2025屆高考生物一輪復(fù)習(xí)第2講微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用學(xué)案新人教版選修1

PAGE20-第2講微生物的培育和應(yīng)用考情研讀·備考定位考點(diǎn)展示核心素養(yǎng)1．進(jìn)行微生物的分別和培育。2．測定某種微生物的數(shù)量。3．探討培育基對微生物的選擇作用。4．探討微生物的利用。5．活動：用大腸桿菌為材料進(jìn)行平板培育，分別菌落。6．活動：分別土壤中分解尿素的細(xì)菌，并進(jìn)行計(jì)數(shù)。1．理性思維——分析培育基的成分及其作用；比較平板劃線法和稀釋涂布平板法的異同。2．科學(xué)探究——設(shè)計(jì)試驗(yàn)探究微生物培育的條件。3．社會責(zé)任——關(guān)注有害微生物的限制和宣揚(yáng)健康生活方式。考點(diǎn)一微生物的試驗(yàn)室培育自主回顧·素養(yǎng)儲備基礎(chǔ)梳理1．培育基(1)概念：人們依據(jù)微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的養(yǎng)分基質(zhì)。(2)養(yǎng)分構(gòu)成：一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。此外還須要滿意微生物生長對pH、特殊養(yǎng)分物質(zhì)以及氧氣的要求。(3)種類①依據(jù)物理性質(zhì)可分為液體培育基、固體培育基、半固體培育基。②依據(jù)成分的來源可分為自然培育基和合成培育基。③依據(jù)功能用途可分為選擇培育基、鑒別培育基等。類型實(shí)例選擇培育基培育基中加入青霉素分別得到酵母菌和霉菌培育基中加入高濃度的食鹽用于分別得到金黃色葡萄球菌以尿素作為唯一氮源的培育基用于分別分解尿素的細(xì)菌石油是唯一碳源時(shí)，可以抑制不能利用石油的微生物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分別能消退石油污染的微生物的目的培育基放在高溫環(huán)境中培育只能得到耐高溫的微生物鑒別培育基伊紅美藍(lán)培育基可以鑒別大腸桿菌(菌落呈黑色)(4)培育基的制備步驟：計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板。2．無菌技術(shù)(1)目的：獲得純凈的培育物。(2)關(guān)鍵：防止外來雜菌的入侵。(3)常用方法：滅菌和消毒，二者的比較見下表。項(xiàng)目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用舉例消毒較為溫柔的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高溫的液體，如牛奶化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源滅菌劇烈的理化因素殺死物體內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌法接種工具干熱滅菌法玻璃器皿、金屬用具高壓蒸汽滅菌法培育基及容器3．大腸桿菌的純化培育(1)原理：在培育基上將聚集的菌種稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落。(2)兩種微生物純化培育的方法比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法平板示意圖純化原理通過連續(xù)劃線操作實(shí)現(xiàn)將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋和涂布平板操作實(shí)現(xiàn)留意事項(xiàng)每次劃線前后均需灼燒接種環(huán)稀釋度要足夠高菌體獲得在具有顯著的菌落特征的區(qū)域菌落中挑取菌體從相宜稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體優(yōu)點(diǎn)可以依據(jù)菌落的菌落特征獲得某種微生物的單細(xì)胞菌落既可以獲得單細(xì)胞菌落，又能對微生物計(jì)數(shù)缺點(diǎn)不能對微生物計(jì)數(shù)操作困難，須要涂布多個(gè)平板(3)菌種的保藏方法①臨時(shí)保藏法：對于頻繁運(yùn)用的菌種，先將菌種接種到試管的固體斜面培育基上培育，然后將試管放入4℃②甘油管藏法：對于須要長期保存的菌種，先將菌液轉(zhuǎn)入滅菌后的甘油中，充分混勻后放在－20℃[易錯(cuò)警示](1)灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。(2)劃線時(shí)最終一區(qū)的劃線不要與第一區(qū)相連。(3)劃線時(shí)用力大小要適當(dāng)，這是為了防止用力過大將培育基劃破。(4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上視察到的只是一個(gè)菌落。思維辨析易錯(cuò)整合，推斷正誤。(1)培育基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽，有時(shí)還須要加入一些特殊的物質(zhì)(√)(2)倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培育基濺到皿蓋上(×)(3)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又削減消毒劑對細(xì)胞的損害(√)(4)用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)，只要稀釋度足夠高，就能在培育基表面形成單個(gè)菌落(√)延長探究1．選擇無菌技術(shù)的原則是什么？[提示](1)考慮無菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對象的承受實(shí)力：活體生物材料、操作者的手等只能采納消毒，而不能滅菌。2．在微生物的分別與培育的過程中，為了防止雜菌的污染，須要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作，接種環(huán)和接種針及培育基的無菌操作技術(shù)相同嗎？接種針或接種環(huán)操作時(shí)經(jīng)滅菌后就可以挑取菌落嗎？[提示]不相同，接種環(huán)和接種針須要灼燒滅菌，培育基須要高壓蒸汽滅菌。