2019-2020學(xué)年生物人教版選修1同步檢測：專題2.課題2-土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

PAGE課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)理一理判一判1.選擇培養(yǎng)基只允許特定的微生物生長，而抑制或阻止其他微生物的生長。(√)2．稀釋涂布平板法能分離細(xì)菌，也能計(jì)數(shù)。(√)3．平板劃線法只能純化細(xì)菌，不能計(jì)數(shù)。(√)4．從土壤中取樣時(shí)，土層越淺越好。(×)5．來自土壤的微生物稀釋倍數(shù)越大越好。(×)6．測定不同微生物數(shù)量時(shí)，接種的土壤懸浮液的稀釋度相同。(×)7．菌落特征是鑒別菌種的重要依據(jù)。(√)8．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。(√)9．可用含酚紅指示劑的培養(yǎng)基對篩選出的尿素分解菌作進(jìn)一步鑒定。(√)悟一悟1.可利用分離對象對某種營養(yǎng)物質(zhì)有“嗜好”的原理，專門在培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物質(zhì)，并且使該營養(yǎng)物質(zhì)成為培養(yǎng)基中某類基本營養(yǎng)物質(zhì)的唯一供給者，如篩選能分解尿素的細(xì)菌，就將尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源。2．可利用分離對象對某種抑菌物質(zhì)的抗性，在混合培養(yǎng)物中加入該抑菌物質(zhì)，經(jīng)培養(yǎng)后，其他微生物生長受到抑制，而該分離對象卻可大量增殖，在數(shù)量上占據(jù)優(yōu)勢。3．顯微鏡直接計(jì)數(shù)法本身不能區(qū)分細(xì)菌的死活，因此一般用來統(tǒng)計(jì)總菌數(shù)。但是，通過一定的輔助處理，可以實(shí)現(xiàn)活菌計(jì)數(shù)，如在計(jì)數(shù)前用臺盼藍(lán)染液進(jìn)行染色，可以通過統(tǒng)計(jì)無色細(xì)胞的個數(shù)來進(jìn)行活菌數(shù)的統(tǒng)計(jì)。4．對照實(shí)驗(yàn)中除測試因素(自變量)不同外，其他因素要保證和實(shí)驗(yàn)組相同且適宜，并遵循單一變量原則。5．在培養(yǎng)基制作和保存過程中，都易出現(xiàn)培養(yǎng)基被污染、樣品被污染等情況，從而對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，因此必須要設(shè)置空白對照或相互對照。感悟體會：練一練1.[2019·平遙縣第二中學(xué)高二月考]在做土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲組實(shí)驗(yàn)用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，乙組實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基中的氮源除尿素外還含硝酸鹽，其他成分都相同，在相同條件下操作，培養(yǎng)觀察，則乙組實(shí)驗(yàn)屬于()A．空白對照B．條件對照C．相互對照D．標(biāo)準(zhǔn)對照解析：生物實(shí)驗(yàn)中的實(shí)驗(yàn)可以分為空白對照，條件對照，自身對照，相互對照等。①空白對照是指不給予對照組任何處理的對照；②條件對照是指雖給對照組施以部分實(shí)驗(yàn)因素，但不是所要研究的處理因素；③自身對照是指對照和實(shí)驗(yàn)都在同一研究對象上進(jìn)行。④標(biāo)準(zhǔn)對照是指生物生理、生化的某些項(xiàng)目也都有相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)，將觀察測定的實(shí)驗(yàn)數(shù)值與規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值相比較，以確定其正常與否的對照方法。理清題目中的實(shí)驗(yàn)的相關(guān)條件，分析對照實(shí)驗(yàn)的類型。根據(jù)以上分析可知，乙組和甲組實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)條件不同，形成了條件對照。綜上所述，B正確，A、C、D錯誤。答案：B2．[2019·新絳縣第二中學(xué)高二月考]以下關(guān)于分解尿素的細(xì)菌的說法，正確的是()A．能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶B．以尿素作為唯一的碳源C．環(huán)境中含有大量的尿素誘導(dǎo)該細(xì)菌產(chǎn)生了分解尿素的特性D．以尿素為唯一氮源且添加了酸堿緩沖劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)該菌后不會使酚紅指示劑變紅解析：能分解尿素是因?yàn)榭梢苑置陔迕?，A項(xiàng)錯誤；篩選分解尿素的細(xì)菌時(shí)以尿素為唯一氮源，B項(xiàng)錯誤；該細(xì)菌分解尿素的特性是基因控制的，C項(xiàng)錯誤；以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中，只有能分解尿素的微生物可以生長，該微生物可以分泌脲酶，把尿素分解成氨，但由于酸堿緩沖液的存在，培養(yǎng)基的pH可以維持穩(wěn)定，故不會使酚紅指示劑變紅，D項(xiàng)正確。答案：D3．[2019·貴州省思南中學(xué)高二月考]分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對培養(yǎng)基的要求是()①加尿素②不加尿素③加瓊脂糖④不加瓊脂糖⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧D．①④⑥⑦解析：分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)微生物，因此培養(yǎng)基中應(yīng)該加入有機(jī)碳源，如葡萄糖；分離分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基從功能上屬于選擇培養(yǎng)基，應(yīng)該以尿素為唯一氮源；從物理性質(zhì)上屬于固體培養(yǎng)基，因此應(yīng)加入凝固劑瓊脂糖，①③⑤⑧正確；故選C項(xiàng)。答案：C考點(diǎn)1實(shí)驗(yàn)原理1.[2019·貴州省銅仁第一中學(xué)高二期中]下列關(guān)于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法的敘述，正確的是()A．采用平板計(jì)數(shù)法獲得的菌落數(shù)往往多于實(shí)際的活菌數(shù)B．當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，一個活菌會形成一個菌落C．