DB1507∕T 105-2024 敖魯古雅馴鹿人工授精技術(shù)操作規(guī)程

ICS65.020.30CCSB401507DB1507/T105—20242024-06-27發(fā)布2024-07-27實施IDB1507/T105—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由呼倫貝爾市農(nóng)牧局提出并歸口。本文件起草單位：呼倫貝爾市農(nóng)牧科學(xué)研究所、呼倫貝爾市產(chǎn)品質(zhì)量計量檢測所、黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)、新右旗農(nóng)牧業(yè)事業(yè)發(fā)展中心、額爾古納市三河回族鄉(xiāng)綜合保障和技術(shù)推廣中心、呼倫貝爾市農(nóng)牧局、呼倫貝爾市農(nóng)牧業(yè)綜合行政執(zhí)法支隊、呼倫貝爾市動物疫病預(yù)防控制中心、呼倫貝爾市農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全中心。本文件主要起草人：韓薩茹拉、王景順、羅保華、韓歡勝、斯木吉德、多樂、崔雪、鄭帥、吉亞、德擎音、白宏琦、張瀟丹、于喆、姜楠、呼倫、張小英、秀春、王嫚、楊薩日娜、烏云斯琴、格根塔那、蘇蘭、王巍、羅洋、云彥平、于維新。1DB1507/T105—2024敖魯古雅馴鹿人工授精技術(shù)操作規(guī)程1范圍本文件規(guī)定了敖魯古雅馴鹿人工授精的電刺激采精、精液處理、同期發(fā)情、人工輸精和記錄。本文件適用于敖魯古雅馴鹿人工繁育。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T2828.11計數(shù)抽樣檢驗程序第11部分：小總體聲稱質(zhì)量水平的評定程序3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1同期發(fā)情synchronousestrus利用某些激素制劑人為地控制并調(diào)整母馴鹿在預(yù)定時間內(nèi)集中發(fā)情。3.2一種內(nèi)含孕酮的特制放置器放入其母馴鹿陰道內(nèi)的同期發(fā)情裝置。3.3用人工方法適時將公馴鹿精液輸入發(fā)情母馴鹿子宮體內(nèi)達(dá)到受孕，以替代自然交配的一種繁殖方法。4電刺激采精4.1公馴鹿保定將采精公馴鹿用麻醉藥物麻醉，使鹿體呈側(cè)臥姿勢。4.2公馴鹿處置排除宿糞，剪掉包皮口周圍的長毛，用清水和生理鹽水先后沖洗包皮腔，滅菌紗布擦干包皮內(nèi)部及龜頭，將陰莖導(dǎo)出，用紗布固定，對準(zhǔn)集精杯。4.3采精探棒用水沾濕緩慢插入直腸，深度23cm～25cm，探棒電極一側(cè)緊貼直腸腹面，電壓調(diào)至零位，打開電源開關(guān)，電壓由低向高逐檔升高（電壓1V～6V，頻率50Hz),每檔通、斷交替刺激5～10次，每次2DB1507/T105—2024通電5s，間斷2s～3s，電壓升至射精檔位時，在該檔繼續(xù)交替刺激直至射精完畢，也可再升一檔進(jìn)行刺激，使其充分射精，精液用集精杯接取。5精液處理5.1鮮精品質(zhì)檢查5.1.1采精量采用電刺激法一次采精1ml～2ml。5.1.2色澤、氣味正常精液為乳白色或乳黃色，微腥。淺黑色、綠色、帶血或被尿液污染的精液不能使用。