艾灸對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠肺組織巨噬細(xì)胞功能表型蛋白調(diào)節(jié)作用的研究-0

1/1艾灸對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠肺組織巨噬細(xì)胞功能表型蛋白調(diào)節(jié)作用的研究艾灸對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠肺組織巨噬細(xì)胞功能表型蛋白調(diào)節(jié)作用的研究艾灸對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠肺組織巨噬細(xì)胞功能表型蛋白調(diào)節(jié)作用的研究張丹1,2,楊延婷2,林晉安2,賈一凡2,黃燕2,李志元2,劉婕1,施征1,吳煥淦1,馬曉芃11上海市針灸經(jīng)絡(luò)研究所，上海200030，中國(guó)2上海中醫(yī)藥大學(xué)，上海201203，中國(guó)【摘要】目的：

觀察艾灸對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerativecolitis,UC)大鼠肺組織巨噬細(xì)胞分化重要功能表型CD86、CD163表達(dá)的影響，并基于巨噬細(xì)胞分化關(guān)鍵細(xì)胞因子干擾素(interferon-gamma,IFN-)、腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor-alpha,TNF-)、白介素4(interleukin-4,IL-4)和白介素13(interleukin-13,IL-13)研究艾灸調(diào)節(jié)肺組織巨噬細(xì)胞分化的作用機(jī)制。

方法：

將40只清潔級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、普通艾灸組和無(wú)煙艾灸組，采用抗原免疫結(jié)合局部福爾馬林灌腸法制備UC大鼠模型，普通艾灸組大鼠雙側(cè)天樞穴接受艾灸治療，無(wú)煙艾灸組大鼠雙側(cè)天樞穴接受無(wú)煙艾灸治療，每次灸10min，每日1次，共8d。

實(shí)驗(yàn)結(jié)束，采用蘇木素-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色法觀察結(jié)腸組織病理學(xué)變化，運(yùn)用免疫印跡法(westernblotting,WB)觀察肺組織中巨噬細(xì)胞分化重要功能表型CD86、CD163的表達(dá)，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)觀察肺組織微環(huán)境中巨噬細(xì)胞分化關(guān)鍵細(xì)胞因子IFN-、TNF-、IL-4、IL-13的含量。

結(jié)果：

與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織損傷嚴(yán)重，結(jié)腸大體評(píng)分及組織學(xué)評(píng)分明顯升高(P0.05)。

與模型組比較，接受艾灸治療的兩組大鼠組織病變均有所改善，表現(xiàn)為潰瘍修復(fù)，炎癥減輕，兩組大鼠結(jié)腸大體評(píng)分及組織學(xué)評(píng)分均降低(P0.05)。

與正常組比較，模型組大鼠肺組織CD86表達(dá)增加(P0.05)，CD163表達(dá)降低(P0.05)。

與模型組、無(wú)煙艾灸組比較，普通艾灸組大鼠肺組織CD86表達(dá)顯著降低，CD163表達(dá)升高(均P0.05)，而無(wú)煙艾灸組與模型組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。

與正常組比較，模型組大鼠肺組織微環(huán)境中巨噬細(xì)胞分化關(guān)鍵細(xì)胞因子表達(dá)異常，表現(xiàn)為IFN-和TNF-含量增加(均P0.05)，IL-4和IL-13含量減少(均P0.05);與模型組及無(wú)煙艾灸組比較，普通艾灸組大鼠肺組織中IL-4、IL-13含量明顯升高，IFN-、TNF-含量減少(均P0.05)，無(wú)煙艾灸組與模型組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。

結(jié)論：

艾灸能上調(diào)UC大鼠肺組織中巨噬細(xì)胞重要功能表型CD163及分化關(guān)鍵細(xì)胞因子IL-4、IL-13表達(dá)，下調(diào)活化表型CD86及分化關(guān)鍵細(xì)胞因子IFN-、TNF-的表達(dá)。

