基因工程高考題附答案

選修3——基因工程高考題1．（2023?新課標(biāo)Ⅰ卷.38）（15分）真核生物基因中通常有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子相應(yīng)的RNA序列的機(jī)制。已知在人體中基因A（有內(nèi)含子）可以表達(dá)出某種特定蛋白（簡(jiǎn)稱蛋白A）。回答下列問題：（1）某同學(xué)從人的基因組文庫中獲得了基因A，以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到蛋白A，其因素是_____________________________________________。（2）若用家蠶作為表達(dá)基因A的受體，在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中，不選用______________作為載體，其因素是_______________________________________________________________。（3）若要高效地獲得蛋白A，可選用大腸桿菌作為受體。由于與家蠶相比，大腸桿菌具有_____________________________________________________（答出兩點(diǎn)即可）等優(yōu)點(diǎn)。（4）若要檢測(cè)基因A是否翻譯出蛋白A，可用的檢測(cè)物質(zhì)是___________________（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”）。（5）艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)為證明DNA是遺傳物質(zhì)做出了重要奉獻(xiàn)，也可以說是基因工程的先導(dǎo)，假如說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，那么，這一啟示是_______________________________________________________________________________。2．（2023?新課標(biāo)Ⅱ卷.38）（15分）幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：（1）在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，若要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，常選用嫩葉而不選用老葉作為實(shí)驗(yàn)材料，因素是________________________________。提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶克制劑，其目的是______________________________________。（2）以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是________________________________。（3）若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，因素是________________________________________________________（答出兩點(diǎn)即可）。（4）當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是__________________________。（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其也許的因素是____________________________________________。3.（2023?新課標(biāo)Ⅲ卷.38）（15分）編碼蛋白甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五個(gè)片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示。回答下列問題：現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙，若在啟動(dòng)子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列（TTCGCTTCT……CAGGAAGGA），則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙，因素是_____________________________________________________________。（2）某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過程中，在PCR反映體系中加入了DNA聚合酶、引物等，還加入了序列甲作為________________，加入了________________作為合成DNA的原料。（3）現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn)：將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均提成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對(duì)照，培養(yǎng)并定期檢測(cè)T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。=1\*GB3①由圖2可知，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)成a時(shí)，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增長(zhǎng)，此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是________________________。細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是________________________。=2\*GB3②僅根據(jù)圖、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少______________（填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所編碼的肽段，則會(huì)減少其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。4．（2023·天津理綜卷9）（20分）玉米自交系（遺傳穩(wěn)定的育種材料）B具有高產(chǎn)、抗病等優(yōu)良性質(zhì)，但難以直接哺育成轉(zhuǎn)基因植株，為使其獲得抗除草劑性狀，需依次進(jìn)行環(huán)節(jié)=1\*ROMANI、=2\*ROMANII實(shí)驗(yàn)。Ⅰ．獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米自交系A(chǔ)，技術(shù)路線如下圖。（1）為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用2種限制酶，選擇的原則是______（單選）。