為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般采用密度較大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D．采用平板劃線法和稀釋涂布平板法都可以對培養(yǎng)基中的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)解析：平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)，用于計(jì)數(shù)的是稀釋涂布平板法，A項(xiàng)錯誤；當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，一個活菌會形成一個菌落，B項(xiàng)正確；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選取菌落數(shù)在30～300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，C項(xiàng)錯誤；稀釋涂布平板法又稱活菌計(jì)數(shù)，是由一個單細(xì)胞繁殖形成單個菌落這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，可對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，而平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)，D項(xiàng)錯誤。答案：B2．[2019·四川樹德中學(xué)高二月考]在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。產(chǎn)生A同學(xué)結(jié)果的原因可能有()①土樣不同②培養(yǎng)基污染③操作失誤④沒有設(shè)置對照A．①②③④B．②③④C．①③④D．①②③解析：同一稀釋濃度下菌落數(shù)不同，產(chǎn)生A同學(xué)結(jié)果的可能的原因可能是土樣不同、培養(yǎng)基污染，或者操作失誤，未達(dá)到相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。答案：D3．[2019·廣西高二期末]用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是()A．涂布了一個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B．涂布了兩個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是251和260，取平均值256C．涂布了三個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212、256，取平均值163D．涂布了三個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值233解析：用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)。答案：D考點(diǎn)2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)4.[2019·四川高二期末]請選出分離土壤細(xì)菌的正確操作步驟()①土壤取樣②稱取10g土壤，加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中③吸取0.1mL進(jìn)行平板涂布④將菌液依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107倍A．①→②→③→④B．①→③→②→④C．①→②→④→③D．①→④→②→③解析：分離純化土壤微生物的正確的操作步驟：①土壤取樣→②制備土壤溶液：稱取10g土壤，加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中→④制備土壤樣品稀釋液：將菌液依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107倍→③涂布平板分離：吸取0.1mL進(jìn)行平板涂布。答案：C5．[2019·貴州省銅仁第一中學(xué)高二期中]下列有關(guān)“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)”的敘述，錯誤的是()A．該實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置空白對照組，以檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否受到雜菌污染B．分解尿素的細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，脲酶能分解尿素產(chǎn)生氮?dú)夂虲O2C．統(tǒng)計(jì)尿素分解菌的數(shù)目時(shí)，以菌落數(shù)在30～300以內(nèi)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D．該實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基應(yīng)以尿素作唯一氮源、并加有酚紅指示劑鑒定尿素分解菌解析：該實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置空白對照組，以檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否受到雜菌污染，A項(xiàng)正確；分解尿素的細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解為氨和CO2，B項(xiàng)錯誤；統(tǒng)計(jì)尿素分解菌的數(shù)目時(shí)，以菌落數(shù)在30～300以上的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，求其平均值，C項(xiàng)正確；用尿素為唯一氮源、加有酚紅指示劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)尿素分解菌，指示劑變紅，D項(xiàng)正確。答案：B6．[2019·吉林白城一中高二月考]在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑的目的是()A．篩選出能分解尿素的細(xì)菌B．對分離的菌種作進(jìn)一步鑒定C．作細(xì)菌的營養(yǎng)成分D．如指示劑變藍(lán)就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素解析：尿素分解菌可以產(chǎn)生脲酶將尿素分解分解為氨，使pH升高，培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后，氨可以使指示劑呈紅色，據(jù)此可以用酚紅指示劑鑒別尿素分解菌。