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文檔簡介
2025年內(nèi)蒙古巴彥淖爾一中高三下學(xué)期七校聯(lián)合交流生物試題注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2.答題時(shí)請按要求用筆。3.請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試卷上答題無效。4.作圖可先使用鉛筆畫出,確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5.保持卡面清潔,不要折暴、不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.限制性核酸內(nèi)切酶均能特異性識別特定的核苷酸序列B.某些基因可通過病毒的侵染將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中C.載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因D.抗蟲基因即使成功插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)2.下列有關(guān)遺傳咨詢與優(yōu)生的敘述中錯(cuò)誤的是()A.遺傳咨詢的目的是防止有缺陷胎兒的出生B.遺傳咨詢中只要通過系譜分析得知遺傳方式和發(fā)病率即可提出防治措施C.產(chǎn)前診斷常用方法是羊膜腔穿刺和絨毛細(xì)胞檢查D.畸形胎的產(chǎn)生不僅與遺傳有關(guān),同時(shí)還受到多種因素的影響3.如圖是一對青年夫婦關(guān)于苯丙酮尿癥(致病基因?yàn)閍)和色盲(致病基因?yàn)閎)的遺傳分析圖譜,甲~庚表示不同的細(xì)胞,已細(xì)胞發(fā)育形成的個(gè)體患兩種病。下列分析正確的是A.在正常細(xì)胞分裂過程中,乙和戊的基因組成分別是AXB和aYB.該對夫婦若再生一個(gè)孩子,只患一種病的概率為3/8C.圖示過程中不會出現(xiàn)DNA和染色體同時(shí)加倍的情況D.正常情況下,庚形成的個(gè)體患兩種病的概率為1/164.S型肺炎雙球菌具有多糖類莢膜,R型肺炎雙球菌則不具有,在含有R型活細(xì)菌的培養(yǎng)基中添加某些物質(zhì)后進(jìn)行培養(yǎng),下列相應(yīng)的培養(yǎng)結(jié)果,表述錯(cuò)誤的是()組別添加物具有莢膜的細(xì)菌AS型細(xì)菌的多糖類物質(zhì)有BS型細(xì)菌DNA有CS型細(xì)菌DNA的完全水解產(chǎn)物無DS型細(xì)菌的蛋白質(zhì)無A.A B.B C.C D.D5.某興趣小組探究乙醇的濃度和鐵離子對纖維素酶活性的影響時(shí)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),結(jié)果如圖所示,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.該實(shí)驗(yàn)的因變量是酶活性,溫度是無關(guān)變量之一B.鐵離子可降低纖維素酶催化纖維素水解時(shí)的活化能C.鐵離子的增加促進(jìn)了乙醇對纖維素酶活性的影響D.改變實(shí)驗(yàn)所使用的底物種類,可以驗(yàn)證該酶的專一性6.在SARS病毒引起的肺炎病人體內(nèi),可能會出現(xiàn)細(xì)胞因子風(fēng)暴,即在機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答消滅病毒的同時(shí),免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子會活化更多免疫細(xì)胞,活化后的免疫細(xì)胞又會產(chǎn)生更多細(xì)胞因子,形成一個(gè)正反饋,最終導(dǎo)致機(jī)體免疫反應(yīng)過度,免疫系統(tǒng)開始對宿主的正常細(xì)胞發(fā)動(dòng)攻擊。為抑制細(xì)胞因子風(fēng)暴,臨床上經(jīng)常會采用注射腎上腺糖皮質(zhì)激素的方法,請分析這種激素屬于()A.抗細(xì)菌藥物B.抗病毒藥物C.免疫增強(qiáng)劑D.免疫抑制劑二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)某研究小組在水分充足、晴朗無風(fēng)的夏日,觀測海水稻得到了光合速率等生理指標(biāo)日變化趨勢,如圖所示。請回答下列相關(guān)問題:(1)8:00到10:00光合速率升高的原因有:①溫度升高,光合作用酶活性增強(qiáng);②_______;③________。(2)推測導(dǎo)致12:00時(shí)光合速率出現(xiàn)低谷的環(huán)境因素主要_____(是/不是)CO2濃度,為什么?___________。(3)根據(jù)色素對不同波長的光的吸收特點(diǎn),你認(rèn)為溫室或大棚種植蔬菜時(shí),在其他條件相同的情況下,選擇_________(顏色)的補(bǔ)充光源能更有利于蔬菜對光能的吸收。8.(10分)甲狀腺和甲狀旁腺都位于頸部,雖然甲狀旁腺依附在甲狀腺上,但它們是兩種功能獨(dú)立的內(nèi)分泌腺,有完全不同的生理作用。