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辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測膠體金免疫層析法范圍和原理1試劑材料和儀器設(shè)備2試劑制備和分析步驟3結(jié)果判定和性能指標(biāo)434膠體金免疫層析法范圍和原理請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明1范圍●本方法規(guī)定了辣椒制品中蘇丹紅I的膠體金免疫層析快速檢測方法?!癖痉椒ㄟm用辣椒醬、辣椒油、辣椒粉中蘇丹紅I的快速測定。辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34二級標(biāo)題請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明2原理本方法采用競爭抑制免疫層析原理。樣品中的蘇丹紅I與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合,抑制了抗體和檢測線(T線)上抗原的結(jié)合,從而導(dǎo)致檢測線顏色深淺的變化,通過檢測線與控制線(C線)顏色深淺比較,對樣品中蘇丹紅I進(jìn)行定性判定。辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34試劑材料和儀器設(shè)備請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明1、試劑
除另有規(guī)定外,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的二級水。乙腈、無水硫酸鎂、正己烷、二氯甲烷、氫氧化鈉辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34試劑材料和儀器設(shè)備請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明1、試劑-----蘇丹紅I簡介蘇丹紅I純度≥95%。辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34試劑材料和儀器設(shè)備請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明1、試劑------蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制(1)蘇丹紅I標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1mg/mL)精密稱取蘇丹紅l參考物質(zhì)適量,置于10mL容量瓶中,加入適量乙腈超聲溶解后,用乙腈稀釋至刻度,搖勻,-20℃避光保存,有效期6個(gè)月。(2)蘇丹紅l標(biāo)準(zhǔn)中間液(1μg/mL)精密量取蘇丹紅I標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1mg/mL)(3.3.1)100μL,置于100mL容量瓶中,用乙腈稀釋至刻度,搖勻辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34試劑材料和儀器設(shè)備請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明2、材料(1)固相萃取柱:CNWPoly-seryMIP-SDR固相萃取柱(200mg/3mL),或相當(dāng)者。(2)蘇丹紅I膠體金免疫層析試劑盒,適用基質(zhì)為辣椒醬、辣椒油、辣椒粉;金標(biāo)微孔;試紙條或檢測卡。辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34試劑材料和儀器設(shè)備請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明3、設(shè)備●移液器:200μL、1mL和5mL?!駵u旋混合器?!耠x心機(jī):轉(zhuǎn)速≥4000r/min?!耠娮犹炱剑焊辛繛?.01g?!竦祪x。●水浴鍋。●環(huán)境條件:溫度15℃~35℃,濕度≤80%。辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34試劑制備和分析步驟請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明1、試樣制備取適量樣品,液體樣品或半固體樣品充分混勻,固體樣品充分粉碎混勻。辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34試劑制備和分析步驟請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明2、試樣提取稱取辣椒粉3g(精確至0.01g)于50mL離心管中,加入8mL乙腈提取,渦旋振蕩1min后,6000r/min離心5min。轉(zhuǎn)移上清液于10mL離心管中,吹干后加入2mL氫氧化鈉溶液,渦旋混勻30s后置于80℃水浴皂化5min。再加入2mL正己烷,渦旋萃取30s后,6000r/min離心5min,轉(zhuǎn)移上清液于新的10mL離心管中,加入無水硫酸鎂0.5g,渦旋振蕩30s后,4000r/min離心5min,轉(zhuǎn)移上清液于10mL離心管中吹干。精密加入400μL復(fù)溶液辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34試劑制備和分析步驟請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明3、測定步驟(1)試紙條與金標(biāo)微孔測定步驟吸取200μL待測液于金標(biāo)微孔中,抽吸5~10次使混合均勻,室溫溫育3~5min,將試紙條吸水海綿端垂直向下插入金標(biāo)微孔中,溫育5~8min,從微孔中取出試紙條,進(jìn)行結(jié)果判定。(2)檢測卡與金標(biāo)微孔測定步驟吸取200μL待測液于金標(biāo)微孔中,抽吸5~10次使混合均勻,室溫溫育3~5min,將金標(biāo)微孔中全部溶液滴加到檢測卡上的加樣孔中,溫育5~8min,進(jìn)行結(jié)果判定。辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34試劑制備和分析步驟請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明4、質(zhì)控試驗(yàn)每批樣品應(yīng)同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)和加標(biāo)質(zhì)控試驗(yàn)。(1)空白試驗(yàn)稱取空白試樣,按照3的測定步驟與樣品同法操作。(2)加標(biāo)質(zhì)控試驗(yàn)準(zhǔn)確稱取空白試樣(精確至0.01g)置于具塞離心管中,加入一定體積的蘇丹紅I標(biāo)準(zhǔn)中間液,使蘇丹紅I添加濃度為10μg/kg,按照上述步驟與樣品同法操作。辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34結(jié)果判定和性能指標(biāo)請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明1、結(jié)果判定通過對比控制線(C線)和檢測線(T線)的顏色深淺進(jìn)行結(jié)果判定。目視判定示意圖見圖。(1)無效控制線(C線)不顯色,表明不正確操作或試紙條/檢測卡無效。(2)陰性檢測線(T線)顏色比控制線(C線)顏色深或者檢測線(T線)顏色與控制線(C線)顏色相當(dāng),表明樣品中蘇丹紅I低于方法測限,判定為陰性。(3)陽性檢測線(T線)不顯色或檢測線(T線)顏色比控制線(C線)顏色淺,表明樣品中蘇丹紅的含量高于方法檢測限,判定為陽性。(4)質(zhì)控試驗(yàn)要求空白試驗(yàn)測定結(jié)果應(yīng)為陰性,加標(biāo)質(zhì)控試驗(yàn)測定結(jié)果應(yīng)為陽性。辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34結(jié)果判定和性能指標(biāo)請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明a試紙條辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34結(jié)果判定和性能指標(biāo)請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明b檢測卡辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測34結(jié)果判定和性能指標(biāo)請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)行說明辣椒調(diào)味品中蘇丹紅的快速檢測2、注意事項(xiàng):當(dāng)檢測結(jié)果為陽性時(shí),應(yīng)對結(jié)果進(jìn)行確證。34結(jié)果判定和性能指標(biāo)請輸入您的文字對實(shí)際情況進(jìn)
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