學(xué)支原體-立克次體

概念：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，也是在無生命培養(yǎng)基上生長繁殖的最小微生物。其特點(diǎn)為細(xì)胞膜含固醇，能通過細(xì)菌濾器；高度多形性、形成分枝的長絲；含DNA和RNA，二分裂繁殖等。柔膜體綱支原體目支原體科無膽甾原體科螺原體科支原體屬脲原體屬主要病原性支原體肺炎支原體M.pneumoniae人型支原體M.Nominis生殖器支原體M.genitalium穿透支原體

M.penetraus溶脲脲原體U.urealyticum第一節(jié)概述一、生物學(xué)性狀1.形態(tài)結(jié)構(gòu)最小的原核細(xì)胞生物；球形、球桿形、長絲狀及分枝狀等多種形態(tài)；G-，著色困難，常用Giemsa染色法染成淡紫色。細(xì)胞膜由蛋白質(zhì)和脂質(zhì)（固醇）組成三層結(jié)構(gòu)

特殊的頂端結(jié)構(gòu)：粘附宿主上皮

細(xì)胞表面，與支原

體的致病有關(guān)。2.培養(yǎng)特性:荷包蛋樣菌落培養(yǎng)基中含人或動(dòng)物的血清(10~20%)及酵母浸液。多數(shù)支原體能在雞胚絨毛尿囊膜或細(xì)胞培養(yǎng)中生長。固體培養(yǎng)基：

2～7天長出直徑約10～600μm的典型的“荷包蛋樣”菌落：低倍鏡下見菌落呈圓形，心致密隆起，深入瓊脂，外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基：

清亮需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察支原體是污染細(xì)胞培養(yǎng)的重要原因之一

鑒別點(diǎn)

支原體細(xì)菌L型細(xì)胞壁缺失原因在遺傳上與細(xì)菌無關(guān)與原菌相關(guān)，可以回復(fù)細(xì)胞膜含高濃度固醇細(xì)胞膜不含固醇培養(yǎng)特性需要膽固醇大多需要高滲培養(yǎng)菌落大小生長慢，菌落小菌落稍大(0.6~1.0)液體培養(yǎng)液體培養(yǎng)混濁度極低一定混濁度，可附壁支原體與細(xì)菌L型的異同點(diǎn)

不同點(diǎn)缺乏細(xì)胞壁，形態(tài)多樣，能通過濾菌器。固體培養(yǎng)—菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。臨床表現(xiàn)相似—間質(zhì)性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等

相同點(diǎn)

支原體葡萄糖精氨酸尿素吸附細(xì)胞致病性

肺炎支原體+——紅細(xì)胞肺炎、支氣管炎人型支原體—+——泌尿生殖道感染生殖器支原體+———泌尿生殖道感染穿透支原體++—紅細(xì)胞條件感染

CD4+T細(xì)胞多見于艾滋病巨噬細(xì)胞溶脲脲原體——+—泌尿生殖道感染

流產(chǎn)及不孕不育

3、生化反應(yīng)溶脲脲原體分解尿素產(chǎn)氨，是酚紅變紅，液體清亮，為陽性（右）

（四）抗原結(jié)構(gòu)來自細(xì)胞膜，胞膜外層蛋白質(zhì)是主要抗原，常用生長抑制試驗(yàn)(GIT)與代謝抑制試驗(yàn)

(MIT)鑒定。

GIT是將吸有型特異性抗血清的濾紙片置于接種有支原體的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)孵育出現(xiàn)同型血清抑制該型支原體生長現(xiàn)象。

MIT是將支原體接種在含有抗血清培養(yǎng)基中，若抗體與支原體型一致，則抑制該支原體不能分解葡萄糖產(chǎn)酸。此兩種方法可將支原體分成若干血清型。（五）抵抗力

?對脂溶劑化學(xué)消毒劑敏感，對結(jié)

晶紫、醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力；

?對影響細(xì)胞壁合成的抗生素如青

霉素類天然耐受，但對干擾蛋白

質(zhì)合成的抗生素如強(qiáng)力霉素等敏感。二、致病性與免疫性頂端結(jié)構(gòu)與宿主細(xì)胞上受體結(jié)合而粘附于細(xì)胞上莢膜或微莢膜的抗吞噬作用產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物超抗原，刺激炎癥細(xì)胞分泌大量細(xì)胞因子粘附、侵入CD4T淋巴細(xì)胞（穿透支原體）免疫性

?體液免疫：抗膜蛋白的抗體包括

IgM、IgG和SIgA

?細(xì)胞免疫：主要是特異性CD4＋Th1

細(xì)胞分泌細(xì)胞因子

第二節(jié)主要致病性支原體一肺炎支原體是下呼吸道重要的致病性支原體，所引起的人類支原體肺炎占細(xì)菌性肺炎50%左右，其病理變化以間質(zhì)性肺炎為主，又稱之原發(fā)性非典型性肺炎。癥狀輕，與胸片嚴(yán)重程度不符（一）致病性

