藥物制劑分析概論

第十八章藥物制劑分析概論第一節(jié)藥物制劑類型及其分析特點(diǎn)藥物制劑類型藥物制劑分析的特點(diǎn)一、二、一、藥物制劑類型各國藥典均收載了多種類型的藥物制劑。其中，片劑、膠囊劑、注射劑和半固體制劑等被ChP2010、EP7、USP32-NF27和JP15共同收載。

防治和診斷疾病的需要

保證藥物用法和用量的準(zhǔn)確

增強(qiáng)藥物的穩(wěn)定性

藥物使用、貯存和運(yùn)輸?shù)姆奖?/p>

延長藥物的生物利用度

降低藥物的毒性和副作用二、藥物制劑分析的特點(diǎn)組成復(fù)雜(含有活性成分及輔料)藥物含量低針對(duì)不同劑型有專門的檢查項(xiàng)目比原料藥分析困難。(一)檢查內(nèi)容不同CompanyLogo一般原料藥項(xiàng)下的檢查項(xiàng)目不需重復(fù)檢查，只檢查在制備和儲(chǔ)運(yùn)過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)及制劑相應(yīng)的檢查項(xiàng)目。例：鹽酸普魯卡因注射劑中“對(duì)氨基苯甲酸”阿司匹林片“水楊酸”(二)質(zhì)量控制要求不同1.含量要求范圍不同CompanyLogo2.雜質(zhì)限度要求不同CompanyLogo3.含量測(cè)定方法不同鹽酸氯丙嗪（含量測(cè)定）

原料：非水滴定法片劑：UV法(λ測(cè)

254nm)

注射劑：UV法(λ測(cè)

306nm)

制劑含量測(cè)定：強(qiáng)調(diào)選擇性、要求靈敏度高

原料含量測(cè)定：強(qiáng)調(diào)準(zhǔn)確度、精密度(三)含量測(cè)定的計(jì)算方法不同CompanyLogo

原料藥：

制劑：CompanyLogo1.原料藥含量測(cè)定的計(jì)算1.1容量分析法

CompanyLogo應(yīng)用示例

精密稱取青霉素鉀供試品0.4021g，按藥典規(guī)定用剩余堿量法測(cè)定含量。先加入NaOH(0.1mol/L)25.00ml，回滴時(shí)消耗0.1015mol/L的HCl為14.20ml，空白試驗(yàn)消耗0.1015mol/L的鹽酸液24.68ml。每1ml氫氧化鈉液(0.1mol/L)相當(dāng)于37.25mg的青霉素鉀，求供試品的含量。CompanyLogo1.2UV法1.2.a直接測(cè)定CompanyLogo1.2.b對(duì)照法CompanyLogo2.片劑含量測(cè)定的計(jì)算使取樣具有代表性CompanyLogo2.1容量分析方法CompanyLogo應(yīng)用示例取司可巴比妥鈉膠囊（標(biāo)示量為0.1g）20粒，除去膠囊后測(cè)得內(nèi)容物總重為3.0780g，稱取0.1536g，按藥典規(guī)定用溴量法測(cè)定。加入溴液（0.1mol/L）25ml，剩余的溴液用硫代硫酸鈉液（0.1025mol/L）滴定到終點(diǎn)時(shí)，用去17.94ml?？瞻自囼?yàn)用去硫代硫酸鈉液25.00ml。按每1ml溴液（0.1mol/L）相當(dāng)13.01mg的司可巴比妥鈉，計(jì)算該膠囊中按標(biāo)示量表示的百分含量。CompanyLogo2.2UV法CompanyLogo3.注射劑含量測(cè)定的計(jì)算CompanyLogo制劑含量測(cè)定中，應(yīng)考慮:

