酶制劑的應(yīng)用

關(guān)于酶制劑的應(yīng)用酶為生活添姿彩第2頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月第3頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月第一節(jié)酶在食品加工方面的應(yīng)用第二節(jié)酶在輕工、化工業(yè)方面的應(yīng)用第三節(jié)酶在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用第四節(jié)酶在環(huán)境保護(hù)方面的應(yīng)用第五節(jié)酶在分析檢測(cè)方面的應(yīng)用第六節(jié)酶在生物技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用第4頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月第一節(jié)酶制劑在食品加工方面的應(yīng)用第5頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月一、酶在食品保鮮方面的應(yīng)用1、除氧保鮮葡萄糖氧化酶（glucoseoxidase，EC1.1.3.4）可以去除果汁、飲料、罐頭制品和果蔬干制品中的氧氣，防止產(chǎn)品氧化變質(zhì)，抑制微生物生長(zhǎng)，延長(zhǎng)食品保質(zhì)期。用葡萄糖氧化酶除去脫水蔬菜的糖分可防止貯藏過(guò)程中發(fā)生褐變。瓶裝桔汁貯藏時(shí)因氧化而使色香味變劣，采用葡萄糖氧化酶、過(guò)氧化氫酶去氧即可保持果汁原有的色香味。水果冷凍保藏時(shí)，由于果實(shí)自身的酶作用而發(fā)酵變質(zhì)，也可用葡萄糖氧化酶保鮮。第6頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月2、蛋類制品脫糖保鮮葡萄糖氧化酶3、食品滅菌保鮮溶菌酶（lysozyme，EC3.2.1.17）可以殺滅存在于食品中的細(xì)菌，以達(dá)到防腐保鮮的效果。在干酪、水產(chǎn)品、清酒、鮮奶、奶粉、奶油、生面條等生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用。第7頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月二、酶在食品生產(chǎn)方面的應(yīng)用1、在淀粉類食品生產(chǎn)方面的應(yīng)用（1）葡萄糖的生產(chǎn)以淀粉為原料，先經(jīng)α-淀粉酶液化成糊精，再用糖化酶（葡萄糖淀粉酶）催化生成葡萄糖。第8頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月糖化酶糖化第9頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月（2）果葡糖漿的生產(chǎn)果葡糖漿無(wú)色無(wú)嗅，常溫下流動(dòng)性好，使用方便，在飲料生產(chǎn)和食品加工中可以部分或全部取代蔗糖，而且，較其更具有醇厚的風(fēng)味，應(yīng)用于飲料中可以保持果汁飲料的原果香味。果葡糖漿的優(yōu)點(diǎn)，主要來(lái)自于其成分組成中的果糖，并隨果糖含量的增加更為明顯。果糖代謝過(guò)程中對(duì)胰島素依賴小，故糖尿病者，攝取果糖仍可進(jìn)行正常的能量代謝,故不會(huì)引起血糖升高，這對(duì)糖尿病患者有利。第10頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月在醫(yī)藥上，吡喃果糖可以加快乙醇的代謝作用，可用于治療乙醇中毒。靜脈注射500ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%的果糖溶液可達(dá)效果。美國(guó)果糖液也有取代葡萄糖大輸液的跡象。果葡糖漿還能抑制體內(nèi)蛋白質(zhì)消耗，利于運(yùn)動(dòng)員和體力勞動(dòng)者作營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)給。在體內(nèi)與細(xì)胞的健結(jié)合能力強(qiáng)，能起到穩(wěn)定地逐步釋放能量的作用，故對(duì)能量消耗大的運(yùn)動(dòng)員，服用果糖飲料，可增加體能耐力，有利于運(yùn)動(dòng)員保持體力和迅速消除疲勞等。

在體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化的肝糖生成量是葡萄糖的3倍，具有保肝的功效。第11頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月果葡糖漿的生產(chǎn)層析等精制第12頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月固定化酶技術(shù)生產(chǎn)果葡糖漿的圖示：第13頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月

酶類用途α-淀粉酶制造糊精、麥芽糊精α-淀粉酶+糖化酶生產(chǎn)葡萄糖、發(fā)酵原料處理α-淀粉酶+β-淀粉酶生產(chǎn)飴糖、麥芽糖、啤酒制造脫支酶生產(chǎn)直鏈淀粉α-淀粉酶+糖化酶生產(chǎn)純葡萄糖