不行以，接種針或接種環(huán)操作時(shí)經(jīng)灼燒滅菌后須要在培育基上接觸冷卻后才能挑取菌落。3．某同學(xué)在利用稀釋涂布平板法純化土壤中的大腸桿菌時(shí)，發(fā)覺培育基上的菌落連成一片，最可能的緣由是什么？為了防止雜菌污染，有同學(xué)建議加入抗生素，你覺得可以嗎？并說明理由。[提示]菌液濃度過高(土壤溶液稀釋不夠)。不行以，因?yàn)榭股夭坏珰珉s菌，而且也可以殺滅大腸桿菌，因此在培育基上不行以加入抗生素。剖析難點(diǎn)·考點(diǎn)突破重難精講1．培育基的配制原則(1)目的要明確：配制時(shí)應(yīng)依據(jù)微生物的種類、培育目的等確定配制的培育基種類。(2)養(yǎng)分要協(xié)調(diào)：留意各種養(yǎng)分物質(zhì)的濃度和比例。(3)pH要相宜：細(xì)菌為6.5～7.5，放線菌為7.5～8.5，真菌為5.0～6.0，培育不同微生物所需的pH不同。2．培育基的種類與應(yīng)用分類依據(jù)種類特點(diǎn)應(yīng)用物理性質(zhì)液體培育基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培育基加凝固劑(少)視察微生物的運(yùn)動、微生物的分別、鑒定固體培育基加凝固劑(多)微生物的分別、鑒定，活菌計(jì)數(shù)、保藏化學(xué)成分自然培育基含化學(xué)成分不明的自然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培育基培育基成分明確或用肯定化學(xué)物質(zhì)配制分類、鑒定用途選擇培育基添加某物質(zhì)，抑制雜菌生長，促進(jìn)所需微生物生長培育分別出特定微生物鑒別培育基依據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培育基中加入某種指示劑鑒別微生物3．平板劃線操作的留意事項(xiàng)(1)灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。(2)其次次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端起先，能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而漸漸削減，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。(3)劃線時(shí)最終一區(qū)不要與第一區(qū)相連。(4)劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培育基劃破。(5)操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都須要進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的如下表：第一次操作每次劃線之前劃線結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種干脆來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目削減殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避開微生物污染環(huán)境和感染操作者精準(zhǔn)命題〔典例剖析〕例1(2024·全國卷Ⅲ)回答下列與細(xì)菌培育相關(guān)的問題。(1)在細(xì)菌培育時(shí)，培育基中能同時(shí)供應(yīng)碳源、氮源的成分是蛋白胨(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制備培育基時(shí)要依據(jù)所培育細(xì)菌的不同來調(diào)整培育基的pH，其緣由是不同細(xì)菌生長繁殖所需的最適pH不同。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培育基上能夠(填“能夠”或“不能”)生長，緣由是硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源(2)用平板培育細(xì)菌時(shí)一般須要將平板倒置(填“倒置”或“正置”)。(3)單個(gè)細(xì)菌在平板上會形成菌落，探討人員通?？梢罁?jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，緣由是在肯定的培育條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征。(4)有些運(yùn)用后的培育基在丟棄前須要經(jīng)過滅菌處理，這種處理可以殺死丟棄物中全部的微生物。[解析](1)蛋白胨中含有碳元素和氮元素，可為細(xì)菌生長供應(yīng)碳源和氮源，葡萄糖不能供應(yīng)氮源，NaNO3不能供應(yīng)碳源。不同細(xì)菌生長繁殖所須要的最適pH不同，制備培育基時(shí)要依據(jù)所培育細(xì)菌種類的不同來調(diào)整pH。硝化細(xì)菌是自養(yǎng)生物，可通過化能合成作用利用空氣中的CO2合成有機(jī)物，所以在沒有碳源的培育基上也能生長。(2)用平板培育細(xì)菌時(shí)，一般將平板倒置，防止皿蓋上的水滴滴到培育基中造成污染。(3)在肯定的培育條件下，不同微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此探討人員可依據(jù)菌落的這些特征初步區(qū)分微生物的種類。(4)消毒僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，滅菌可殺死物體內(nèi)外全部的微生物，包括芽孢和孢子。因此，運(yùn)用后的培育基在丟棄前要進(jìn)行滅菌處理，防止其中的微生物污染環(huán)境。〔對應(yīng)訓(xùn)練〕1．(2024·錫山區(qū)月考)牛奶是微生物生長的良好培育基。牛奶在飲用前都要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物。為檢測自制酸奶是否被雜菌污染，進(jìn)行如圖所示操作。請回答下列問題。(1)牛奶用巴氏消毒的好處是牛奶的養(yǎng)分成分不被破壞(養(yǎng)分成分沒有損失)。(2)圖中所用培育基在滅菌過程中，需用到高壓蒸汽滅菌鍋。下面是關(guān)于高壓蒸汽滅菌鍋運(yùn)用過程中的操作，正確的先后依次是①②③④⑤⑥⑦④⑧⑨。