5.1.3鮮精活力鮮精在38℃溫度下，鏡檢精子活力應(yīng)≥0.7。5.2精液冷凍5.2.1稀釋液配方5.2.2稀釋液配制方法稱取Tirs、檸檬酸、葡萄糖放入三角燒杯中充分溶解，蒸氣滅菌30min，冷卻后取出待用。使用前加入20%的卵黃、青霉素10萬IU，鏈霉素10萬IU，充分?jǐn)嚢杈鶆蛑萌?℃~5℃的冰箱中待用，放置時間不應(yīng)超過24h。5.2.3稀釋倍數(shù)依據(jù)鮮精的活力和密度確定稀釋倍數(shù)，使解凍后每個細(xì)管凍精含有效精子數(shù)1000萬～1500萬。5.2.4冷凍細(xì)管準(zhǔn)備規(guī)格為0.25ml細(xì)管。細(xì)管上應(yīng)印有冷凍精液生產(chǎn)單位代號、品種代號、凍精生產(chǎn)日期、公馴鹿號。5.2.5冷凍細(xì)管分裝精液稀釋10min后分裝、封口。5.2.6平衡將分裝好的細(xì)管精液用2層毛巾或4層紗布包好，放入4℃冰箱中平衡3h～4h。5.2.7細(xì)管精液冷凍將平衡后的細(xì)管精液均勻鋪于冷凍架上，使冷凍架與液氮面保持2cm～2.5cm的高度，冷凍溫度控5.3細(xì)管凍精檢測與保存3DB1507/T105—20245.3.1檢測每批細(xì)管凍精應(yīng)抽樣檢測，按照GB/T2828.11的規(guī)定執(zhí)行。從液氮罐中迅速取出細(xì)管凍精，時間不超過5s，投入38℃溫水中解凍10s，取出后用吸紙或紗布擦去水珠。解凍3min～5min精子完全復(fù)蘇時鏡檢，鏡檢溫度38℃,活力≥0.3視為合格。5.3.2保存細(xì)管凍精貯存的液氮罐應(yīng)定期檢查液氮面的高度，保證細(xì)管凍精始終浸在液氮中。6同期發(fā)情6.1母馴鹿的選擇及管理選擇30月齡以上、母性強、性情溫順、生殖系統(tǒng)及乳腺發(fā)育良好、發(fā)情表現(xiàn)明顯的母馴鹿。自制圍欄對母馴鹿進(jìn)行集中飼養(yǎng)管理。6.2藥品和用具6.2.1藥品鹿用孕酮陰道栓、孕馬血清促性腺激素、生理鹽水。6.2.2用具置栓器。清洗擦干后用75%的酒精或高壓滅菌的方式消毒。6.3埋栓清洗消毒母馴鹿外陰部，將孕酮陰道栓裝入置栓器，經(jīng)母馴鹿陰門沿生殖道背部插入陰道前端，推動置栓器手柄將孕酮陰道栓置入陰道內(nèi)，孕酮陰道栓的拉線留在母馴鹿的陰門外，緩慢抽出置栓器，完成置栓處理。6.4注射孕馬血清促性腺激素置栓9d～11d拉動露在陰門外的孕酮陰道栓拉線緩慢取出，同時按照產(chǎn)品說明肌注孕馬血清促性腺激素。孕馬血清促性腺激素使用記錄見附錄A。7人工輸精7.1發(fā)情鑒定采用試情法鑒定。將試情公馴鹿放入母馴鹿群中，接受公馴鹿爬跨視為發(fā)情。發(fā)情后12h～16h輸精。7.2輸精準(zhǔn)備將輸精母馴鹿保定，清洗消毒陰門。7.3輸精器械準(zhǔn)備輸精槍和開膣器在使用前用75%的酒精消毒，生理鹽水擦拭。4DB1507/T105—20247.4細(xì)管凍精的解凍7.5細(xì)管凍精活力檢查細(xì)管凍精解凍，38℃鏡檢，精子活力≥0.3方可輸精。7.6輸精方法開膣器輸精。將細(xì)管凍精裝入輸精槍，將輸精槍自陰門向斜上方插入5cm～10cm，避開尿道口，再改為平插或斜下插，雙手配合調(diào)節(jié)輸精槍方向，使輸精槍緩慢到達(dá)子宮頸口進(jìn)入子宮體內(nèi)，緩慢注入精液并拉出輸精槍。5DB15