牛病毒性腹瀉病毒磁微?；瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)方法

1牛病毒性腹瀉病毒磁微?；瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)方法本文件規(guī)定了牛病毒性腹瀉病毒磁微?；瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)方法的試劑與耗材、器材與設(shè)備、樣本采集及處理、操作步驟、試驗(yàn)成立條件和結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)等內(nèi)下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成文件的必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅注日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范4縮略語(yǔ)PBS：磷酸鹽緩沖液（phosphatebuffersalinEDC：1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺（1-(3-Dimethylaminop2標(biāo)記的牛病毒性腹瀉單抗5E9結(jié)合物混合；溫育一段時(shí)間洗滌后，加酯分子的發(fā)射光強(qiáng)度達(dá)到最大，通過測(cè)量的發(fā)光值結(jié)果和既定的判定方法判定待測(cè)樣本的陰陽(yáng)性。樣6.1耳部切口組織浸泡緩沖液，制備方法7.62℃~8℃冰箱，-20℃冰箱。8.1.1用無(wú)菌注射器直接采集血液至滅菌離心管或采用一次性采血管采集血液，分離血清，編號(hào)備3μL～250μL耳部切口組織浸泡緩沖液，確保液體完全浸沒樣本。在18℃~26℃條件下耳部切口組織在緩沖液中浸泡12h～24h，浸泡過程中采樣管要密封。樣品處理過程應(yīng)防止樣品污染，注意個(gè)人生9操作步驟9.1將樣本、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照分別各加509.5化學(xué)發(fā)光免疫分析儀自動(dòng)測(cè)定各反應(yīng)杯發(fā)光值。4mL，經(jīng)0.22μm過濾，置2℃~8℃保存。XX/TXXXXX—XXXX5B.1取0.3mg牛病毒性腹瀉單抗2G5，裝入透析袋中，置PBS中室溫（15℃~25℃)透析4h。B.2磁珠洗滌取10mg羧基磁珠到離心管中，固定到磁力架上進(jìn)行磁分離（或10000g離心5液，搖勻后固定在混勻器上室溫（15℃~25℃)反應(yīng)30min。反應(yīng)結(jié)束后，磁分離，移除上清，用體積1mL，搖勻后固定在混勻器上室溫（15℃~25℃)反應(yīng)4h。反應(yīng)結(jié)束后，磁分離，移除上清，2℃~8℃保存?zhèn)溆谩?結(jié)合物取400μL牛病毒性腹瀉單抗5E9（濃度3mg/mL），裝入透析袋中，置于PBS中透析，室溫（15℃~25℃)透析4h。將標(biāo)記的抗體溶液，裝入透析袋內(nèi)，置于PBS（0.05moL/L，pH值7.4）中透析，室溫（15℃~25℃)透析過夜，中間換液2次～3次。0.02%Proclin-300混勻后經(jīng)0.22μm濾器過濾，無(wú)菌分裝，于2℃~8℃保存。XX/TXXXXX—XXXX7對(duì)1頭未感染牛病毒性腹瀉的健康動(dòng)物進(jìn)行頸部靜脈大量采血，經(jīng)牛病毒性腹瀉熒光定量RT-室溫（15℃~25℃)待血液凝固后，37℃靜置2h，然后2℃~8℃靜置1h，將析出的血清轉(zhuǎn)稀釋到陰性對(duì)照血清中，混合均勻后，0.22μm濾膜過濾除菌。無(wú)菌定量分裝，1mL/瓶，冷凍真8相關(guān)試劑勻加純化水定容至1000mL。定量分裝，2℃~8℃保存。X-1002.5mL，攪拌均勻加純化水定容至1000mL。定量分裝，2℃~8℃保存。水?dāng)嚢枞芙?，再加純化水定容?000mL，經(jīng)0.22μm過濾，置2℃~8℃保存。0.22μm過濾，置2℃~8℃保存。），），攪拌均勻，PBS定容至1000mL，經(jīng)0