(有的操作可以重復(fù))①裝入待滅菌物品；②加蓋；③加熱滅菌鍋；④打開排氣閥；⑤關(guān)閉排氣閥；⑥切斷電源；⑦壓力表的壓力降到零；⑧打開蓋子；⑨取出滅菌物品(3)取最終的牛奶稀釋液0.1mL滴在培育基上進(jìn)行涂布，應(yīng)選擇的工具是下圖中B。(4)志向狀況下，稀釋涂布培育一段時(shí)間后可在培育基表面形成菌落，假如培育基上出現(xiàn)(形態(tài)、大小、顏色、光澤度)不同的菌落，說明自制酸奶已被雜菌污染。(5)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要進(jìn)一步分別純化乳酸菌采納下圖所示的劃線分別操作，正確的是B，其正確操作過程中，培育基在劃線時(shí)劃線工具至少要灼燒5次。[解析](1)常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法。巴氏消毒的方法是指70～75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，運(yùn)用這種方法對簇新牛奶進(jìn)行消毒的好處是牛奶的養(yǎng)分成分不被破壞。(2)高壓蒸汽滅菌鍋運(yùn)用過程中的操作，正確的先后依次是：①裝入待滅菌物品、②加蓋、③加熱滅菌鍋、④打開排氣閥、⑤關(guān)閉排氣閥、⑥切斷電源、⑦壓力表的壓力降到零、④打開排氣閥、⑧打開蓋子、⑨取出滅菌物品。特殊留意兩次打開氣閥，第一次是排出冷氣，其次次是排出滅菌鍋中多余的蒸汽。(3)涂布時(shí)所用的接種工具是涂布器，即圖中的B。(4)假如培育基上出現(xiàn)(形態(tài)、大小、顏色、光澤度)不同的菌落，說明自制酸奶已被雜菌污染。(5)平板上劃線的工具為接種環(huán)。A圖很難得到由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育而來的菌落，A錯(cuò)誤；B圖劃線從上次劃線末端起先，簡單得到由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育而來的菌落，B正確；C圖劃線沒有從上次劃線的末端起先，接種環(huán)上沒有菌種，不能得到由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育而來的菌落，C錯(cuò)誤；D圖劃線不是從上次劃線末端起先，不簡單得到由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育而來的菌落，D錯(cuò)誤。由于每次劃線之前和之后都要灼燒接種環(huán)，因此培育基在劃線時(shí)劃線工具至少要灼燒5次?？键c(diǎn)二微生物的篩選與計(jì)數(shù)自主回顧·素養(yǎng)儲備基礎(chǔ)梳理1．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)(1)篩選菌株的原理：人為供應(yīng)有利于目的菌株生長的條件(包括養(yǎng)分、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻擋其他微生物的生長。(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：稀釋涂布平板法和顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法。(3)試驗(yàn)流程eq\x(\a\al(土壤,取樣))→eq\x(\a\al(樣品,稀釋))→eq\x(\a\al(取樣,接種))→eq\x(\a\al(培育,視察))→eq\x(\a\al(菌種,鑒定))(4)尿素分解菌的鑒定①原理：分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，使培育基的堿性增加。②方法：在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑，培育某種細(xì)菌，若指示劑變紅，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。2．分解纖維素的微生物的分別(1)纖維素酶①組成：纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。②作用：纖維素eq\o(→,\s\up7(C1酶),\s\do5(CX酶))纖維二糖eq\o(→,\s\up7(葡萄糖苷酶))葡萄糖(2)纖維素分解菌的篩選①方法：剛果紅染色法。②原理：eq\b\lc\\rc\}(\a\vs4\al\co1(剛果紅,纖維素))→紅色復(fù)合物eq\o(→,\s\up7(纖維素酶))紅色消逝，出現(xiàn)透亮圈(3)試驗(yàn)流程eq\x(土壤取樣)—eq\x(土壤的采集要選擇富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層)↓eq\x(選擇培育)—eq\x(\a\al(用以纖維素為唯一碳源的選擇培育基培育，,以增加纖維素分解菌的數(shù)量))↓eq\x(梯度稀釋)↓eq\x(\a\al(涂布,平板))—eq\x(將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的固體培育基上)↓eq\x(選擇)—eq\x(選擇出產(chǎn)生透亮圈的菌落)思維辨析易錯(cuò)整合，推斷正誤。(1)纖維素酶只包括三種組分：C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶(×)(2)選擇培育基可以鑒定某種微生物的種類(×)(3)對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)只能采納稀釋涂布平板法，而不能用平板劃線法(×)(4)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素(√)(5)篩選分解尿素的細(xì)菌應(yīng)以尿素作為培育基中的唯一氮源(√)(6)在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍(lán)，則說明篩選到分解尿素的細(xì)菌(×)(7)剛果紅可以與纖維素形成透亮復(fù)合物，所以可以通過是否產(chǎn)生透亮圈來篩選纖維素分解菌(×)(8)剛果紅染色法只能在培育微生物的時(shí)候加入剛果紅(×)(9)在篩選能分解纖維素的細(xì)菌的試驗(yàn)中，選擇培育的目的是增大樣品中目的菌株的濃度(√)延長探究1．