基因工程高考題附答案

選修3——基因工程高考題1．（2023?新課標Ⅰ卷.38）（15分）真核生物基因中通常有內含子，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內含子相應的RNA序列的機制。已知在人體中基因A（有內含子）可以表達出某種特定蛋白（簡稱蛋白A）。回答下列問題：（1）某同學從人的基因組文庫中獲得了基因A，以大腸桿菌作為受體細胞卻未得到蛋白A，其因素是_____________________________________________。（2）若用家蠶作為表達基因A的受體，在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中，不選用______________作為載體，其因素是_______________________________________________________________。（3）若要高效地獲得蛋白A，可選用大腸桿菌作為受體。由于與家蠶相比，大腸桿菌具有_____________________________________________________（答出兩點即可）等優(yōu)點。（4）若要檢測基因A是否翻譯出蛋白A，可用的檢測物質是___________________（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”）。（5）艾弗里等人的肺炎雙球菌轉化實驗為證明DNA是遺傳物質做出了重要奉獻，也可以說是基因工程的先導，假如說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，那么，這一啟示是_______________________________________________________________________________。2．（2023?新課標Ⅱ卷.38）（15分）幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：（1）在進行基因工程操作時，若要從植物體中提取幾丁質酶的mRNA，常選用嫩葉而不選用老葉作為實驗材料，因素是________________________________。提取RNA時，提取液中需添加RNA酶克制劑，其目的是______________________________________。（2）以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是________________________________。（3）若要使目的基因在受體細胞中表達，需要通過質粒載體而不能直接將目的基因導入受體細胞，因素是________________________________________________________（答出兩點即可）。（4）當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是__________________________。（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其也許的因素是____________________________________________。3.（2023?新課標Ⅲ卷.38）（15分）編碼蛋白甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五個片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示?；卮鹣铝袉栴}：現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙，若在啟動子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列（TTCGCTTCT……CAGGAAGGA），則所構建的表達載體轉入宿主細胞后不能翻譯出蛋白乙，因素是_____________________________________________________________。（2）某同學在用PCR技術獲取DNA片段B或D的過程中，在PCR反映體系中加入了DNA聚合酶、引物等，還加入了序列甲作為________________，加入了________________作為合成DNA的原料。（3）現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細胞增殖的作用，某同學做了如下實驗：將一定量的含T淋巴細胞的培養(yǎng)液平均提成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對照，培養(yǎng)并定期檢測T淋巴細胞濃度，結果如圖2。=1\*GB3①由圖2可知，當細胞濃度達成a時，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細胞濃度不再增長，此時若要使T淋巴細胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是________________________。細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是________________________。=2\*GB3②僅根據圖、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少______________（填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所編碼的肽段，則會減少其刺激T淋巴細胞增殖的效果。