【關(guān)鍵詞】灸法;結(jié)腸炎,潰瘍性;穴,天樞;巨噬細(xì)胞;干擾素-;腫瘤壞死因子;白細(xì)胞介素潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerativecolitis,UC）以結(jié)腸非特異性炎癥為重要病理變化，以腹痛、腹瀉、膿血便為主要臨床癥狀。

病情的反復(fù)發(fā)作和長(zhǎng)期醫(yī)療經(jīng)歷嚴(yán)重影響著UC患者及家庭的生活質(zhì)量[1-2]。

艾灸具有溫經(jīng)散寒，溫通經(jīng)絡(luò)，活血逐痹，補(bǔ)虛助陽(yáng)，消瘀散結(jié)以及防病保健的功效，是公認(rèn)臨床治療UC的優(yōu)選替代療法，因其操作簡(jiǎn)單安全、療效肯定并無(wú)明顯副作用特點(diǎn)，引起了廣泛關(guān)注。

臨床證實(shí)，以天樞、氣海為主穴的隔藥灸療法對(duì)UC患者具有良好臨床療效[3-8]。

目前關(guān)于艾灸作用機(jī)制尚無(wú)明確定論，傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為熱效應(yīng)與艾煙是重要的影響因素[9-12]。

研究顯示，UC模型大鼠肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)、微生態(tài)、炎性因子分泌及免疫反應(yīng)等出現(xiàn)異常，表明肺與大腸在生理病理存在著一定聯(lián)系[13-16]。

因此，本研究建立UC大鼠模型，觀察UC大鼠肺組織巨噬細(xì)胞（Macrophage,M）分化重要功能表型CD86、CD163及微環(huán)境巨噬細(xì)胞分化關(guān)鍵細(xì)胞因子干擾素(interferon-gamma,IFN-)、腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor-alpha,TNF-)、白介素4(interleukin-4,IL-4)和白介素13(interleukin-13,IL-13)的變化，并探討艾灸對(duì)其的調(diào)節(jié)作用，以期為闡明艾灸治療UC的作用機(jī)制提供科學(xué)研究資料。

1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)SD雄性大鼠40只，體重（15010）g，由上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)飼養(yǎng)許可證號(hào)：

SCXK（滬）2012-0002，適應(yīng)性飼養(yǎng)3d。

1.2模型制備采用抗原免疫加福爾馬林局部刺激復(fù)合法制備大鼠實(shí)驗(yàn)性UC模型[17]。

造模結(jié)束后，每組隨機(jī)選取大鼠1只，脫頸處死，自肛門上2cm開始剪取6~8cm結(jié)腸組織，用10%中性福爾馬林固定，分別采用巨檢(grossexamination)與鏡檢，觀察模型大鼠結(jié)腸組織病理學(xué)變化，確認(rèn)模型成功與否。

1.3主要試劑與儀器完全弗氏佐劑（Sigma,美國(guó)）；艾絨艾條、無(wú)煙艾條（南陽(yáng)漢醫(yī)艾絨有限責(zé)任公司，中國(guó)）；HE染色試劑盒（南京建成生物有限公司，中國(guó)）；IFN-、TNF-、IL-4、IL-13ELISA試劑盒（武漢基因美生物科技有限公司，中國(guó)）；CD86、CD163抗體（SantaCruz，美國(guó)）；正置熒光顯微鏡（Olympus，日本）；酶標(biāo)儀（Bio-Tek，美國(guó)）；垂直電泳儀，濕轉(zhuǎn)膜儀及全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng)（Bio-Rad，美國(guó)）。

1.4分組與處理實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為正常組(normalgroup,NG)、模型組(modelgroup,MG)、普通艾灸組(normalmoxibustiongroup,NMG)和無(wú)煙艾灸組(smokelessmoxibustiongroup,SMG)，每組10只。