甲狀旁腺可以分泌一種參與體液中無機(jī)鹽調(diào)節(jié)的激素——甲狀旁腺素(PTH)。具體調(diào)節(jié)過程如圖甲。圖乙為青蛙變態(tài)發(fā)育過程中甲狀腺激素含量變化曲線。(1)PTH除了可以通過腎臟重吸收、骨骼溶解直接提升血鈣之外,還可以通過活化某一種脂質(zhì)__________(填寫一種物質(zhì))間接提升血鈣含量,由此可見PTH的靶器官A是__________。(2)已知血鈣升高時(shí),甲狀旁腺分泌PTH的過程就會受到抑制,從而使血鈣含量下降,這種調(diào)節(jié)方式稱為__________調(diào)節(jié),其意義在于__________。(3)如圖乙,請據(jù)圖回答:①由圖可知,當(dāng)甲狀腺激素含量為__________(填字母)時(shí)青蛙開始出現(xiàn)前肢,由此可見,甲狀腺激素具有的功能__________。②從以上信息分析,甲狀腺激素與PTH的作用關(guān)系是__________(填“協(xié)同”或“拮抗”)。請說明理由:__________。9.(10分)現(xiàn)有一未受人類干擾的自然湖泊,某研究小組考察了該湖泊中牌食物鏈最高營養(yǎng)級的某魚種群的年齡組成,結(jié)果如下表。年齡
0+
1+
2+
3+
4+
5+
6+
7+
8+
9+
10+
11+
≥12
個(gè)體數(shù)
92
187
121
70
69
62
63
72
64
55
42
39
264
注:表中“1+”表示魚的年齡大于等于1、小于2,其他以類類推。回答下列問題:(1)通常,種群的年齡結(jié)構(gòu)大致可以分為三種類型,分別。研究表明:該魚在3+時(shí)達(dá)到性成熟(進(jìn)入成年),9+時(shí)喪失繁殖能力(進(jìn)入老年)。根據(jù)表中數(shù)據(jù)可知幼年、成年和老年3個(gè)年齡組成個(gè)體數(shù)的比例為,由此可推測該魚種群數(shù)量的變化趨勢是。(2)如果要調(diào)查這一湖泊中該值的種群密度,常用的調(diào)查方法是標(biāo)志重捕法。標(biāo)志重捕法常用于調(diào)查強(qiáng)、活動(dòng)范圍廣的動(dòng)物的種群密度。(3)在該湖泊中,能量沿食物鏈流動(dòng)時(shí),所具有的兩個(gè)特點(diǎn)是。10.(10分)癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后,可抑制T細(xì)胞活性并啟動(dòng)其凋亡,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定,為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點(diǎn)見圖2:α鏈:5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈:5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1(1)首先提取細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄生成____________________作為模板;設(shè)計(jì)含有不同的限制酶切點(diǎn)的α和β序列為引物,通過____________________技術(shù)擴(kuò)增目的基因。(2)選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)粒”載體進(jìn)行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成,除了目的基因、標(biāo)記基因抗卡那霉素基因外,還必須具有____________________等。(3)而后一定溫度下,與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中,可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌,繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴(kuò)增重組DNA。(4)將擴(kuò)增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時(shí)間后,為確定PD-1基因是否表達(dá),檢測細(xì)胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學(xué)活性和功能,則可裂解293T細(xì)胞,提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結(jié)合,從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟,只將“pIRES2-EGFP載體”轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞,其目的是_________________________。11.(15分)實(shí)驗(yàn)嵌合體是了解哺乳動(dòng)物發(fā)育機(jī)制的關(guān)鍵點(diǎn),也能為不同多潛能干細(xì)胞狀態(tài)的潛能提供咨詢的來源。