據(jù)某微生物培育基的配方表回答下列問題：成分纖維素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO4含量5g1g1.2g0.9g成分MgSO4·7H2OKCl酵母膏水解酪素含量0.5g0.5g0.5g0.5g將上述成分溶解后，用蒸餾水定容到1000mL(1)該培育基對微生物是否具有選擇作用？假如具有，又是如何進(jìn)行選擇的？(2)你能否設(shè)計(jì)一個(gè)比照試驗(yàn)，說明選擇培育的作用？(3)假如用該培育基來鑒別纖維素分解菌，須要加入的成分有哪些？[提示](1)具有選擇作用。纖維素為唯一碳源，只有能分解纖維素的微生物才能生長繁殖，而不能分解纖維素的微生物被抑制。(2)用接種了的完全培育基(牛肉膏蛋白胨培育基)作為比照。(3)須要加入的成分有凝固劑(瓊脂)和染色劑(剛果紅)。2．測定活菌的數(shù)量時(shí)不用平板劃線法，請說出其中的緣由。[提示]用平板劃線法接種時(shí)，一般只有最終一次劃線的末端才會形成只由一個(gè)活菌形成的菌落，而其他一些菌落往往由兩個(gè)或多個(gè)活菌繁殖而成，還有一些不能形成菌落，而在計(jì)數(shù)時(shí)一個(gè)菌落對應(yīng)著一個(gè)活菌，這樣在劃線所得的平板中，菌落數(shù)目低于活菌的實(shí)際數(shù)值，所以不能用平板劃線法測定活菌的數(shù)量。3．探討人員用含有剛果紅的培育基培育纖維素分解菌時(shí)，篩選到了幾株有透亮降解圈的菌落如圖所示。據(jù)圖回答以下問題：(1)透亮圈是如何形成的？(2)推想與圖中透亮圈大小有關(guān)因素主要是什么？降解纖維素實(shí)力最強(qiáng)的菌種是哪種？[提示](1)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。細(xì)菌分泌的纖維素酶能將培育基中的纖維素降解成纖維二糖和葡萄糖，形成透亮圈。(2)纖維素酶的產(chǎn)量和活性。菌落①對應(yīng)的菌種。剖析難點(diǎn)·考點(diǎn)突破重難精講1．兩種微生物計(jì)數(shù)方法的比較間接計(jì)數(shù)法(稀釋涂布平板法)干脆計(jì)數(shù)法(顯微計(jì)數(shù)法)原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推想出樣品中大約含有多少活菌利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算肯定容積的樣品中微生物的數(shù)量公式每克樣品中的菌落數(shù)＝eq\f(C,V)×MC：某稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)；V：涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)；M：稀釋倍數(shù)每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)：每小格內(nèi)平均細(xì)菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)缺點(diǎn)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起時(shí)，平板上視察到的只是一個(gè)菌落不能區(qū)分細(xì)胞死活結(jié)果比實(shí)際值偏小比實(shí)際值偏大2．微生物的篩選與鑒別方法(1)微生物的篩選方法單菌落挑取法利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培育基表面，干脆依據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物選擇培育法利用選擇培育基對微生物進(jìn)行選擇培育，干脆獲得目的微生物鑒定培育法利用鑒別培育基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物(2)微生物的鑒別方法菌落特征鑒別法依據(jù)微生物在固體培育基表面形成的菌落的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別指示劑鑒別法如培育基中加入酚紅指示劑，培育某種微生物后，培育基變紅說明該種微生物能夠分解尿素染色鑒別法如利用剛果紅染色法，依據(jù)培育基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透亮圈來篩選分解纖維素的微生物3．微生物的分別與計(jì)數(shù)試驗(yàn)中比照組和重復(fù)組的設(shè)置及作用(1)兩種比照組的設(shè)置及作用①推斷培育基中“是否有雜菌污染”，需將未接種的培育基同時(shí)進(jìn)行培育。②推斷選擇培育基“是否具有篩選作用”，需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培育基進(jìn)行接種后培育，視察兩種培育基上菌落數(shù)目，進(jìn)行對比得出結(jié)論。(2)重復(fù)組的設(shè)置及作用為解除偶然因素對試驗(yàn)結(jié)果的干擾，在每一稀釋度下宜設(shè)置3個(gè)平板作重復(fù)組，選擇菌落數(shù)均在30～300且數(shù)目相差不大的三個(gè)平板，用“平均值”代入計(jì)數(shù)公式予以計(jì)算菌落數(shù)。4．常用的選擇培育基與鑒別培育基類型實(shí)例選擇培養(yǎng)基培育基中加入青霉素分別得到酵母菌和霉菌培育基中加入高濃度的食鹽用于分別金黃色葡萄球菌以尿素作為唯一氮源的培育基用于分別分解尿素的細(xì)菌以纖維素作為唯一碳源的培育基用于分別纖維素分解菌不添加氮源的培育基用于分別固氮微生物石油是唯一碳源時(shí)，可以抑制不能利用石油的微生物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分別能消退石油污染的微生物的目的培育基放在高溫環(huán)境中培育能得到耐高溫的微生物鑒別培養(yǎng)基加入伊紅美藍(lán)可以鑒別大腸桿菌(菌落呈黑色)加入酚紅指示劑可以鑒別尿素分解菌加入剛果紅可以鑒別纖維素分解菌精準(zhǔn)命題〔典例剖析〕例2(2024·江蘇高考)下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分別及運(yùn)用的敘述，不合理的是(A)A．