=1\*GB3①Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)=2\*GB3②G基因編碼蛋白質(zhì)的序列中，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)=3\*GB3③酶切后，G基因形成的兩個(gè)黏性末端序列不相同=4\*GB3④酶切后，Ti質(zhì)粒形成的兩個(gè)黏性末端序列相同A．=1\*GB3①=3\*GB3③B．=1\*GB3①=4\*GB3④C．=2\*GB3②=3\*GB3③D．=2\*GB3②=4\*GB3④（2）下表是4種玉米自交系幼胚組織培養(yǎng)不同階段的結(jié)果。據(jù)表可知，細(xì)胞脫分化時(shí)使用的激素是_____________________，自交系_____________________的幼胚最適合培養(yǎng)成愈傷組織作為轉(zhuǎn)化受體。（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織時(shí)，T-DNA攜帶插入其內(nèi)的片段轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞。篩選轉(zhuǎn)化的愈傷組織，需使用含___________________________的選擇培養(yǎng)基。（4）轉(zhuǎn)化過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也也許在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。具有內(nèi)含子的報(bào)告基因只能在真核生物中對(duì)的表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。用K分別解決以下愈傷組織，出現(xiàn)藍(lán)色的是_______________（多選）。A．無農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織B．無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織C．農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織D．農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織（5）組織培養(yǎng)獲得的轉(zhuǎn)基因植株（核DNA中僅插入一個(gè)G基因）進(jìn)行自交，在子代含G基因的植株中，純合子占_____________。繼續(xù)篩選，最終選育出抗除草劑純合自交系A(chǔ)。II．通過回交使自交系B獲得抗除草劑性狀（6）抗除草劑自交系A(chǔ)（GG）與自交系B雜交產(chǎn)生F1，然后進(jìn)行多輪回交（下圖）。自交系B作為親本多次回交的目的是使后代________________________________。（7）假設(shè)子代生活力一致，請(qǐng)計(jì)算上圖育種過程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例，并在圖1中畫出相應(yīng)的折線圖。若回交后每代不進(jìn)行鑒定篩選，直接回交，請(qǐng)?jiān)趫D2中畫出相應(yīng)的折線圖。（8）下表是鑒定含G基因植株的4種方法。請(qǐng)預(yù)測(cè)同一后代群體中，4種方法檢出的含G基因植株的比例，從小到大依次是________。方法檢測(cè)對(duì)象檢測(cè)目的檢出的含G基因植株的比例PCR擴(kuò)增基因組DNAG基因x1分子雜交總mRNAG基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物x2抗原-抗體雜交總蛋白質(zhì)G基因編碼的蛋白質(zhì)x3噴灑除草劑幼苗抗除草劑幼苗x4對(duì)Hn繼續(xù)篩選，最終選育出高產(chǎn)、抗病、抗除草劑等優(yōu)良性狀的玉米自交系5．（2023·江蘇單科33）（8分）金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白，某研究小組計(jì)劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒从常≒CR）擴(kuò)增獲得目的基因，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌，用于重金屬?gòu)U水的凈化解決。PCR擴(kuò)增過程示意圖如下，請(qǐng)回答下列問題：（1）從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA，通過______________獲得______________用于PCR擴(kuò)增。（2）設(shè)計(jì)一對(duì)與MT基因兩端序列互補(bǔ)配對(duì)的引物（引物1和引物2），為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，在引物中需要增長(zhǎng)適當(dāng)?shù)腳___________________位點(diǎn)。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成_______________________，而導(dǎo)致引物自連。（3）圖中環(huán)節(jié)1代表_____________，環(huán)節(jié)2代表退火，環(huán)節(jié)3代表延伸，這三個(gè)環(huán)節(jié)組成一輪循環(huán)。（4）PCR擴(kuò)增時(shí)，退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過高會(huì)破壞_____________________的堿基配對(duì)。退火溫度的設(shè)定與引物長(zhǎng)度、堿基組成有關(guān)，長(zhǎng)度相同但__________________的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。（5）假如PCR反映得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物，則可以采用的改善措施有___________（填序號(hào)：=1\*GB3①升高退火溫度 =2\*GB3②減少退火溫度 =3\*GB3③重新設(shè)計(jì)引物）。6.（2023·江蘇理綜卷33）（9分）下表是幾種限制酶辨認(rèn)序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，其中切割位點(diǎn)相同的酶不反復(fù)標(biāo)注。請(qǐng)回答下列問題：（1）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用____________兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過__________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒，學(xué).科.網(wǎng)需將其轉(zhuǎn)入處在__________________態(tài)的大腸桿菌。（2）為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加________________平板上長(zhǎng)出的菌落，常用PCR鑒定，所用的引物組成為圖2中_____________。