1.主要經(jīng)飛沫傳播，但大多數(shù)發(fā)生于夏

末秋初，5～15歲青少年發(fā)病率最高。

2.含特殊的頂端結(jié)構(gòu)：P1表面蛋白（170

kDa）和P30（32

kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。

3.肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎癥細(xì)胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-α、IL-1、IL-6）引起組織損傷。致病性與免疫性所致疾病------支原體肺炎傳播途徑

經(jīng)飛沫傳播發(fā)病年齡

兒童及青少年多見潛伏期2－3W臨床表現(xiàn)發(fā)熱（約39℃）、頭痛、持續(xù)性頑固咳嗽、胸痛等。一般經(jīng)3－10d主要癥狀消失，但咳嗽可以持續(xù)1個(gè)月之久。免疫性

血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細(xì)胞；

呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對防止再感染有較強(qiáng)保護(hù)作用；

出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作

（一）分離培養(yǎng)

痰或咽拭子接種在SP-4培養(yǎng)基，挑選可疑菌落，經(jīng)形態(tài)學(xué)、糖發(fā)酵、溶血性、血細(xì)胞吸附試驗(yàn)進(jìn)行初步鑒定，進(jìn)一步鑒定需用特異性抗血清做GIT與MIT實(shí)驗(yàn)。三、微生物學(xué)檢查法三、微生物學(xué)檢查法（二）血清學(xué)檢查

冷凝集試驗(yàn)：

即用病人血清與人O型血紅細(xì)胞或自身紅細(xì)胞混合，4℃過夜時(shí)可發(fā)生凝集，而在37℃時(shí)這種凝集又分散解離開，但僅50％左右的患者才出現(xiàn)陽性。此反應(yīng)為非特異性。

快速診斷

ELISA：檢測P1和P30蛋白mAbs

PCR：從痰標(biāo)本中檢測16SrRNA或

P1蛋白基因ELISA：此法敏感，特異性高，快速、經(jīng)濟(jì)，并可檢測IgM和IgG抗體，為目前診斷的可靠方法。檢測分子量190kDa的P1蛋白，3h可完成試驗(yàn)，特異性高，敏感性為104CFU／μl標(biāo)本。防治原則

大環(huán)內(nèi)酯類藥物

喹諾酮類藥物四、防治原則二解脲脲原體溶脲脲原體U.urealyticum人型支原體M.Nominis生殖器支原體M.genitalium性傳播疾?。⊿TD）的病原體解脲脲原體

通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起非淋菌性尿道炎，也能引起盆腔等部位的感染。還可通過胎盤感染胎兒，出現(xiàn)早產(chǎn)和死胎。也能引起婦女不孕不育癥。常與衣原體、淋球菌合并感染1.寄居泌尿生殖道，2.傳播途徑為性接觸和母嬰傳播。3.致病機(jī)制-粘附于宿主細(xì)胞表面，引起細(xì)胞膜損傷；-產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物如NH3，對宿主細(xì)胞有急性毒性作用；-磷脂酶損傷宿主的細(xì)胞膜。解脲脲原體

2.引起非淋菌性尿道炎(NGU)，上行感染，可引起前列腺炎或附睪炎；陰道炎和宮頸炎，并可導(dǎo)致流產(chǎn)。因?yàn)榕c人精子膜有共同抗原，對精子可造成免疫損傷而致不育。常與衣原體、淋球菌合并感染引起男性不孕的原因：①Uu吸附于精子表面，使其運(yùn)動(dòng)受阻，并蔽蓋了精子識別卵細(xì)胞的部位②Uu產(chǎn)生神經(jīng)氨酸樣物質(zhì)，干擾精子與卵細(xì)胞結(jié)合。③Uu與精子膜有共同抗原，從而產(chǎn)生抗精子抗體

病原體檢測

接種液體培養(yǎng)基，分解尿素產(chǎn)堿，酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色；培養(yǎng)24～48h，用低倍鏡觀察菌落，進(jìn)一步鑒定需用特異抗血清做GIT與MIT。三、微生物學(xué)檢查法核酸檢測