除正常組外，其余三組大鼠均按上述方法制備UC模型。

確認(rèn)模型制備成功后進(jìn)行分給干預(yù)。

正常組：

不做任何治療，只做與治療組相同的抓取固定。

模型組：

不做任何治療，只做與治療組相同的抓取固定。

普通艾灸組：

取雙側(cè)天樞穴[18]，采用溫和灸。

將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)專用細(xì)艾條點(diǎn)燃后在天樞穴處施灸，距離穴位表面約2～3cm，以大鼠不掙扎為度，每隔5s彈灰1次。

每次每穴溫和灸10min，每日1次，共灸8d。

無(wú)煙艾灸組：

穴們、灸法操作及灸治療時(shí)間均與艾灸組相同，但用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)專用無(wú)煙艾條施灸，每日1次，共灸8d。

1.5指標(biāo)檢測(cè)1.5.1結(jié)腸病理學(xué)觀察采用蘇木素-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色法觀察結(jié)腸組織病理變化。

結(jié)腸組織進(jìn)行脫水、包埋、切片及烤片處理。

二甲苯、梯度酒精中脫蠟至水，蘇木精染液染色5min，1％鹽酸酒精分化，1%氨水返藍(lán)，0.5％伊紅染液染色3min，再依次經(jīng)70％、85％、95％、100％酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，烘片鏡檢。

1.5.2肺組織勻漿上清液中細(xì)胞因子含量檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)雙抗體夾心法測(cè)定肺組織中巨噬細(xì)胞分化關(guān)鍵細(xì)胞因子干擾素(Interferon-gamma,IFN-)、腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor-alpha,TNF-)、白介素4(interleukin-4,IL-4)和白介素13(interleukin-13,IL-13)含量。

加入待測(cè)樣本及標(biāo)準(zhǔn)品40L/孔，再加入親和素10L，充分混勻，37℃溫育30min,棄上清液,用洗滌液洗滌5次，再加入酶標(biāo)試劑50L/孔，37℃溫育30min，棄上清液，用洗滌液洗滌5次，依次加入顯色劑A50L/孔、顯色劑B50L/孔，充分混合，37℃避光顯色15min，加入終止液50L/孔，終止反應(yīng)，450nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度(opticaldensity,OD)值，含量與OD值之間呈正線性關(guān)系，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中各細(xì)胞因子濃度。

1.5.3肺組織勻漿上清液中CD86、CD163蛋白檢測(cè)蛋白檢測(cè)采用免疫印跡法(westernblotting,WB)技術(shù)觀察肺組織中巨噬細(xì)胞分化表型CD86、CD163蛋白表達(dá)情況。

用RIPA裂解液提取肺組織蛋白，BCA法測(cè)定組織總蛋白濃度。

制備10%分離膠與5%積層膠，上樣總量為40g/30L，110V電泳2～3h，100V濕轉(zhuǎn)2h，5%BSA室溫封閉1h，一抗（CD861:500;CD1631:500）4℃雜交過夜，0.1%T-TBS漂洗3次，15min/次，HRP+二抗（1:10000）室溫雜交1h，0.1%T-TBS漂洗3次，15min/次，滴加ECL顯影液，曝光，全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng)分析軟件掃描灰度值并記錄。

1.6統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

若數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布且方差齊，則用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用One-wayANOVA分析，組間兩兩比較則采用最小顯著差異（leastsignificantdifference,LSD）檢驗(yàn);若數(shù)據(jù)非正態(tài)分布或方差不齊，則用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示，采用非參數(shù)檢驗(yàn)。

統(tǒng)計(jì)結(jié)果以P0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.1一般情況正常組大鼠飲食活動(dòng)正常，精神狀態(tài)良好，毛發(fā)有光澤，大便成形，質(zhì)地中等，肛周紅潤(rùn)，未見異常分泌物，籠具干燥。

與正常組比較，模型組大鼠飲食減少，精神差，易激惹，毛發(fā)干枯，便質(zhì)稀或不成形，肛周紅腫伴異常分泌物，體重增加緩慢(P0.05)。

與模型組比較，艾灸治療的兩組大鼠飲食、大便及精神狀態(tài)改善，體重相對(duì)增加明顯(P0.05),艾灸治療的兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)，圖1。