取樣問題

輔料對(duì)含量測(cè)定的干擾與排除

復(fù)方制劑中各成分互相干擾其含量測(cè)定及其措施

要有合適的分析方法與一定的準(zhǔn)確度，以保證制劑的質(zhì)量。第二節(jié)片劑分析性狀鑒別試驗(yàn)劑型檢查含量測(cè)定四、一、二、三、一、性狀片劑外觀應(yīng)完整光潔，色澤均勻。符合正文各品種項(xiàng)下的性狀描述。二、鑒別試驗(yàn)排除輔料干擾：過濾、離心、提取，參考原料藥：選2~4種不同原理的方法(化學(xué)法、光譜法、色譜法)。三、劑型檢查口服普通片應(yīng)進(jìn)行兩項(xiàng)常規(guī)檢查：【重量差異】和【崩解時(shí)限】。當(dāng)主藥與片劑輔料的混合不均勻時(shí)，應(yīng)以含量均勻度檢查替代重量差異檢查；（標(biāo)示量不大于25mg或主藥含量不大于25%(g/g)的片劑應(yīng)檢查含量均勻度）。當(dāng)片劑中的主藥水溶性差時(shí)，應(yīng)以溶出度測(cè)定替代崩解時(shí)限檢查。(一)重量差異與含量均勻度重量差異(uniformityofmass，weightvariation或massvariation)系指按規(guī)定稱量方法稱量片劑時(shí)，每片的重量與平均片重之間的差異。含量均勻度(uniformityofcontent或contentuniformity)系指小劑量或單劑量的固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑的每片(個(gè))含量符合標(biāo)示量的程度。重量差異與含量均勻度統(tǒng)稱為劑量單位均勻度(uniformityofdosageunits)，系指多個(gè)劑量單位中所含藥物量的均勻程度。重量差異檢查法取供試品20片，精密稱定總重量，求得平均片重后，再分別精密稱定每片的重量，每片重量與平均片重相比較(凡無含量測(cè)定的片劑，每片重量應(yīng)與標(biāo)示片重比較)，按表中的規(guī)定，超出重量差異限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度1倍。薄膜衣片應(yīng)在包薄膜衣后檢查重量差異并符合規(guī)定。糖衣片的片心應(yīng)檢查重量差異并符合規(guī)定，包糖衣后不再檢查重量差異。平均片重或標(biāo)示片重重量差異限度0.30g以下±7.5%0.30g及0.30g以上±5%含量均勻度檢查法除另有規(guī)定外，取供試品10片(個(gè))，照各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法，分別測(cè)定每片(個(gè))以標(biāo)示量為100的相對(duì)含量X，求其均值

X和標(biāo)準(zhǔn)差S以及標(biāo)示量與均值之差的絕對(duì)值A(chǔ)(A=

100-

X

)。如A+1.80S≤15.0，則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若A+S＞15.0，則不符合規(guī)定；若A+1.80S＞15.0，且A+S≤15.0，則應(yīng)另取20片(個(gè))復(fù)試。根據(jù)初、復(fù)試結(jié)果，計(jì)算30片(個(gè))的均值

X、標(biāo)準(zhǔn)差S和標(biāo)示量與均值之差的絕對(duì)值A(chǔ)：如A+1.45S≤15.0，則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若A+1.45S＞15.0，則不符合規(guī)定。含量均勻度的限度應(yīng)符合各品種項(xiàng)下的規(guī)定。如該品種項(xiàng)下規(guī)定含量均勻度的限度為±20%或其他數(shù)值時(shí)，應(yīng)將上述各判斷式中的15.0改為20.0或其他數(shù)值，但各判斷式中的系數(shù)不變。(二)崩解時(shí)限與溶出度崩解時(shí)限(disintegration)系指口服固體制劑應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，于規(guī)定條件下全部崩解溶散或成碎粒，除不溶性包衣材料或破碎的膠囊殼外，全部通過篩網(wǎng)。如有少量不能通過篩網(wǎng)，應(yīng)已軟化或輕質(zhì)上漂且無硬心。溶出度(dissolution)系指在規(guī)定條件下藥物從片劑等制劑中溶出的速率和程度。它是一種模擬口服固體制劑在胃腸道中崩解和溶出的體外簡易試驗(yàn)方法，對(duì)難溶性藥物一般都做溶出度的檢查。凡規(guī)定檢查溶出度的制劑，不再檢查崩解時(shí)限。普通片崩解時(shí)限檢查法1000ml燒杯中，吊籃位置使其下降時(shí)篩網(wǎng)距燒杯底部25mm，燒杯內(nèi)盛有溫度為37℃±1℃的水，調(diào)節(jié)水位高度使吊籃上升時(shí)篩網(wǎng)在水面下15mm處。除另有規(guī)定外，取供試品6片，各片均應(yīng)在15分鐘內(nèi)全部崩解。如有1片不能完全崩解，應(yīng)另取6片復(fù)試，均應(yīng)符合規(guī)定。溶出度測(cè)定法