將猴子的皮膚干細(xì)胞注射到小鼠的囊胚里,再將囊胚移入代孕鼠體內(nèi)發(fā)育形成猴鼠嵌合體——猴鼠,可用于器官的移植研究。請回答下列問題:(1)判斷哺乳動(dòng)物的受精過程是否完成的重要標(biāo)志是______________________。(2)胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)和誘導(dǎo)等操作均需在嚴(yán)格的無菌、無毒環(huán)境條件下操作,可以采取的措施有_______________________。胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)誘導(dǎo)分化可形成大量皮膚干細(xì)胞,其原因是__________。根據(jù)胚胎干細(xì)胞的這種功能特性,當(dāng)我們身體的某一類細(xì)胞功能出現(xiàn)異常或退化時(shí),利用胚胎干細(xì)胞的治療思路是________________________。(3)將猴子的皮膚干細(xì)胞注射到小鼠囊胚的___________部位能獲取所需組織,再將囊胚移入代孕鼠體內(nèi),此技術(shù)對代孕受體的要求是___________________。在畜牧生產(chǎn)中采用這種技術(shù)的優(yōu)勢主要是________,若想進(jìn)一步提高胚胎的利用率,可采用___技術(shù)。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、C【解析】
DNA重組技術(shù)至少需要三種工具:限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)、DNA連接酶、運(yùn)載體。基因工程的基本操作步驟主要包括四步:①目的基因的獲取;②基因表達(dá)載體的構(gòu)建;③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;④目的基因的檢測與鑒定.構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),需要用同種限制酶切割含有目的基因的DNA和運(yùn)載體DNA,再用DNA連接酶連接形成重組DNA分子?!驹斀狻緼、限制性核酸內(nèi)切酶具有識別特定核苷酸序列的能力,即具有專一性,A正確;B、病毒也可以作為運(yùn)載體,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中,B正確;C、載體質(zhì)粒通常采用抗生素抗性基因作為篩選標(biāo)記基因,C錯(cuò)誤;D、抗蟲基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá),需要進(jìn)行檢測和鑒定,D正確。故選C。2、B【解析】
遺傳咨詢是咨詢醫(yī)師和咨詢者就其家庭中遺傳病的病因、遺傳方式、診斷、治療、預(yù)防、復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)等所面臨的全部問題進(jìn)行討論和商談,最后做出恰當(dāng)?shù)膶Σ吆瓦x擇,并在咨詢醫(yī)師的幫助下付諸實(shí)施,以達(dá)到防治效果的過程。遺傳咨詢的基本程序是:病情診斷→系譜分析→染色體/生化測定→遺傳方式分析、發(fā)病率測算→提出防治措施。【詳解】A、遺傳咨詢的目的是預(yù)防遺傳病的發(fā)生,防止有缺陷胎兒的出生,A正確;B、遺傳咨詢中通過系譜分析得知遺傳方式和發(fā)病率,還需要進(jìn)行染色體/生化測定等才能提出防治措施,B錯(cuò)誤;C、羊膜腔穿刺和絨毛細(xì)胞檢查是產(chǎn)前診斷的常用方法,C正確;D、表現(xiàn)型不僅受基因的控制,還與環(huán)境有關(guān),因此畸形胎的產(chǎn)生不僅與遺傳有關(guān),同時(shí)還受到多種因素的影響,D正確。故選B。3、B【解析】
苯丙酮尿癥是常染色體顯性遺傳病,色盲是伴X隱性遺傳病,右圖是女性,其基因型為AaXBXb,左圖是男性,基因型為AaXBY,甲細(xì)胞室極體,丙是卵細(xì)胞,已細(xì)胞發(fā)育形成的個(gè)體患兩種病,說明己是個(gè)男孩,基因型為aaXbY,庚是表現(xiàn)型正常的后代?!驹斀狻緼、在正常細(xì)胞分裂過程中,乙基因組成分別是AXB,戊不含有Y染色體,含有AXB,A錯(cuò)誤;B、該對夫婦的基因型為為AaXBXb、AaXBY,若再生一個(gè)孩子,只患一種病的概率為苯丙酮尿癥的患病概率為1/4,色盲的患病率為1/4,只患一種病的概率=苯丙酮尿癥率1/4×不患色盲的概率(1-1/4)+不患苯丙酮尿癥(1-1/4)×色盲概率1/4=3/8,B正確;C、圖示過程中存在受精作用,受精過程中精卵識別以及精子和卵細(xì)胞的融合過程中出現(xiàn)DNA和染色體同時(shí)加倍的情況,C錯(cuò)誤;D、正常情況下,庚形成的個(gè)體患病的概率為0,D錯(cuò)誤;故選B。4、A【解析】