+脫支酶β-淀粉酶、脫支酶生產(chǎn)麥芽糖、高麥芽糖漿α-淀粉酶、糖化酶生產(chǎn)果糖、高果糖漿葡萄糖異構(gòu)酶第14頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月（3）飴糖、麥芽糖的生產(chǎn)淀粉α-淀粉酶糊精麥芽糖β-淀粉酶（4）糊精、麥芽糊精的生產(chǎn)糊精廣泛應(yīng)用于食品增稠劑、填充劑和吸收劑。DE值在10~20之間的糊精稱為麥芽糊精。（5）環(huán)糊精的生產(chǎn)淀粉環(huán)糊精葡萄糖苷轉(zhuǎn)移酶α-淀粉酶β-環(huán)糊精環(huán)糊精能選擇性地吸附小分子物質(zhì)，起到穩(wěn)定、乳化、緩釋、提高溶解度和分散度等作用。第15頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月(6)降低淀粉類食品高溫產(chǎn)生丙烯酰胺含量自從2002年4月瑞典斯德哥爾摩大學(xué)MargaretaTornqvist教授首次發(fā)現(xiàn)，在油炸或焙烤的馬鈴薯和谷物類食品中存在具有神經(jīng)毒性的潛在致癌物——丙烯酰胺，有關(guān)丙烯酰胺的問(wèn)題立即引起了全世界的廣泛關(guān)注。隨后英國(guó)、美國(guó)、加拿大等發(fā)達(dá)國(guó)家也開(kāi)展了相關(guān)研究。許多國(guó)家和國(guó)際性機(jī)構(gòu)對(duì)丙烯酰胺在食品中形成機(jī)理、危害評(píng)估和消除方法等方面進(jìn)行廣泛而深入研究。第16頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月目前，淀粉類食品在加工中丙烯酰胺的生成機(jī)理的研究已有突破性進(jìn)展；在食品貯藏和加工方法方面，歐美和日本等國(guó)對(duì)食物加工前的保存條件、加工溫度對(duì)食品中丙烯酰胺含量的影響進(jìn)行了研究，并提出減少丙烯酰胺的方法，如降低加工溫度、體系pH值，減少原料中天門(mén)冬酰胺的含量等。瑞士科學(xué)家Vass等研究發(fā)現(xiàn)天門(mén)冬酰胺酶應(yīng)用可降低薄脆餅干70％丙烯酰胺含量，但作用機(jī)理還有待于進(jìn)一步深入分析和研究。第17頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月2、在蛋白質(zhì)類食品生產(chǎn)方面的應(yīng)用（1）酶應(yīng)用于豆醬的生產(chǎn)（2）酶應(yīng)用于甜面醬的生產(chǎn)（3）酶應(yīng)用于醬油的制造（4）酶應(yīng)用于食醋的生產(chǎn)（5）酶應(yīng)用于食醋的生產(chǎn)第18頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月3、在果蔬類食品生產(chǎn)方面的應(yīng)用第19頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月（1）柑橘制品去除苦味柑桔類脫苦問(wèn)題歷來(lái)是果品加工中的一大問(wèn)題。桔子中的檸檬苦素是引起桔汁產(chǎn)生苦味的原因，利用球形節(jié)桿菌固定化細(xì)胞的檸檬酶處理即可消除苦味。柚苷酶用于分解柑桔類果實(shí)果肉和果汁中的柚皮苷，脫苦效果良好。（2）柑橘罐頭防止白色渾濁橙皮苷酶分解橙皮苷，有效地防止柑桔類罐頭出現(xiàn)白色渾濁.第20頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月（3）果蔬制品的脫色花青素酶用于分解花青素，防止果蔬制品的變色等。（4）在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用果膠酶用于果汁提取——利于壓榨、提高出汁率，利于果汁澄清。果膠酶主要包括：果膠酯酶、聚半乳糖醛酸酶、聚甲基半乳糖醛酸酶、聚半乳糖醛酸裂合酶、聚甲基半乳糖醛酸裂合酶。（5）在果酒生產(chǎn)中的應(yīng)用果膠酶利于果汁和果酒的澄清，效果很好。第21頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月1.保持混濁果汁穩(wěn)定性（番茄汁、番茄醬）2.生產(chǎn)澄清果汁3.提高果汁榨汁率4.加工水果罐頭5.防止果汁混濁

