2025屆高考生物一輪復(fù)習(xí)單元檢測(cè)9生物技術(shù)與工程(新高考新教材)

單元檢測(cè)(九)生物技術(shù)與工程(考試用時(shí):90分鐘滿分:100分)一、選擇題(本大題共25小題,每小題2分,共50分。每小題列出的四個(gè)備選項(xiàng)中只有一個(gè)是符合題目要求的,不選、多選、錯(cuò)選均不得分)1.高等哺乳動(dòng)物的胚胎發(fā)育一般都要經(jīng)歷“受精卵→卵裂期→桑葚胚→囊胚→原腸胚→幼體形成”等階段。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.受精卵通過(guò)有絲分裂不斷增加體細(xì)胞數(shù)目B.卵裂期細(xì)胞與受精卵所含的核酸種類和數(shù)量相同C.原腸胚細(xì)胞通過(guò)增殖分化形成幼體的各種組織和器官D.幼體形成后仍然保留著少數(shù)具有分裂和分化能力的細(xì)胞2.某雜種植株的獲取過(guò)程如圖所示,下列有關(guān)分析正確的是()A.清洗培養(yǎng)基密度小于原生質(zhì)體密度B.圖示①過(guò)程可用聚乙二醇調(diào)節(jié)滲透壓C.葉片經(jīng)消毒后需用蒸餾水多次沖洗D.原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是再生細(xì)胞壁3.生物武器素來(lái)令人談虎色變,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.生物武器不同于常規(guī)武器的是有些具有傳染性B.歷史上生物武器對(duì)人類造成了嚴(yán)重的威脅與傷害C.隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)發(fā)展,生物武器造成的威脅不斷降低D.我國(guó)對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散持反對(duì)態(tài)度4.下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問(wèn)題的敘述,正確的是()A.生物戰(zhàn)劑的病原體有細(xì)菌類和病毒類兩大類B.轉(zhuǎn)基因食品的安全性是不容置疑的C.試管嬰兒技術(shù)已經(jīng)成熟,可對(duì)植入前胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷和基因改造D.治療性克隆是利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞來(lái)修復(fù)或替代受損的細(xì)胞5.科研人員通過(guò)干預(yù)優(yōu)良經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的早期胚胎發(fā)育過(guò)程,以達(dá)到經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的大規(guī)模生產(chǎn),從而獲得經(jīng)濟(jì)效益。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.體外受精之前需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理B.超數(shù)排卵可以為體外受精提供足夠的卵細(xì)胞C.胚胎分割技術(shù)可以提高胚胎的利用率D.代孕母體必須是同期發(fā)情的優(yōu)良經(jīng)濟(jì)動(dòng)物6.棉酚是棉花植株中一種對(duì)動(dòng)物有危害的毒性物質(zhì),研究人員試圖從棉花田的土壤中分離篩選出高效分解棉酚的菌株。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.篩選培養(yǎng)基需以棉酚為唯一的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則C.稀釋涂布平板法或平板劃線法均可用來(lái)分離純化棉酚分解菌D.棉酚分解菌可分解棉酚的根本原因是含有能分解棉酚相應(yīng)酶的基因7.2023年3月,中國(guó)首塊100%雞細(xì)胞肉在杭州一家生物公司研制成功,這是一塊完全不含植物支架的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)肉產(chǎn)品。培養(yǎng)細(xì)胞取自杭州的一種本土雞,培養(yǎng)肉經(jīng)多種烹飪方式后的口感與傳統(tǒng)雞肉幾乎無(wú)差別。下列關(guān)于該技術(shù)的敘述,正確的是()A.原理是細(xì)胞的全能性B.培養(yǎng)需要無(wú)毒、無(wú)菌和合適配比的營(yíng)養(yǎng)和氣體條件C.培養(yǎng)的材料可取分化程度較高的肌肉干細(xì)胞,經(jīng)消化分散后培養(yǎng)D.所需的成本低,且細(xì)胞肉的質(zhì)量可控,很有發(fā)展前景8.從目標(biāo)生物中提取分離DNA,是進(jìn)行基因工程操作的基礎(chǔ)。某興趣小組嘗試從新鮮香蕉果肉中進(jìn)行DNA的粗提取及分離,下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.可用蛋白酶對(duì)濾液中的DNA進(jìn)行純化B.酵母或菜花可以作為替代香蕉果肉的材料C.加入冷酒精后快速研磨以析出絮狀物D.設(shè)置只加二苯胺試劑的空白對(duì)照組,目的是與實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行顏色對(duì)照9.研究者發(fā)現(xiàn)金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基中長(zhǎng)出了青霉菌落,青霉周圍出現(xiàn)透明圈(如圖),最終發(fā)現(xiàn)青霉素?？股啬軌蛞种萍?xì)菌的生長(zhǎng)與繁殖,因此在抗生素環(huán)境周圍出現(xiàn)了透明的抑菌圈。下列敘述錯(cuò)誤的是()金黃色葡萄球菌和青霉菌落間出現(xiàn)透明圈的現(xiàn)象A.根據(jù)是否有抑菌圈可判斷抗生素對(duì)細(xì)菌是否有抑制效果B.抑菌圈直徑與菌落直徑比值的大小可判斷抗生素對(duì)細(xì)菌抑制效果強(qiáng)弱C.要選擇能抗青霉素的細(xì)菌應(yīng)從抑菌圈邊緣獲取目的菌D.抑菌圈邊緣存活的細(xì)菌一定產(chǎn)生了耐藥性10.將山核桃miRNA169基因轉(zhuǎn)入擬南芥中,可促進(jìn)擬南芥提前開(kāi)花,部分流程如下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.過(guò)程①通常需要逆轉(zhuǎn)錄酶催化B.過(guò)程②中可利用PCR技術(shù)擴(kuò)增并篩選出目的基因C.過(guò)程中轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌一般需要農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒作為表達(dá)載體D.過(guò)程④收獲轉(zhuǎn)化的種子需經(jīng)植物組織培養(yǎng)才能獲得提前開(kāi)花的植株11.某同學(xué)選用新鮮成熟的葡萄制作果酒和果醋,下列相關(guān)敘述正確的是()A.果酒發(fā)酵時(shí),每日迅速打開(kāi)瓶蓋放氣,避免空氣回流進(jìn)入發(fā)酵容器B.果酒發(fā)酵時(shí),用本尼迪特試劑檢測(cè)還原糖的含量,紅黃色沉淀逐日增多C.果醋發(fā)酵時(shí),發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵產(chǎn)生的氣泡量D.果醋發(fā)酵時(shí),重鉻酸鉀測(cè)定醋酸含量變化時(shí),溶液灰綠色逐日加深12.動(dòng)物細(xì)胞工程包括細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合、核移植等技術(shù)。下列敘述正確的是()A.體外培養(yǎng)白細(xì)胞到一定階段時(shí),會(huì)出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制現(xiàn)象B.用生物方法誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí),采用的仙臺(tái)病毒已進(jìn)行滅活處理C.骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合后,經(jīng)誘導(dǎo)融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞D.通過(guò)核移植和體外受精所獲得的胚胎都須移植給特定受體才能獲得后代13.下列關(guān)于植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述,錯(cuò)誤的是()A.誘變處理愈傷組織可獲得基因重組的新品種B.人工種子可以解決某些作物品種繁殖能力差、結(jié)籽困難等問(wèn)題C.以植物根尖、莖尖為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng),可培育脫毒植株D.植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可實(shí)現(xiàn)藥物、食品添加劑等的工業(yè)化生產(chǎn)14.下圖是白菜與甘藍(lán)體細(xì)胞雜交技術(shù)的流程,下列分析錯(cuò)誤的是()A.該過(guò)程發(fā)生了染色體變異B.過(guò)程①②均應(yīng)置于較高滲透壓溶液中C.經(jīng)過(guò)程②③獲得的均為雜種細(xì)胞D.