Figure1.各組大鼠體重增加情況[Note:Comparedwiththenormalgroup,1)P0.05;comparedwiththemodelgroup,2)P0.05]2.2結(jié)腸組織病理學(xué)巨檢：

正常組大鼠結(jié)腸黏膜表面光滑，皺襞紋路清晰，質(zhì)軟，色白，伴見少量血管。

與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸有不同程度腫脹，腸壁充血，質(zhì)地偏厚，色暗或偏紅，甚者可見局部白色潰瘍面、點(diǎn)，大體損傷評(píng)分升高(P0.05)。

與模型組比較，艾灸治療的兩組大鼠的結(jié)腸腫脹、增厚、充血、潰瘍等大體損傷改善，與模型組相比，大體損傷評(píng)分明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；艾灸治療的兩組比較，大體損傷評(píng)分無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),圖2。

Figure2.各組大鼠大體損傷評(píng)分[Note:Comparedwiththenormalgroup,1)P0.05;comparedwiththemodelgroup,2)P0.05]鏡檢：

正常組大鼠結(jié)腸結(jié)構(gòu)良好，黏膜連續(xù)覆蓋，單層柱狀上皮，腸腺有序排列整齊，部分腺腔直接向腸腔開口，黏膜下層結(jié)締組織疏松，伴見血管、淋巴、神經(jīng)，肌層結(jié)構(gòu)完整，未見潰瘍、壞死、炎癥浸潤(rùn)。

模型組大鼠結(jié)腸嚴(yán)重?fù)p傷，多處潰瘍面，黏膜層腺體壞死，黏膜層與黏膜下層有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，組織結(jié)構(gòu)層次不清，與正常組相比，病理組織學(xué)評(píng)分升高(P0.05)。

與模型組比較，艾灸治療的兩組大鼠結(jié)腸病理?yè)p傷均有不同程度改善，表現(xiàn)為黏膜層能基本連續(xù)分布，腺體增生明顯，黏膜層與黏膜下層輕度水腫伴少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，偶見潰瘍。

與模型組、無(wú)煙艾灸組比較，普通艾灸組病理學(xué)損傷評(píng)分顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。

無(wú)煙艾灸組與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，圖3、圖4。

圖3.各組大鼠病理學(xué)損傷評(píng)分[Note:Comparedwiththenormalgroup,1)P0.05;comparedwiththemodelgroup,2)P0.05;comparedwiththesmokelessmoxibustiongroup,3)P0.05]2.3肺組織勻漿上清液中CD86、、CD163蛋白表達(dá)蛋白表達(dá)與正常組比較，模型組大鼠肺組織勻漿上清液中CD86蛋白含量顯著增加，CD163蛋白含量顯著減少(P0.05)。

與模型組、無(wú)煙艾灸組比較，普通艾灸組大鼠肺組織勻漿上清液中CD86蛋白含量降低，CD163蛋白含量升高(P0.05)，提示普通艾灸能影響UC大鼠肺組織M分化，調(diào)節(jié)肺組織中M功能表型蛋白CD86/CD163表達(dá)。

無(wú)煙艾灸組與模型組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，圖5和圖6。

2.4肺組織勻漿上清液中細(xì)胞因子TNF-、IFN-、IL-4、IL-13含量與正常組比較，模型組大鼠肺組織中TNF-和IFN-含量明顯增加，IL-4和IL-13含量減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。

與模型組、無(wú)煙艾灸組比較，普通艾灸組大鼠肺組織中TNF-和IFN-含量顯著降低，IL-4和IL-13含量增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，提示普通艾灸能降低UC大鼠肺組織TNF-和IFN-含量，增加IL-4和IL-13含量。