1.破壞果膠酶2.應(yīng)用果膠酶3.應(yīng)用果膠酶4.破壞果膠酶5.應(yīng)用果膠酶果膠酶的應(yīng)用：第22頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月4、酶在烘烤食品中的應(yīng)用1、淀粉酶在面包中的應(yīng)用2、淀粉酶在面粉中的應(yīng)用第23頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月5、酶在啤酒工業(yè)中的應(yīng)用1、制漿過(guò)程中蛋白酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶降解麥芽中的多糖和蛋白質(zhì)。2、發(fā)酵結(jié)束后，蛋白酶和糖化酶降解蛋白和糊精。第24頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月三、酶在食品添加劑生產(chǎn)方面的應(yīng)用1、酸味劑（1）采用乳酸脫氫酶，催化丙酮酸還原為乳酸（2）采用2-鹵代酸脫鹵酶，催化2-氯丙酸水解生成乳酸。（3）采用延胡索酸酶催化反丁烯二酸水合，生成蘋(píng)果酸。第25頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月2、增味劑（1）L-谷氨酸、L-天冬氨酸的生產(chǎn)（2）呈味核苷酸的生產(chǎn)5`-肌苷酸、5`-鳥(niǎo)苷酸5`-磷酸二酯化酶第26頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月3、甜味劑嗜熱菌蛋白酶催化L-天冬氨酸與L-苯丙氨酸甲酯縮合生成天苯肽（阿斯巴甜）。葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶可催化蔗糖轉(zhuǎn)化為帕拉金糖。

4、乳化劑利用脂肪酶的作用，將甘油三酯水解生成甘油單酯（單甘酯）。5、營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑

SOD第27頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月

水果和蔬菜中的風(fēng)味物，一些是由風(fēng)味酶作用于風(fēng)味前體，然后轉(zhuǎn)化生成的。

蒜氨酸蒜素芥子苷異硫氰酸酯亞麻酸黃瓜醛香菇酸香菇精蒜氨酸酶葡萄糖硫苷酶脂肪氧合酶S-烷基-L-半胱氨酸亞砜斷裂酶（1）風(fēng)味酶四、酶在改善食品品質(zhì)和風(fēng)味方面的應(yīng)用第28頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月

