殘留溶劑測定法

殘留溶劑測定法1簡述藥品中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過程中使用過，但在工藝過程中未能完全去除的有機(jī)溶劑。藥物中常見的殘留溶劑及限度參照《中國藥典》2015年版四部通則0861附表1的規(guī)定，除另有規(guī)定外，第一、第二、第三類溶劑的殘留量應(yīng)符合其規(guī)定；對其他溶劑，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)工藝的特點(diǎn)，制訂相應(yīng)的限度，使其符合產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求。本法照氣相色譜法（《中國藥典》2015年版四部通則0521測定。本測定方法適用于對各論項(xiàng)下未收載殘留溶劑檢測方法的品種中殘留溶劑的檢驗(yàn)，也可用于指導(dǎo)建立各論項(xiàng)下具體品種的殘留溶劑檢查方法。2儀器和用具2.1氣相色譜儀，帶FID檢測器，頂空進(jìn)樣器。2.2計(jì)算機(jī)，安裝工作站軟件。2.3色譜柱2.3.1毛細(xì)管柱除另有規(guī)定外，極性相近的同類色譜柱之間可以互代使用。2.3.1.1非極性色譜柱固定液為100%的二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱。2.3.1.2極性色譜柱固定液為聚乙二醇(PEG-20M)的毛細(xì)管柱。2.3.1.3中極性色譜柱固定液為(35%)二苯基-(65%)二甲基聚硅氧烷，(50%)二苯基-(50%)二甲基聚硅氧烷，(35%)二苯基-(65%)二甲基亞芳基聚硅氧烷，(14%)氰丙基苯基-(86%)二甲基聚硅氧烷，(6%)氰丙基苯基-(94%)二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱。2.3.1.4弱極性色譜柱固定液為(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷，(5%)二苯基-(95%)二甲基亞芳基硅氧烷共聚物的毛細(xì)管柱。2.3.2填充柱以直徑為0.18~0.25mm的二乙烯苯3供試品溶液和對照品溶液的制備3.1供試品溶液的制備3.1.1頂空進(jìn)樣除另有規(guī)定外，精密稱取供試品0.1~1g；通常以水為溶劑；對于非水溶性藥物，可采用N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或其他適宜溶劑；根據(jù)供試品和待測溶劑的溶解度，選擇適宜的溶劑且應(yīng)不干擾待測溶劑的測定。根據(jù)品種正文中殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，濃度滿足系統(tǒng)定量測定的需要。3.1.2溶液直接進(jìn)樣精密稱取供試品適量，用水或合適的有機(jī)溶劑使溶解；根據(jù)品種正文中殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測定的需要。3.2對照品溶液的制備精密稱取各品種項(xiàng)下規(guī)定檢查的有機(jī)溶劑適量，采用與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對照品溶液。若為限度檢查，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定確定對照品溶液的濃度；若為定量測定，為保證定量結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的實(shí)際殘留量確定對照品溶液的濃度；通常對照品溶液的色譜峰面積與供試品溶液中對應(yīng)的殘留溶劑的色譜峰面積以不超過2倍為宜。必要時(shí)，應(yīng)重新調(diào)整供試品溶液和對照品溶液的濃度。4系統(tǒng)適用性試驗(yàn)4.1用待測物的色譜峰計(jì)算，毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)均應(yīng)大于5000；填充柱法的理論板數(shù)一般應(yīng)大于1000。4.2色譜圖中，待測物色譜峰與其相鄰的色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5；4.3以內(nèi)標(biāo)法測定時(shí)，對照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，所得待測物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)應(yīng)不大于5%；若以外標(biāo)法測定，所得待測物峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)應(yīng)不大于10%。5測定法5.1第一法毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法5.1.1當(dāng)需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量不多，并極性差異較小時(shí)，可采用此法。