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文檔簡介

工業(yè)菌種(二)工業(yè)生產(chǎn)常用的微生物及要求工業(yè)菌種的選育工業(yè)菌種的保藏、衰退與復(fù)壯生產(chǎn)菌種的改良種子的擴(kuò)大培養(yǎng)優(yōu)良菌種選育

選種:從自然界或生產(chǎn)中選擇符合生產(chǎn)要求的菌種。

菌種選育

育種:用人工方法引起菌種變異,再篩選出符合生產(chǎn)要求的菌種。(一)菌種選育方法1.自然選育:生產(chǎn)中根據(jù)菌種自發(fā)突變的特點(diǎn)進(jìn)行菌種篩選的過程。優(yōu)良菌種選育方法:1.通過表現(xiàn)形態(tài)來淘汰不良菌株2.通過目的代謝物產(chǎn)量考察3.進(jìn)行遺傳基因型純度試驗(yàn)4.傳代的穩(wěn)定性試驗(yàn)

常采用單菌落分離法。

優(yōu)良菌種選育2.誘變育種:用各種物理、化學(xué)的因素人工誘發(fā)基因突變進(jìn)行的篩選,稱為誘變育種。誘變劑:能夠提高生物體突變頻率的物質(zhì)稱為誘變劑

常用誘變劑

{

物理:紫外,快中子化學(xué):硫酸二乙酯,亞硝基胍優(yōu)良菌種選育誘變?cè)恚?/p>

點(diǎn)突變:堿基對(duì)置換和移碼。染色體畸變:在染色體上發(fā)生大的變化如斷裂、重復(fù)、缺失、易位和染色體數(shù)目變化等結(jié)構(gòu)變化。突變優(yōu)良菌種選育優(yōu)良菌種選育誘變育種工作程序優(yōu)良菌種選育3.體內(nèi)基因重組育種:指重組過程發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)。即采用轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合和原生質(zhì)體融合等遺傳學(xué)方法和技術(shù),使微生物細(xì)胞內(nèi)發(fā)生基因重組(染色體或基因的重新組合),改變遺傳物質(zhì)的成分、數(shù)量和結(jié)構(gòu),從而獲得優(yōu)良菌株的一種育種方法。優(yōu)良菌種選育4.DNA體外重組技術(shù)(基因工程技術(shù)):根據(jù)需要用人工方法取得供體DNA上的基因,在體外重組于載體DNA上,再轉(zhuǎn)移入受體細(xì)胞使其復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯,表達(dá)出供體原有的遺傳性狀。菌種保藏目的保證菌種不發(fā)生遺傳變異、無污染和保持活力。核心人工創(chuàng)造條件(如低溫、干燥、缺氧、和缺乏營養(yǎng)物質(zhì)),使菌種的代謝活動(dòng)處于不活動(dòng)狀態(tài)。方法斜面低溫保藏法、石蠟油封保藏法、砂土保藏法、冷凍干燥法、液氮超低溫凍結(jié)法菌種保藏酵母菌:一般采用定期移植斜面低溫保藏法,將酵母接種于麥芽汁瓊脂斜面上,放置低溫處,每隔幾個(gè)月移植一次。也可采用石蠟油封藏法。

霉菌:采用砂土管保藏法。此法特別適宜于產(chǎn)孢子或芽孢的微生物。細(xì)菌和放線菌:

一般細(xì)菌采用凍干法為佳,放線菌可采用凍干法和砂土管法保藏。菌種退化及其防治菌種退化:指在較長時(shí)期傳代保藏后,菌株的一個(gè)或多個(gè)生理性狀和形態(tài)特征逐漸減退或消失的現(xiàn)象。1.菌種退化的原因:保藏方法不妥、保藏操作不當(dāng)、傳代不當(dāng)、培養(yǎng)基不適、回復(fù)突變?;貜?fù)突變:凡是變異菌因遺傳組成的自身修復(fù),原有的遺傳障礙解除,導(dǎo)致代謝途徑再變化,恢復(fù)原有特性,表現(xiàn)出已獲得的優(yōu)良性狀退化。菌種退化及其防治2.防止菌種退化的措施:從菌種選育方法上考慮(1)進(jìn)行充分的后培養(yǎng)及分離純化;(2)增加突變位點(diǎn),減少基因回復(fù)突變的幾率。從菌種保藏方式上考慮(1)盡量減少傳代次數(shù)(2)選擇適宜的保藏培養(yǎng)基菌種退化及其防治2.防止菌種退化的措施:從菌種培養(yǎng)適宜條件上考慮(1)結(jié)構(gòu)類似物抗性菌株在保藏培養(yǎng)基中應(yīng)添加相應(yīng)藥物及時(shí)淘汰回復(fù)突變細(xì)胞。(2)基因工程菌添加抗生素于培養(yǎng)

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