酶不僅廣泛用于食品的制造與加工，而且在改善食品的品質(zhì)和風(fēng)味方面大有用場(chǎng)。風(fēng)味酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用，在食品風(fēng)味的再現(xiàn)、強(qiáng)化和改變方面有廣闊應(yīng)用前景。例如：用洋蔥風(fēng)味酶處理甘藍(lán)等蔬菜，可使被處理的蔬菜呈現(xiàn)出洋蔥的風(fēng)味；用奶油風(fēng)味酶作用于含乳脂的巧克力、冰淇淋，人造奶油等食品，可使這些食品增強(qiáng)奶油的風(fēng)味。一些食品在加工或保藏過(guò)程中，可能會(huì)使原有的風(fēng)味減弱或失去，若在這些食品中添加各自特有的風(fēng)味酶，則可使它們恢復(fù)甚至強(qiáng)化原來(lái)的天然風(fēng)味。第29頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月（2）面包生產(chǎn)α-淀粉酶、蛋白酶、面粉中添加α-淀粉酶可調(diào)節(jié)麥芽糖的生成量，使二氧化碳產(chǎn)生和面團(tuán)氣體保持力相平衡。添加蛋白酶可促進(jìn)面筋軟化，增加延伸性，減少揉面時(shí)間和動(dòng)力，改善發(fā)酵效果。面包制作中適當(dāng)添加脂肪酶可增進(jìn)面包的香味，這是因?yàn)橹久缚墒谷橹形⒘康拇妓峄蛲岬母视王シ纸?，從而生成?內(nèi)脂或甲酮等香味物質(zhì)。第30頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月（3）糕點(diǎn)、飲料用β-淀粉酶強(qiáng)化面粉可防止糕點(diǎn)老化。糕點(diǎn)餡心常以淀粉為填料，添加β-淀粉酶可以改善餡心風(fēng)味。糕點(diǎn)制作使用轉(zhuǎn)化酶可使蔗糖水解為轉(zhuǎn)化糖，從而防止糖漿析晶。第31頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月（4）乳制品乳品加工時(shí)添加適量的脂肪酶可增加干酪和黃油的香味。在乳制品工廠中，脂肪酶被廣泛的使用來(lái)水解牛奶脂肪。近來(lái)的應(yīng)用包括奶酪風(fēng)味的增強(qiáng)、加速奶酪的成熟、生產(chǎn)類似奶酪的產(chǎn)品以及對(duì)奶油脂肪和奶油進(jìn)行脂解作用。加入脂肪酶可以釋放出短鏈的脂肪酸（4～6個(gè)碳），這種短鏈的脂肪酸可以導(dǎo)致酸味及濃烈味道的產(chǎn)生，而中等長(zhǎng)鏈脂肪酸的釋放會(huì)對(duì)產(chǎn)品的味道具有有害的影響，此外，游離的脂肪酸還參與簡(jiǎn)單的化學(xué)反應(yīng)，而這些反應(yīng)可以發(fā)動(dòng)其他香味成分的合成。第32頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月水解牛乳中的乳糖——低乳糖奶的生產(chǎn)牛奶中所含的乳糖是一種雙糖，因?yàn)榉肿犹?，要在小腸中消化成較小的葡萄糖及半乳糖才能穿過(guò)腸壁進(jìn)入血管中被吸收。但當(dāng)小腸中的乳糖酶未能發(fā)揮作用時(shí)，乳糖就在大腸內(nèi)發(fā)酵，大約半小時(shí)至2小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)脹氣、腹痛、嘔吐或拉肚子等癥狀。乳糖不耐癥是一種相當(dāng)普遍的現(xiàn)象，特別是亞洲人的乳糖酶缺乏發(fā)生率高達(dá)90%以上。第33頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月酶法低乳糖牛乳的生產(chǎn)工藝水解14-16h，水解率達(dá)50%以上第34頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月（5）去除食品中的抗?fàn)I養(yǎng)因子植酸以鈣、鎂和鉀鹽的形式存在于豆類和谷類中，易于同膳食中的鐵、鋅和其他金屬離子形成難溶的絡(luò)合物，因而使人體吸收這些元素變得困難。植酸酶能催化植酸水解成磷酸和肌醇，顯著降低植酸和寡糖的含量。近年植酸酶還用于釀造和飼料工業(yè)，以改善原料中磷的利用，以及用于去鉀大豆蛋白食物的生產(chǎn)，成為腎臟病人蛋白質(zhì)的來(lái)源。第35頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月一、酶在原料處理方面的應(yīng)用1、發(fā)酵原料的處理α-淀粉酶、纖維素酶、戊聚糖酶第二節(jié)酶在輕工、化工方面的應(yīng)用第36頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月2、紡織原料的處理α-淀粉酶——上漿、退漿纖維素酶在牛仔布返舊整理、棉織物的生物拋光、麻織物的風(fēng)格改性、減量處理等方面有廣泛的應(yīng)用。第37頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月3、制漿、造紙?jiān)系奶幚砟举|(zhì)素酶——提高紙的質(zhì)量木聚糖酶、半纖維素酶、木質(zhì)過(guò)氧化物素酶——漂白纖維素酶——再生紙?zhí)幚淼?8頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月脫皮（酶法）碎屑化學(xué)法紙漿（生物酶紙漿）機(jī)械法紙漿漂白（生物法用木質(zhì)素氧化酶）造紙機(jī)（酶法脫墨）第39頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月4、生絲的脫膠處理胰蛋白酶、木瓜蛋白酶或微生物蛋白酶——生絲脫膠5、羊毛的除垢處理枯草桿菌蛋白酶——去除羊毛表面上存在的鱗垢，提高著色率。6、皮革的脫毛處理堿性或中性蛋白酶——除去毛囊中的蛋白質(zhì)蛋白酶、脂肪酶——除去去毛后的原料皮上的油脂和污垢7、甜菜糖蜜的處理蜜二糖酶——催化棉子糖水解生成半乳糖和蔗糖第40頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月8、煙草原料的處理纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶——處理煙梗和煙末α-淀粉酶、蛋白酶——有機(jī)物的分解與轉(zhuǎn)化硝酸還原酶、蔗糖轉(zhuǎn)化酶——增香第41頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月二、酶在輕工、化工產(chǎn)品制造方面的應(yīng)用1、酶法生產(chǎn)L-氨基酸天冬氨酸的生產(chǎn)丙氨酸的生產(chǎn)第42頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月3、酶法制造化工原料2、酶法生產(chǎn)有機(jī)酸蘋(píng)果酸的生產(chǎn)丙烯酰胺的生產(chǎn)第43頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月4、在發(fā)酵工業(yè)上的應(yīng)用5、在洗滌劑中的應(yīng)用6、在造紙工業(yè)的應(yīng)用7、在制革業(yè)中的應(yīng)用第44頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月三、在飼料加工中的應(yīng)用1、酶制劑在飼料中飛添加效應(yīng)補(bǔ)充動(dòng)物消化酶的不足消除飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子第45頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月2、常用飼料酶制劑的種類及來(lái)源（1）內(nèi)源性消化酶類淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶。（2）外源性分解酶類纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、植酸酶、β-葡聚糖酶、復(fù)合酶。第46頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月一、酶在疾病診斷方面的應(yīng)用（一）根據(jù)體內(nèi)酶活力的變化來(lái)診斷疾病第三節(jié)酶在醫(yī)藥方面的應(yīng)用第47頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月酶疾病與酶活力變化淀粉酶胰、腎病變時(shí)活力升高；肝病時(shí)活力下降膽堿酯酶肝病、肝硬化、有機(jī)磷中毒、風(fēng)濕等，活力下降酸性磷酸酶前列腺癌、肝炎、紅血球病變時(shí)，活力升高堿性磷酸酶佝僂病、軟骨化病、骨瘤、甲狀旁腺功能亢進(jìn)時(shí)，活力升高；軟骨發(fā)育不全等，活力下降谷丙轉(zhuǎn)氨酶肝病、心肌梗死等，活力升高谷草轉(zhuǎn)氨酶肝病、心肌梗死等，活力升高醛縮酶急性傳染性肝炎、心肌梗死，活力顯著升高胃蛋白酶胃癌，活力升高；十二指腸潰瘍，活力下降碳酸酐酶壞血病、貧血等，活力升高第48頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月1、酸性磷酸酶前列腺癌患者以及出現(xiàn)肝炎、甲狀旁腺功能亢進(jìn)、紅血球病變時(shí)，患者血清中酸性磷酸酶活力都會(huì)升高。為了鑒別血清中增加的酸性磷酸酶是來(lái)源于前列腺還是其他組織器官，可采用某些抑制劑。乙醇和酒石酸對(duì)前列腺酸性磷酸酶有顯著的抑制作用。銅離子和甲醛對(duì)紅細(xì)胞的酸性磷酸酶抑制作用顯著。測(cè)定方法：定磷法、測(cè)酚法、磷酸麝香草酚呋法、硝基酚磷酸法第49頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月2、堿性磷酸酶佝僂病、軟骨化病、骨瘤、甲狀旁腺功能亢進(jìn)、黃疸性肝炎患者，血清中堿性磷酸酶活力升高；軟骨發(fā)育不全等，活力下降3、轉(zhuǎn)氨酶血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT，ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT，AST）活力的測(cè)定，已在肝病和心肌梗死等疾病診斷中得到廣泛應(yīng)用。急性傳染性肝炎患者，GPT和GOT活力急劇升高。心肌梗死患者，GOT活力升高尤為顯著。測(cè)定方法：二硝基苯肼顯色法第50頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月4、乳酸脫氫酶廣泛存在于各種組織以及紅細(xì)胞中。在肝癌、急性肝炎、心肌梗死等患者血清中，該酶活力顯著升高。第51頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月HHHHHHHMHHMMHMMMMMMMLDH1