（3）若BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接，連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為___________________________，對(duì)于該部位，這兩種酶_________（填“都能”、“都不能”或“只有一種能”）切開。（4）若用Sau3AI切圖1質(zhì)粒最多也許獲得_________種大小不同的DNA片段。7.（2023·北京理綜卷31）（16分）嫁接是我國(guó)古代勞動(dòng)人民早已使用的一項(xiàng)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)技術(shù)，目前也用于植物體內(nèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的基礎(chǔ)研究。研究者將具有正常葉形的番茄（X）作為接穗，嫁接到葉形呈鼠耳形的番茄（M）砧木上，結(jié)果見圖1.（1）上述嫁接體可以成活，是由于嫁接部位的細(xì)胞在恢復(fù)分裂、形成_______________組織后，經(jīng)_______________形成上下連通的輸導(dǎo)組織。（2）研究者對(duì)X和M植株的相關(guān)基因進(jìn)行了分析，結(jié)果見圖2.由圖可知，M植株的P基因發(fā)生了類似于染色體結(jié)構(gòu)變異中的_______________變異，部分P基因片段與L基因發(fā)生融合，形成PL基因（PL）。以P-L為模板可轉(zhuǎn)錄出_______________，在_______________上翻譯出蛋白質(zhì)，M植株鼠耳葉形的出現(xiàn)也許與此有關(guān)。（3）嫁接體正常葉形的接穗上長(zhǎng)出了鼠耳形的新葉。為探明因素，研究者進(jìn)行了相關(guān)檢測(cè)，結(jié)果見下表。實(shí)驗(yàn)材料檢測(cè)對(duì)象M植株的葉X植株的葉接穗新生葉PLmRNA有無有PLDNA有無無①檢測(cè)PLmRNA需要先提取總RNA，再以mRNA為模板_______________出cDNA，然后用PCR技術(shù)擴(kuò)增的片段。②檢測(cè)PLDNA需要提取基因組DNA，然后用PCR技術(shù)對(duì)圖2中_____________（選填序號(hào)）位點(diǎn)之間的片段擴(kuò)增。a.Ⅰ~Ⅱb.Ⅱ~Ⅲc.Ⅱ~Ⅳd.Ⅲ~Ⅳ（4）綜合上述實(shí)驗(yàn)，可以推測(cè)嫁接體中PL基因的mRNA____________________________________________________________________________。8.（2023·海南理綜卷31）（15分）基因工程又稱為DNA重組技術(shù)，回答相關(guān)問題：（1）在基因工程中，獲取目的基因重要有兩大途徑，即________________________和從_______________________________中分離。（2）運(yùn)用某植物的成熟葉片為材料，同時(shí)構(gòu)建cDNA文庫和基因組文庫，兩個(gè)文庫相比，cDNA文庫中具有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少，其因素是________________________________________________________________________。（3）在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是______聚合酶辨認(rèn)并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是__________________。（4）將目的基因通過基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時(shí)，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有___________和____________顆粒。9.（2023·上海）回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達(dá)的問題。（9分）在圖27所示的質(zhì)粒PZHZ11（總長(zhǎng)為3.6kb，1kb=1000對(duì)堿基因）中，lacZ基因編碼β-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能將白色的大腸桿菌染成藍(lán)色。（1）若先用限制酶BamHI切開pZHZ11，然后滅活BamHI酶，再加DNA連接酶進(jìn)行連接，最后將連接物導(dǎo)入足夠數(shù)量的大腸桿菌細(xì)胞中，則含3.1kb質(zhì)粒的細(xì)胞顏色為；含3.1kb質(zhì)粒的細(xì)胞顏色為。（2）若將兩端分別用限制酶BamHI和BglHI切開的單個(gè)目的基因片段置換pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段，形成4.9kb的重組質(zhì)粒，則目的基因長(zhǎng)度為kb。（3）上述4.9kb的重組質(zhì)粒有兩種形式，若用BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段；那么聯(lián)合酶切同等長(zhǎng)度的另一種重組質(zhì)粒，則可獲得kb和kb兩種DNA片段。（4）若將人的染色體DNA片段先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中克隆并鑒定目的基因，然后再將獲得的目的基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞中表達(dá)，最后將產(chǎn)生的藥物蛋白注入小鼠體內(nèi)觀測(cè)其生物功能是否發(fā)揮，那么上述過程屬于。A.人類基因工程B.動(dòng)物基因工程C.植物基因工程D.微生物基因工程10.（2023·天津理綜卷7）(12分)人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。（1）未獲取HSA基因，一方面需采集人的血液，提取_____________合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因。下圖中箭頭箭頭表達(dá)一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，請(qǐng)用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向。（2）啟動(dòng)子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體，需要選擇的啟動(dòng)子是_____________（填寫字母，單選）。A.人血細(xì)胞啟動(dòng)子B.水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子C.大腸桿菌啟動(dòng)子D.農(nóng)桿菌啟動(dòng)子 （3）運(yùn)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是____________________________________________。