第一法轉(zhuǎn)籃法

第二法槳法

第三法小杯法（小杯攪拌槳法）第一法：轉(zhuǎn)籃法除另有規(guī)定外，分別量取經(jīng)脫氣處理的溶出介質(zhì)900ml，置各溶出杯內(nèi)，加溫，待溶出介質(zhì)溫度恒定在37oC±0.5oC后，取供試品6片(粒、袋)，分別投入6個(gè)干燥的轉(zhuǎn)籃內(nèi)，按規(guī)定速度旋轉(zhuǎn)。除另有規(guī)定外，至規(guī)定時(shí)間時(shí)取樣，立即用0.8μm的微孔濾膜濾過。自取樣至濾過應(yīng)在30s內(nèi)完成。取澄清濾液，照該品種項(xiàng)下規(guī)定的方法測(cè)定，計(jì)算每片的溶處量。CompanyLogo籃體溶出杯籃軸第二法(槳法)：除將轉(zhuǎn)籃換成攪拌槳外(當(dāng)各品種項(xiàng)下規(guī)定需要使用沉降籃或其他沉降裝置時(shí)，可將片劑等先裝入規(guī)定的沉降籃內(nèi))，其他裝置和要求與第一法相同。

如片劑或膠囊劑浮于液面，應(yīng)先裝入沉降籃。

計(jì)時(shí)自供試品接觸溶出介質(zhì)開始。第三法(小杯法)：使用250ml溶出杯及相應(yīng)攪拌槳，適用于測(cè)定藥物含量較低的片劑溶出度。結(jié)果判斷6片(個(gè))中每片(個(gè))的溶出量，按標(biāo)示量計(jì)算，均不低于規(guī)定限度(Q)；6片(個(gè))中僅有1～2片(個(gè))低于Q，但不低于Q-10%，且其平均溶出度不低于Q；6片(個(gè))中有1～2片(個(gè))低于Q，其中僅有1片(個(gè))低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均溶出度不低于Q時(shí)，應(yīng)另取6片(個(gè))復(fù)試；初、復(fù)試的12片(個(gè))中僅有1~3片(個(gè))低于Q，其中僅有1片(個(gè))低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均溶出度不低于Q①溶出度儀的適用性及性能確認(rèn)試驗(yàn)②溶出介質(zhì)——應(yīng)新鮮制備和經(jīng)脫氣處理(氣泡影響試驗(yàn)）：在緩慢攪拌下加熱至約41℃，并在真空條件下不斷攪拌5分鐘以上；或采用煮沸、超聲、抽濾等除氣方法；如果溶出介質(zhì)為緩沖液，當(dāng)需要調(diào)節(jié)pH值時(shí)，一般調(diào)節(jié)至規(guī)定pH值±0.05。片劑的溶出條件和注意事項(xiàng)釋放度測(cè)定法

系指藥物從緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑及透皮貼劑等在規(guī)定條件下釋放的速率和程度。它是模擬體內(nèi)消化道條件，用規(guī)定的儀器，在規(guī)定的溫度、介質(zhì)、攪拌速率等條件下，對(duì)制劑進(jìn)行藥物釋放速率的試驗(yàn)，用以檢測(cè)產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝是否達(dá)到控制產(chǎn)品質(zhì)量的目的。檢查方法

