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第第頁(yè)水土中總磷酸鹽試劑盒說(shuō)明書水土中總磷酸鹽試劑盒說(shuō)明書微量法100T/96S注意:正式測(cè)定之前選擇23個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。測(cè)定意義:總磷酸鹽包含正磷酸鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、多聚磷酸鹽等各種磷酸鹽的形式,反應(yīng)了水土中的磷酸鹽水平,是一個(gè)水質(zhì)和土壤質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)。測(cè)定原理:在酸性溶液中,在分解劑和高溫條件下,將無(wú)機(jī)磷酸鹽和有機(jī)磷酸鹽水解成正磷酸鹽,正磷酸鹽可與鉬酸銨反應(yīng)成磷鉬酸,在還原劑存在時(shí)被還原為磷鉬藍(lán),在710nm處有特征吸收峰。需自備的儀器和用品:天平,震蕩儀、常溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、蒸餾水。試劑組成和配制:試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。試劑二:液體40mL×1瓶,4℃保存。試劑三:液體4mL×1瓶,4℃避光保存。試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加4mL蒸餾水充分溶解,然后將試劑五全部加入試劑四中充分混勻。試劑五:液體×1支,4℃保存。樣品處理:1.水樣:按照水樣體積(mL):試劑一體積(mL):試劑二體積(mL)為10:1:2的比例(建議取1mL水樣,加入100μL試劑一和200μL試劑二)95℃沸水浴30min,冷卻后待測(cè)。2.土樣:按照土壤質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL):試劑一體積(V):試劑二體積(V)=1:10:1:2(建議稱取約0.1g土樣,加入1mL蒸餾水,再加入100μL試劑一和200μL試劑二),95℃沸水浴振蕩30min,10000g,25℃離心10min,取上清液待測(cè)。測(cè)定操作表:空白管測(cè)定管樣本(μL)40試劑三(μL)4040試劑四(μL)4040蒸餾水(μL)12080充分混勻,25℃靜置10min,于96孔板測(cè)定710處吸光值A(chǔ),分別記為A空白管和A測(cè)定管,△A=A測(cè)定管A空白管計(jì)算公式:標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0237x+0.0016,R2=0.9989;x為PO4濃度μg/mL,y為吸光值△A。1.水樣:總磷酸鹽含量(μg/mL)=(△A0.0016)÷0.0237×V樣÷(V樣÷V樣總)=54.8×(△A0.0016)2.土樣:總磷酸鹽含量(μg/g)=(△A+0.0063)÷0.0489×V樣÷(W×V樣÷V樣總)=54.8×(△A+0.0063)÷WV樣:加入樣本體積;0.04mL;V樣總:樣本總體積,1.3mL;W
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