R型和S型肺炎雙球菌的區(qū)別是前者沒有莢膜(菌落表現(xiàn)粗糙),后者有莢膜(菌落表現(xiàn)光滑)。由肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)可知,只有S型菌有毒,會導(dǎo)致小鼠死亡,S型菌的DNA才能使R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌?!驹斀狻緼、S型細(xì)菌的多糖類物質(zhì)不能使R型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化成S型細(xì)菌,所以培養(yǎng)R型活細(xì)菌時(shí)加入S型細(xì)菌的多糖類物質(zhì),不可能產(chǎn)生一些有莢膜的S型細(xì)菌,A錯(cuò)誤;B、S型細(xì)菌DNA能將R型活菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌,所以培養(yǎng)R型活細(xì)菌時(shí)加入S型細(xì)菌生物DNA,能產(chǎn)生有莢膜的S型細(xì)菌,B正確;C、S型細(xì)菌DNA的完全水解產(chǎn)物不攜帶遺傳信息,所以培養(yǎng)R型活細(xì)菌時(shí)加入S型細(xì)菌DNA的完全水解產(chǎn)物,不能產(chǎn)生有莢膜的細(xì)菌,C正確;D、S型細(xì)菌的蛋白質(zhì)不攜帶遺傳信息,所以培養(yǎng)R型活細(xì)菌時(shí)加入S型細(xì)菌的蛋白質(zhì),不能產(chǎn)生有莢膜的細(xì)菌,D正確。
故選A。5、C【解析】
根據(jù)柱形圖分析,實(shí)驗(yàn)的自變量是乙醇的濃度和有無鐵離子,因變量是酶活性??磮D可知:隨著乙醇濃度的增大,纖維素酶的活性逐漸降低,可見乙醇對纖維素酶的活性有抑制作用,鐵離子對纖維素酶的活性有促進(jìn)作用。據(jù)此答題?!驹斀狻緼、根據(jù)該實(shí)驗(yàn)的目的可知,該實(shí)驗(yàn)的自變量是乙醇濃度和有無鐵離子,溫度屬于無關(guān)變量,A正確;B、乙醇濃度為零時(shí),有鐵離子組酶的活性較高,說明鐵離子可使纖維素酶催化纖維素水解時(shí)的活化能降低,B正確;C、從圖中信息可知,乙醇對纖維素酶的活性有抑制作用,鐵離子的增加抑制了乙醇對纖維素酶活性的影響,C錯(cuò)誤;D、驗(yàn)證特定酶的專一性,實(shí)驗(yàn)的自變量是底物的種類,D正確。故選C。本題考查乙醇的濃度和無機(jī)鹽離子對酶活性的影響,要求考生識記分析柱形圖,得出自變量和因變量,以及實(shí)驗(yàn)結(jié)論的能力,能運(yùn)用所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng),屬于考綱識記和理解層次的考查。6、D【解析】
根據(jù)題干信息分析,細(xì)胞因子風(fēng)暴是由于SARS病毒侵入人體后引起的,人體消滅病毒的同時(shí)分泌了很多細(xì)胞因子,活化了更多的免疫細(xì)胞,進(jìn)而產(chǎn)生了更多的淋巴因子,導(dǎo)致機(jī)體免疫功能過強(qiáng)并攻擊正常的細(xì)胞。【詳解】根據(jù)以上分析已知,細(xì)胞因子風(fēng)暴是SARS病毒侵入人體后引起的免疫功能過強(qiáng)的現(xiàn)象,免疫系統(tǒng)會對宿主的正常細(xì)胞發(fā)動(dòng)攻擊,而注射腎上腺糖皮質(zhì)激素的方法能夠抑制細(xì)胞因子風(fēng)暴,即腎上腺糖皮質(zhì)激素可以降低免疫系統(tǒng)的功能,屬于免疫抑制劑。故選D。二、綜合題:本大題共4小題7、光照強(qiáng)度增大,光反應(yīng)速率加快氣孔導(dǎo)度增加,二氧化碳吸收量增加,暗反應(yīng)速率加快不是因?yàn)榇藭r(shí)氣孔導(dǎo)度大,CO2供應(yīng)充足藍(lán)紫色(或藍(lán)色)【解析】
據(jù)圖分析,從圖中光合速率的曲線可以看出,在10:00左右時(shí),光合速率相對量最大;但是在12:00時(shí)出現(xiàn)低谷,正常情況下這可能是由于氣孔關(guān)閉導(dǎo)致的,但是此時(shí)的氣孔導(dǎo)度最大,因此可排除二氧化碳的影響?!驹斀狻浚?)從圖中看出在8:00到10:00,植物氣孔導(dǎo)度增加,所以提高了二氧化碳吸收量,暗反應(yīng)速率加快;同時(shí)光照強(qiáng)度增加,光反應(yīng)速率加快;溫度升高,光合作用酶活性增強(qiáng),所以光合作用速率升高。(2)12:00時(shí)光合速率出現(xiàn)了低谷,而此時(shí)氣孔導(dǎo)度最大,二氧化碳供應(yīng)充足,說明不是二氧化碳限制了光合作用的進(jìn)行。(3)葉肉細(xì)胞中的葉綠素主要吸收紅光和藍(lán)紫光,類胡蘿卜素主要吸收藍(lán)紫光,所以補(bǔ)充藍(lán)紫色(或藍(lán)色)更有利于蔬菜對光能的吸收。解答本題的關(guān)鍵是分析題圖、獲取有效信息,能夠根據(jù)氣孔導(dǎo)度和光合速率的關(guān)系判斷12:00時(shí)影響光合速率的主要環(huán)境因素。8、維生素D小腸(負(fù))反饋使血鈣的含量維持在正常的生理范圍之內(nèi)B促進(jìn)生長發(fā)育(或促進(jìn)變態(tài)發(fā)育或促進(jìn)前肢出現(xiàn))拮抗甲狀腺激素含量高時(shí),促進(jìn)骨骼生長發(fā)育(長出上肢),而PTH高時(shí)骨骼釋放鈣,不利于骨骼的生長發(fā)育【解析】