第一法?緩試制劑或控釋制劑

第二法?腸溶制劑

第三法?透皮貼劑第一法第一點(diǎn)0.5~2h?考察藥物是否有突釋第二點(diǎn)中間取樣時(shí)間點(diǎn)?確定釋藥特性第三點(diǎn)最后取樣時(shí)間點(diǎn)?確定釋藥完全第二法酸中釋放量≤10％標(biāo)示量緩沖液中釋放量>70％標(biāo)示量(Q)四、含量測(cè)定片劑的輔料：稀釋劑、潤濕劑與黏合劑、崩解劑、潤滑劑等輔料。預(yù)處理排除輔料干擾：

糖類硬脂酸鎂抗氧劑?加入掩蔽劑?加酸分解?加入弱氧化劑氧化?利用主藥和抗氧劑紫外吸收光譜的差異進(jìn)行測(cè)定(一)糖類的干擾及其排除淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等是片劑常用的稀釋劑，具有還原性，干擾氧化還原測(cè)定法（高錳酸鉀法、溴酸鉀法）等。采用陰性對(duì)照品(空白輔料)進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)，若陰性對(duì)照品消耗滴定劑，須改用其他方法測(cè)定。固體制劑常用的潤滑劑，以硬脂酸鎂(C36H70O4Mg)和棕櫚酸鎂(C32H62O4Mg)為主的混合物。

配位常數(shù)：被測(cè)離子-EDTA>>Mg2+-EDTA，不干擾調(diào)節(jié)pH或選擇合適的指示劑

pH6.0～7.5，酒石酸(草酸)可掩蔽。(二)硬脂酸鎂的干擾及其排除（1）Mg2+干擾EDTA配位滴定；（2）硬脂酸根干擾高氯酸非水滴定。干擾作用干擾消除方法（2）在非水溶液滴定法中，硬脂酸根離子(C17H35COO-)能被高氯酸滴定。若主藥的含量高、硬脂酸鎂的含量低，則硬脂酸根離子(C17H35COO-)對(duì)測(cè)定的干擾可忽略不計(jì)。否則，C17H35COO-消耗的高氯酸滴定液使測(cè)定結(jié)果偏高。對(duì)于脂溶性藥物，可用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑提取藥物，排除硬脂酸鎂的干擾后，再用非水溶液滴定法測(cè)定?；蛘吒挠闷渌椒y(cè)定。第三節(jié)

注射劑分析性狀鑒別試驗(yàn)劑型檢查及安全性檢查含量測(cè)定四、一、二、三、注射液系指藥物與適宜的溶劑或分散介質(zhì)制成的供注入體內(nèi)的溶液、乳狀液或混懸液，以及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無菌制劑。溶劑

最常用的水性溶劑為注射用水，亦可用0.9%氯化鈉溶液或其他適宜的水溶液。非水溶劑有乙醇、丙二醇、聚乙二醇的水溶液。常用的油溶劑為注射用大豆油。其質(zhì)量應(yīng)符合大豆油(供注射用)的標(biāo)準(zhǔn)。其他溶劑必須安全無害，用量應(yīng)不影響療效。附加劑