過(guò)程④⑤通常需要適宜的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的配比15.有一些細(xì)菌能分泌脲酶將尿素水解為NH3和CO2,吸收后可作為自身含氮物質(zhì)合成的原料,該過(guò)程在生態(tài)系統(tǒng)的氮平衡中起到重要作用,通過(guò)配制尿素固體培養(yǎng)基可篩選出這類細(xì)菌。下列有關(guān)敘述正確的是()A.尿素是這類細(xì)菌利用的直接氮源B.分泌脲酶的細(xì)菌在生態(tài)系統(tǒng)中屬于次級(jí)生產(chǎn)者C.配制尿素固體培養(yǎng)基時(shí)要用無(wú)菌水,不能用蒸餾水D.以尿素為唯一氮源的液體培養(yǎng)基也能篩選出分泌脲酶的細(xì)菌閱讀以下材料,回答第16、17題?？莶菅挎邨U菌分泌的蛋白酶在生物醫(yī)藥和日用化工等生產(chǎn)領(lǐng)域具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,為篩選高產(chǎn)蛋白酶的枯草芽孢桿菌,將分別浸過(guò)不同菌株(a~e)分泌物提取液的圓紙片置于含某種高濃度蛋白質(zhì)的平板培養(yǎng)基表面,在37℃恒溫箱中放置2~3d,結(jié)果如圖1。檢測(cè)枯草芽孢桿菌的蛋白酶和其他酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)(即酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間,再在酶活性最高的溫度下測(cè)其酶活性),結(jié)果如圖2。圖1圖216.下列有關(guān)敘述正確的是()A.使用高濃度蛋白質(zhì)的目的之一是使培養(yǎng)基呈現(xiàn)不透明的狀態(tài)B.為使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加可信,應(yīng)增設(shè)浸過(guò)蒸餾水的圓紙片進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)C.菌株b提取液周圍沒(méi)有形成明顯透明圈的原因一定是不能合成蛋白酶D.蛋白酶制備時(shí)需研磨破碎枯草芽孢桿菌17.在工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中,制備該蛋白酶制劑前,枯草芽孢桿菌發(fā)酵液需在一定的溫度下保溫一定時(shí)間,下列溫度區(qū)間中最合適的是()A.30~40℃ B.40~50℃C.50~60℃ D.60~70℃18.下列關(guān)于細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述,正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要提供95%的O2和5%CO2的氣體環(huán)境B.靈長(zhǎng)類動(dòng)物克隆實(shí)驗(yàn)中,動(dòng)物體細(xì)胞核移植成功率低于胚胎細(xì)胞C.“克隆羊”“試管羊”的培育過(guò)程,都用到了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)D.克隆高產(chǎn)奶牛時(shí),將重構(gòu)胚(重組胚胎)進(jìn)行胚胎移植后,需用化學(xué)或物理方法“激活”19.某興趣小組對(duì)土壤中細(xì)菌進(jìn)行分離并計(jì)數(shù),利用選擇培養(yǎng)基篩選某種細(xì)菌,以下敘述正確的是()A.可配制以(NH4)2SO4為唯一氮源的培養(yǎng)基用于篩選硝化細(xì)菌B.所有培養(yǎng)基的成分均需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C.脲酶將尿素分解成氨,使培養(yǎng)基的pH降低,加入酚紅指示劑后變紅D.本實(shí)驗(yàn)可采用稀釋涂布平板法或平板劃線法的接種方法閱讀下列材料,回答第20、21題。解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)是一種線粒體內(nèi)膜蛋白,具有消除線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的H+濃度差、減少ATP合成、增加耗氧量、增加產(chǎn)熱的功能。我國(guó)科學(xué)家通過(guò)CRISPR/Cas9技術(shù)將小鼠的UCP1基因置換到豬的體內(nèi),并使鼠UCP1基因在豬的白色脂肪組織中特異性表達(dá),獲得了脂肪沉積少的“瘦肉豬”,下圖是“瘦肉豬”的主要培育過(guò)程。20.下列關(guān)于UCP1的相關(guān)分析與推測(cè),錯(cuò)誤的是()A.UCP1可能主要影響需氧呼吸的第三階段ATP的生成量B.寒冷刺激可能會(huì)提高恒溫動(dòng)物UCP1的活性或表達(dá)量C.脂肪組織細(xì)胞中UCP1基因表達(dá)效率低的豬,瘦肉產(chǎn)率更高D.甲狀腺激素可能具有提高UCP1基因表達(dá)的作用21.下列關(guān)于“瘦肉豬”培育過(guò)程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.CRISPR/Cas9技術(shù)育種的主要原理是基因重組B.b過(guò)程中,進(jìn)行有限稀釋培養(yǎng)的目的是獲得陽(yáng)性單克隆細(xì)胞系C.d過(guò)程中,受體細(xì)胞選擇去核的豬卵母細(xì)胞效果最好D.e過(guò)程中,需對(duì)代孕豬進(jìn)行超數(shù)排卵及同期發(fā)情處理22.生物技術(shù)與工程實(shí)踐中常利用特殊的化學(xué)試劑或一定的物理刺激進(jìn)行“激活”操作。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.將果酒用于果醋發(fā)酵時(shí),降低溫度是“激活”醋酸菌的重要條件之一B.在PCR反應(yīng)過(guò)程中,耐高溫的DNA聚合酶需要Mg2+“激活”C.克隆高產(chǎn)奶牛時(shí),獲得的重構(gòu)胚需要在胚胎移植前用電脈沖等方法“激活”D.制備單克隆抗體時(shí),應(yīng)先利用抗原“激活”小鼠相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞23.人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白,可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得,流程如下。下列相關(guān)敘述正確的是()A.過(guò)程①用雌激素處理以獲得更多卵母細(xì)胞B.過(guò)程②在雌鼠a的輸卵管內(nèi)完成受精C.過(guò)程③需將表達(dá)載體通過(guò)顯微注射到子宮中D.過(guò)程④前需對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定24.疣粒野生稻對(duì)白葉枯病有較高抗性,但與栽培稻雜交后代高度不育,限制了野生稻的抗病基因向栽培稻轉(zhuǎn)移。為解決該問(wèn)題,科研人員通過(guò)施加大劑量的X射線(隨機(jī)破壞染色體結(jié)構(gòu),使細(xì)胞不再分裂)和碘乙酰胺(使細(xì)胞質(zhì)中的某些酶失活,細(xì)胞不再分裂)等措施獲得抗病品系,該過(guò)程如圖所示。下列敘述正確的是()A.疣粒野生稻和栽培稻間不存在生殖隔離B.過(guò)程①應(yīng)通過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選得到原生質(zhì)體CC.過(guò)程②發(fā)生脫分化,過(guò)程③中可能發(fā)生基因重組D.此方法得到的再生植株不一定具有抗病性25.科研人員將目的基因J與質(zhì)粒構(gòu)建重組表達(dá)載體,該質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如圖所示,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.除圖中標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外,質(zhì)粒還需具備的結(jié)構(gòu)有復(fù)制起點(diǎn)、標(biāo)記基因、限制酶切位點(diǎn)等B.與圖中啟動(dòng)子結(jié)合的酶是RNA聚合酶C.用PCR檢測(cè)J基因連接到質(zhì)粒中且方向正確可選用的一對(duì)引物是F1和R2D.若J基因轉(zhuǎn)錄的鏈位于b鏈,可知引物F1與基因J的b鏈相應(yīng)部分序列相同二、非選擇題(本大題共3小題,共50分)26.(16分)研究人員欲將嗜鹽微生物中的某種抗鹽基因?qū)雴巫尤~水稻,從而培育抗鹽水稻新品種,回答下列問(wèn)題。(1)獲取抗鹽基因。若抗鹽基因的序列已知,為獲得大量該基因,可將其連接到上,通過(guò)大腸桿菌培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增;也可通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增過(guò)程中兩種特異性引物會(huì)與靠近模板鏈端的堿基序列配對(duì)結(jié)合,為減少反應(yīng)中因引物和模板不完全配對(duì)而產(chǎn)生的非特異條帶數(shù)量,下列哪一項(xiàng)措施最有效?(A.增加模板數(shù)量B.延長(zhǎng)熱變性時(shí)間C.延長(zhǎng)延伸時(shí)間D.提高復(fù)性溫度)。若抗鹽基因的序列未知,可將該種嗜鹽微生物的全部DNA提取、切割后與載體連接,再導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存,該群體稱為,然后從中篩選得到所需抗鹽基因。