4．（2023·天津理綜卷9）（20分）玉米自交系（遺傳穩(wěn)定的育種材料）B具有高產、抗病等優(yōu)良性質，但難以直接哺育成轉基因植株，為使其獲得抗除草劑性狀，需依次進行環(huán)節(jié)=1\*ROMANI、=2\*ROMANII實驗。Ⅰ．獲得抗除草劑轉基因玉米自交系A，技術路線如下圖。（1）為防止酶切產物自身環(huán)化，構建表達載體需用2種限制酶，選擇的原則是______（單選）。=1\*GB3①Ti質粒內，每種限制酶只有一個切割位點=2\*GB3②G基因編碼蛋白質的序列中，每種限制酶只有一個切割位點=3\*GB3③酶切后，G基因形成的兩個黏性末端序列不相同=4\*GB3④酶切后，Ti質粒形成的兩個黏性末端序列相同A．=1\*GB3①=3\*GB3③B．=1\*GB3①=4\*GB3④C．=2\*GB3②=3\*GB3③D．=2\*GB3②=4\*GB3④（2）下表是4種玉米自交系幼胚組織培養(yǎng)不同階段的結果。據表可知，細胞脫分化時使用的激素是_____________________，自交系_____________________的幼胚最適合培養(yǎng)成愈傷組織作為轉化受體。（3）農桿菌轉化愈傷組織時，T-DNA攜帶插入其內的片段轉移到受體細胞。篩選轉化的愈傷組織，需使用含___________________________的選擇培養(yǎng)基。（4）轉化過程中，愈傷組織表面常殘留農桿菌，導致未轉化愈傷組織也也許在選擇培養(yǎng)基上生長。具有內含子的報告基因只能在真核生物中對的表達，其產物能催化無色物質K呈現(xiàn)藍色。用K分別解決以下愈傷組織，出現(xiàn)藍色的是_______________（多選）。A．無農桿菌附著的未轉化愈傷組織B．無農桿菌附著的轉化愈傷組織C．農桿菌附著的未轉化愈傷組織D．農桿菌附著的轉化愈傷組織（5）組織培養(yǎng)獲得的轉基因植株（核DNA中僅插入一個G基因）進行自交，在子代含G基因的植株中，純合子占_____________。繼續(xù)篩選，最終選育出抗除草劑純合自交系A。II．通過回交使自交系B獲得抗除草劑性狀（6）抗除草劑自交系A（GG）與自交系B雜交產生F1，然后進行多輪回交（下圖）。自交系B作為親本多次回交的目的是使后代________________________________。（7）假設子代生活力一致，請計算上圖育種過程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例，并在圖1中畫出相應的折線圖。若回交后每代不進行鑒定篩選，直接回交，請在圖2中畫出相應的折線圖。（8）下表是鑒定含G基因植株的4種方法。請預測同一后代群體中，4種方法檢出的含G基因植株的比例，從小到大依次是________。方法檢測對象檢測目的檢出的含G基因植株的比例PCR擴增基因組DNAG基因x1分子雜交總mRNAG基因轉錄產物x2抗原-抗體雜交總蛋白質G基因編碼的蛋白質x3噴灑除草劑幼苗抗除草劑幼苗x4對Hn繼續(xù)篩選，最終選育出高產、抗病、抗除草劑等優(yōu)良性狀的玉米自交系5．（2023·江蘇單科33）（8分）金屬硫蛋白（MT）是一類廣泛存在的金屬結合蛋白，某研究小組計劃通過多聚酶鏈式反映（PCR）擴增獲得目的基因，構建轉基因工程菌，用于重金屬廢水的凈化解決。PCR擴增過程示意圖如下，請回答下列問題：（1）從高表達MT蛋白的生物組織中提取mRNA，通過______________獲得______________用于PCR擴增。（2）設計一對與MT基因兩端序列互補配對的引物（引物1和引物2），為方便構建重組質粒，在引物中需要增長適當?shù)腳___________________位點。設計引物時需要避免引物之間形成_______________________，而導致引物自連。（3）圖中環(huán)節(jié)1代表_____________，環(huán)節(jié)2代表退火，環(huán)節(jié)3代表延伸，這三個環(huán)節(jié)組成一輪循環(huán)。（4）PCR擴增時，退火溫度的設定是成敗的關鍵。退火溫度過高會破壞_____________________的堿基配對。退火溫度的設定與引物長度、堿基組成有關，長度相同但__________________的引物需要設定更高的退火溫度。（5）假如PCR反映得不到任何擴增產物，則可以采用的改善措施有___________（填序號：=1\*GB3①升高退火溫度 =2\*GB3②減少退火溫度 =3\*GB3③重新設計引物）。6.（2023·江蘇理綜卷33）（9分）下表是幾種限制酶辨認序列及其切割位點，圖1、圖2中標注了相關限制酶的酶切位點，其中切割位點相同的酶不反復標注。請回答下列問題：（1）用圖中質粒和目的基因構建重組質粒，應選用____________兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過__________酶作用后獲得重組質粒。為了擴增重組質粒，學.科.網需將其轉入處在__________________態(tài)的大腸桿菌。（2）為了篩選出轉入了重組質粒的大腸桿菌，應在篩選平板培養(yǎng)基中添加________________平板上長出的菌落，常用PCR鑒定，所用的引物組成為圖2中_____________。（3）若BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為___________________________，對于該部位，這兩種酶_________（填“都能”、“都不能”或“只有一種能”）切開。