附加劑一般有滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑、增溶劑、抗氧劑、抑菌劑等?？寡鮿┯衼喠蛩徕c、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉等。常用的抑菌劑及其濃度(g/ml)為苯酚0.5%、甲酚0.3%、三氯叔丁醇0.5%等。抑菌劑用量應(yīng)能抑制注射液內(nèi)微生物的生長。加有抑菌劑的注射液，仍應(yīng)用適宜的方法滅菌。注射量超過5ml的注射液，添加的抑菌劑必須特別審慎選擇。供靜脈(除另有規(guī)定外)或椎管注射用的注射液，均不得添加抑菌劑。一、性狀溶液型注射液應(yīng)澄明；混懸型注射液若有可見沉淀，振搖時(shí)應(yīng)容易分散均勻；乳狀液型注射液應(yīng)穩(wěn)定，不得有相分離現(xiàn)象。注射液系指藥物與適宜的溶劑或分散介質(zhì)制成的供注入體內(nèi)的溶液、乳狀液或混懸液，以及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無菌制劑。二、鑒別試驗(yàn)溶液型注射液輔料一般不干擾藥物的鑒別；若輔料干擾藥物的鑒別，可排除干擾后，再進(jìn)行鑒別。三、劑型檢查及安全性檢查注射液應(yīng)進(jìn)行以下常規(guī)檢查：【裝量】【滲透壓摩爾濃度】【可見異物】【不溶性微粒】【無菌】【細(xì)菌內(nèi)毒素】/【熱原】(一)裝量(extractablevolumeofparenteralpreparations)標(biāo)示裝量不大于2ml者取供試品5支，2ml以上至50ml者(標(biāo)示裝量為50ml以上的注射液及注射用濃溶液照最低裝量檢查法檢查)取供試品3支；開啟時(shí)注意避免損失，將內(nèi)容物分別用相應(yīng)體積的干燥注射器及注射針頭抽盡，然后注入經(jīng)標(biāo)化的量入式量筒內(nèi)(量筒的大小應(yīng)使待測(cè)體積至少占其額定體積的40%)，在室溫下檢視，每支的裝量均不得少于其標(biāo)示量。測(cè)定油溶液或混懸液的裝量時(shí)，應(yīng)先加溫?fù)u勻，再用干燥注射器及注射針頭抽盡后，同前法操作，放冷，檢視。(二)滲透壓摩爾濃度(osmolality)溶劑通過半透膜由低濃度溶液向高濃度溶液擴(kuò)散的現(xiàn)象稱為滲透；阻止?jié)B透所需要施加的壓力稱為滲透壓。通常滲透壓摩爾濃度以每千克溶劑中溶質(zhì)的毫滲透壓摩爾(mOsmol/kg)為單位。滲透壓摩爾濃度通常采用冰點(diǎn)下降法測(cè)定。(三)可見異物可見異物(visibleparticles或foreigninsolublematter)系指存在于注射劑、眼用液體制劑中，在規(guī)定條件下目視可以觀測(cè)到的不溶性物質(zhì)，其粒徑或長度通常大于50μm。可見異物檢查法：

燈檢法（常用）

光散射法第一法(燈檢法)溶液型、乳狀液及混懸型制劑：除另有規(guī)定外，取供試品20支(瓶)，除去容器標(biāo)簽，擦凈容器外壁，必要時(shí)將藥液轉(zhuǎn)移至潔凈透明的適宜容器內(nèi)；置供試品于遮光板邊緣處，在明視距離(指供試品至人眼的清晰觀測(cè)距離，通常為25cm)，分別在黑色和白色背景下，手持供試品頸部輕輕旋轉(zhuǎn)和翻轉(zhuǎn)容器使藥液中可能存在的可見異物懸浮(但應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡)，輕輕翻搖后立即目視檢查，重復(fù)3次，總時(shí)限為20秒。供試品裝量每支(瓶)在10ml及10ml以下的注射劑，每次檢查時(shí)可手持2支(瓶)。第二法(光散射法)

溶液型注射液：除另有規(guī)定外，取供試品20支(瓶)，除去不透明標(biāo)簽，擦凈容器外壁，置儀器上瓶裝置上，根據(jù)儀器的使用說明書選擇適宜的測(cè)定參數(shù)，啟動(dòng)儀器，檢測(cè)供試品3次，記錄結(jié)果。凡儀器判定有1次不合格者，須用燈檢法作進(jìn)一步確認(rèn)(燈檢法不適用的品種除外)。(四)不溶性微?？梢姰愇餀z查對(duì)象：粒徑或長度大于50μm的不溶性物質(zhì)。不溶性微粒：在可見異物檢查符合規(guī)定后，用以檢查靜脈用注射劑(溶液型注射液、注射用無菌粉末、注射用濃溶液)及供靜脈注射用無菌原料藥中不溶性微粒的大小及數(shù)量。檢查方法：

