nóng)田土壤環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)范》(NY/T395—2012)8.3干物質(zhì)含量的測定進行土壤處理和制備。準確稱取適量試樣(8.2),參照HJ613測定樣品干物質(zhì)的含量。9分析步驟9.1試料的制備稱取2.50g試樣(8.2),置于干燥的150ml具塞錐形瓶中，加入50.0ml浸提劑(6.8),塞緊，置于恒溫往復(fù)振蕩器上，在25℃±1℃下以180～200r/min的振蕩頻率振蕩(30±1)min,立即用無磷濾紙(7.8)過濾，濾液應(yīng)當(dāng)天分析。分別量取0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00ml磷標準使用液(6.13)于7個50ml容量瓶中，用浸提劑(6.8)加至10.0ml。分別加水至15～20ml,再加入1滴指示劑(6.14),然后逐滴加入硫酸溶液(6.6)調(diào)至溶液近無色，加入0.75ml抗壞血酸溶液(6.11),混勻，30s后加5ml鉬酸鹽溶液(6.10),用水定容至50ml,混勻。此標準系列中磷濃度依次為0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60mg/L。將上述容量瓶置于室溫下放置30min(若室溫低于20℃,可在25～30℃水浴中放置30min)。用10mm比色皿在880nm波長處，室溫高于20℃的環(huán)境條件下比色，以去離子水為參比，分別測量吸光度。以試劑空白校正吸光度為縱坐標，對應(yīng)的磷濃度(mg/L)為橫坐標，繪制校準曲線。量取10.0ml試液(9.1)于干燥的50ml容量瓶中。然后按照與校準(9.2)相同操作步驟進行顯色9.4實驗室空白試驗不加入土壤試樣，按照9.1、9.3相同操作步驟進行顯色和測量。410結(jié)果計算與表示10.1結(jié)果計算土壤樣品中有效磷的含量w,按照式(1)進行計算。A——試料吸光度值；Ao——空白試驗的吸光度值；a——校正曲線的截距；b——校準曲線的斜率；V?——吸取試料體積，ml;Wdn土壤的干物質(zhì)含量(質(zhì)量分數(shù)),%。10.2結(jié)果表示測定結(jié)果小數(shù)位數(shù)與方法檢出限保持一致，最多保留3位有效數(shù)字。11精密度和準確度11.1精密度實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為2.5%～4.3%、1.1%～5.2%、0.7%～1.9%;實驗室間相對標準偏差分別為3.7%、3.2%、1.0%;重復(fù)性限為0.2mgkg、0.2mgkg、0.2mgkg;再現(xiàn)性限為0.5mgkg、1.2mg/kg、了測定，相對誤差分別為-10.0%～-1.4%、-4.7%～-2.1%;相對誤差最終值分別為(-4.8±5.9)%、12質(zhì)量保證和質(zhì)量控制12.1校準曲線的相關(guān)系數(shù)應(yīng)大于等于0.999。12.2每批樣品應(yīng)做兩個空白試驗，其測試結(jié)果應(yīng)低于檢測下限。12.3每批樣品應(yīng)至少測定10%的平行雙樣，樣品量少于10個時，應(yīng)至少測定一個平行雙樣。平行樣測定結(jié)果允許差應(yīng)滿足一定的要求(見附錄A)。512.4每批樣品應(yīng)分析一個有證標準物質(zhì)，其測定值應(yīng)在保證值范圍內(nèi)。12.5每批樣品需做校準曲線。13注意事項13.1所有的采樣儀器和設(shè)備