(H4)LDH2(H3M)LDH3(H2M2)LDH4(HM3)LDH5

(M4)乳酸脫氫酶的同工酶5、乳酸脫氫酶同工酶心肌梗死、惡性貧血患者，血清中LDH1增高；白血病、肌肉萎縮患者，LDH2增高；白血病、淋巴肉瘤、肺癌患者，LDH3增高；轉(zhuǎn)移性肝癌、結(jié)腸癌患者，LDH4增高；肝炎、原發(fā)性肝癌、脂肪肝、心肌梗死、外傷、骨折患者，LDH5增高。用醋酸薄膜電泳或瓊脂膜電泳方法進(jìn)行分離。第52頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月6、葡萄糖磷酸異構(gòu)酶急性肝炎患者，血清中葡萄糖磷酸異構(gòu)酶活力極度升高；心肌梗死、急性腎炎、腦溢血患者，該酶活力明顯升高。7、膽堿脂酶?jìng)魅拘愿窝?、肝硬化、風(fēng)濕、營(yíng)養(yǎng)不良等，血清中膽堿脂酶活力下降。通常采用羥胺顯色法測(cè)定。8、端粒酶通過(guò)測(cè)定體細(xì)胞內(nèi)的端粒酶活性，診斷細(xì)胞是否發(fā)生癌變。測(cè)定方法：端粒重復(fù)序列擴(kuò)增法（TRAP）。第53頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月1、用葡萄糖氧化酶檢測(cè)葡萄糖含量，診斷糖尿?。ǘ┯妹笢y(cè)定體液中某些物質(zhì)的變化診斷疾病葡萄糖+O2

葡萄糖酸+H2O2葡萄糖氧化酶監(jiān)測(cè)監(jiān)測(cè)第54頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月2、用葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化物酶檢測(cè)葡萄糖含量，診斷糖尿病葡萄糖+O2葡萄糖酸+H2O2葡萄糖氧化酶H2O2+4-氨基安替吡啉H2O

