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血液標(biāo)本采集的基本常識(shí)1病人的準(zhǔn)備做血液檢驗(yàn)項(xiàng)目檢驗(yàn)的病人,一般要求采血前禁食12~14小時(shí),采血的前一天避免吃高脂肪、高蛋白類(lèi)食物,避免飲酒。否則,會(huì)引起血脂及某些血清酶結(jié)果升高,甚至血清出現(xiàn)混濁,影響整個(gè)檢驗(yàn)結(jié)果;進(jìn)行葡萄糖耐量試驗(yàn)的病人,在試驗(yàn)前3天給予適量的碳水化學(xué)物飲食,有利于取得正確的結(jié)果;做碘131吸收試驗(yàn)者,在試驗(yàn)前一個(gè)月停服一切含碘的藥物和含碘豐富的食物,如海產(chǎn)品類(lèi)。2采血時(shí)間血液生化檢驗(yàn)一般要求早晨空腹安靜時(shí)采血。因?yàn)轶w內(nèi)的各種化學(xué)成份受許多因素調(diào)節(jié):如飲食后大量葡萄糖及脂類(lèi)物質(zhì)吸收入血,使血糖和血脂上升,游離脂肪酸及無(wú)機(jī)磷降低;運(yùn)動(dòng)后會(huì)使乳酸、丙酮酸、乳酸脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶等升高,血糖降低;晝夜變化大的成份有皮質(zhì)醇、血清鐵、膽紅素等;日間變化大的主要是代謝廢物成份如尿素、尿酸等;大量飲水可致血液稀釋等等。所以,做血液生化檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)掌握好采血時(shí)間。但是,對(duì)重癥昏迷或急癥病例,可隨時(shí)采血送檢糖、鉀、鈉、鈣、血?dú)夥治?、淀粉酶等?xiàng)目。但在輸液時(shí)采血應(yīng)避免送檢項(xiàng)目受輸液成份的影響,如輸液中補(bǔ)鉀、補(bǔ)糖、補(bǔ)鹼時(shí)送檢,對(duì)血鉀、血糖、二氧化碳結(jié)合力等項(xiàng)目均有影響。3采血部位成人一般取肘部靜脈,肥胖者可用腕背靜脈;嬰兒常用頸部靜脈、股動(dòng)脈或前囟靜脈竇;剛出生的嬰兒可收集臍帶血;尸體解剖者取心臟血;血?dú)夥治鲆话悴蓜?dòng)脈血;檢驗(yàn)只需微量全血時(shí),成人從耳垂或指尖取血,嬰兒從大腳趾或腳跟取血;輸液病人采血應(yīng)避免在輸液的同一側(cè)上肢或下肢采血,燒傷患者采血應(yīng)避免穿剌炎癥或水腫部,以免影響結(jié)果。4采血操作及送檢的注意事項(xiàng)4.1采血器械:采血用的注射器、試管必須干燥清潔。注射器及針頭不宜用酒精消毒。目前多用一次性注射器及試管。4.2采血操作:必須按無(wú)菌操作,采血部位皮膚必須干燥,止血帶不可縛扎過(guò)久,抽血時(shí)速度不可過(guò)快,以免血細(xì)胞破裂,采血后應(yīng)卸下針頭再將血液沿管壁徐徐注入試管內(nèi)。4.3防止氣體逸散:采集血?dú)夥治鰳颖荆檠獣r(shí)注射器內(nèi)不能有空泡,抽出后立即用小橡皮密封針頭,隔絕空氣。因空氣中的氧分壓高于動(dòng)脈血,二氧化碳分壓低于動(dòng)脈血;作二氧化碳結(jié)力測(cè)定時(shí),盛血標(biāo)本的容器亦應(yīng)加塞蓋緊,避免血液與空氣接觸過(guò)久,影響檢驗(yàn)結(jié)果。4.4防止分解及自身變化:采血后應(yīng)盡快送檢。因血液中有些化學(xué)成份于離體后極易分解,使其含量改變,如血糖及酶類(lèi)測(cè)定,時(shí)間過(guò)久,血細(xì)胞酵解可使血糖下降,酶活力變化等。有些化學(xué)成份在細(xì)胞內(nèi)外相差懸株,離體時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)胞內(nèi)外濃度會(huì)發(fā)生變化,影響測(cè)定結(jié)果。如肌酸激酶、乳酸脫氫酶、電解質(zhì)等。4.5防止污染:有些檢查項(xiàng)目要求極嚴(yán)格,其采血器具及標(biāo)本容器必須經(jīng)過(guò)化學(xué)清潔。如血氨、銅、鋅、鐵等項(xiàng)目,因其含量極低,稍有污染即影響結(jié)果。作淀粉酶測(cè)定時(shí),要防止唾液污染,因唾液中含有大量的淀粉酶,污染后會(huì)引起假性淀粉酶升高。4.6防止溶血:作各類(lèi)生化檢驗(yàn),要防止血細(xì)胞破裂溶血,因溶血引起細(xì)胞內(nèi)外濃度改變,可使鉀、膽紅素、氯化物、無(wú)機(jī)磷、ALT、AST、LDH等升高,鈉、鈣、AKP等降低,溶血對(duì)某些實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)過(guò)程干擾:如血紅蛋白可直接抑制脂肪酶的活性,使脂肪酶降低。