DB35T 2024-2021 鰻鱺皰疹病毒感染診斷技術(shù)規(guī)范_第1頁
DB35T 2024-2021 鰻鱺皰疹病毒感染診斷技術(shù)規(guī)范_第2頁
DB35T 2024-2021 鰻鱺皰疹病毒感染診斷技術(shù)規(guī)范_第3頁
DB35T 2024-2021 鰻鱺皰疹病毒感染診斷技術(shù)規(guī)范_第4頁
DB35T 2024-2021 鰻鱺皰疹病毒感染診斷技術(shù)規(guī)范_第5頁
已閱讀5頁,還剩4頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

35DB35/T2024—2021鰻鱺皰疹病毒感染診斷技術(shù)規(guī)范ProtocolofdiagnosistechnologyforHerpesvirusanguillaeinfection2021-11-23發(fā)布2022-02-23實施福建省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I 4 本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分:標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草1GB/T6682分析實驗室用水規(guī)CTAB:十六烷基三甲基溴化銨(CetyltrdCTP:脫氧胞苷三磷酸(Deoxycytidinetriphosphate)dGTP:脫氧鳥苷三磷酸(DeoxyguaDNA:脫氧核糖核酸(DeoxyribondNTP:脫氧核糖核苷三磷酸(Deoxy-EDTA:乙二胺四乙酸(EthylenediHVA:鰻鱺皰疹病毒(Herpesvirusanguillae)PCR:聚合酶鏈式反應(yīng)(PolymerasTaq酶:DNA聚合酶(ThermusAquatiTris:三羥甲基氨基甲烷(Trishydroxym,﹣25.3dNTP:dCTP、dGTP、dATP、在鰻鱺的鰓、肝臟、脾臟、腎臟等部位及體表黏液,共取50mg~100mg樣品,置于1.5mL離心管后加入1.5倍體積的異丙醇,混勻后,靜置5min,12000g離心10min,棄上清液;加入600μL75%3乙醇,混勻后12000g離心10min,棄上清液,室溫靜置5在0.2mL離心管中加入10×PCR緩沖液(見附錄A的A.7)2.5μL、25mmol/L氯化鎂(MgCl2見附錄A的A.6)1μL、dNTP2μL、上下游引物各0.5μL、Taq酶2U、1μL待測樣品DNA為模板,補充水反應(yīng)液混勻后,離心使其集中在離心管底部,將離心管置于PCR擴增儀,按照94℃4min;再用TBE電泳緩沖液(見附錄A的A.4)配制1%的瓊脂糖[含0.5μg/mLEB(見附錄A的A平板放入水平電泳槽,使電泳緩沖液剛好淹沒膠面。取6μLPCR擴增產(chǎn)物和2μL電泳上樣緩沖液(見附錄A的A.8)混勻,加入樣品孔,5V/cm電泳約30min,當(dāng)溴酚藍4按2%CTAB,1.4mmol/LNaCl,20mmol/LEDTA,20mmol/LTris-HClpH7.5配制。使A.4.2制法將固體物質(zhì)溶解于蒸餾水,將總體積調(diào)整至1000mL,用5mol/5A.7.2制法每100mL溶液中含溴酚藍0.256CATGCCGGGAGTCTTTTTGATCACGTCCTCCACTATAAGGATCTTTTGTCGCCCCGAGAGCGTGGTCAACATCTCCGATACGCCGTAGTGCGAGTTGGCGCAGATCTTCATCTCGTTCTGCAGCTGGTTGAAGTATTTTTTCAGTCCGGCTTCATGTCGCCCTTGTATTTGTTTCGCATGCTCAGGTAGTGGCGGAGGCTGGAAGACGTGTACGTCGTAAACCTGCCACACTCTTGTGTAGGAGGATGGTG

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論