（4）若用Sau3AI切圖1質粒最多也許獲得_________種大小不同的DNA片段。7.（2023·北京理綜卷31）（16分）嫁接是我國古代勞動人民早已使用的一項農業(yè)生產技術，目前也用于植物體內物質轉運的基礎研究。研究者將具有正常葉形的番茄（X）作為接穗，嫁接到葉形呈鼠耳形的番茄（M）砧木上，結果見圖1.（1）上述嫁接體可以成活，是由于嫁接部位的細胞在恢復分裂、形成_______________組織后，經_______________形成上下連通的輸導組織。（2）研究者對X和M植株的相關基因進行了分析，結果見圖2.由圖可知，M植株的P基因發(fā)生了類似于染色體結構變異中的_______________變異，部分P基因片段與L基因發(fā)生融合，形成PL基因（PL）。以P-L為模板可轉錄出_______________，在_______________上翻譯出蛋白質，M植株鼠耳葉形的出現(xiàn)也許與此有關。（3）嫁接體正常葉形的接穗上長出了鼠耳形的新葉。為探明因素，研究者進行了相關檢測，結果見下表。實驗材料檢測對象M植株的葉X植株的葉接穗新生葉PLmRNA有無有PLDNA有無無①檢測PLmRNA需要先提取總RNA，再以mRNA為模板_______________出cDNA，然后用PCR技術擴增的片段。②檢測PLDNA需要提取基因組DNA，然后用PCR技術對圖2中_____________（選填序號）位點之間的片段擴增。a.Ⅰ~Ⅱb.Ⅱ~Ⅲc.Ⅱ~Ⅳd.Ⅲ~Ⅳ（4）綜合上述實驗，可以推測嫁接體中PL基因的mRNA____________________________________________________________________________。8.（2023·海南理綜卷31）（15分）基因工程又稱為DNA重組技術，回答相關問題：（1）在基因工程中，獲取目的基因重要有兩大途徑，即________________________和從_______________________________中分離。（2）運用某植物的成熟葉片為材料，同時構建cDNA文庫和基因組文庫，兩個文庫相比，cDNA文庫中具有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少，其因素是________________________________________________________________________。（3）在基因表達載體中，啟動子是______聚合酶辨認并結合的部位。若采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞，最常用的原核生物是__________________。（4）將目的基因通過基因槍法導入植物細胞時，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有___________和____________顆粒。9.（2023·上海）回答下列有關遺傳信息傳遞與表達的問題。（9分）在圖27所示的質粒PZHZ11（總長為3.6kb，1kb=1000對堿基因）中，lacZ基因編碼β-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能將白色的大腸桿菌染成藍色。（1）若先用限制酶BamHI切開pZHZ11，然后滅活BamHI酶，再加DNA連接酶進行連接，最后將連接物導入足夠數(shù)量的大腸桿菌細胞中，則含3.1kb質粒的細胞顏色為；含3.1kb質粒的細胞顏色為。（2）若將兩端分別用限制酶BamHI和BglHI切開的單個目的基因片段置換pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段，形成4.9kb的重組質粒，則目的基因長度為kb。（3）上述4.9kb的重組質粒有兩種形式，若用BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段；那么聯(lián)合酶切同等長度的另一種重組質粒，則可獲得kb和kb兩種DNA片段。（4）若將人的染色體DNA片段先導入大腸桿菌細胞中克隆并鑒定目的基因，然后再將獲得的目的基因轉入植物細胞中表達，最后將產生的藥物蛋白注入小鼠體內觀測其生物功能是否發(fā)揮，那么上述過程屬于。A.人類基因工程B.動物基因工程C.植物基因工程D.微生物基因工程10.（2023·天津理綜卷7）(12分)人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值，只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。（1）未獲取HSA基因，一方面需采集人的血液，提取_____________合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術擴增HSA基因。下圖中箭頭箭頭表達一條引物結合模板的位置及擴增方向，請用箭頭在方框內標出標出另一條引物的位置及擴增方向。（2）啟動子通常具有物種及組織特異性，構建在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA的載體，需要選擇的啟動子是_____________（填寫字母，單選）。A.人血細胞啟動子B.水稻胚乳細胞啟動子C.大腸桿菌啟動子D.農桿菌啟動子 （3）運用農桿菌轉化水稻受體細胞的過程中，需添加酚類物質，其目的是____________________________________________。（4）人體合成的初始HSA多肽，需要通過膜系統(tǒng)加工形成對的的空間結構才干有活性。