篩選培育基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖供應(yīng)生長養(yǎng)分B．可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌C．在分別平板上長出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的實(shí)力D．用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價(jià)值[解析]分別產(chǎn)纖維素酶菌時(shí)，篩選培育基中應(yīng)以纖維素作為唯一碳源，A項(xiàng)錯(cuò)誤。富含腐殖質(zhì)的林下土壤中纖維素多，故含有能分解纖維素的產(chǎn)纖維素酶菌，B項(xiàng)正確。用篩選培育基分別得到的菌落只是初步篩選，還需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的實(shí)力，C項(xiàng)正確。用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈，可將纖維素分解為小分子物質(zhì)，動物食用后易消化汲取，故可提高其飼用價(jià)值，D項(xiàng)正確。〔對應(yīng)訓(xùn)練〕2．(2024·城固縣月考)二硝基甲苯遇堿變紅，如圖表示從被二硝基甲苯污染的土壤中分別具有降解二硝基甲苯實(shí)力的光合細(xì)菌——球形紅細(xì)菌的過程。請回答下列問題：(1)將10g土壤樣品加入裝有無菌水的三角瓶中制備土壤浸出液。②過程的目的是獲得單個(gè)菌落；③過程所用的接種方法為平板劃線法。(2)在5個(gè)培育基平板上分別接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣液0.1mL，培育一段時(shí)間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191，則每毫升土壤樣液中的細(xì)菌數(shù)量約為1.75×108個(gè)。用此方法測定的球形紅細(xì)菌數(shù)量比實(shí)際活菌數(shù)量少，緣由是一個(gè)菌落可以由一個(gè)或多個(gè)球形紅細(xì)菌形成。(3)圖中甲、乙培育基需置于有光條件下培育，主要緣由是球形紅細(xì)菌進(jìn)行光合作用須要光。挑出純化獲得的菌落接種在含二硝基甲苯的培育基中，培育結(jié)束后，可通過調(diào)整培育基的pH至堿性后視察培育基顏色來推斷菌種降解二硝基甲苯的實(shí)力。[解析](1)圖中②稀釋涂布平板接種的目的是獲得單個(gè)菌落；由圖中菌落的分布可知，③過程所用的接種方法為平板劃線法。(2)在5個(gè)培育基平板上分別接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣液0.1mL，培育一段時(shí)間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191，一般取菌落數(shù)在30～300之間的平板計(jì)數(shù)，則每毫升土壤樣液中的細(xì)菌數(shù)量為eq\f(156＋178＋191×105÷0.1,3)＝1.75×108個(gè)。用此方法測定的球形紅細(xì)菌數(shù)量比實(shí)際活菌數(shù)量少，緣由是一個(gè)菌落可以由一個(gè)或多個(gè)球形紅細(xì)菌形成。(3)由于球形紅細(xì)菌進(jìn)行光合作用須要光，因此圖中甲、乙培育基需置于有光條件下培育。挑出純化獲得的菌落接種在含二硝基甲苯的培育基中，由于二硝基甲苯遇堿變紅，因此培育結(jié)束后，可通過調(diào)整培育基的pH至堿性后視察培育基顏色來推斷菌種降解二硝基甲苯的實(shí)力。3．(2024·江西省新余市高三期末)目前微博傳言手機(jī)細(xì)菌比馬桶多。如圖，央視和北京衛(wèi)視通過試驗(yàn)展示調(diào)查結(jié)果?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題∶(1)該試驗(yàn)需制備固體(填“固體”或“液體”)培育基。在液體培育基中加入瓊脂可配置成固體培育基。(2)據(jù)圖，兩電視臺均采納稀釋涂布平板法接種，接種前須要采納高壓蒸汽滅菌法對培育基進(jìn)行滅菌。(3)通過視察菌落形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等初步鑒定手機(jī)屏幕和馬桶按鈕上的生物類群。兩電臺試驗(yàn)操作均正確且完全一樣，但報(bào)道結(jié)果迥然不同，你認(rèn)為緣由是：手機(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同。(4)按圖操作取樣面積，試驗(yàn)員測定某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)量，將10mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋，分別取0.1mL稀釋倍數(shù)為100的樣品液接種到三個(gè)培育基上，培育一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為98、100、102，則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為4×104個(gè)/平方厘米。該試驗(yàn)比照組要取培育基涂布0.1_mL無菌水進(jìn)行培育。[解析](1)該試驗(yàn)需制備固體培育基。在液體培育基中加入瓊脂做凝固劑即可。(2)圖中，均要用稀釋涂布平板法接種，培育基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。(3)不同的菌落形態(tài)、大小不同，圖示兩個(gè)電視臺調(diào)查的手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都有多種形態(tài)的菌落，即存在多種微生物。兩電視臺試驗(yàn)操作均正確且完全一樣，但報(bào)道結(jié)果迥然不同，可能是因?yàn)槭謾C(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同。(4)依據(jù)題意分析，三個(gè)菌落的平均數(shù)為(98＋100＋102)/3＝100(個(gè))，則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)＝100×100×(10÷0.1)÷(5×5)＝4×104(個(gè)/cm2)。