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中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)出口海產(chǎn)品中大田軟海綿酸化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測方法IGB/T6682分析實驗室用水規(guī)格OA:大田軟海綿酸(okadaicacDSP:腹瀉性貝類毒素(diarrheticshellfshpoisoning)HRP:辣根過氧化物酶(horscradishperoxidase)大田軟海綿酸(OA)是腹瀉性貝類毒素的主要成分之一是一種有毒的C38多環(huán)脂肪酸,能夠引起23復(fù)洗板步驟8.3。8.5加底物溶液測定:每孔加入100μ所獲得的標(biāo)準(zhǔn)和樣品發(fā)光值(B)的平均值除以第一個標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))發(fā)光值(B?)的平均值再乘以100%,即發(fā)光率值:(40),將其換算為扇貝肉中的OA濃度。也可以通過專本方法測定低限為0.0308ng/mL。實際樣品的最低檢出限=樣品的最低檢出限×樣品稀釋倍4A.1OA抗原包被微孔板的制備用pH9.6的0.2mol/L碳酸鹽緩沖液(Na?CO?1.696g,NaHCO?2.856g,加ddH?O定容至微孔孔板中,4℃包被過夜。甩干,按每孔加入200pL加入封閉液(0.5%BSA-PBST:BSA0.A.2.1標(biāo)準(zhǔn)品(1.0mL/瓶):準(zhǔn)確稱取OA標(biāo)準(zhǔn)品,用50%甲醇進(jìn)行定溶,OA標(biāo)準(zhǔn)液濃度分別為102.5、0.625、0.3125、0.15625、0ng/mL,按每瓶1.0mL進(jìn)行分裝,在2℃~8℃條件下棕色瓶密封A.2.210×洗滌液(含0.5%吐溫-20的0.1mol/LpH7.4PBS)配制:NaCl80.0g,NaHPO?12H?O129g,KH?PO?2.0g,吐溫A.2.5底物A:該溶液含魯米諾(2mmol/L)和發(fā)光增強(qiáng)劑對羥基苯丙烯酸(0.25mmol/L),分裝成15mL/瓶的包裝,在2℃~8℃保存于棕色塑料瓶中。A.2.10抗體工作液:用一抗稀釋液按1:100比例稀釋100×0A抗體濃縮液。A.2.12酶標(biāo)二抗工作液:用二抗稀釋液按1:100比例稀釋10
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