(2)制備原生質(zhì)體。植物細(xì)胞壁對(duì)外源基因的導(dǎo)入造成一定阻礙,因此可采用酶去除而得到原生質(zhì)體。在制備葉片原生質(zhì)體的酶混合液中,一般含較高濃度的甘露醇,可使細(xì)胞處于微弱的狀態(tài),從而有利于完整原生質(zhì)體的釋放,制得的原生質(zhì)體呈形。

(3)將抗鹽基因?qū)朐|(zhì)體?？赏ㄟ^(guò)方法,直接將抗鹽基因?qū)朐|(zhì)體的細(xì)胞核也可將抗鹽基因通過(guò)載體導(dǎo)入處于的農(nóng)桿菌,再進(jìn)一步完成轉(zhuǎn)化。農(nóng)桿菌主要侵染雙子葉植物,雙子葉植物受傷時(shí),其傷口處產(chǎn)生的酚類化合物會(huì)吸引農(nóng)桿菌并激活Ti質(zhì)粒相關(guān)基因的表達(dá),因此采用的方法可提高轉(zhuǎn)化效率。導(dǎo)入后的原生質(zhì)體經(jīng)培養(yǎng)重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁,則在繼續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程中需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行的調(diào)整是,以利于細(xì)胞的繼續(xù)分裂。