（4）人體合成的初始HSA多肽，需要通過膜系統(tǒng)加工形成對(duì)的的空間結(jié)構(gòu)才干有活性。與途徑II相比，選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢(shì)是________________________________________________。（5）為證明rHSA具有醫(yī)用價(jià)值，須確認(rèn)rHSA與_________________的生物學(xué)功能一致。11.（2023·全國(guó)理綜Ⅱ卷40）（15分）下圖表達(dá)通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物（二倍體）的流程。供體的體細(xì)胞供體的體細(xì)胞卵母細(xì)胞A去核卵母細(xì)胞新個(gè)體代孕個(gè)體初期胚胎重組細(xì)胞回答下列問題：（1）圖中A表達(dá)正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為____________。過程=1\*GB3①表達(dá)去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用_________________________的方法。=2\*GB3②代表的過程是____________________________。（2）通過多次傳代后，供體細(xì)胞中_______________的穩(wěn)定性會(huì)減少。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。（3）若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其因素是______________________________________________________________________________。（4）與克隆羊“多莉（利）”培養(yǎng)成功同樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了_______________________________________________________。12．（2023·全國(guó)理綜Ⅲ卷40）（15分）圖（a）中的三個(gè)DNA片段上以此表達(dá)出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三種限制性內(nèi)切酶的辨認(rèn)序列與切割位點(diǎn)，圖（b）為某種表達(dá)載體示意圖（載體上的EcoRI、Sau3AI的切點(diǎn)是唯一的）。根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問題：（1）經(jīng)BamHI酶切割得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被____________酶切后的產(chǎn)物連接，理由是________________________________________________。（2）若某人運(yùn)用圖（b）所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種具有目的基因的重組子，如圖（c）所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的是____________，不能表達(dá)的因素是_______________________________________________________________________。（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有_________________和_____________________，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是_____________________。13.（2023·全國(guó)理綜Ⅰ卷40）（15分）某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（Ampr表達(dá)氨芐青霉素抗性基因，Tetr表達(dá)四環(huán)素抗性基因）。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后，與用BamHI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連接反映，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是具有環(huán)狀目的基因、具有質(zhì)粒載體、具有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具有的基本條件有_______________________________________________________（答出兩點(diǎn)即可），而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動(dòng)子和終止子。（2）假如用品有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅具有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其因素是_______________________________________________；并且__________________和______________________的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其因素是_______________________________________________。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選具有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用品有_____________的固體培養(yǎng)基。（3）基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自于_____________。14.（2023新課標(biāo)卷Ⅱ，40，15分）(15分)已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)(P)，該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，由305個(gè)氨基酸組成。假如將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)(P1)不僅保存P的功能，并且具有了酶的催化活性。回答下列問題：=1\*GB2⑴從上述資料可知，若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以考慮對(duì)蛋白質(zhì)的_________進(jìn)行改造。=2\*GB2⑵以P基因序列為基礎(chǔ)，獲得P1基因的途徑有修飾基因或合成基因。所獲得的基因表達(dá)時(shí)是遵循中心法則的，中心法則的所有內(nèi)容涉及的復(fù)制；以及遺傳信息在不同分子之間的流動(dòng)，即：。