溶血可影響呈色反應(yīng)終點(diǎn)為紅色的實(shí)驗(yàn),如酶法測(cè)定血糖、膽固醇、甘油三酯、膽紅素的重氮反應(yīng)、尿素的二乙酰肟法等。5抗凝劑的選擇生化檢驗(yàn)大部份項(xiàng)目都采用血清,但有些項(xiàng)目需用血漿或全血,采集的血液必須加入抗凝劑??鼓齽┑姆N類(lèi)較多,如選擇不當(dāng),亦會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。下面介紹幾種生化檢驗(yàn)常用的抗凝劑及其用途:5.1草酸鉀:常用于尿素、肌酐、纖維蛋白原等測(cè)定,不能用鉀、鈣等測(cè)定,對(duì)LDH、丙酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑制作用。5.2肝素:常用于電解質(zhì)、血?dú)夥治?、血氨等測(cè)定。其鈉鹽可使淀粉酶升高。5.3氟化鈉:常用氟化鈉—草酸鈉混合抗凝劑作血糖測(cè)定的抗凝劑,它可抑制血細(xì)胞葡萄糖酵解酶的作用,延長(zhǎng)標(biāo)本的保存時(shí)間。5.4二乙胺四乙酸鈉鹽(EDTA-Na2):生化常用的抗凝劑,但不能用于鈣、鈉、及含氮物質(zhì)的測(cè)定,對(duì)淀粉酶、肌酸激酶、AKP、ACP、5’正確的血液收集方法采集步驟:查看檢驗(yàn)單,詢問(wèn)病史,查對(duì)檢驗(yàn)單上病人姓名、性別、年齡等項(xiàng)目與病人是否吻合,耐心檢查需要空腹血檢驗(yàn)項(xiàng)目要詢問(wèn)病人是否8小時(shí)以內(nèi)沒(méi)有能量攝入,詢問(wèn)病人在檢驗(yàn)前是否有足夠的休息;需要增添項(xiàng)目時(shí)先與出具檢驗(yàn)申請(qǐng)單的醫(yī)生聯(lián)系。請(qǐng)患者準(zhǔn)備。(“請(qǐng)將左手衣袖挽起,手伸直平放,拳頭握緊?!保?duì)孩子應(yīng)多哄勸,避免劇烈躁動(dòng)、哭鬧。對(duì)于緊張或有暈血史的病人要進(jìn)行安慰(“您可以側(cè)過(guò)身去,不看很快會(huì)好”)。采血器材準(zhǔn)備,選擇相應(yīng)的真空采血管;并記錄采集時(shí)間。選擇穿刺血管:扎好壓脈帶,觀察血管走向,選擇穿刺點(diǎn),松開(kāi)壓脈帶(壓脈帶壓迫時(shí)間不能超過(guò)1分鐘),正在輸液的病人絕對(duì)不可同側(cè)采血,更不可以利用原有的輸液針頭采血。消毒:以穿刺點(diǎn)為圓心,用蘸有碘伏的棉簽由內(nèi)到外螺旋型涂抹,消毒范圍為直徑大約3厘米,注意消毒過(guò)的地方不能重復(fù)涂抹,在涂抹的過(guò)程中棉簽必須也要同時(shí)旋轉(zhuǎn)。采樣及混勻:等待碘伏干了以后(必須等到干了以后,否則達(dá)不到消毒效果),再次扎好壓脈帶,將針頭平面朝上與手臂成15°穿刺,最好一針見(jiàn)血。拔出采血管后立即進(jìn)行顛倒8次混勻。在抽血時(shí)要詢問(wèn)病人感受(如有無(wú)心慌,頭暈等情況),當(dāng)出現(xiàn)異常時(shí)如:?病人出汗、面色蒼白、暈倒時(shí)立即拔出針并急救?操作失敗,取得病人諒解,再次進(jìn)行操作(“對(duì)不起,由于……的原因需要再取一次血,請(qǐng)?jiān)彙保?。采樣盡量在1分鐘內(nèi)完成。止血:采血結(jié)束后,解開(kāi)壓脈帶,退針后請(qǐng)病人“手指壓住棉球,手伸直抬高于心臟,保持兩分鐘”(如果是有出血傾向患者如紫癜,ITP,血液病等要壓迫5~10分鐘直到無(wú)血滲出)。標(biāo)本前處理:將采血管與相應(yīng)的檢驗(yàn)單裹好,分類(lèi),盡快送檢驗(yàn)項(xiàng)目所對(duì)應(yīng)的采血管:1.生化檢驗(yàn)黃頭管2.凝血試驗(yàn)藍(lán)頭管3.血常規(guī)紫頭管采血順序:紅頭管→藍(lán)頭管→紫頭管→黃頭管,注:除紅頭管外,其他各種采血管均須顛倒混勻8次。以下檢驗(yàn)項(xiàng)目須特別注意1.所有生化項(xiàng)目、微量元素、血沉必須用空腹血;乙肝三對(duì)最好用空腹血。2.糖耐量試驗(yàn):(方法一)空腹抽血→吃飯(3分鐘內(nèi)進(jìn)食75克葡萄糖或二兩饅頭一個(gè))→飯后30分鐘抽血→飯后60分鐘抽血→飯后120分鐘抽血(方法二)空腹抽血→吃飯(3分鐘內(nèi)進(jìn)食50克葡萄糖)→飯后60分鐘抽血注:血糖正常的人吃葡萄糖,高血糖的人吃饅頭.3.