(4)檢測(cè)篩選轉(zhuǎn)基因植株?？衫脦в袠?biāo)記的抗鹽基因片段作為,與從轉(zhuǎn)基因植株提取的DNA進(jìn)行雜交,雜交前需通過(guò)處理使提取的DNA;也可通過(guò)含有的培養(yǎng)基,根據(jù)生長(zhǎng)狀況初步篩選出抗鹽植株。

(5)抗鹽性狀的優(yōu)化。研究人員基于已有的研究成果推測(cè),將上述抗鹽蛋白中的第38位氨基酸甲改變?yōu)榘被嵋铱赡軙?huì)顯著提高其作用效果,他們因此通過(guò)新的氨基酸序列合成了新的基因序列,并最終獲得了效果更優(yōu)的抗鹽蛋白,該過(guò)程是通過(guò)工程來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

27.(14分)為獲得純合的轉(zhuǎn)K基因植株,某同學(xué)設(shè)計(jì)了一個(gè)實(shí)驗(yàn)流程,其主要內(nèi)容如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1)天然的目的基因不滿足生產(chǎn)需求,研究人員設(shè)想通過(guò)易錯(cuò)PCR技術(shù)引入隨機(jī)突變,再進(jìn)行定向篩選,獲得滿足需求的K基因。易錯(cuò)PCR與普通PCR相似,每次循環(huán)也包括變性、退火、三步,但可以通過(guò)改變PCR反應(yīng)條件來(lái)提高堿基錯(cuò)配的概率。研究發(fā)現(xiàn)Mg2+可以提高已發(fā)生錯(cuò)配區(qū)域的穩(wěn)定性,Mn2+可以降低DNA聚合酶對(duì)底物的專一性,因此與普通PCR相比,易錯(cuò)PCR反應(yīng)體系中應(yīng)適當(dāng)。

A.提高M(jìn)g2+和Mn2+濃度B.降低Mg2+和Mn2+濃度C.提高M(jìn)g2+降低Mn2+濃度D.降低Mg2+和提高M(jìn)n2+濃度(2)農(nóng)桿菌廣泛分布在土壤中,若從土壤中分離農(nóng)桿菌,應(yīng)取(填“表層”或“深層”)土壤。圖中A感染愈傷組織的過(guò)程中,K基因隨整合到植物細(xì)胞染色體上。(3)組織培養(yǎng)過(guò)程中無(wú)菌操作是非常重要的?；ǚ墼谂囵B(yǎng)前需進(jìn)行消毒處理,不同物種、不同外植體對(duì)消毒試劑的反應(yīng)不同,所以應(yīng)恰當(dāng)選擇消毒試劑的、和處理時(shí)間。培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)放置3~5d后使用,目的是使培養(yǎng)器皿內(nèi)的揮發(fā),并觀察培養(yǎng)基的以保證外植體接種在無(wú)菌的培養(yǎng)基上。

(4)B過(guò)程將愈傷組織浸入高壓滅菌的溶液中處理,再用清洗后,接種于分化培養(yǎng)基上,再生植株。

(5)獲得二倍體植株后,若需檢測(cè)K基因是否存在于植株的不同組織細(xì)胞中,某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定,在鑒定時(shí)應(yīng)以不同組織細(xì)胞中的(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。若要進(jìn)一步檢測(cè)K基因是否正確表達(dá),應(yīng)檢測(cè)此植株中K基因的,如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,再在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的是否得到改變。

28.(20分)紫杉醇是珍貴的抗癌藥物,但目前資源短缺,紫杉醇產(chǎn)量低,為了獲得更多的紫杉醇,許多科學(xué)家進(jìn)行了多方面的嘗試與研究。(1)快速培育紅豆杉植株:選取合適的外植體作為起始材料,為提高組培成功率,常選擇幼嫩莖段,原因是。接種前還需對(duì)其進(jìn)行處理。愈傷組織經(jīng)過(guò)程形成組培苗,組培苗移栽至特殊基質(zhì)并檢驗(yàn)后作為生產(chǎn)用苗。移栽時(shí),用洗掉根部殘留的培養(yǎng)基,防止瓊脂發(fā)霉引起爛根。

(2)紅豆杉細(xì)胞懸浮培養(yǎng):對(duì)紅豆杉的愈傷組織進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)獲得的細(xì)胞,通過(guò)繼代培養(yǎng),獲得能產(chǎn)生紫杉醇的。但紫杉醇本身是一種細(xì)胞生長(zhǎng)的毒性物質(zhì),在培養(yǎng)基中的積累量越多,對(duì)細(xì)胞增殖的抑制越強(qiáng)。為了減弱其抑制作用,可采取的措施有哪幾項(xiàng)?。

A.定時(shí)更換培養(yǎng)基B.及時(shí)提取紫杉醇C.采用莖尖來(lái)培養(yǎng)以獲得脫毒苗D.篩選耐紫杉醇的細(xì)胞培養(yǎng)物(3)研究發(fā)現(xiàn)表達(dá)來(lái)自原核細(xì)胞的MET1基因的紅豆杉的紫杉醇的含量顯著提高。圖1、2表示為構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)所需的關(guān)鍵條件。圖1圖2實(shí)驗(yàn)思路如下。①設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增MET1基因序列:為使擴(kuò)增出的序列中編碼起始密碼子(GUG)的序列由原核生物偏好的GTG轉(zhuǎn)變?yōu)檎婧松锲玫腁TG,且能通過(guò)雙酶切確保目的基因以正確方向插入質(zhì)粒,需設(shè)計(jì)引物1和2。其中引物1的5'端序列應(yīng)如何設(shè)計(jì)?、。

②構(gòu)建重組DNA分子并導(dǎo)入受體細(xì)胞:將上述PCR產(chǎn)物和質(zhì)粒重組,導(dǎo)入農(nóng)桿菌后與紅豆杉細(xì)胞共培養(yǎng)以實(shí)現(xiàn)。重組Ti質(zhì)粒上有,所以能在農(nóng)桿菌中擴(kuò)增。培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)需在培養(yǎng)基中添加進(jìn)行篩選。