=3\*GB2⑶蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過和，進(jìn)而擬定相相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得基因，再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì)，之后還需要對(duì)蛋白質(zhì)的生物進(jìn)行鑒定。15.（2023新課標(biāo)卷Ⅰ，40，15分）HIV屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒，是艾滋病的病原體?；卮鹣铝袉栴}：（1）用基因工程方法制備HIV的某蛋白（目的蛋白）時(shí)，可先提取HIV中的，以其作為模板，在的作用下合成。獲取該目的蛋白的基因，構(gòu)建重組表達(dá)載體，隨后導(dǎo)入受體細(xì)胞。（2）從受體細(xì)胞中分離純化出目的蛋白，該蛋白作為抗原注入機(jī)體后，刺激機(jī)體產(chǎn)生的可與此蛋白結(jié)合的相應(yīng)分泌蛋白是。該分泌蛋白可用于檢測(cè)受試者血清中的HIV，檢測(cè)的原理是。（3）已知某種菌導(dǎo)致的肺炎在健康人群中罕見，但是在艾滋病患者中卻多發(fā)。引起這種現(xiàn)象的主線因素是HIV重要感染和破壞了患者的部分細(xì)胞，減少了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能。（4）人的免疫系統(tǒng)有癌細(xì)胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易發(fā)生惡性腫瘤。16.（2023年海南，31．（15分）在體內(nèi)，人胰島素基因表達(dá)可合成出一條稱為前胰島素原的肽鏈，此肽鏈在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中經(jīng)酶甲切割掉氨基端一段短肽后成為胰島素原，進(jìn)入高爾基體的胰島素原經(jīng)酶乙切割去除中間片段C后，產(chǎn)生A、B兩條肽鏈，再經(jīng)酶丙作用生成由51個(gè)氨基酸殘基組成的胰島素。目前，運(yùn)用基因工程技術(shù)可大量生產(chǎn)胰島素。回答下列問題：（1）人體內(nèi)合成前胰島素原的細(xì)胞是，合成胰高血糖素的細(xì)胞是。（2）可根據(jù)胰島素原的氨基酸序列，設(shè)計(jì)并合成編碼胰島素原的序列，用該序列與質(zhì)粒表達(dá)載體構(gòu)建胰島素原基因重組表達(dá)載體。再通過細(xì)菌轉(zhuǎn)化、篩選及鑒定，即可建立能穩(wěn)定合成的基因工程菌。（3）用胰島素原抗體檢測(cè)該工程菌的培養(yǎng)物時(shí)，培養(yǎng)液無抗原抗體反映，菌體有抗原抗體反映，則用該工程菌進(jìn)行工業(yè)發(fā)酵時(shí)，應(yīng)從中分離、純化胰島素原。胰島素原經(jīng)酶解決便可轉(zhuǎn)變?yōu)橐葝u素。17.（2023安徽卷，31Ⅱ，9分）科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過乳腺生物反映器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖。由過程①獲得的A為_____________________。在核移植之前，必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核，目的是_______________________。受體應(yīng)選用___________期卵母細(xì)胞。進(jìn)行胚胎移植時(shí)，代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生______________，這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了也許。（4）采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆，理論上可獲得無限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊，這是由于__________________________________________________。18.（2023年天津，8）纖維素分子不能進(jìn)入酵母細(xì)胞，為了使酵母菌可以運(yùn)用環(huán)境中的纖維素為原料生產(chǎn)酒精，構(gòu)建了含3種不同基因片段的重組質(zhì)粒，下面是酵母菌轉(zhuǎn)化及纖維素酶在工程菌內(nèi)合成與運(yùn)送的示意圖。據(jù)圖回答：本研究構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)看選用四種限制酶，其辨認(rèn)序列如下圖，為防止酶切片段的自身環(huán)接，可選用的限制酶組合是_____________或____________A=1\*GB3①=2\*GB3②B=1\*GB3①=3\*GB3③C=2\*GB3②=4\*GB3④D=3\*GB3③=4\*GB3④（2）設(shè)立菌株Ⅰ為對(duì)照，是為了驗(yàn)證____________不攜帶纖維素酶基因。(3)纖維素酶基因的表達(dá)涉及__________和__________過程，與菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中參與纖維素酶合成和分泌的細(xì)胞器尚有______________________________。(4)在以纖維素為唯一C源的培養(yǎng)基上分別培養(yǎng)菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株___________不能存活，因素是_______________________________________________(5)酵母菌生產(chǎn)酒精的細(xì)胞部位是__________________，產(chǎn)生酒精時(shí)細(xì)胞的呼吸方式是___________，在運(yùn)用纖維素生產(chǎn)酒精時(shí)，菌株Ⅳ更具有優(yōu)勢(shì)，由于導(dǎo)入的中重組質(zhì)粒具有___________________。使分泌的纖維素酶固定于細(xì)胞壁，減少因培養(yǎng)液更新而導(dǎo)致的酶的流失，提高酶的運(yùn)用率。19.（2023年江蘇，32.9分)胰島素A、B鏈分別表達(dá)法是生產(chǎn)胰島素的方法之一。圖1是該方法所用的基因表達(dá)載體,圖2表達(dá)運(yùn)用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程(融合蛋白A、B分別表達(dá)β-半乳糖苷酶與胰島素A、B鏈融合的蛋白)。請(qǐng)回答下列問題:(1)圖1基因表達(dá)載體中沒有標(biāo)注出來的基本結(jié)構(gòu)是________________。(2)圖1中啟動(dòng)子是_________酶辨認(rèn)和結(jié)合的部位,有了它才干啟動(dòng)目的基因的表達(dá);氨芐青霉素抗性基因的作用是______________________________。(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)必需的工具酶有_______________________。