色譜條件柱溫應(yīng)根據(jù)待測溶劑及配制供試液的溶劑的沸點(diǎn)決定。為避免溶劑在柱內(nèi)凝結(jié)，提高保留的重現(xiàn)性，柱溫不宜太低，通常在40℃~l00定；常以氮?dú)鉃檩d氣，流速為每分鐘1.0~2.0ml；以水為溶劑時(shí)頂空瓶平衡溫度為70~85℃，頂空瓶平衡時(shí)間30~60分鐘；進(jìn)樣口溫度一般為150℃~200℃；如采用FID5.1.2測定法取對照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測定待測峰的峰面積。由于靜態(tài)頂空進(jìn)樣時(shí)，抽取的是處于氣液平衡的頂空氣，所以每到高的靈敏度。7.6由于不同的實(shí)驗(yàn)室在測定同一藥品時(shí)可能采用了不同的實(shí)驗(yàn)方法，當(dāng)測定結(jié)果處于合格不合格邊緣時(shí)，以采用內(nèi)標(biāo)及標(biāo)準(zhǔn)加入法為準(zhǔn)。8應(yīng)用8.1已知樣品中殘留溶劑的種類8.1.1測定方法的初步選擇根據(jù)待測藥品的結(jié)構(gòu)和溶解性，選擇合適的頂空條件和溶劑；根據(jù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)或工藝流程確定待檢測樣品中的殘留溶劑種類，在表2、表3中選定適合的色譜柱系統(tǒng)以達(dá)到最好的分離，并選擇一種與待測殘留溶劑無干擾的內(nèi)標(biāo)。8.1.2測定方法的考察與優(yōu)化8.1.2.1用所選溶劑配制對照品溶液并加入內(nèi)標(biāo)，并在所選色譜柱系統(tǒng)考察是否能夠達(dá)到分離要求，內(nèi)標(biāo)是否合適。如果不能達(dá)到要求，根據(jù)情況進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，如調(diào)整柱溫、流速等或選用其他色譜柱系統(tǒng)。8.1.2.2精密稱取樣品0.2g置20m1頂空瓶中，加溶劑2.0m1溶解，加蓋密封作為供試品溶液。在所確定的色譜條件下測定，考察供試品中待測殘留溶劑是否達(dá)到分離要求，內(nèi)標(biāo)出峰處是否有干擾。如果不能達(dá)到要求，根據(jù)情況進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，如調(diào)整柱溫、流速等或選用其他色譜柱系統(tǒng)。8.1.2.3最終確定色譜條件和內(nèi)標(biāo)。8.1.3定量測定8.1.3.1配制足夠量的一定濃度的內(nèi)標(biāo)溶液備用。精密稱取供試品約0.2g置頂空瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液2.0ml溶解，加蓋密封作為供試品溶液。根據(jù)供試品溶液的濃度計(jì)算出按照中國藥典的限度應(yīng)配制的對照品濃度，并用內(nèi)標(biāo)溶液配制。8.1.3.2在相同的頂空條件和色譜條件下測定對照品和供試品并按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算結(jié)果。8.1.4結(jié)果判定8.1.4.1測定結(jié)果小于中國藥典規(guī)定限度的組分，為殘留溶劑項(xiàng)符合規(guī)定的組分。8.1.4.2當(dāng)存在有干擾組分、限度邊緣組分、不符合規(guī)定的組分時(shí)，要改變測定條件做進(jìn)一步的考察，以排除干擾因素，得到正確結(jié)論。8.2未知樣品中殘留溶劑的種類8.2.1初步判斷8.2.1.1精密稱取藥品約0.2g置20mI頂空瓶中，加溶劑2.0ml溶解，加蓋密封作為供試品溶液；8.2.1.2分別采用程序升溫法，在非極性和極性兩種色譜柱系統(tǒng)條件下，按推薦的程序升溫條件用頂空氣相色譜法測定藥品中所有揮發(fā)性組分的保留時(shí)間；在相同色譜條件下測定丁酮的保留時(shí)間；8.2.1.3計(jì)算藥品中所有揮發(fā)性組分相對于丁酮的相對保留時(shí)間。8.2.1.4將兩個(gè)柱系統(tǒng)中的揮發(fā)性組分相對于丁酮的保留時(shí)間分別與表3中的相對保留時(shí)間比較，找出相對保留時(shí)間相差小于3%的有機(jī)溶劑，作為可能存在的殘留溶劑；8.2.1.5找出在兩個(gè)柱系統(tǒng)中共同的可能存在的殘留溶劑，即為藥品中可能存在的殘留溶劑。8.2.2確定根據(jù)初步判斷結(jié)果，使用有機(jī)溶劑標(biāo)樣配制對照品溶液，選擇適當(dāng)?shù)牡葴厣V系統(tǒng)測定對照品溶液和供試品溶液，供試品溶液中殘留溶劑的保留時(shí)間應(yīng)與對照品的保留時(shí)間一致。8.2.3驗(yàn)證如果藥品中殘留溶劑的保留時(shí)間與對照品的保留時(shí)間存在微小差異，難以判斷是否為同一種物質(zhì)時(shí)，可用標(biāo)準(zhǔn)加入法進(jìn)一步確定。