答案：B7．[2019·湖北高二月考]可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是()A．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入伊紅—美藍(lán)試劑C．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹Ⅲ試劑D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑解析：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中，不能分解尿素獲得氮源的細(xì)菌不能生長，而分解尿素的細(xì)菌能利用尿素作氮源，將尿素分解為氨，使pH升高。若培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑將變紅，A項(xiàng)正確；伊紅美藍(lán)試劑是鑒定大腸桿菌的，不能分離出分解尿素的細(xì)菌，B項(xiàng)錯誤；蘇丹III試劑是鑒定脂肪的，不能分離出分解尿素的細(xì)菌，C項(xiàng)錯誤；雙縮脲試劑是鑒定蛋白質(zhì)的，不能分離出分解尿素的細(xì)菌，D項(xiàng)錯誤。故選A項(xiàng)。答案：A8．人和哺乳動物的尿中含有尿素，環(huán)境中大量尿素的存在會造成污染。土壤中有些細(xì)菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源。某研究小組對土壤中的這類細(xì)菌進(jìn)行分離，用以回收氮源，同時(shí)可凈化環(huán)境。請回答下列相關(guān)問題：(1)分離培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)必須進(jìn)行無菌操作。配制培養(yǎng)基時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是________。(2)采用________________法將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后接種培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在________旁進(jìn)行操作。(3)用________________培養(yǎng)基篩選獲得能分泌脲酶的細(xì)菌，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。若培養(yǎng)基中存在能分泌脲酶的細(xì)菌，其菌落周圍會出現(xiàn)________，這是由于尿素被分解產(chǎn)生________，遇培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力________。解析：(1)配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先調(diào)pH，后滅菌，滅菌后再調(diào)節(jié)pH可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的污染。(2)將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，應(yīng)采用稀釋涂布平板法接種，然后培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作，以避免污染雜菌。(3)獲得能分泌脲酶的細(xì)菌，可以用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。若培養(yǎng)基中存在能分泌脲酶的細(xì)菌，尿素被分解后產(chǎn)生氨，可以使培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑產(chǎn)生紅色，使菌落周圍出現(xiàn)紅色圓環(huán)，從而證明這一菌株可以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株分解的尿素越多，利用尿素的能力越強(qiáng)。答案：(1)先調(diào)pH，后滅菌(2)稀釋涂布平板酒精燈火焰(3)以尿素為唯一氮源選擇紅色圓環(huán)現(xiàn)象氨越強(qiáng)9．[2019·黑龍江大慶實(shí)驗(yàn)中學(xué)高二期末]某研究小組從牛的瘤胃中采集樣本，進(jìn)行分解尿素的微生物的分離與計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下，請回答下列問題：eq\x(配制培養(yǎng)基)→eq\x(滅菌、倒平板)→eq\x(接種)→eq\x(培養(yǎng))→eq\x(觀察、統(tǒng)計(jì))(1)分解尿素的微生物含有________________，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)以尿素作為唯一氮源，尿素會被分解成________使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。培養(yǎng)基中添加________作為指示劑，可使目標(biāo)菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶。(2)該小組在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是____________；然后將1mL瘤胃樣液稀釋1000倍，在3個平板上用涂布平板法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板的菌落數(shù)分別為49、47和45。據(jù)此可得出每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為________，理論上，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)________(低、等、高)于接種的實(shí)際活菌數(shù)目。解析：(1)分解尿素的微生物含有脲酶(分解尿素的酶)，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)以尿素作為唯一氮源，尿素會被分解成氨(NH3)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)；培養(yǎng)基中添加酚紅作為指示劑，可使目標(biāo)菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶。(2)接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成，用來進(jìn)行對照，以檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；根據(jù)題意可知，3個平板上生長的平均菌落數(shù)C＝(49＋47＋45)÷3＝47個，涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積V＝0.1mL，稀釋倍數(shù)M＝103，所以每毫升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為(C÷V)×M＝(47÷0.1)×103＝4.7×105個，則每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為4.7×105×103＝4.7×108個。當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個菌落，因此，理論上，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往低于接種的實(shí)際活菌數(shù)目。答案：(1)脲酶(分解尿素的酶)氨(NH3)酚紅(2)檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格4.7×108低一、選擇題1．[2019·北京四中高二期中]“分離土壤中以尿素為氮源的微生物”實(shí)驗(yàn)，配制LB全營養(yǎng)培養(yǎng)基的目的是()A．作為實(shí)驗(yàn)組，分離尿素分解菌B．作為對照組，檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底C．作為對照組，觀察尿素分解菌在含有酚紅培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)D．作為對照組，觀察全營養(yǎng)條件下能生長的土壤微生物的種類和數(shù)量解析：“分離土壤中以尿素為氮源的微生物”實(shí)驗(yàn)，應(yīng)設(shè)置實(shí)驗(yàn)組和對照組，實(shí)驗(yàn)的變量是培養(yǎng)基的不同，故實(shí)驗(yàn)組應(yīng)配置以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，屬于選擇培養(yǎng)基，對照組為全營養(yǎng)培養(yǎng)基，因此，配制LB全營養(yǎng)培養(yǎng)基的目的是作為對照組，觀察全營養(yǎng)條件下能生長的土壤微生物的種類和數(shù)目，以區(qū)分選擇培養(yǎng)基是否有選擇作用，D項(xiàng)正確。答案：D2．在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲同學(xué)從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。下列有關(guān)敘述，出現(xiàn)科學(xué)性錯誤的是()A．甲同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是由于土樣不同，也可能是操作過程出了問題B．可以將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染C．將其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與甲同學(xué)一致，則可以證明甲同學(xué)無誤D．B、C選項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)思路都遵循了實(shí)驗(yàn)的對照原則解析：甲同學(xué)獲得的菌落遠(yuǎn)大于其他同學(xué)，可能是由于所取的土樣不同，也可能操作過程被污染，A項(xiàng)正確；污染可能是培養(yǎng)基滅菌不徹底，或操作過程沒有保證無菌操作，將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染，B項(xiàng)正確；若是土樣不同造成的，讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與甲同學(xué)一致，則可以證明甲同學(xué)操作正確，C項(xiàng)正確；B選項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)思路遵循了實(shí)驗(yàn)的對照原則，C選項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)思路遵循了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性原則，D項(xiàng)錯誤；故選D項(xiàng)。答案：D3．[2019·四川閬中中學(xué)高二期中]下列有關(guān)“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是()A．分解尿素的細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解產(chǎn)生氮?dú)釨．在稀釋度足夠高時(shí)，所形成的單個菌落一定是由最初的一個細(xì)胞繁殖而來的C．統(tǒng)計(jì)尿素分解菌的數(shù)目時(shí)，以菌落數(shù)在300以上的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D．用尿素為唯一氮源、加有酚紅指示劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)尿素分解菌，指示劑變紅解析：分解尿素的細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解產(chǎn)生二氧化碳和氨氣，A項(xiàng)錯誤；在稀釋度足夠高時(shí)，所形成的單個菌落可能是由最初的一個細(xì)胞繁殖而來的，也可能幾個細(xì)胞未分開，繁殖形成一個菌落，B項(xiàng)錯誤；統(tǒng)計(jì)尿素分解菌的數(shù)目時(shí)，以菌落數(shù)在30～300以內(nèi)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，C項(xiàng)錯誤；用尿素為唯一氮源、加有酚紅指示劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)尿素分解菌，指示劑變紅，D項(xiàng)正確。答案：D4．[2019·四川雅安中學(xué)高二月考]分離土壤中尿素分解菌的實(shí)驗(yàn)操作中，無法分離得到尿素分解菌的原因最可能是()A．制備浸出液的土壤取自土壤的表層B．未對土壤樣液進(jìn)行稀釋就進(jìn)行涂布培養(yǎng)C．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中添加尿素作為氮源D．接種操作者的雙手未用酒精棉進(jìn)行消毒解析：制備浸出液的土壤取自土壤的表層與純化的尿素分解菌的單菌落有關(guān)，但影響不大，A項(xiàng)不符合題意；未對土壤樣液進(jìn)行稀釋，土壤樣液中的尿素分解菌濃度大，容易分離得到尿素分解菌，B項(xiàng)不符合題意；該培養(yǎng)基必須以尿素為唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或在其中添加尿素作為氮源，否則大量的微生物都能生長，該培養(yǎng)基就無法起到選擇的作用，即無法分離得到尿素分解菌，C項(xiàng)符合題意；接種操作者的雙手未用酒精棉進(jìn)行消毒，可能會造成污染，但對分離尿素分解菌影響不大，D項(xiàng)不符合題意。