③MET1基因的檢測(cè)與表達(dá)分析:可提取并分離受體細(xì)胞的,利用RT-PCR技術(shù)(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))檢測(cè),該過(guò)程需要用到的酶是。若要分離MET1基因的表達(dá)產(chǎn)物可用法,其原理是蛋白質(zhì)分子的電荷、大小及形狀不同,在電場(chǎng)中的移動(dòng)速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。

答案：1.B2.D原生質(zhì)體在輕微高滲溶液中比在等滲溶液中更為穩(wěn)定,清洗培養(yǎng)基密度大于原生質(zhì)體密度,A項(xiàng)錯(cuò)誤;圖示①過(guò)程調(diào)節(jié)滲透壓用的是滲透壓穩(wěn)定劑,B項(xiàng)錯(cuò)誤;葉片經(jīng)消毒后需用無(wú)菌水沖洗,C項(xiàng)錯(cuò)誤;原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是再生細(xì)胞壁,即原生質(zhì)體活性正常,D項(xiàng)正確。3.C生物武器不同于常規(guī)武器,其致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣,有些具有傳染性,且危害難以控制,對(duì)于未知的生物武器難以防范,A項(xiàng)正確;歷史上生物武器曾對(duì)人類造成了嚴(yán)重的威脅與傷害,為防止生物武器的危害,要發(fā)展生物安全前瞻科技、儲(chǔ)備生物防御技術(shù),以保證人民的生命安全,B項(xiàng)正確;隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)發(fā)展,生物技術(shù)也在發(fā)展,且可能會(huì)被別有用心的人用于研制生物武器,因此生物武器造成的威脅不會(huì)降低,C項(xiàng)錯(cuò)誤;中國(guó)在《禁止生物武器公約》中重申在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器,且我國(guó)對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散持反對(duì)態(tài)度,D項(xiàng)正確。4.D根據(jù)生物戰(zhàn)劑的形態(tài)和病理可將生物戰(zhàn)劑分為細(xì)菌類生物戰(zhàn)劑、病毒類生物戰(zhàn)劑、立克次體類生物戰(zhàn)劑、衣原體類生物戰(zhàn)劑、毒素類生物戰(zhàn)劑、真菌類生物戰(zhàn)劑,A項(xiàng)錯(cuò)誤;目前轉(zhuǎn)基因生物的安全性是存在爭(zhēng)論的,主要是食物安全和環(huán)境安全,另外還有生物安全問(wèn)題,B項(xiàng)錯(cuò)誤;試管嬰兒技術(shù)已經(jīng)成熟,可對(duì)植入前胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷,判斷其是否含有遺傳病基因或者異常染色體,但是不能進(jìn)行定向基因改造,C項(xiàng)錯(cuò)誤;生殖性克隆的目的是產(chǎn)生人類個(gè)體,任何情況下都是禁止的,治療性克隆的目的是產(chǎn)生特定細(xì)胞、組織和器官用于治療疾病,D項(xiàng)正確。5.D體外受精之前,需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理,使其具有受精的能力,A項(xiàng)正確;用促性腺激素對(duì)供體母牛進(jìn)行超數(shù)排卵處理,以獲得足夠數(shù)量的卵細(xì)胞,B項(xiàng)正確;為提高胚胎的利用率,可以采用胚胎分割技術(shù),C項(xiàng)正確;代孕母體是有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體,不需要是優(yōu)良經(jīng)濟(jì)動(dòng)物,D項(xiàng)錯(cuò)誤。6.A分離過(guò)程中使用以棉酚為唯一碳源的培養(yǎng)基,只有能分解棉酚的微生物能生長(zhǎng),該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中除了碳源以外,基本成分還有氮源、水和無(wú)機(jī)鹽,因此不是以棉酚為唯一的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),A項(xiàng)錯(cuò)誤;獲得純凈的培養(yǎng)物關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵,因此實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則,B項(xiàng)正確;純化微生物的方法有稀釋涂布平板法或平板劃線法,且稀釋涂布平板法還可以對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù),C項(xiàng)正確;棉酚分解菌可分解棉酚的直接原因是具有相應(yīng)的酶存在,根本原因是細(xì)胞內(nèi)存在含有能分解棉酚相應(yīng)酶的基因,能夠指導(dǎo)該酶的合成,D項(xiàng)正確。7.B上述過(guò)程并未得到完整個(gè)體或各種細(xì)胞,故不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,其原理是細(xì)胞增殖,A項(xiàng)錯(cuò)誤;上述過(guò)程主要采用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),培養(yǎng)需要無(wú)毒、無(wú)菌和合適配比的營(yíng)養(yǎng)和氣體條件,B項(xiàng)正確;培養(yǎng)的材料應(yīng)取分化程度較低的細(xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤;“細(xì)胞培養(yǎng)肉”制造過(guò)程中,肌肉細(xì)胞的培養(yǎng)需要借助合適的支架體系來(lái)防止細(xì)胞的接觸抑制,成本較高,D項(xiàng)錯(cuò)誤。8.C提取DNA主要就是將DNA和蛋白質(zhì)分開(kāi),蛋白酶可分解蛋白質(zhì),利用蛋白酶可對(duì)濾液中的DNA進(jìn)行純化,A項(xiàng)正確;酵母或菜花的細(xì)胞中都含有DNA,可以作為替代香蕉果肉的材料,B項(xiàng)正確;DNA不溶解于酒精,在上清液中加入體積相等的、預(yù)冷的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%),靜置2~3min,溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA,不需要快速研磨,C項(xiàng)錯(cuò)誤;設(shè)置只加二苯胺試劑的空白對(duì)照組,目的是與實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行顏色對(duì)照,以鑒定提取出的物質(zhì)是DNA,D項(xiàng)正確。