檢驗(yàn)科血清同型半胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號：JYK-3-SH-040版本/修訂號：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：20110701第1頁共5頁編寫制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01同型半胱氨酸測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗(yàn)申請單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請：同型半胱氨酸測定(縮寫:Hcy);組合項(xiàng)目申請：。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請。2標(biāo)本采集與處理2.1標(biāo)本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗(yàn)申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.3急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請單上填寫標(biāo)本采集時間。2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請單一起及時運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2標(biāo)本保存 2.2.1接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.2標(biāo)本保存時間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定4天，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定數(shù)周。-20℃可保存數(shù)月；應(yīng)避免標(biāo)本反復(fù)凍溶。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置4～8℃冰箱內(nèi)保存7天。2.3標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.2不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素，不可用EDTA抗凝。2.3.3采血前請盡量避免高蛋白飲食，高蛋白飲食可能導(dǎo)致同型半胱氨酸升高。2.3.4使用下列藥物治療的病人,會引起同型半胱氨酸水平偏高:氨甲蝶呤、卡馬西平、苯妥英、一氧化二氮、6-氮尿嘧啶苷等。3方法原理本品是基于小分子捕獲技術(shù)（SMT）的S-腺苷同型半胱氨酸的方法。同型半胱氨酸被轉(zhuǎn)化為游離型后，通過與共價底物反應(yīng)，循環(huán)放大，同時產(chǎn)生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黃嘌呤，氨在谷氨酸脫氫酶的作用下，使NADH轉(zhuǎn)化為NAD+，樣本中的同型半胱氨酸的濃度與NADH的變化成正比。4試劑及其他用品4.1試劑：同型半胱氨酸（循環(huán)酶法）測定試劑盒，由四川邁克生物科技股份有限公司出品。4.2試劑盒保存：未啟封試劑盒在2～8℃保存，可儲存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉冰箱內(nèi)穩(wěn)定7天。開蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或空白吸光率>2.0時，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.3試劑盒準(zhǔn)備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.4試劑盒主要成分：R1:S-腺苷甲硫氨酸（SAM）0.1mmol/lNADH0.2mmol/l三（2羧乙基）磷氯化氫（TCEP）0.5mmol/lα-酮戊二酸5.0mmol/lHcy甲基轉(zhuǎn)移酶（HMTase）5.0KU/L谷氨酸脫氫酶（GLDH）10.0KU/LR2:S-腺苷同型半胱氨酶水解酶3.0KU/L腺苷脫氨酶(ADA)5.0KU/L5校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.1校準(zhǔn)品：與試劑盒配套的校準(zhǔn)液（3個不同水平）。5.2校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：非線性模式，3個校準(zhǔn)點(diǎn)。5.3校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時間自定。但在：①更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后，進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.4校準(zhǔn)液重建方法：3個校準(zhǔn)品均為液體,即開即用。6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1質(zhì)控品采用由由四川邁克生物科技股份有限公司提供的一個定值質(zhì)控血清。6.2質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控品，用前應(yīng)充分混勻，動作應(yīng)輕柔，用完后應(yīng)立即入2-8℃保存；避免高溫及反復(fù)凍融。6.3質(zhì)控品測定：在每一天標(biāo)本中測定質(zhì)控血清各一次。6.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。6.5如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動生化分析儀器。8標(biāo)本檢測步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測項(xiàng)目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測定→結(jié)果復(fù)核→報告。9主要分析參數(shù)參見說明書。10結(jié)果計算儀器根據(jù)非線性校準(zhǔn)曲線自動給出每個標(biāo)本測定結(jié)果。11檢驗(yàn)結(jié)果的報告及范圍11.1結(jié)果的報告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。11.1.2報告單上標(biāo)明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。11.2報告范圍：3.0—50.0μmol/l，超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12操作性能12.1精密度：批內(nèi)CV<4.6％，總CV<5.9％；12.2準(zhǔn)確度：不準(zhǔn)確度小于15%。12.3空白吸光度：試劑的空白吸光度小于2.0(主波長340nm,光徑10mm).12.4線性范圍：3.0～50μmol/l。12.5方法的有限性及干擾因素：12.5.1應(yīng)避免溶血、混濁及嚴(yán)重脂血樣本；12.5.2不可用EDTA抗凝。12.5.3樣本中Hcy含量超過50μmol/l，則用蒸餾水稀釋后測定，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。13參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：5-20μmol/ml14臨床意義14.1Hcy與心血管系統(tǒng)疾病高于15μmol/l被認(rèn)為是高同型半胱氨酸血癥（HHcy）。HHcy是冠心?。–HD）的獨(dú)立危險因素，CHD患者中30%可見HHcy。HHcy患者發(fā)生心肌梗塞的危險性明顯增高；它也是先天性心臟病的一個獨(dú)立危險因素，而且冠狀動肪病變支數(shù)隨著血漿Hcy濃度增高而增加。14.2HHcy與神經(jīng)系統(tǒng)疾病HHcy是腦卒中的一個獨(dú)立危險因素,隨著Hcy濃度的增高,腦中風(fēng)危險度增加1.87倍。14.3HHcy與糖尿病、腎病的關(guān)系研究表明，Ⅱ型糖尿病患者血Hcy濃度高于正常對照，且與空腹血糖和糖尿病病程顯著相關(guān)；慢性腎病病人因排泄Hcy功能障礙，血中HHcy增加造成動脈粥樣硬化和心血管疾病死亡率增加。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2認(rèn)真審核每一個測定結(jié)果，審核者對發(fā)出報告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé)，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項(xiàng)目：通常無其他相關(guān)項(xiàng)目。16無威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定17有關(guān)引用程序與文件17.1Abbott自動