該試驗(yàn)比照組應(yīng)當(dāng)取培育基涂布0.1mL無菌水進(jìn)行培育。課末總結(jié)學(xué)問導(dǎo)圖·思維縷析學(xué)科素養(yǎng)·核心釋疑下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請回答相關(guān)問題：(1)圖甲是利用平板劃線法進(jìn)行微生物接種，圖乙是利用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物接種。對這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是灼燒滅菌和酒精消毒。(2)接種操作要在火焰旁邊進(jìn)行的緣由是火焰旁邊存在著無菌區(qū)域。(3)接種后，在固體培育基上培育細(xì)菌時(shí)進(jìn)行倒置培育的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培育基上污染培育基。探究高考·明確考向1．(2024·山東卷，20)野生型大腸桿菌可以在基本培育基上生長，發(fā)生基因突變產(chǎn)生的氨基酸依靠型菌株須要在基本培育基上補(bǔ)充相應(yīng)氨基酸才能生長。將甲硫氨酸依靠型菌株M和蘇氨酸依靠型菌株N單獨(dú)接種在基本培育基上時(shí)，均不會產(chǎn)生菌落。某同學(xué)試驗(yàn)過程中發(fā)覺，將M、N菌株混合培育一段時(shí)間，充分稀釋后再涂布到基本培育基上，培育后出現(xiàn)很多由單個(gè)細(xì)菌形成的菌落，將這些菌落分別接種到基本培育基上，培育后均有菌落出現(xiàn)。該同學(xué)對這些菌落出現(xiàn)緣由的分析，不合理的是(B)A．操作過程中出現(xiàn)雜菌污染B．M、N菌株互為對方供應(yīng)所缺失的氨基酸C．混合培育過程中，菌株獲得了對方的遺傳物質(zhì)D．混合培育過程中，菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變[解析]操作過程中出現(xiàn)雜菌污染，基本培育基上生長的為雜菌，A合理；若M、N菌株互為對方供應(yīng)所缺失的氨基酸形成的菌落，須要MN混合在一起才能生存，而該菌落來自單個(gè)細(xì)菌形成的菌落，單個(gè)細(xì)菌不行能是混合培育的細(xì)菌。B項(xiàng)不合理。M、N菌株混合培育后在基本培育基上可以生存，推想可能是混合培育過程中，菌株間發(fā)生了基因溝通，獲得了對方的遺傳物質(zhì)，C合理；基因突變是不定向的，在混合培育過程中，菌株中已突變的基因也可能再次發(fā)生突變得到可在基本培育基上生存的野生型大腸桿菌，D合理。故選B。2．(2024·江蘇卷，19)為純化菌種，在鑒別培育基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培育結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是(B)A．倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B．圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C．該試驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的D．菌落四周的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色[解析]倒平板后無需晃動，A錯(cuò)誤；Ⅰ區(qū)、Ⅱ區(qū)沒有出現(xiàn)單菌落，說明細(xì)菌數(shù)量太多，故應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B正確；出現(xiàn)單菌落即達(dá)到了菌種純化的目的，C錯(cuò)誤；剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)，D錯(cuò)誤。故選B。3．(2024·浙江卷，19)下列關(guān)于微生物培育及利用的敘述，錯(cuò)誤的是(A)A．利用尿素固體培育基可快速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B．配制培育基時(shí)應(yīng)依據(jù)微生物的種類調(diào)整培育基的pHC．酵母菌不能干脆利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒D．相宜濃度的酒精可使醋化醋桿菌活化[解析]在尿素固體培育基中，由于不能利用尿素做氮源的微生物不能生長繁殖，而保留利用尿素的微生物，其他微生物并非被殺死，A錯(cuò)誤；不同的微生物所需的pH不同，所以配置培育基時(shí)應(yīng)依據(jù)微生物的種類調(diào)整培育基的pH，B正確；酵母菌不能干脆利用淀粉，應(yīng)用酒曲中的根霉和米曲霉等微生物把淀粉糖化，再用酵母菌發(fā)酵得到糯米酒，C正確；醋化醋桿菌在有氧條件下利用酒精產(chǎn)生醋酸，D正確。故選A。4．(2024·江蘇卷，12)下列關(guān)于微生物試驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是(A)A．培育微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒C．接種后的培育皿要倒置，以防培育污染D．菌種分別和菌落計(jì)數(shù)都可以運(yùn)用固體培育基[解析]培育微生物的器具不肯定都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，如接種環(huán)須要進(jìn)行灼燒滅菌，A項(xiàng)錯(cuò)誤。接種前灼燒接種環(huán)的目的是徹底殺滅環(huán)上的細(xì)菌、芽孢等，接種后再灼燒是為了防止菌種逸出，污染接種室或者超凈臺，影響整體接種環(huán)境，B項(xiàng)正確。接種后的培育皿要倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培育基造成污染，又可以避開培育基里的水分過快地?fù)]發(fā)，C項(xiàng)正確。固體培育基可通過平板劃線法或稀釋涂布平板法進(jìn)行菌種分別；在固體培育基上才能形成菌落，故菌落計(jì)數(shù)用固體培育基，D項(xiàng)正確。