+醌類化合物過(guò)氧化物酶無(wú)色紅色OD500第55頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月3、用尿素酶徹底尿素含量，診斷肝、腎病變尿素二氧化碳+氨尿素酶監(jiān)測(cè)尿素在肝生成，通過(guò)腎排出體外。腎功能障礙時(shí)，尿液中尿素含量減少而血液中尿素含量增加。當(dāng)肝有實(shí)質(zhì)性病變時(shí)，尿素生成量減少，血液和尿液中尿素含量均減少。第56頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月4、用膽固醇氧化酶測(cè)定膽固醇含量，診斷高血脂癥膽固醇+O24-膽甾烯-3-酮膽固醇氧化酶華勃氏呼吸儀或氧電極第57頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月5、用谷氨酰胺酶測(cè)定腦脊液中谷氨酰胺含量，診斷肝硬化、肝昏迷谷氨酰胺谷氨酸+氨谷氨酰胺酶硫酸硫酸銨銨顯色劑OD490第58頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月6、利用DNA聚合酶進(jìn)行基因診斷、檢測(cè)癌基因7、利用酶標(biāo)免疫檢測(cè)法測(cè)定抗體或抗原第59頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月酶來(lái)源用途淀粉酶、脂肪酶胰臟、麥芽、微生物消化不良、食欲不振溶菌酶蛋清、細(xì)菌止血、消炎、鎮(zhèn)痛尿激酶人尿治療心肌梗死、黃斑部出血青酶素酶臘狀芽孢桿菌治療青霉素引起的變態(tài)膠原酶細(xì)菌消炎、化膿、治療潰瘍?nèi)芾w酶蚯蚓溶血栓L-精氨酸酶、L-蛋氨酸酶微生物抗癌α-半乳糖苷酶牛肝、人胎盤(pán)治療遺傳缺陷病二、酶在疾病治療方面的應(yīng)用第60頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月1、蛋白酶（proteinase）消化劑，用于治療消化不良和食欲不振，使用時(shí)常常與淀粉酶、脂肪酶等一起制成復(fù)合酶制劑，以增加療效消炎劑，對(duì)各種炎癥有很好的療效，它能分解一些蛋白質(zhì)和多肽，使炎癥部位的壞死組織溶解，增加組織的通透性，抑制浮腫，促進(jìn)病灶附近組織積液的排出并抑制肉芽的形成。

如：胰蛋白酶等可用于治療消化不良和消炎。胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶等可用作消炎劑。蛋白酶經(jīng)靜脈注射可治療高血壓，由于蛋白酶催化運(yùn)動(dòng)遲緩素原及胰血管舒張素原的部分肽段水解生成運(yùn)動(dòng)遲緩素和胰血管舒張素，從而使血壓下降。第61頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月2、α-淀粉酶（α-amylase）可用于治療消化不良、食欲不振。常用的有：麥芽淀粉酶、胰淀粉酶、米曲霉淀粉酶（高峰淀粉酶）等。第62頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月3、脂肪酶（lipase）可用于治療消化不良、食欲不振。常用的有：胰脂肪酶、酵母脂肪酶等。假單胞菌脂肪酶能分解血液中的低密度脂蛋白和乳糜微粒，可用于預(yù)防和治療高血脂病。

第63頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月4、溶菌酶（lysozyme）具有抗菌、抗病毒、消炎、鎮(zhèn)痛等作用。常用于難以治愈的細(xì)菌性感染以及帶狀皰疹、腮腺炎、水痘、肝炎、流感等病毒性疾病的治療。第64頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月5、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）具有抗氧化、抗衰老、抗輻射等功效。對(duì)紅斑狼瘡、皮肌炎、結(jié)腸炎及氧中毒等疾病有顯著療效。影響SOD臨床應(yīng)用的主要因素有體內(nèi)半衰期短和有時(shí)對(duì)個(gè)別病人產(chǎn)生一定的致敏性。為解決這些影響因素,國(guó)內(nèi)外用化學(xué)修飾的方法對(duì)其進(jìn)行改造,美國(guó)用聚乙二醇修飾的SOD已進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)。第65頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月6、L-天冬酰胺酶（L-asparaginase）可用于治療癌癥，特別是對(duì)于治療白血病療效顯著。分解L-天冬酰氨,阻斷依賴外源L-天冬酰氨的癌細(xì)胞的蛋白合成途徑,臨床應(yīng)用于治療急性淋巴細(xì)胞性白血病。該酶在體內(nèi)具有免疫反應(yīng)性質(zhì)，且半衰期短、穩(wěn)定性差mPEG2修飾水溶性的N,O-羧甲基殼聚糖（NOCC）修飾第66頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月7、尿激酶（urokinase，UK）是一種具有溶解血栓功能的堿性蛋白酶。常用于治療各種血栓性疾病，如心肌梗死、腦血栓、肺血栓、視網(wǎng)膜血管閉塞、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。