答案：C5．[2019·河南省開封市第十中學(xué)高二月考]下列可以鑒定分解尿素的細(xì)菌的方法是()A．在加入尿素及其他氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑C．在加入尿素及其他氮源的培養(yǎng)基中加入伊紅—美藍(lán)試劑D．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入伊紅—美藍(lán)試劑解析：篩選尿素分解菌應(yīng)采用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素分解為氨時(shí)，培養(yǎng)基的pH升高，使酚紅指示劑將變紅。綜上所述，鑒定分解尿素的細(xì)菌的方法是在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，B項(xiàng)正確，A、C、D三項(xiàng)錯誤。故選B項(xiàng)。答案：B二、非選擇題6．[2019·吉林市第三中學(xué)高二月考]下面是分離分解尿素的細(xì)菌所用的培養(yǎng)基配方：KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g蒸餾水定容至1000mL。請根據(jù)以上配方，回答下列問題：(1)該培養(yǎng)基含有微生物所需要的________類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是________，唯一的氮源是________。(2)該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分是________培養(yǎng)基，按培養(yǎng)基的作用劃分是________培養(yǎng)基。(3)培養(yǎng)基配制完成后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對培養(yǎng)基進(jìn)行________處理。解析：(1)該培養(yǎng)基中含有水、無機(jī)鹽、碳源和氮源4類營養(yǎng)物質(zhì)，其中最主要的碳源是葡萄糖，唯一的氮源是尿素。(2)該培養(yǎng)基是加入瓊脂的固體培養(yǎng)基，且以尿素為唯一氮源，能夠篩選出分解尿素的細(xì)菌，屬于選擇培養(yǎng)基。(3)培養(yǎng)基配制完成后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理。答案：(1)4葡萄糖尿素(2)固體選擇(3)滅菌7．[2019·河南高考模擬]某些細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3。欲從土壤中分離能分解尿素的細(xì)菌，某研究小組利用成分為KH2PO4、Na2HPO4、葡萄糖、瓊脂、尿素的培養(yǎng)基進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請回答：(1)在土壤微生物的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中的KH2PO4與Na2HPO4作為無機(jī)營養(yǎng)被細(xì)菌利用外，它們還具有的功能為__________________________________________；葡萄糖的作用是____________________________________________。(2)該培養(yǎng)基對土壤中的微生物具有選擇作用，理由是__________________________________________________________。微生物能分解尿素的原因是這些微生物能合成________。(3)為能獲得目的菌的單菌落，常對土壤樣液做________處理。為便于確認(rèn)目的菌，可在培養(yǎng)基中加入________指示劑，接種并培養(yǎng)后，可根據(jù)菌落周圍________來判斷該菌能分解尿素。解析：(1)培養(yǎng)基中的KH2PO4與Na2HPO4除作為無機(jī)營養(yǎng)被細(xì)菌利用外，它們還具有的功能為：KH2PO4和Na2HPO4可構(gòu)成緩沖液，維持培養(yǎng)基的pH相對穩(wěn)定，利于微生物的生長與增殖。葡萄糖是細(xì)胞主要的能源物質(zhì)，可為細(xì)菌的代謝提供能量，還能為合成其他有機(jī)物提供原料。(2)該培養(yǎng)基中的唯一氮源為尿素，只有以尿素為氮源的細(xì)菌才能在此培養(yǎng)基上生長、增殖，所以該培養(yǎng)基對土壤中的微生物具有選擇作用。微生物能分解尿素的原因是這些微生物能合成脲酶，脲酶可將尿素分解為氨。(3)為能獲得目的菌的單一菌落，常用無菌水對土壤樣液做稀釋處理。尿素分解菌合成的脲酶可將尿素分解形成氨，氨使培養(yǎng)基的pH升高，酚紅指示劑將變紅。所以為便于確認(rèn)目的菌，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，接種并培養(yǎng)后，可根據(jù)菌落周圍出現(xiàn)紅色來判斷該菌能分解尿素。答案：(1)能使培養(yǎng)基的pH保持相對穩(wěn)定，利于微生物的生長與增殖為細(xì)菌的代謝提供能量，為合成其他有機(jī)物提供原料(2)該培養(yǎng)基中的唯一氮源為尿素，只有以尿素為氮源的細(xì)菌才能在此培養(yǎng)基上生長、增殖脲酶(3)稀釋酚紅出現(xiàn)紅色8．[2019·貴州高二期中]下面是尿素分解菌所用的培養(yǎng)基，根據(jù)下表回答下列問題：Na2HPO4K2HPO4·7H2OMgSO4葡萄糖尿素瓊脂蒸餾水2.1g1.4g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mL(1)該培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)來分，屬于________培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基具有選擇作用的原因是__________________________________________________________。(2)鑒定某種細(xì)菌是否能夠分解尿素，可向培養(yǎng)基中加入________指示劑。若該細(xì)菌能分解尿素，則指示劑變________色，所依據(jù)的原理是________________________________________________________。(3)如果對尿素分解菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)，可以采用________________________法接種。(4)為了保持菌種的純凈，對于長期需要保存的菌種，可以采用________的方法。