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1牛病毒性腹瀉病毒阻斷磁微粒CLIA抗體檢測(cè)方法GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范4符號(hào)和縮略語(yǔ)CLIA:化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ChemilumineBVD:牛病毒性腹瀉(bovineviraldiarrheBVDV:牛病毒性腹瀉病毒(bovineviraldiarrheavirus)5.2磁微粒工作液(偶聯(lián)鏈霉親和素的磁性微粒)。2包括產(chǎn)品校準(zhǔn)品1和產(chǎn)品校準(zhǔn)品2,抗體含量分5.9化學(xué)發(fā)光底物——全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀:磁微粒酶促化學(xué)——離心機(jī):最高轉(zhuǎn)速:16000rpm;——可調(diào)單道移液器(0.1μL~2.5μL,2μL~20μL,20μL~200μL,100μL~1000μL——1.5mL尖底離心管;一周內(nèi)檢測(cè),可置2℃~8℃條件下保存,若超過(guò)一周檢測(cè),應(yīng)置于-20℃以下冷凍保存。待檢;若樣品中存在沉淀或絮狀物等雜質(zhì),應(yīng)離心去除雜質(zhì),輕微操作,避免出現(xiàn)39操作步驟9.1校準(zhǔn)曲線擬合將BVDV抗體工作校準(zhǔn)品1~工作校準(zhǔn)品6放入樣本架,按照99.2校準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)9.4樣品檢測(cè)),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程在全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上進(jìn)行,具體檢測(cè)過(guò)b)清洗:使用磁鐵吸附磁微粒30s,使其聚集于管壁,棄去上清液。加入1×洗滌液300μL懸浮磁c)免疫反應(yīng)2:取50μL抗體工作液加入反應(yīng)杯中,379.5結(jié)果計(jì)算4時(shí),可以用于結(jié)果計(jì)算和判定。將待檢樣品檢測(cè)發(fā)光值代入校準(zhǔn)曲線,計(jì)算結(jié)果即為待檢樣本中BVDV5將表A.1中的試劑依次加入燒杯中,加滅菌蒸餾水至600mL,溶解,定容至1000mL,置于2~8℃按表A.2中的試劑依次加入燒杯中,加滅菌蒸餾水至600mL,溶解,6測(cè)方法檢測(cè),計(jì)算檢測(cè)結(jié)果,定義中和試驗(yàn)檢測(cè)的陽(yáng)性7取B.1所制備的BVDV高免血清,用校準(zhǔn)品稀釋液稀釋至抗體含量為50U和800取B.1所制備的BVDV高免血清,用校準(zhǔn)品稀釋液稀釋至抗體含量為6.25U和200U質(zhì)控品1和質(zhì)控品2,用BVDV抗體磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)方法檢測(cè)5次,計(jì)算平均
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