溶纖維蛋白酶原溶纖維蛋白酶

——用來(lái)治療血栓病尿激酶第67頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月8、納豆激酶（nattokinase）可催化血纖維蛋白水解，同時(shí)可以激活纖溶酶原成為纖溶酶。納豆激酶能夠?qū)Ｒ蝗芙庋?，?duì)纖維蛋白原沒(méi)有降解活性，大量使用不會(huì)引起出血，可以預(yù)防和輔助治療以下病癥：腦血栓、腦梗塞、心肌梗塞、血栓后遺癥、血栓靜脈炎、脈管炎等。第68頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月9、凝血酶（thrombin）可用于各種出血性疾病的治療。10、組織纖溶酶原激活劑（plasminogenactivator，PA）在治療心肌梗死、腦血栓等方面療效顯著。

第69頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月11、乳糖酶（lactase）可用于乳糖不耐癥等的治療。12、核酸類酶（ribozyme）可阻斷某些不良基因的表達(dá)，用于基因治療或病毒性疾病的治療。第70頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月三、酶在藥物制造方面的應(yīng)用1、青霉素?；钢圃彀牒铣煽股厍嗝顾仵；缚纱呋嗝顾鼗蝾^孢霉素水解生成6-氨基青霉烷酸或7-氨基頭孢霉烷酸。又可進(jìn)一步催化?；磻?yīng)，合成新型頭孢霉素。

青霉素G或V－－－－－－→6-氨基青霉烷酸氨芐青霉素青霉素?；浮?-APA）第71頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月青霉烷酸的生產(chǎn)6-氨基青霉烷酸（6-APA）第72頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月2、β-酪氨酸酶制造多巴β-酪氨酸酶可催化L-酪氨酸氧化，生成二羥苯丙氨酸（多巴）。多巴可用于治療帕金森氏癥。3、核苷磷酸化酶制造阿糖腺苷阿糖尿苷+磷酸尿苷磷酸化酶尿嘧啶+阿拉伯糖-1-磷酸嘌呤核苷磷酸化酶阿糖腺苷阿拉伯糖-1-磷酸+腺嘌呤抗癌、抗病毒第73頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月4、無(wú)色桿菌蛋白酶制造人胰島素可特異性地催化胰島素B鏈羧基末端（第30位）上的氨基酸置換反應(yīng)，由豬胰島素（Ala-30）轉(zhuǎn)變?yōu)槿艘葝u素(Thr-30)，以增加療效。第74頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月豬胰島素人胰島素第75頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月5、多核苷酸磷酸化酶生產(chǎn)聚肌胞RNAn+核苷二磷酸=RNAn+1+磷酸該酶還可催化肌苷酸聚合生成聚肌苷酸，也可催化胞苷酸聚合生成聚胞苷酸，還可催化肌苷酸和胞苷酸混合聚合生成聚肌胞?？共《?、抑癌、增強(qiáng)肌體免疫力第76頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月一、在環(huán)境監(jiān)測(cè)方面的應(yīng)用1、利用膽堿酯酶檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥污染膽堿酯酶可以催化膽堿酯水解生成膽堿和有機(jī)酸。有機(jī)磷農(nóng)藥是膽堿酯酶的一種抑制劑，可以通過(guò)檢測(cè)膽堿酯酶的活性變化，來(lái)判定是否受到有機(jī)磷農(nóng)藥的污染。第四節(jié)酶在環(huán)境保護(hù)方面的應(yīng)用第77頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月通過(guò)檢測(cè)家魚(yú)血清乳酸同工酶（SLDH）的活性變化，可以檢測(cè)水中重金屬污染的情況及其危害程度。鎘和鉛的存在可以使SLDH5活性升高；汞污染使SLDH1活性升高；銅的存在則引起SLDH4的活性降低。2、利用乳酸脫氫酶的同工酶監(jiān)測(cè)重金屬污染第78頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月3、通過(guò)β-葡聚糖苷酸酶監(jiān)測(cè)大腸桿菌污染將4-甲基香豆素基-β-葡聚糖苷酸摻入選擇性培養(yǎng)基中，樣品中如果有大腸桿菌存在，大腸桿菌中的β-葡聚糖苷酸酶就會(huì)將其水解，生成甲基香豆素。甲基香豆素在紫外光的照射下發(fā)出熒光。由此可以監(jiān)測(cè)水或食品中是否污染大腸桿菌。4、利用亞硝酸還原酶檢測(cè)水中亞硝酸鹽濃度通過(guò)亞硝酸還原酶電極，可以檢測(cè)水中亞硝酸鹽的濃度。第79頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月二、在廢水處理方面的應(yīng)用淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶、亞硝酸還原酶含酚廢水的處理過(guò)氧化物酶多酚氧化酶含有殘留有機(jī)氯農(nóng)藥土壤的處理某些細(xì)菌中含有一種特殊的甲烷單加氧酶(MMO),具有比較廣泛的底物選擇性，能夠催化降解大多數(shù)氯代烴污染物

先轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的醇，然后再在其它酶作用下，分解成無(wú)害物質(zhì)。第80頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月HNO3+還原型受體=========HNO2

+受體硝酸還原酶HNO2+還原型受體=========NO+H2O+受體亞硝酸還原酶2NO+還原型受體============N2+受體氧化一氮還原酶◆含有硝酸鹽、亞硝酸鹽的地下水或廢水，可以采用固定化硝酸還原酶（nitratereductase,EC1.7.99.4）、亞硝酸還原酶(nitritereductase,EC1.7.99.3)和氧化一氮還原酶(nitric-oxidereductase,EC1.7.99.2)進(jìn)行處理。使硝酸根、亞硝酸根逐步還原，最終成為氮?dú)?。其反?yīng)過(guò)程如下：第81頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月在脂肪酶催化下，己二酸（或癸二酸）與蔗糖在己烷溶液中進(jìn)行酯化反應(yīng)，能夠生成聚糖酯高聚物：三、在可生物降解材料開(kāi)發(fā)方面的應(yīng)用聚酯類、聚糖酯類多肽類、聚酰胺類第82頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月第83頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月

第五節(jié)酶在分析檢測(cè)方面的應(yīng)用

利用酶催化作用的高度專一性對(duì)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，巳成為物質(zhì)分析檢測(cè)的重要手段。一、概述二、單酶反應(yīng)檢測(cè)三、多酶偶聯(lián)反應(yīng)檢測(cè)四、酶標(biāo)記免疫反應(yīng)檢測(cè)

第84頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月一、概述1.酶法檢測(cè)：用酶進(jìn)行物質(zhì)分析檢測(cè)的方法統(tǒng)稱為酶法檢測(cè)或酶法分析。酶法檢測(cè)是以酶的專一性為基礎(chǔ)．以酶作用后物質(zhì)的變化為依據(jù)來(lái)進(jìn)行的。2.酶法檢測(cè)的基本條件：要進(jìn)行酶法檢測(cè)必須具備兩個(gè)基本條件：一是要有專一性高的酶，二是對(duì)酶作用后的物質(zhì)變化要有可靠的檢出方法．3.酶法檢測(cè)步驟：酶法檢測(cè)一般包括兩個(gè)步驟，第一步是酶反應(yīng)。即將酶與樣品接觸，在適宜的條件下(包括溫度，pH值、抑制劑和激活劑濃度等)進(jìn)行催化反應(yīng)。第二步是檢測(cè)。即測(cè)定反應(yīng)前后物質(zhì)的變化情況，可以測(cè)定底物的減少，產(chǎn)物的增加或輔酶的變化等。第85頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月

酶標(biāo)免疫測(cè)定技術(shù)還可以應(yīng)用于某些具有親和力的生物分子對(duì)之間的測(cè)定。如用酶標(biāo)抗胰島素蛋白測(cè)定胰島素的含量，酶標(biāo)抗生物素蛋白測(cè)定生物素含量等。這類檢測(cè)的原理與酶標(biāo)免疫測(cè)定相類似，但由于不是抗體抗原間的免疫結(jié)合，只是分子對(duì)之間的親和結(jié)合，故稱為酶標(biāo)親和檢測(cè)。第86頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月一、酶在除去細(xì)胞壁方面的應(yīng)用1、胞內(nèi)物質(zhì)提取2、原生質(zhì)體的制備第六節(jié)酶在生物技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用第87頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月5’5’GCAATGCTTAGCCATCGTTACGAATCGGTA核酸外切酶核酸內(nèi)切酶核酸外切酶二、在大分子切割方面的應(yīng)用1、限制性核酸內(nèi)切酶第88頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月

5’-GAATTC-3’3’-

CTTAAG-5’5’-GTTAAC-3’3’-CAATTG

-5’EcoRⅠ的識(shí)別序列HaeⅠ的識(shí)別序列第89頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月5’NNNNNNNGAATTCNNNNNNNN3’3’NNNNNNNCTTAAGNNNNNNNN5’5’NNNNNG

3’NNNNNCTTAApEcoRⅠ的識(shí)別序列和酶切切口（粘端）pAATTCNNNNNN3'GNNNNNN5’第90頁(yè),共100頁(yè)，星期六，2024年，5月

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