無(wú)煙艾灸組與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，圖7-圖10。

圖5.各組大鼠肺組織勻漿中CD86蛋白表達(dá)[Note:Comparedwiththenormalgroup,1)P0.05;comparedwiththemodelgroup,2)P0.05;comparedwiththesmokelessmoxibustiongroup,3)P0.05]圖6.各組大鼠肺組織勻漿中CD163蛋白表達(dá)[Note:Comparedwiththenormalgroup,1)P0.05;comparedwiththemodelgroup,2)P0.05;comparedwiththesmokelessmoxibustiongroup,3)P0.05]圖7.各組大鼠肺組織勻漿中TNF-含量[Note:Comparedwiththenormalgroup,1)P0.05;comparedwiththemodelgroup,2)P0.05;comparedwiththesmokelessmoxibustiongroup,3)P0.05]圖8.各組大鼠肺組織勻漿中IFN-含量[Note:Comparedwiththenormalgroup,1)P0.05;comparedwiththemodelgroup,2)P0.05;comparedwiththesmokelessmoxibustiongroup,3)P0.05]圖9.各組大鼠肺組織勻漿中IL-4含量[Note:Comparedwiththenormalgroup,1)P0.05;comparedwiththemodelgroup,2)P0.05;comparedwiththesmokelessmoxibustiongroup,3)P0.05]圖10.各組大鼠肺組織勻漿中IL-13含量[Note:Comparedwiththenormalgroup,1)P0.05;comparedwiththemodelgroup,2)P0.05;comparedwiththesmokelessmoxibustiongroup,3)P0.05]3討論UC的發(fā)病原因與機(jī)制目前尚不明確，異常免疫反應(yīng)是其重要的影響因素。

UC屬于中醫(yī)久痢、腹痛、腹瀉等范疇。

作為炎癥性腸?。╥nflammatoryboweldiseases,IBD）的一種，UC以典型腸道癥狀(腹痛、腹瀉及膿血便)為主要表現(xiàn)，病情緩解與發(fā)作反復(fù)交替，病程遷延不愈，結(jié)腸纖維化及結(jié)腸癌是UC后期致死的重要原因。

研究發(fā)現(xiàn)，21%~36%的IBD患者存在著腸外表現(xiàn)，可累及所有器官系統(tǒng)；約0.21%的UC患者可出現(xiàn)肺部癥狀，病情經(jīng)糖皮質(zhì)激素治療緩解，提示這些表現(xiàn)可能與UC有共同的免疫致病機(jī)制[19-21]。

中醫(yī)傳統(tǒng)理論認(rèn)為肺與大腸相表里，肺與腸在生理病理上相互影響。

近幾年，研究發(fā)現(xiàn)一定比例的UC患者伴隨肺組織損傷及相應(yīng)臨床癥狀[22-25]。

肺損傷或是UC重要的腸外表現(xiàn)之一。

流行病學(xué)調(diào)查顯示，58.6%的UC患者出現(xiàn)氣短、咳嗽癥狀，63.3%的UC患者存在肺功能異常，這些肺部病變常與UC活動(dòng)性及病變程度相關(guān)，以活動(dòng)期和輕中度UC患者肺功能改變尤為突出[26-30]。

景珊等研究表明UC模型大鼠存在肺組織炎癥損傷、肺功能異常及肺組織分泌型免疫球蛋白A（secretoryimmunoglobulin,sIgA）表達(dá)異常[31]，但UC患者肺組織中M的變化尚未見有報(bào)道。

M因不同的激活環(huán)境而呈現(xiàn)不同的分化狀態(tài)和功能高度異質(zhì)性。

M1型M激活主要由IFN-和TNF-介導(dǎo)，表達(dá)重要功能表型CD86，促進(jìn)抗原提呈，增強(qiáng)吞噬，與免疫損傷有關(guān)。

M2型M則由IL-4和IL-13激活，表達(dá)功能表型CD163，與消解炎癥，促進(jìn)腫瘤形成有關(guān)[32-34]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，UC模型組大鼠肺組織存在著異常免疫狀態(tài)，主要表現(xiàn)為調(diào)節(jié)CD86+M激活的關(guān)鍵細(xì)胞因子IFN-和TNF-分泌異常升高，M重要活化表型蛋白CD86表達(dá)明顯增加，肺組織M多呈現(xiàn)M1型特質(zhì)。