9.D若抗生素對(duì)細(xì)菌有抑制效果,則存在抗生素的部位不會(huì)生長(zhǎng)細(xì)菌菌落,故根據(jù)是否有抑菌圈可判斷抗生素對(duì)細(xì)菌是否有抑制效果,A項(xiàng)正確;抑菌圈直徑與菌落直徑比值的大小可判斷抗生素對(duì)細(xì)菌抑制效果強(qiáng)弱,一般而言比值越大,抑菌效果越好,B項(xiàng)正確;由于抑菌圈邊緣的菌落直接與青霉素接觸,耐藥性強(qiáng),所以連續(xù)培養(yǎng)時(shí)應(yīng)從抑菌圈邊緣的菌落挑取細(xì)菌,從而獲取目的菌,C項(xiàng)正確;抗生素能夠殺死細(xì)菌,抑菌圈邊緣抗生素濃度較低,故抑菌圈邊緣菌落中的細(xì)菌可能產(chǎn)生了耐藥性,但有可能也存在能利用耐藥菌產(chǎn)物的其他菌,D項(xiàng)錯(cuò)誤。10.D過(guò)程①為mRNA逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA的過(guò)程,需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化,A項(xiàng)正確;過(guò)程②序列已知,可利用PCR技術(shù)篩選并擴(kuò)增出目的基因,B項(xiàng)正確;過(guò)程③中轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌一般需要Ti質(zhì)粒(農(nóng)桿菌質(zhì)粒)作為表達(dá)載體,C項(xiàng)正確;過(guò)程④收獲轉(zhuǎn)化的種子,直接在土壤中培養(yǎng)也可以長(zhǎng)成植株,不需要經(jīng)植物組織培養(yǎng),D項(xiàng)錯(cuò)誤。11.C果酒發(fā)酵時(shí),裝置內(nèi)會(huì)產(chǎn)生二氧化碳,應(yīng)每日迅速擰松瓶蓋放氣,避免空氣中的雜菌進(jìn)入,A項(xiàng)錯(cuò)誤;果酒發(fā)酵時(shí),發(fā)酵液中的葡萄糖不斷被消耗,因此用本尼迪特試劑檢測(cè)葡萄汁中還原糖含量變化,紅黃色沉淀逐日減少,B項(xiàng)錯(cuò)誤;以酒精為底物進(jìn)行醋酸發(fā)酵,酒精與氧氣發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生醋酸和水,幾乎沒(méi)有氣泡產(chǎn)生,發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時(shí),C項(xiàng)正確;重鉻酸鉀用于檢測(cè)酒精,不能用于測(cè)定醋酸含量,D項(xiàng)錯(cuò)誤。12.A進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),有的細(xì)胞表現(xiàn)為貼壁生長(zhǎng),該類細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,如體外培養(yǎng)的白細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制現(xiàn)象,A項(xiàng)正確;滅活的病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有方法,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí),采用的仙臺(tái)病毒需進(jìn)行滅活處理,B項(xiàng)錯(cuò)誤;骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合后,經(jīng)誘導(dǎo)融合的細(xì)胞未必是雜交瘤細(xì)胞,因?yàn)橛械募?xì)胞沒(méi)有融合,也有的細(xì)胞是同種類型的融合,因此需要經(jīng)過(guò)篩選才能獲得雜交瘤細(xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤;通過(guò)核移植和體外受精所獲得的胚胎需要移植給經(jīng)過(guò)同期發(fā)情處理的受體,這樣能保證胚胎的存活,且只需要受體具有良好的孕育能力即可,D項(xiàng)錯(cuò)誤。13.A基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程中,愈傷組織發(fā)育形成新個(gè)體屬于有絲分裂,因此誘變處理愈傷組織不會(huì)進(jìn)行基因重組,A項(xiàng)錯(cuò)誤;人工種子具有很多優(yōu)點(diǎn),如解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)籽困難、發(fā)芽率低等問(wèn)題,B項(xiàng)正確;植物莖尖的分生區(qū)附近病毒極少,甚至無(wú)病毒,利用植物根尖、莖尖作外植體進(jìn)行培養(yǎng)可以降低病毒的感染,但不能抵抗病毒,C項(xiàng)正確;植物組織培養(yǎng)技術(shù)還可以用來(lái)生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素等,D項(xiàng)正確。14.C圖示為植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程,雜種細(xì)胞為異源四倍體,即發(fā)生了染色體數(shù)目的變異,A項(xiàng)正確;過(guò)程①②均應(yīng)置于較高滲透壓溶液中,這樣可以避免原生質(zhì)體吸水漲破,B項(xiàng)正確;經(jīng)過(guò)程②③獲得的未必都是雜種細(xì)胞,因?yàn)橹豢紤]兩兩融合,則融合的細(xì)胞會(huì)有三種情況,即白菜和甘藍(lán)的原生質(zhì)體自融的情況和互融獲得的雜種細(xì)胞,因而還需要篩選才能獲得所需的雜種細(xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤;過(guò)程④⑤為植物組織培養(yǎng)技術(shù)的脫分化和再分化過(guò)程,該過(guò)程中通常需要適宜的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的配比來(lái)獲得不同的細(xì)胞團(tuán),如當(dāng)培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素比例適當(dāng)時(shí)會(huì)誘導(dǎo)愈傷組織的產(chǎn)生,D項(xiàng)正確。