5．(2024·全國Ⅰ，37)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。探討人員依據(jù)下圖所示流程從淤泥中分別得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。試驗(yàn)過程中須要甲、乙兩種培育基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y?；卮鹣铝袉栴}：(1)試驗(yàn)時(shí)，盛有水或培育基的搖瓶通常采納高壓蒸汽滅菌的方法進(jìn)行滅菌。乙培育基中的Y物質(zhì)是瓊脂。甲、乙培育基均屬于選擇培育基。(2)試驗(yàn)中初步估測搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋104倍。(3)在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)覺當(dāng)培育基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對S的降解量反而下降，其緣由可能是S的濃度超過某一值時(shí)會抑制菌株的生長(答出1點(diǎn)即可)。(4)若要測定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請寫出主要試驗(yàn)步驟：取淤泥加入無菌水中，涂布(或稀釋涂布)到乙培育基上，培育后計(jì)數(shù)。(5)上述試驗(yàn)中，甲、乙兩種培育基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長供應(yīng)4類養(yǎng)分物質(zhì)，即水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。[解析]本題考查微生物的培育、分別和計(jì)數(shù)。(1)為保持原有的濕度，盛有水或培育基的器皿常采納高壓蒸汽滅菌法滅菌。乙培育基為固體培育基，須要加入凝固劑瓊脂。甲、乙培育基均只含S一種碳源和氮源，故只有能利用S的細(xì)菌才能生長，因而都屬于選擇培育基。(2)M中細(xì)菌濃度÷稀釋倍數(shù)＝涂布時(shí)細(xì)菌的濃度，所以稀釋倍數(shù)＝M中細(xì)菌濃度÷涂布時(shí)細(xì)菌的濃度。M中細(xì)菌濃度為2×107個(gè)/mL，涂布時(shí)細(xì)菌濃度最高為200個(gè)/100μL＝2×103個(gè)/mL，所以稀釋倍數(shù)為2×107個(gè)/mL÷(2×103)個(gè)/mL＝104。(3)當(dāng)培育基中的S超過某一濃度時(shí)，細(xì)胞外的滲透壓增大，細(xì)胞吸水削減，代謝減弱，菌株生長受到抑制，對S的降解量下降。(4)采納稀釋涂布平板法進(jìn)行培育計(jì)數(shù)時(shí)，先取1g淤泥加入9mL無菌水中制成菌懸液，稀釋涂布到乙培育基上，培育后統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，推算淤泥中能降解S的細(xì)菌數(shù)量。(5)培育微生物的培育基中含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等養(yǎng)分物質(zhì)。6．(2024·全國卷Ⅱ，37)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，會污染土壤。W在培育基中達(dá)到肯定量時(shí)培育基表現(xiàn)為不透亮。某探討小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)?；卮鹣铝袉栴}。(1)要從土壤中分別目標(biāo)菌，所用選擇培育基中的氮源應(yīng)當(dāng)是W。(2)在從土壤中分別目標(biāo)菌的過程中，發(fā)覺培育基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落(如圖所示)。假如要得到目標(biāo)菌，應(yīng)當(dāng)選擇乙菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是乙菌落四周出現(xiàn)透亮圈，說明乙菌能降解W。(3)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础Ｈ粢O(shè)計(jì)試驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，請簡要寫出試?yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即將甲、乙菌分別接種在無氮源培育基上，若細(xì)菌能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础?4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與自然酶降解W實(shí)力的差異，該小組擬進(jìn)行如下試驗(yàn)，請完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有肯定濃度W的固體培育基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度自然酶的緩沖液，C處滴加緩沖液，三處滴加量相同。②一段時(shí)間后，測量透亮圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透亮圈，說明緩沖液不能降解W；若A、B處形成的透亮圈直徑大小相近，說明酶E與自然酶降解W的實(shí)力相近。[解析](1)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，要分別能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌，需用以物質(zhì)W為唯一氮源的選擇培育基進(jìn)行篩選。(2)由題圖可知，甲菌落四周沒有透亮圈，說明甲菌不能降解物質(zhì)W，乙菌落四周出現(xiàn)透亮圈，說明乙菌能降解物質(zhì)W，故要得到目標(biāo)菌，應(yīng)選擇乙菌落進(jìn)一步純化。