據(jù)圖分析,甲狀腺分泌甲狀腺激素,促進(jìn)細(xì)胞代謝等生命活動(dòng);甲狀旁腺分泌的PTH能夠促進(jìn)器官A,增加對鈣的吸收;促進(jìn)腎臟對鈣的重吸收;促進(jìn)骨骼釋放鈣,進(jìn)而使得血鈣升高;當(dāng)血鈣升高后會抑制甲狀旁腺分泌PTH,表現(xiàn)為負(fù)反饋調(diào)節(jié)?!驹斀狻浚?)PTH除了可以通過腎臟重吸收、骨骼溶解直接提升血鈣之外,還可以通過活化某一種脂質(zhì)間接提升血鈣含量,而脂質(zhì)中的維生素D可以促進(jìn)小腸對鈣的吸收,從而使得血鈣含量升高,結(jié)合圖示說明PTH作用的靶器官有小腸、腎臟、骨骼。(2)根據(jù)以上分析可知,甲狀旁腺素的分泌過多時(shí),通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)使血鈣的含量維持在正常的生理范圍之內(nèi)。(3)①據(jù)圖分析,當(dāng)甲狀腺激素含量最高時(shí)即B點(diǎn)時(shí)青蛙開始出現(xiàn)前肢,說明甲狀腺激素具有促進(jìn)生長發(fā)育的功能。②甲狀腺激素含量高時(shí),促進(jìn)骨骼生長發(fā)育(長出上肢),而PTH高時(shí)骨骼釋放鈣,不利于骨骼的生長發(fā)育,因此甲狀腺激素與PTH表現(xiàn)為拮抗關(guān)系。解答本題的關(guān)鍵是能夠從題圖中獲取有效信息,弄清楚甲狀旁腺的作用機(jī)理,明確甲狀旁腺分泌的負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制。9、增長型穩(wěn)定型衰退型1:1:1穩(wěn)定活動(dòng)能力單向性逐級遞減【解析】
(1)種群的年齡組成是指種群中幼年個(gè)體、成年個(gè)體、老年個(gè)體的比例,可分為三種類型,增長型,穩(wěn)定型,衰退型。幼年(0+1+2+):400個(gè),成年(3+4+5+6+7+8+):400個(gè),老年(9+10+11+≥12):400個(gè),故幼年:成年:老年=1:1:1,故穩(wěn)定型,穩(wěn)定型在一定時(shí)期內(nèi)種群密度保持相對穩(wěn)定。(2)志重捕法常用于調(diào)查活動(dòng)性強(qiáng)、活動(dòng)范圍廣的動(dòng)物的種群密度。(3)生態(tài)系統(tǒng)能量流動(dòng)的特點(diǎn)是單向流動(dòng),逐級遞減。本題主要考查種群特征中種群的年齡組成、種群密度,涉及到生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動(dòng)知識點(diǎn)10、cDNAPCRXhoIEoRI啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA采用分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】(1)基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫(cDNA)。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因,而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因,可以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成cDNA;由于PCR技術(shù)利用的是DNA分子復(fù)制的原理,所以用該cDNA進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增短時(shí)間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。(2)分析圖1中堿基序列,α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列,β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列,與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?!陛d體進(jìn)行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構(gòu)建基因表達(dá)載體?;虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。(3)根據(jù)第(2)題可知,基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因,因此一定溫度下,與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基,可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌。(4)基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì),一段時(shí)間后,為確定PD-1基因是否表達(dá),可以檢測細(xì)胞膜表面是否具有PD-1基因表達(dá)的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學(xué)
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