與途徑II相比，選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢是________________________________________________。（5）為證明rHSA具有醫(yī)用價值，須確認rHSA與_________________的生物學功能一致。11.（2023·全國理綜Ⅱ卷40）（15分）下圖表達通過核移植等技術獲得某種克隆哺乳動物（二倍體）的流程。供體的體細胞供體的體細胞卵母細胞A去核卵母細胞新個體代孕個體初期胚胎重組細胞回答下列問題：（1）圖中A表達正常細胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為____________。過程=1\*GB3①表達去除細胞核，該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至適當時期再進行，去核時常采用_________________________的方法。=2\*GB3②代表的過程是____________________________。（2）通過多次傳代后，供體細胞中_______________的穩(wěn)定性會減少。因此，選材時必須關注傳代次數(shù)。（3）若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質的角度分析其因素是______________________________________________________________________________。（4）與克隆羊“多莉（利）”培養(yǎng)成功同樣，其他克隆動物的成功獲得也證明了_______________________________________________________。12．（2023·全國理綜Ⅲ卷40）（15分）圖（a）中的三個DNA片段上以此表達出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三種限制性內切酶的辨認序列與切割位點，圖（b）為某種表達載體示意圖（載體上的EcoRI、Sau3AI的切點是唯一的）。根據基因工程的有關知識，回答下列問題：（1）經BamHI酶切割得到的目的基因可以與上述表達載體被____________酶切后的產物連接，理由是________________________________________________。（2）若某人運用圖（b）所示的表達載體獲得了甲、乙、丙三種具有目的基因的重組子，如圖（c）所示。這三種重組子中，不能在宿主細胞中表達目的基因產物的是____________，不能表達的因素是_______________________________________________________________________。（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有_________________和_____________________，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是_____________________。13.（2023·全國理綜Ⅰ卷40）（15分）某一質粒載體如圖所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導致相應的基因失活（Ampr表達氨芐青霉素抗性基因，Tetr表達四環(huán)素抗性基因）。有人將此質粒載體用BamHI酶切后，與用BamHI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反映，用得到的混合物直接轉化大腸桿菌，結果大腸桿菌有的未被轉化，有的被轉化。被轉化的大腸桿菌有三種，分別是具有環(huán)狀目的基因、具有質粒載體、具有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：（1）質粒載體作為基因工程的工具，應具有的基本條件有_______________________________________________________（答出兩點即可），而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。（2）假如用品有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述四種大腸桿菌細胞中，未被轉化的和僅具有環(huán)狀目的基因的細胞是不能區(qū)分的，其因素是_______________________________________________；并且__________________和______________________的細胞也是不能區(qū)分的，其因素是_______________________________________________。在上述篩選的基礎上，若要篩選具有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用品有_____________的固體培養(yǎng)基。（3）基因工程中，某些噬菌體經改造后可以作為載體，其DNA復制所需的原料來自于_____________。14.（2023新課標卷Ⅱ，40，15分）(15分)已知生物體內有一種蛋白質(P)，該蛋白質是一種轉運蛋白，由305個氨基酸組成。假如將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(P1)不僅保存P的功能，并且具有了酶的催化活性?