激素檢查:病人必須空腹且在抽血前要靜坐30分鐘,激素全套要抽血5ml。臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的采集和處理(2)實(shí)驗(yàn)于8h內(nèi)不能完成時(shí),血清或血漿應(yīng)置2oC~8oC保存;(3)48h內(nèi)不能完成的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,或分離的血清或血漿需貯存48h以上時(shí),應(yīng)于-20oC保存;(4)標(biāo)本不可反復(fù)凍融(只能凍融一次),且不可貯存于無(wú)霜冰箱(可造成樣品溫度變化);(5)離心后分離凝膠(凝膠屏障)上面的血清可保存2~5天,但必須保證凝膠的完整性;但應(yīng)用非凝膠分離物質(zhì)時(shí),離心后必須立即將血清或血漿移出。(6)血清或血漿必須保存于密閉的試管中。四、血清或血漿分離物質(zhì)是指將血清或血漿從全血中分離出來(lái)的物質(zhì),包括凝膠物質(zhì)與非凝膠物質(zhì)。(一)凝膠物質(zhì)為一類(lèi)具有特定粘度和特殊比重(介于血清或血漿與凝塊之間的比重)的惰性凝膠物質(zhì),用(1000~1100)×gRCF離心10min,能在血清或血漿與凝塊之間形成不可穿透的凝膠屏障,從而將血清或血漿與其接觸的血細(xì)胞、凝塊分開(kāi)。(二)非凝膠物質(zhì)是由惰性物質(zhì)(玻璃、塑料、纖維、毛氈等)構(gòu)成的小珠、盤(pán)、濾器、纖維塞等組成。具有介于血清或血漿與凝塊之間的比重,將其輕輕加入血管中,用(1000~1100)×gRCF離心10min時(shí),可透過(guò)血液移動(dòng)至血清或血漿與血細(xì)胞、凝塊之間,形成一個(gè)界面,使血清或血漿被分離出來(lái)。(三)完整的凝膠管系統(tǒng)該系統(tǒng)是由一個(gè)真空采血管(硅化塑料管)、內(nèi)含惰性凝膠物質(zhì)、促凝劑或抗凝劑組成。使用時(shí)要注意該產(chǎn)品必須具有相應(yīng)性能證書(shū)和有效期,并且必須在其有效期內(nèi)正確使用。隨著檢驗(yàn)方法日益完善,高精檔次的自動(dòng)化儀器的大量應(yīng)用,以及檢驗(yàn)的科學(xué)管理和檢驗(yàn)工作人員技術(shù)水平不斷提高,明顯降低檢測(cè)過(guò)程中的影響因素和干擾,而分析檢測(cè)前的各類(lèi)影響或干擾因素相對(duì)增多。現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)對(duì)檢測(cè)標(biāo)本的留取與收集提出較高的要求,而廣大就診患者也必需了解留取標(biāo)本的基本知識(shí),遵照囑托,配合檢驗(yàn)人員,以使檢驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確準(zhǔn)確可靠。門(mén)診檢驗(yàn)常見(jiàn)的標(biāo)本一般包括血液(指血,靜脈血)、尿、糞便、腦脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等,這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。標(biāo)本采集注意事項(xiàng)一、血液標(biāo)本盡量避免生理因素的影響,有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng)、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。采集血液標(biāo)本的條件應(yīng)盡量一致為宜,如無(wú)法避免,應(yīng)說(shuō)明在標(biāo)本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無(wú)凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對(duì)燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(cè)(如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類(lèi)等)受生理因素影響波動(dòng)過(guò)大,比較時(shí)宜便條件盡量一致。