(3)要鑒定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，則培育基中不能添加氮源，所以將甲、乙菌分別接種在無氮源的培育基上(其他條件相同且相宜)，若細(xì)菌能生長，則說明細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础?4)試驗(yàn)?zāi)康氖潜容^自然酶和酶E降解物質(zhì)W的實(shí)力，做試驗(yàn)時(shí)要設(shè)計(jì)空白比照試驗(yàn)，所以C處應(yīng)滴加緩沖液。C處沒有出現(xiàn)透亮圈，說明緩沖液不能降解物質(zhì)W，A、B處透亮圈的出現(xiàn)說明物質(zhì)W被降解，若兩個(gè)透亮圈直徑大小相近，則說明酶E與自然酶降解物質(zhì)W的實(shí)力相近。7．(2024·全國卷Ⅰ，37)已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培育基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。Ⅰ號培育基：在牛肉膏蛋白胨培育基中加入X(5g/L)。Ⅱ號培育基：氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機(jī)鹽(適量)，X(15g/L)。Ⅲ號培育基：氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機(jī)鹽(適量)，X(45g/L)。回答下列問題。(1)在Ⅰ號培育基中，為微生物供應(yīng)氮源的是牛肉膏、蛋白胨。Ⅱ、Ⅲ號培育基中為微生物供應(yīng)碳源的有機(jī)物是X。(2)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培育基中，培育一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌比例會下降，其緣由是不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細(xì)菌能夠增殖。(3)Ⅱ號培育基加入瓊脂后可以制成固體培育基，若要以該固體培育基培育目標(biāo)菌并對菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，接種時(shí)，應(yīng)采納的方法是稀釋涂布平板法。(4)假設(shè)從Ⅲ號培育基中得到了能高效降解X的細(xì)菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長供應(yīng)能量和合成其他物質(zhì)的原料。[解析](1)Ⅰ號培育基中含有牛肉膏、蛋白胨和有機(jī)物X等，其中X僅含有C、H兩種元素，故為微生物供應(yīng)氮源的是牛肉膏、蛋白胨。Ⅱ、Ⅲ號培育基中除無機(jī)鹽外，還含有有機(jī)物X，故為微生物供應(yīng)碳源的有機(jī)物是X。(2)因Ⅱ號液體培育基中的有機(jī)碳源只有X，故培育一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細(xì)菌能夠增殖，故不能降解X的細(xì)菌比例會下降。(3)對微生物分別的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，但其中只有稀釋涂布平板法能夠用于計(jì)數(shù)。(4)能高效降解X的細(xì)菌能將X代謝為丙酮酸，丙酮酸在有氧條件下被降解時(shí)能釋放出大量能量，故丙酮酸可為該細(xì)菌的生長供應(yīng)能量。丙酮酸還可以為該細(xì)菌中其他物質(zhì)的合成供應(yīng)原料。8．(2024·全國卷Ⅰ)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸肯定時(shí)間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入肯定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培育基?；卮鹣铝袉栴}：(1)M培育基若用于真菌的篩選，則培育基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制細(xì)菌的生長，加入了鏈霉素的培育基屬于選擇培育基。(2)M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供應(yīng)了多種養(yǎng)分物質(zhì)，養(yǎng)分物質(zhì)類型除氮源外還有碳源、無機(jī)鹽(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參加合成的生物大分子有蛋白質(zhì)、核酸(答出兩點(diǎn)即可)。(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培育，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是碘液，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解，形成透亮圈。(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133；乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其緣由是乙同學(xué)的結(jié)果中，1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差。[解析](1)鏈霉素是抗生素，可抑制細(xì)菌生長，故在M培育基中加入鏈霉素作為選擇培育基，可篩選出真菌。(2)培育基中的養(yǎng)分成分一般包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等。細(xì)胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白質(zhì)、核酸等，故所加入的氮源可參加以上物質(zhì)的合成。(3)能產(chǎn)生淀粉酶的微生物可將淀粉分解成麥芽糖，淀粉遇碘變藍(lán)，向加有淀粉的培育基中加入碘液后培育基呈現(xiàn)藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落四周的淀粉被水解，形成透亮圈，可依據(jù)透亮圈的大小推斷產(chǎn)生淀粉酶的多少。(4)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)時(shí)一般選擇菌落數(shù)在30～300個(gè)