；卮鹣铝袉栴}：=1\*GB2⑴從上述資料可知，若要改變蛋白質的功能，可以考慮對蛋白質的_________進行改造。=2\*GB2⑵以P基因序列為基礎，獲得P1基因的途徑有修飾基因或合成基因。所獲得的基因表達時是遵循中心法則的，中心法則的所有內容涉及的復制；以及遺傳信息在不同分子之間的流動，即：。=3\*GB2⑶蛋白質工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預期蛋白質功能出發(fā)，通過和，進而擬定相相應的脫氧核苷酸序列，據此獲得基因，再經表達、純化獲得蛋白質，之后還需要對蛋白質的生物進行鑒定。15.（2023新課標卷Ⅰ，40，15分）HIV屬于逆轉錄病毒，是艾滋病的病原體。回答下列問題：（1）用基因工程方法制備HIV的某蛋白（目的蛋白）時，可先提取HIV中的，以其作為模板，在的作用下合成。獲取該目的蛋白的基因，構建重組表達載體，隨后導入受體細胞。（2）從受體細胞中分離純化出目的蛋白，該蛋白作為抗原注入機體后，刺激機體產生的可與此蛋白結合的相應分泌蛋白是。該分泌蛋白可用于檢測受試者血清中的HIV，檢測的原理是。（3）已知某種菌導致的肺炎在健康人群中罕見，但是在艾滋病患者中卻多發(fā)。引起這種現(xiàn)象的主線因素是HIV重要感染和破壞了患者的部分細胞，減少了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能。（4）人的免疫系統(tǒng)有癌細胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易發(fā)生惡性腫瘤。16.（2023年海南，31．（15分）在體內，人胰島素基因表達可合成出一條稱為前胰島素原的肽鏈，此肽鏈在內質網中經酶甲切割掉氨基端一段短肽后成為胰島素原，進入高爾基體的胰島素原經酶乙切割去除中間片段C后，產生A、B兩條肽鏈，再經酶丙作用生成由51個氨基酸殘基組成的胰島素。目前，運用基因工程技術可大量生產胰島素?；卮鹣铝袉栴}：（1）人體內合成前胰島素原的細胞是，合成胰高血糖素的細胞是。（2）可根據胰島素原的氨基酸序列，設計并合成編碼胰島素原的序列，用該序列與質粒表達載體構建胰島素原基因重組表達載體。再通過細菌轉化、篩選及鑒定，即可建立能穩(wěn)定合成的基因工程菌。（3）用胰島素原抗體檢測該工程菌的培養(yǎng)物時，培養(yǎng)液無抗原抗體反映，菌體有抗原抗體反映，則用該工程菌進行工業(yè)發(fā)酵時，應從中分離、純化胰島素原。胰島素原經酶解決便可轉變?yōu)橐葝u素。17.（2023安徽卷，31Ⅱ，9分）科研人員采用轉基因體細胞克隆技術獲得轉基因綿羊，以便通過乳腺生物反映器生產人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術路線如圖。由過程①獲得的A為_____________________。在核移植之前，必須先去掉受體卵母細胞的核，目的是_______________________。受體應選用___________期卵母細胞。進行胚胎移植時，代孕母羊對移入子宮的重組胚胎基本上不發(fā)生______________，這為重組胚胎在代孕母羊體內的存活提供了也許。（4）采用胎兒成纖維細胞進行轉基因體細胞克隆，理論上可獲得無限個轉基因綿羊，這是由于__________________________________________________。18.（2023年天津，8）纖維素分子不能進入酵母細胞，為了使酵母菌可以運用環(huán)境中的纖維素為原料生產酒精，構建了含3種不同基因片段的重組質粒，下面是酵母菌轉化及纖維素酶在工程菌內合成與運送的示意圖。據圖回答：本研究構建重組質粒時看選用四種限制酶，其辨認序列如下圖，為防止酶切片段的自身環(huán)接，可選用的限制酶組合是_____________或____________A=1\*GB3①=2\*GB3②B=1\*GB3①=3\*GB3③C=2\*GB3②=4\*GB3④D=3\*GB3③=4\*GB3④（2）設立菌株Ⅰ為對照，是為了驗證____________不攜帶纖維素酶基因。(3)纖維素酶基因的表達涉及__________和__________過程，與菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中參與纖維素酶合成和分泌的細胞器尚有______________________________。(4)在以纖維素為唯一C源的培養(yǎng)基上分別培養(yǎng)菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株___________不能存活，因素是_______________________________________________(5)酵母菌生產酒精的細胞部位是__________________，產生酒精時細胞的呼吸方式是___________，在運用纖維素生產酒精時，菌株Ⅳ更具有優(yōu)勢，由于導入的中重組質粒具有___________________。使分泌的纖維素酶固定于細胞壁，減少因培養(yǎng)液更新而導致的酶的流失，提高酶的運用率。19.（2023年江蘇，32.9分)胰島素A、B鏈分別表達法是生產胰島素的方法之一。圖1是該方法所用的基因表達載體,圖2表達運用大腸桿菌作為工程菌生產人胰島素的基本流程(融合蛋白A、B分別表達β-半乳糖苷酶與胰島素A、B鏈融合的蛋白)。請回答下列問題:(1)圖1基因表達載體中沒有標注出來的基本結構是________________。(2)圖1中啟動子是_________酶辨認和結合的部位,有了它才干啟動目的基因的表達;氨芐青霉素抗性基因的作用是______________________________。