艾灸具有操作簡(jiǎn)單、作用溫和的特點(diǎn)，能有效緩解結(jié)腸組織病變和改善患者生活質(zhì)量，已逐漸成為臨床治療UC的首選替代療法。

本研究發(fā)現(xiàn)，艾灸具有緩解UC模型大鼠結(jié)腸損傷并促進(jìn)粘膜修復(fù)的作用，表現(xiàn)為普通艾灸組、無(wú)煙艾灸組大鼠結(jié)腸局部炎性細(xì)胞浸潤(rùn)相對(duì)減輕和潰瘍的愈合；與模型組比較，艾灸治療的兩組大鼠大體評(píng)分降低（P0.05）；與模型組和無(wú)煙艾灸組比較，普通艾灸組大鼠結(jié)腸組織學(xué)評(píng)分顯著降低（P0.05）；無(wú)煙艾灸組大鼠結(jié)腸組織學(xué)評(píng)分與模型組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。

艾灸的作用成分復(fù)雜、作用途徑多樣。

光輻射熱效應(yīng)是艾灸起效的重要機(jī)制[35-37]。

隨著艾煙有效成分的揭示及艾煙安全性問題的被關(guān)注，艾煙生物學(xué)功能及其對(duì)機(jī)體器官的影響也逐漸引起大家的關(guān)注和認(rèn)可。

實(shí)驗(yàn)表明艾煙能增強(qiáng)肺泡M活性并對(duì)肺組織環(huán)境具有一定調(diào)節(jié)作用，促進(jìn)損傷修復(fù)[38-41]。

本研究顯示，與模型組、無(wú)煙艾灸組比較，普通艾灸組大鼠肺組織中CD86表達(dá)明顯降低，CD163升高，肺組織微環(huán)境中IL-4和IL-13含量明顯增加，IFN-和TNF-表達(dá)減少，提示艾灸組大鼠肺組織中M多表現(xiàn)M2型特征，肺微環(huán)境中細(xì)胞因子分泌趨向于激活M2型M。

普通艾灸組和無(wú)煙艾灸組大鼠結(jié)腸損傷均有一定改善，但對(duì)肺M重要功能表型蛋白及細(xì)胞因子表達(dá)的影響不同，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生溫?zé)岽碳な莾烧叩墓餐c(diǎn)，這個(gè)共同點(diǎn)也許是促進(jìn)結(jié)腸損傷修復(fù)的重要因素；此外兩組的干預(yù)方法也存在一定差異，前者燃燒產(chǎn)生艾煙，后者燃燒無(wú)煙霧產(chǎn)生，這種不同點(diǎn)抑或是造成兩組大鼠肺組織M特征差異的可能因素。

關(guān)于是否是艾煙產(chǎn)生了這種特異性肺部變化并參與了結(jié)腸損傷愈合的正面調(diào)節(jié)作用則有待于進(jìn)一步研究證實(shí)。

本研究表明，艾灸能促進(jìn)UC大鼠肺組織中M重要功能表型蛋白CD163及M分化關(guān)鍵細(xì)胞因子IL-4和IL-13表達(dá)，抑制功能活化表型蛋白CD86及相應(yīng)細(xì)胞因子IFN-和TNF-表達(dá)，促進(jìn)M從M1型向M2型轉(zhuǎn)化。

艾灸對(duì)UC大鼠結(jié)腸組織損傷修復(fù)的促進(jìn)作用是否與其艾煙調(diào)控肺組織微環(huán)境中M分化關(guān)鍵細(xì)胞因子分泌從而抑制M異?；罨嘘P(guān)，尚待于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)。