光阻法

顯微計(jì)數(shù)法（最終判定依據(jù)）(五)無菌(sterility)注射劑直接進(jìn)入血循環(huán)，需嚴(yán)格控制微生物污染。無菌檢查法：

薄膜過濾法

直接接種法

對(duì)檢查無影響的供試品?直接接種法

供試品對(duì)檢查有干擾?薄膜過濾法兩種方法均由陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和供試品檢查三部分組成。陽性對(duì)照：應(yīng)根據(jù)供試品特性選擇陽性對(duì)照菌(例如，無抑菌作用及抗革蘭陽性菌為主的供試品，以金黃色葡萄球菌為對(duì)照菌)，陽性對(duì)照管培養(yǎng)48~72小時(shí)應(yīng)生長良好。陰性對(duì)照：應(yīng)取相應(yīng)溶劑和稀釋液、沖洗液同法操作，作為陰性對(duì)照。陰性對(duì)照不得有菌生長。供試品檢查：①供試品處理及接種培養(yǎng)基(薄膜過濾法和直接接種法)；②培養(yǎng)及觀察。(六)細(xì)菌內(nèi)毒素與熱原細(xì)菌內(nèi)毒素(bacterialendotoxins)是革蘭陰性菌細(xì)胞壁的脂多糖，具有致熱作用。細(xì)菌內(nèi)毒素的量用內(nèi)毒素單位(EU)表示，1EU與1個(gè)內(nèi)毒素國際單位(IU)相當(dāng)。熱原(pyrogens)是藥品中存在的能引起體溫升高的物質(zhì)，主要來源于細(xì)菌內(nèi)毒素。靜脈用注射劑按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，照細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法或熱原檢查法檢查，應(yīng)符合規(guī)定。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法

本法系利用鱟試劑檢測(cè)或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素。包括凝膠法和光度測(cè)定法。

鱟的血變形細(xì)胞中含有高分子量凝固酶原和凝固蛋白原。前者經(jīng)內(nèi)毒素激活轉(zhuǎn)化為具有活性的凝固酶，通過凝固酶的酶解作用將凝固蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槟痰鞍祝痰鞍淄ㄟ^交聯(lián)酶作用相互聚合而形成牢固的凝膠。鱟試劑法原理熱原檢查法(家兔法)取適用的家兔3只，測(cè)定其正常體溫后15分鐘內(nèi)，自耳靜脈緩緩注入規(guī)定劑量并溫?zé)嶂良s38℃的供試品溶液，然后每隔30分鐘按前法測(cè)量其體溫1次，共測(cè)6次，以6次體溫中最高一次減去正常體溫，即為該兔體溫的升高溫度(℃)。如3只家兔中有1只體溫升高0.6℃或高于0.6℃，或3只家兔體溫升高的總和達(dá)1.3℃或高于1.3℃，應(yīng)另取5只家兔復(fù)試，檢查方法同上。四、含量測(cè)定注射劑：溶劑＋附加劑。預(yù)處理排除干擾。(一)溶劑水的干擾及其排除用非水溶液滴定法測(cè)定注射液的含量時(shí)，溶劑水干擾非水溶液滴定。對(duì)于堿性藥物或其鹽類，可通過堿化、有機(jī)溶劑提取游離藥物，排除水的干擾；揮干有機(jī)溶劑后，用非水溶液滴定法測(cè)定藥物的含量。(二)溶劑油的干擾及其排除溶劑油影響以水為溶劑的分析方法和其他分析方法，排除其干擾的方法通常有以下幾種。1.有機(jī)溶劑稀釋法：對(duì)于藥物含量較高的注射劑，若測(cè)定其含量所需的供試品溶液濃度較低，可用有機(jī)溶劑稀釋供試品，降低溶劑