(3)構建基因表達載體時必需的工具酶有_______________________。(4)β-半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達,可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點隱藏在內部,其意義在于__________________________________________________________。(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,用溴化氰解決相應的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈,且β-半乳糖苷酶被切成多個肽段,這是由于___________________________________________________。(6)根據圖2中胰島素的結構,請推測每個胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量。你的推測結果是________________,理由是___________________________________________________。20.（2023年四川，11分）將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉，其過程如下圖所示（注：農桿菌中Ti質粒上只有T－DNA片段能轉移到植物細胞中）。（1）過程①需用同種_______酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切。為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來，應使用______________培養(yǎng)基。（2）過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓_______進入棉花細胞；除盡農桿菌后，還須轉接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是____________________________。（3）若過程④僅獲得大量的根，則應在培養(yǎng)基中增長______________以獲得芽；部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根，因素是__________________________________________。（4）檢查轉基因棉的抗蟲性狀，常用方法是_____________________。種植轉基因抗蟲棉能減少_______的使用，以減輕環(huán)境污染。21.(2023福建卷，33，10分)（10分）GDNF是一種神經營養(yǎng)因子。對損傷的神經細胞具有營養(yǎng)和保護作用。研究人員構建了含GDNF基因的表達載體（如圖1所示），并導入到大鼠神經干細胞中，用于干細胞基因治療的研究。請回答：（1）在分離和培養(yǎng)大鼠神經干細胞的過程中，使用胰蛋白酶的目的是______________________。（2）構建含GDNF基因的表達載體時，需選擇圖1中的限制酶進行酶切。（3）經酶切后的載體和GDNF基因進行連接，連接產物經篩選得到的載體重要有三種：單個載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接（如圖1所示）。為鑒定這3種連接方式，選擇HpaI酶和BamHI酶對篩選的載體進行雙酶切，并對酶切后的DNA片段進行電泳分析，結果如圖2所示。圖中第泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。（4）將正向連接的表達載體導入神經干細胞后，為了檢測GDNF基因是否成功表達，可用相應的與提取的蛋白質雜交。當培養(yǎng)的神經干細胞達成一定的密度時，需進行培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于神經干細胞移植治療實驗。基因工程高考題答案（1）基因A有內含子，在大腸桿菌中，其初始轉錄產物中與內含子相應的RNA序列不能被切除，無法表達出蛋白A（2）噬菌體噬菌體的宿主是細菌，而不是家蠶（3）繁殖快、容易培養(yǎng)（4）蛋白A的抗體（5）DNA可以從一種生物個體轉移到另一種生物個體2.（1）嫩葉組織細胞易破碎 防止RNA降解（2）在逆轉錄酶的作用下，以mRNA為模板按照堿基互補配對的原則可以合成cDNA（3）目的基因無復制原點；目的基因無表達所需啟動子（4）磷酸二酯鍵（5）目的基因的轉錄或翻譯異常3.（1）編碼乙的DNA序列起始端無ATG，轉錄出的mRNA無起始密碼子（2）模板dNTP（3）①進行細胞傳代培養(yǎng)維持培養(yǎng)液是的pH②C4．（20分）（1）A（2）2,4—D乙（3）除草劑（4）BD（5）1/3（6）積累越來越多自交系B的遺傳物質/優(yōu)良性狀（7）（8）X4，X3，X2，X15．（8分）（1）逆轉錄 cDNA（2）限制性核酸內切酶 堿基互補配對（3）變性（4）引物與模板 GC含量高（5）=2\*GB3②=3\*GB3③6.(9分)(1)Bcl玉和Hind=3\*ROMANIII連接感受(2)四環(huán)素引物甲和引物丙(3)TGATCCACTAGG都不能(4)77.（1）愈傷細胞分化（2）反復mRNA核糖體（3）=1\*GB3①逆轉錄=2\*GB3②C（4）從