(4)β-半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達(dá),可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點(diǎn)隱藏在內(nèi)部,其意義在于__________________________________________________________。(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,用溴化氰解決相應(yīng)的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈,且β-半乳糖苷酶被切成多個(gè)肽段,這是由于___________________________________________________。(6)根據(jù)圖2中胰島素的結(jié)構(gòu),請(qǐng)推測(cè)每個(gè)胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量。你的推測(cè)結(jié)果是________________,理由是___________________________________________________。20.（2023年四川，11分）將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過程如下圖所示（注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T－DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中）。（1）過程①需用同種_______酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切。為將過程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來，應(yīng)使用______________培養(yǎng)基。（2）過程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓_______進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是____________________________。（3）若過程④僅獲得大量的根，則應(yīng)在培養(yǎng)基中增長(zhǎng)______________以獲得芽；部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長(zhǎng)根，因素是__________________________________________。（4）檢查轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是_____________________。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少_______的使用，以減輕環(huán)境污染。21.(2023福建卷，33，10分)（10分）GDNF是一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子。對(duì)損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營(yíng)養(yǎng)和保護(hù)作用。研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達(dá)載體（如圖1所示），并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中，用于干細(xì)胞基因治療的研究。請(qǐng)回答：（1）在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過程中，使用胰蛋白酶的目的是______________________。（2）構(gòu)建含GDNF基因的表達(dá)載體時(shí)，需選擇圖1中的限制酶進(jìn)行酶切。（3）經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進(jìn)行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體重要有三種：?jiǎn)蝹€(gè)載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接（如圖1所示）。為鑒定這3種連接方式，選擇HpaI酶和BamHI酶對(duì)篩選的載體進(jìn)行雙酶切，并對(duì)酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析，結(jié)果如圖2所示。圖中第泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。（4）將正向連接的表達(dá)載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后，為了檢測(cè)GDNF基因是否成功表達(dá)，可用相應(yīng)的與提取的蛋白質(zhì)雜交。當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)成一定的密度時(shí)，需進(jìn)行培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)?；蚬こ谈呖碱}答案（1）基因A有內(nèi)含子，在大腸桿菌中，其初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子相應(yīng)的RNA序列不能被切除，無法表達(dá)出蛋白A（2）噬菌體噬菌體的宿主是細(xì)菌，而不是家蠶（3）繁殖快、容易培養(yǎng)（4）蛋白A的抗體（5）DNA可以從一種生物個(gè)體轉(zhuǎn)移到另一種生物個(gè)體2.（1）嫩葉組織細(xì)胞易破碎 防止RNA降解（2）在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以mRNA為模板按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則可以合成cDNA（3）目的基因無復(fù)制原點(diǎn)；目的基因無表達(dá)所需啟動(dòng)子（4）磷酸二酯鍵（5）目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常3.（1）編碼乙的DNA序列起始端無ATG，轉(zhuǎn)錄出的mRNA無起始密碼子（2）模板dNTP（3）①進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)維持培養(yǎng)液是的pH②C4．（20分）（1）A（2）2,4—D乙（3）除草劑（4）BD（5）1/3（6）積累越來越多自交系B的遺傳物質(zhì)/優(yōu)良性狀（7）（8）X4，X3，X2，X15．（8分）（1）逆轉(zhuǎn)錄 cDNA（2）限制性核酸內(nèi)切酶 堿基互補(bǔ)配對(duì)（3）變性（4）引物與模板 GC含量高（5）=2\*GB3②=3\*GB3③6.(9分)(1)Bcl玉和Hind=3\*ROMANIII連接感受(2)四環(huán)素引物甲和引物丙(3)TGATCCACTAGG都不能(4)77.（1）愈傷細(xì)胞分化（2）反復(fù)mRNA核糖體（3）=1\*GB3①逆轉(zhuǎn)錄=2\*GB3②C（4）從