參考文獻(xiàn)[1]GreenleyRN,KunzJH,SchurmanJV,SwansonE.Abdominalpainandhealthrelatedqualityoflifeinpediatricinflammatoryboweldisease.JPediatrPsychol,2013,38(1):63-71.[2]ShiYL,ZhangPC,LinCJ,YuZ,WuJS.炎癥性腸病患者生存質(zhì)量100例臨床研究.ZhongguoShiyongNeikeZazhi,2015,35(2):163-164.[3]ChenH,KangM.艾灸配合中成藥治療腹瀉型腸易激綜合征38例.ShaanxiZhongyiXueyuanXuebao,2014,37(6):44-46.[4]ChenRX,ChenMR,FuY,ZhangB,ChiZH.Clinicalresearchofthearrivalofqiattheaffectedareawhiletreatingchronicdiarrhea(spleenqideficiency)withmoxibustionatTianshupoint.JiangxiZhongyiyao,2011,42(1):24-26.[5]YingJ,GouCY.ClinicalobservationofsuspendedmoxibustionondelayeddiarrheaduetochemotherapyregimencontainingIrinotecan.JETCM,2015,24(5):794-796.[6]SongCY.艾灸治療脾胃虛寒型潰瘍性結(jié)腸炎60例臨床分析.Asia-PacificTradMed,2014,10(21):53-54.[7]WuHG,TanWL,ChenHP,ShiZ,HuaXG.艾灸治療潰瘍性結(jié)腸炎療效及其對(duì)腸上皮細(xì)胞HLA-DR抗原的影響.ZhenCiYanJiu,1999,24(1):12-16.[8]ShiZ,WuHG,WangJH,ChenHP,ZhangLS.艾灸治療潰瘍性結(jié)腸炎的療效及粘膜免疫學(xué)機(jī)制.WCJD,2000,8(Special8):90.[9]WangJP,YinHY,LuSF,YangY,YuSG.Reviewofstudyonwarmeffectinducedbymoxibustion.LiaoningZhongyiZazhi,2012,39(4):760-762.[10]ChangXR,LiuM,YanJ,YiSX,YueZH,ZhangGS,LiuML,SunGJ,WangLL,HuL,WuHG.Researchonmechanismsandprinciplesofwarm-unblockandwarm-toniceffectsonmoxibustion.ShijieZhongyiyao,2013,8(8):875-879.[11]WangLL.Characteristicofmoxibustionanditswarming-dredgingeffect.ZhongguoZhenJiu,2011,31(10):865-868.[12]LanL,ZhangGS,ShiJ,ChangXR.Advancesintheapplicationandadversereactionofmoxasmoke.ZhonghuaZhongyiyaoXuekan,2012,30(1):48-51.[13]ZhengXL,YangY,WangBJ,TangHQ,ZhouXY.Explorationontheinterior-exteriorrelationbetweenlungandlargeintestinefromtheperspectiveofsynchronousdynamicchangeofmicroecologyofrespiratoryandintestinalpassageofratswithulcerativecolitis.ShijieZhongyiyao,2014,9(4):418-421.[14]YanX,ZhouXY,ShengYH,ZhuL,ZhangLD,ZangQ.ExplorationofthetheoryofFeiandDachangbeinginterior-exteriorlyrelatedfromobservingchangesofinflammatorycytokinesandoxygenfreeradicalsinthelungtissueofulcerativecolitisrats.CJITWM,2014,34(4):455-459.[15]ZhengXL,YangY,wangBJ,wangJ,TangHQ,HuiY.Todiscussthepathologicaltransmissionfeaturebetweenlungandlargeintestinefromteperspectiveofsynchronousdynamicchangeofpulmonaryandintestinalfunctionandhistomorphology.ShijieZhongyiyao,2014,9(8):1063-1066,1072.[16]JingS,WangXY,YangX,YangS,ZhuL,ShengYH,YanX,ChaiLM.ChangesofinherentimmuneresponseandacquiredimmuneresponseintheLungtissueandtheintestinaltissueofulcerativecolitisratsandtheinterventionofChinesecompound:anexperimentalresearch.CJITWM,2015,35(1):63-70.[17]徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法.第3版.北京：