15.B細(xì)菌分泌的脲酶能將尿素水解為NH3和CO2,吸收后可作為自身含氮物質(zhì)合成的原料,說(shuō)明這類細(xì)菌利用的直接氮源是NH3,A項(xiàng)錯(cuò)誤;分泌脲酶的細(xì)菌屬于分解者,消費(fèi)者和分解者都是次級(jí)生產(chǎn)者,B項(xiàng)正確;配制尿素固體培養(yǎng)基后需要滅菌處理,配制尿素固體培養(yǎng)基時(shí)可以用蒸餾水,C項(xiàng)錯(cuò)誤;使用固體培養(yǎng)基的原因是固體培養(yǎng)基上細(xì)菌分裂產(chǎn)生的子代個(gè)體不易分散,從而形成菌落,故不能利用液體培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,D項(xiàng)錯(cuò)誤。16.A蛋白質(zhì)的溶解度較低,所以使用高濃度蛋白質(zhì)的目的之一是使培養(yǎng)基呈現(xiàn)不透明的狀態(tài),A項(xiàng)正確;為使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加可信,應(yīng)增設(shè)浸過(guò)無(wú)菌水的圓紙片進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn),B項(xiàng)錯(cuò)誤;菌株b提取液周圍沒(méi)有形成明顯透明圈的原因可能是不能合成蛋白酶,也可能是合成的蛋白酶不能分泌到細(xì)胞外,C項(xiàng)錯(cuò)誤;枯草芽孢桿菌能分泌蛋白酶,不需要研磨枯草芽孢桿菌,D項(xiàng)錯(cuò)誤。17.D由圖可知,枯草芽孢桿菌的蛋白酶在60~70℃相對(duì)活性較大,而其他酶的活性較小,兩者的酶活性差值較大,有利于將蛋白酶與其他酶的活性相區(qū)分,D項(xiàng)符合題意。18.B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所處的氣體環(huán)境一般是95%的空氣+5%的CO2,95%空氣中的氧氣可以滿足細(xì)胞需氧呼吸的需要,5%的CO2可以維持培養(yǎng)液的pH,A項(xiàng)錯(cuò)誤;動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對(duì)容易,而體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)全能性十分困難,故動(dòng)物體細(xì)胞核移植的成功率明顯低于胚胎細(xì)胞核移植,B項(xiàng)正確;“克隆羊”“試管羊”在培育過(guò)程中,都用到了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù),但只有“克隆羊”應(yīng)用了核移植技術(shù),C項(xiàng)錯(cuò)誤;克隆高產(chǎn)奶牛時(shí),重組胚胎(重構(gòu)胚)需要用物理或化學(xué)的方法激活,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程,然后將其移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性受體體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育,不是胚胎移植后再激活,D項(xiàng)錯(cuò)誤。19.A以無(wú)機(jī)氮源(NH4)2SO4為唯一氮源的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,可用于篩選硝化細(xì)菌,A項(xiàng)正確;對(duì)于維生素等熱穩(wěn)定性不強(qiáng)的成分,不能高壓蒸汽滅菌,B項(xiàng)錯(cuò)誤;脲酶將尿素分解成氨,氨呈堿性,使培養(yǎng)基的pH上升,加入酚紅指示劑后變紅,C項(xiàng)錯(cuò)誤;若本實(shí)驗(yàn)需要計(jì)數(shù),只能采用稀釋涂布平板法,D項(xiàng)錯(cuò)誤。20.C解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)是一種線粒體內(nèi)膜蛋白,具有消除線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的H+濃度差、減少ATP合成、增加耗氧量、增加產(chǎn)熱的功能,故UCP1可能主要影響需氧呼吸的第三階段ATP的生成量;寒冷刺激可能會(huì)提高恒溫動(dòng)物UCP1的活性或表達(dá)量,使機(jī)體產(chǎn)熱增加,A、B兩項(xiàng)正確;根據(jù)題干信息“UCP1基因在豬的白色脂肪組織中特異性表達(dá),獲得了脂肪沉積少的‘瘦肉豬’”,脂肪組織細(xì)胞中UCP1基因表達(dá)效率低的豬,瘦肉產(chǎn)率低,C項(xiàng)錯(cuò)誤;甲狀腺激素進(jìn)入靶細(xì)胞后,可通過(guò)調(diào)節(jié)UCP1基因的表達(dá)來(lái)促進(jìn)線粒體活動(dòng)使產(chǎn)熱增加,故甲狀腺激素可能具有提高UCP1基因表達(dá)的作用,D項(xiàng)正確。21.D應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)育種的主要原理是基因重組,使得小鼠的UCP1基因在豬的體細(xì)胞中正常表達(dá),A項(xiàng)正確;過(guò)程b進(jìn)行有限稀釋培養(yǎng),保證加到每個(gè)培養(yǎng)孔內(nèi)的細(xì)胞數(shù)不超過(guò)1個(gè),該操作的目的是獲得陽(yáng)性單克隆細(xì)胞系,B項(xiàng)正確;卵母細(xì)胞含有激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì),還可為細(xì)胞的早期分裂提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),故過(guò)程d的受體細(xì)胞最好是去核的豬卵母細(xì)胞,C項(xiàng)正確;過(guò)程e要對(duì)代孕豬進(jìn)行同期發(fā)情處理,使之處于相同生理狀態(tài),并選擇發(fā)育正常的桑葚胚或囊胚植入代孕豬的子宮中,D項(xiàng)錯(cuò)誤。22.A多數(shù)醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃,高于酵母菌的發(fā)酵溫度,A項(xiàng)錯(cuò)誤;PCR的緩沖液中一般存在Mg2+,其可“激活”耐高溫DNA聚合酶,B項(xiàng)正確;電脈沖等方法可以激活重構(gòu)胚,使其正常發(fā)育,C項(xiàng)正確;B淋巴細(xì)胞接受抗原刺激可進(jìn)行增殖分化,才可用于單克隆抗體的制備,D項(xiàng)正確。