出、凝血功能的檢測(cè)項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測(cè),不宜服用抗凝、促凝藥物,以免影響測(cè)定結(jié)果。2.靜脈血除涉及各種止血和血栓檢測(cè)等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測(cè)項(xiàng)目的分析檢測(cè)可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測(cè)項(xiàng)目中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜,有些在血中衰變較快(血清酶活性測(cè)定如ACP活性等),0~4℃二、尿液標(biāo)本同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的第一次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,管形)相對(duì)集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病變。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù),即Addis(前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日8時(shí)的所有尿液),因時(shí)間較長(zhǎng),細(xì)菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。24小時(shí)尿(第一天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,包括蛋白,糖,Ca2十等,檢測(cè)不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),要求無(wú)菌,沖洗外明后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,最少12m1,最好50ml,定時(shí)尿須全部收集,對(duì)女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。三、糞便標(biāo)本糞便標(biāo)本的檢測(cè)對(duì)判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值。采集時(shí)要求用干凈的件簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對(duì)外觀無(wú)異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲(chóng)蟲(chóng)體及作蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲(chóng)蟲(chóng)卵時(shí)應(yīng)取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲(chóng)卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門(mén)周?chē)櫶幪幨萌〔⒘⒓寸R檢。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法),試驗(yàn)前3日禁食肉類(lèi)及含動(dòng)物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞。四、腦脊液標(biāo)本腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,放置過(guò)久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類(lèi)不被:有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少:細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無(wú)菌管,第一管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,全部送檢和檢測(cè)過(guò)程應(yīng)注意安全。五、胸腹水標(biāo)本與腦脊液標(biāo)本一樣,采集

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