PCR檢測：

檢測尿素酶基因、多帶抗原（MB-Ag）基因和16S

rRNA基因。此法快速、特異，適宜于大批量標(biāo)本檢測。三、微生物學(xué)檢查法生殖支原體與泌尿生殖道感染有關(guān)人型支原體能引起滲出性咽炎及尿道炎，也與卵巢膿腫、產(chǎn)褥熱等有關(guān)。思考題1、名詞解釋：支原體(mycoplasma)2、簡述致病性支原體的種類及其致病性。3、支原體與細(xì)菌L型的比較第20章立克次體（Rickettsia）概念：立克次體是一類以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介，嚴(yán)格活細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物，可以引起斑疹傷寒、Q熱、恙蟲病、斑點(diǎn)熱等傳染病。1906年首次被發(fā)現(xiàn)，第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的立克次體病是斑疹傷寒。為了紀(jì)念因研究斑疹傷寒被感染而犧牲的年僅39歲的醫(yī)師，將這類微生物統(tǒng)稱為立克次體。立克次體的共同特點(diǎn)：專性活細(xì)胞內(nèi)寄生，以二分裂方式繁殖有DNA和RNA兩類核酸球桿狀或多形態(tài)，革蘭染色陰性寄生在吸血性節(jié)肢動(dòng)物體內(nèi)，以節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介或儲存宿主引起自然疫源性疾病對多種抗生素敏感第一節(jié)概述一、生物學(xué)性狀大小:(0.3μm-0.6μm)×(0.8μm-2.0μm)形態(tài):

類似球桿菌,多形性

(球形、啞鈴形、長桿狀或絲狀等)染色:Giemsa染色法:紫色或藍(lán)色

馬氏染色法(Macchiavellostain):紅色排列:

散在于細(xì)胞漿中、核旁成堆

(斑點(diǎn)熱立克次體在胞漿或核內(nèi))培養(yǎng):

專性細(xì)胞內(nèi)(活細(xì)胞內(nèi))寄生培養(yǎng)方法:

雞胚卵黃囊內(nèi)接種，組織細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物接種抗原構(gòu)造：群特異性抗原,種特異性外膜抗原外斐反應(yīng)(Weil-Felixreaction):斑疹傷寒等立克次體與變形桿菌某些X菌株（OX19、OX2、OXk

）有共同的耐熱多糖類抗原。利用這些變形桿菌菌株代替立克次體抗原，進(jìn)行定量非特異凝集反應(yīng)（交叉凝集反應(yīng)），以檢測人或動(dòng)物血清中的相應(yīng)抗體。協(xié)助診斷斑疹傷寒,恙蟲病,滴度超過1:160有意義.立克次體變形桿菌抗體抗體交叉反應(yīng)

外裴氏反應(yīng)示意圖抵抗力:

熱、消毒劑:較弱(56℃,數(shù)分鐘,0.5%石碳酸、

0.5%來蘇,75%酒精中數(shù)分鐘)

抗生素:敏感:氯霉素和四環(huán)素不敏感:磺胺類，磺胺藥刺激生長低溫、干燥:較強(qiáng)(-20℃或冷凍干燥半年以上)二、致病性與免疫性傳播媒介：吸血節(jié)肢動(dòng)物，如虱、蚤、蜱、螨等。致病物質(zhì)：脂多糖（發(fā)熱、微循環(huán)障礙、DIC、休克磷脂酶A（溶解宿主細(xì)胞膜或吞噬體膜）微莢膜（粘附、抗吞噬）致病過程

體虱鼠蚤人體局部淋巴結(jié)及小血管內(nèi)皮細(xì)胞恙螨第一次入血

全身小血管內(nèi)皮細(xì)胞高熱、皮疹神經(jīng)系統(tǒng)癥狀臨床癥狀第二次入血心血管系統(tǒng)癥狀生長繁殖大量繁殖致病機(jī)制：立克次體

虱、蚤、蜱、螨等叮咬或其糞便污染傷口

局部淋巴組織或小血管內(nèi)皮細(xì)胞中增殖

立克次體血癥（第一次）

經(jīng)血流

全身小血管內(nèi)皮細(xì)胞

大量增殖

立克次體血癥（第二次）、毒血癥和各種臨床癥狀。螨蟲蜱吃飽的跳蚤人體虱致病性與免疫性所致疾病

人畜共患性疾病流行性斑疹傷寒地方性斑疹傷寒恙蟲病

Q熱免疫性：以細(xì)胞免疫為主，體液免疫為輔。多數(shù)可獲得持久的免疫。三、微生物學(xué)診斷與防治病原體的分離培養(yǎng)與鑒定血清學(xué)試驗(yàn)（外斐反應(yīng)、ELISA）控制和消滅媒介昆蟲；抗生素治療（氯霉素、四環(huán)素，但禁用磺胺類藥物）；全細(xì)胞滅活疫苗立克次體易引起實(shí)驗(yàn)室感染，注意無菌操作！！第二節(jié)主要致病性立克次體一、普氏立克次體

(R.prowazekii)流行性斑疹傷寒（epidemictyphus）虱型斑疹傷寒（louse-bornetyphus）流行環(huán)節(jié)

傳染源：

病人

儲存宿主：

病人

傳播媒介：

人虱

傳播方式：

人人虱人所致疾病——流行性斑疹傷寒臨床表現(xiàn):

潛伏期（10～14d）高熱、頭痛、肌肉痛等（