23.D為獲取更多的卵母細(xì)胞,要對(duì)供體母羊注射促性腺激素,目的是促進(jìn)其超數(shù)排卵,A項(xiàng)錯(cuò)誤;過(guò)程②是體外受精,體外受精是將獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子置于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液中共同培養(yǎng)一段時(shí)間,來(lái)促使它們完成受精,B項(xiàng)錯(cuò)誤;過(guò)程③需將表達(dá)載體通過(guò)顯微注射到羊的受精卵中,C項(xiàng)錯(cuò)誤;為了在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得htPA,過(guò)程④前需對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定,選擇雌性胚胎移植,D項(xiàng)正確。24.D疣粒野生稻和栽培稻雜交后代高度不育,說(shuō)明疣粒野生稻和栽培稻間存在生殖隔離,A項(xiàng)錯(cuò)誤;疣粒野生稻施加大劑量的X射線后不分裂,栽培稻施加碘乙酰胺后不分裂,因此單獨(dú)的或者相同融合的細(xì)胞不能生長(zhǎng)繁殖,則一般培養(yǎng)基就能得到原生質(zhì)體C,B項(xiàng)錯(cuò)誤;過(guò)程③發(fā)生有絲分裂,而基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程中,C項(xiàng)錯(cuò)誤;疣粒野生稻用X射線處理,依據(jù)的原理是基因突變,由于突變具有不定向性,因此此方法得到的再生植株不一定具有抗病性,D項(xiàng)正確。25.D圖中有啟動(dòng)子和終止子等,因此質(zhì)粒還需具備的結(jié)構(gòu)有限制酶切割位點(diǎn)、標(biāo)記基因、復(fù)制起點(diǎn)等,A項(xiàng)正確;啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,B項(xiàng)正確;引物F2與R1或F1與R2結(jié)合部位包含J基因的堿基序列,因此推測(cè)為了確定J基因連接到質(zhì)粒中且插入方向正確,進(jìn)行PCR檢測(cè)時(shí),若僅用一對(duì)引物,應(yīng)選擇引物F2和R1或F1與R2,C項(xiàng)正確;b是模板鏈,而根據(jù)圖上啟動(dòng)子和終止子的位置可知,轉(zhuǎn)錄方向是圖上從左向右,對(duì)應(yīng)的模板鏈方向應(yīng)該是3'-5',非模板鏈(也就是a鏈)是5'-3',考慮到DNA復(fù)制的方向是子鏈的5'-3',引物基礎(chǔ)上延伸的方向肯定是5'-3',所以引物結(jié)合的單鏈其方向是3'-5',圖中F1是前引物,在左側(cè),所以其配對(duì)的單鏈?zhǔn)?'-5'的b鏈,故其序列應(yīng)該與a鏈相應(yīng)部分的序列相同,D項(xiàng)錯(cuò)誤。26.答案(除標(biāo)注外,每空1分)(1)質(zhì)粒3'D(2分)基因組文庫(kù)(2)纖維素酶、果膠質(zhì)壁分離圓球(3)顯微注射感受態(tài)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化降低培養(yǎng)基中甘露醇的濃度(4)探針解旋成單鏈/變性較高濃度鹽(5)蛋白質(zhì)解析(1)獲取到抗鹽基因后可通過(guò)PCR技術(shù)使其擴(kuò)增,也可通過(guò)將目的基因與質(zhì)粒連接,再導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi),利用大腸桿菌快速增殖的特點(diǎn)實(shí)現(xiàn)目的基因擴(kuò)增。DNA聚合酶能在引物的3'端開(kāi)始延伸,結(jié)合子鏈延伸方向?yàn)?'→3'端可知,擴(kuò)增過(guò)程中兩種特異性引物會(huì)與靠近模板鏈3'端的堿基序列配對(duì)結(jié)合。增加模板DNA的量可以提高反應(yīng)速度,但不能有效減少非特異性條帶,A項(xiàng)不符合題意;延長(zhǎng)熱變性的時(shí)間和延長(zhǎng)延伸的時(shí)間會(huì)影響變性延伸過(guò)程,但對(duì)于延伸中的配對(duì)影響不大,故不能有效減少非特異性條帶,B、C兩項(xiàng)不符合題意;非特異性產(chǎn)物增加的原因可能是復(fù)性溫度過(guò)低造成引物與模板的結(jié)合位點(diǎn)增加,故可通過(guò)提高復(fù)性的溫度來(lái)減少非特異性條帶的產(chǎn)生,D項(xiàng)符合題意。若抗鹽基因的序列未知,可將該種嗜鹽微生物的全部DNA提取、切割后與載體連接,再導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存,該群體稱為基因組文庫(kù),然后從中篩選得到所需抗鹽基因。(2)植物細(xì)胞壁主要由纖維素和果膠組成,故可用纖維素酶和果膠酶破壞細(xì)胞壁,制備原生質(zhì)體。在制備葉片原生質(zhì)體的酶混合液中,一般含較高濃度的甘露醇,使細(xì)胞處于微弱的質(zhì)壁分離狀態(tài),一方面可以防止去壁時(shí)損傷細(xì)胞,另一方面還可以防止原生質(zhì)體吸水漲破。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法有多種,可以利用顯微注射法將目的基因?qū)朐|(zhì)體中,也可以利用感受態(tài)細(xì)胞法將目的基因與載體連接后導(dǎo)入處于感受態(tài)的農(nóng)桿菌細(xì)胞中。結(jié)合農(nóng)桿菌侵染植物的特點(diǎn)可知,農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可提高轉(zhuǎn)化效率。將轉(zhuǎn)化后的原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng),重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁,此時(shí),應(yīng)該降低培養(yǎng)基中甘露醇濃度,以利于植物細(xì)胞繼續(xù)分裂、分化形成再生植株。(4)用分子雜交技術(shù)鑒定目的基因是否成功導(dǎo)入時(shí)需要利用帶有標(biāo)記的抗鹽基因片段作為探針,提取的待測(cè)DNA需要處理使之變性成單鏈,再與探針結(jié)合,觀察是否有雜交帶產(chǎn)生。還可以從個(gè)體水平檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá),大致思路為通過(guò)含有較高濃度鹽的培養(yǎng)基,根據(jù)生長(zhǎng)狀況初步篩選出抗鹽植株。(5)根據(jù)蛋白質(zhì)功能分析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),例如將上述抗鹽蛋白中的第38位氨基酸甲改變?yōu)榘被嵋铱赡軙?huì)顯著提高其作用效果,再根據(jù)氨基酸序列推測(cè)DNA序列,最終獲得改造的蛋白質(zhì),該過(guò)程需要通過(guò)蛋白質(zhì)工程實(shí)現(xiàn)。27.答案(除標(biāo)注外,每空1分)(1)延伸A(2分)(2)表層