人民衛(wèi)生出版社,2001.[18]LiZR.ExperimentalAcupunctureScience.Beijing:ChinaPressofTraditionalChineseMedicine,2003.[19]LiuJX,LiW,SongZM,WangXD.Meta-analysisofrareextraintestinalmanifestationsofulcerativecolitisinChinesemainlandarea.ChinJClinGastroenterol,2014,26(5):264-270.[20]DingYJ,ShiGC,LiM.潰瘍性結(jié)腸炎合并肺血栓栓塞1例.ChinJTubercRespirDis,2012，35(4):295-296.[21]LiuY,ZhangB,YuH,JiSG.潰瘍性結(jié)腸炎合并閉塞性細(xì)支氣管炎伴機(jī)化性肺炎1例.ChinJInternMed,2007,46(5):436-437.[22]YilmazA,YilmazDemirciN,HosgnD,UnerE,ErdoganY,GokcekA,CaqlarA.Pulmonaryinvolvementininflammatoryboweldisease.WorldJGastroenterol,2010,16(39):4952-4957.[23]GaramszegiM.Extraintestinalmanifestationsofinflammatoryboweldiseasesandtheirirmanagement.OrvHetil,2011,152(17):663-671.[24]TzanakisNE,TsiligianniIG,SiafakasNM.Pulmonaryinvolvementandallergicdisordersininflammatoryboweldisease.WorldJGastroenterol,2010,16(3):299-305.[25]OzyilmazE,YildirimB,ErbasG,AktenS,OquzulgenIK,TuncB,TuncerC,TurktasH.Valueoffractionalexhalednitricoxide(FENO)forthediagnosisofpulmonaryinvolvementduetoinflammatoryboweldisease.InflammBowelDis,2010,16(4):670-676.[26]YangX,WangXY,ZhuL炎癥性腸病的肺部損害及機(jī)制探討.ChinJIntegrTradWestMedDig,2011,19(2):133-136.[27]SunHY,WangXY,WuJ,ZhangW,LiuDM,WangJY.Theinterior-exteriorcorrelationbetweenFeiandDachangfromthelungfunctioninjuryinulcerativecolitispatients.CJITWM,2011,31(5):591-594.[28]WangJY,WangXY,SunHY,LiuDM,ZhangW,JinCX,LiL,ZhuLQ.Correlationbetweenpulmonaryfunctionimpairmentandlevelsof1-antitrypsininserumandcolonofulcerativecolitispatients:aclinicalresearch.CJITWM,2014,34(1):20-26.[29]WangP,WangXY,WangJY,ChengRY,LiuDM,SunHY,ZhangW,JinCX.Differencesinlungdysfunctionbetweeninflammatoryboweldiseaseandirritablebowelsyndromebasedoninteractionoflungandlargeintestine.ShijieZhongxiyiJieheZazhi,2014,9(5):527-530,538.[30]ZhangW,WangXY,SunHY,WuJ,TangZP,ZhaoWX,HanJ,YangHY,ShenH,TangXD,LiZH,LiBS,WangJY,LiuDM,WuJW,LiuYJ,ZhuL.Characteristicsofinjuredlungfunctioninpatientswithulcerativecolitis.BeijingZhongyiyaoDaxueXuebao,2012,35(3):213-216.[31]JingS,WangXY,ZhuL,YangX,ZhouB.Discussionontheoryofthelungandthelargeintestinebeinginterior-exteriorlyrelatedbasedontwoUCratmodels.CJTCMP,2011,26(6):1367-1369.[32]ZhouD,HuangC,LinZ,ZhanS,KongL,FangC,LiJ.Macrophagepolarizationandfunctionwithemphasisontheevolvingrolesofcoordinatedregulationofcellularsignalingpathways.CellSignal,2014,26(2):192-197.[33]McWhorterFY,WangT,NguyenP,Chung