解析：(1)由于培養(yǎng)基中有瓊脂，故按照物理性質(zhì)來分，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基中尿素作為唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能在此培養(yǎng)基上生長繁殖。(2)在細(xì)菌分解尿素的過程中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，氨溶于水使培養(yǎng)基pH升高，遇酚紅指示劑變紅，所以在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后，若指示劑變紅，說明菌體能合成脲酶分解尿素。(3)微生物計(jì)數(shù)時(shí)常用稀釋涂布平板法接種。(4)根據(jù)分析可知，菌種的長期保存常使用甘油管藏法。答案：(1)固體該培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能在此培養(yǎng)基上生長繁殖(2)酚紅紅在細(xì)菌分解尿素的過程中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，氨溶于水使培養(yǎng)基pH升高，遇酚紅指示劑變紅(3)稀釋涂布平板(4)甘油管藏法9．[2019·廣西高考模擬]尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但是尿素不能被農(nóng)作物直接吸收，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。請回答問題：(1)土壤中的某些細(xì)菌能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣蒧_______。(2)配制好的培養(yǎng)基常用________法進(jìn)行滅菌。為了檢測所用培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，需要進(jìn)行的操作是________________________________________。(3)為了篩選到能分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源，原因是______________________________________________________；若平板上長出菌落，可通過加入顯色劑初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素，加入的顯色劑是________。(4)一位同學(xué)在某濃度下稀釋涂布了一個平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230。該同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果________(填“是”或“否”)具有說服力，原因是______________________。解析：(1)土壤中的某些細(xì)菌能夠合成脲酶，脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘焙投趸肌?2)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格，需要將滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，如果沒有菌落產(chǎn)生證明培養(yǎng)基滅菌合格，否則不合格。(3)篩選尿素分解菌時(shí)需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，因?yàn)橹挥心軌蚶媚蛩氐募?xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長，其他微生物不能分解尿素而不能生長。尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘倍筽H升高，酚紅指示劑能夠與氨反應(yīng)呈紅色，故可以用酚紅指示劑檢測尿素分解菌。(4)根據(jù)題意可知該同學(xué)沒有設(shè)置重復(fù)組，所以結(jié)果沒有說服力。答案：(1)脲酶(2)高壓蒸汽滅菌將滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(3)只有能夠利用尿素的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長酚紅(4)否沒有設(shè)置重復(fù)組10．[2019·安徽高考模擬]如圖是某課題小組設(shè)計(jì)的“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”的實(shí)驗(yàn)流程示意圖。請回答下列問題。(1)微生物接種的方法有很多，該圖所示為________________法，這一方法常用來統(tǒng)計(jì)樣品中________(填“活菌”、“死菌”或“活菌和死菌”)的數(shù)目。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比細(xì)菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)開_______________________________________________________________________。(2)實(shí)驗(yàn)過程中，需對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常用的滅菌方法有________________。接種操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行，目的是防止________。(3)對分離得到的分解尿素的細(xì)菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)，可在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，其鑒定原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)微生物接種的方法有很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，該圖所示為稀釋涂布平板法，這一方法常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比細(xì)菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個菌落。(2)常見的滅菌方法有：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌，實(shí)驗(yàn)過程中，需對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常用的方法是高壓蒸汽滅菌。接種操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行，酒精燈火焰附近存在無菌區(qū)域，目的是防止雜菌污染。(3)