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備案號:44981-2015DB22DB22/T2260—2015鹿鞭鑒定方法PCR法IdentificationofSikaDeerandWapitiPizzles----PolymeraseChainReactionMethod2015-02-01發(fā)布2015-03-01實施吉林省質(zhì)量技術監(jiān)督局發(fā)布I1WS/T230-2002臨床診斷中聚合酶鏈反應(PCR)技上游引物:5’-CAAAGCACGTGATATAACCTTATG-3’下游引物:5’-ATCTAGTGCTCGAATTAATGGTAC-3’),),2),),),),):)():5.2.276×loadingBuffer(市售含0.25%溴酚藍,0.25%二甲苯3Taq酶/(5U/μL)4用1×TAE電泳緩沖液配制成1%瓊脂糖平板(溴化乙錠終濃度0.5μg/mL)。將平中,加入1×TAE電泳緩沖液剛剛高出凝膠表面,將PCR擴增產(chǎn)物6μL與樣品孔中,取5μLDNAMarkerDL20必要時取PCR擴增產(chǎn)物進行測序,如果結(jié)果與附錄A參考序列比較,序列相似性在95%以上,可進5):ACAAAGCACGTGATATAACCTTATGTGTTTGTAGTACATAAAATTAATGCATTAAGGCACACATACAATGGTACATAAAATCGGTGTATAGGACATATTATGCATAATAGTACATAAATTAATAGGACATACTATGTATAATAGTACATTATATTATATGCCCCATGCTTATAAGCATGTATTTTTATCTACAGTACATAGTACATGATGTTGCTTATCGTACATAGCGCATTGAGTCAAATCAGTCCTCGTCAGCATGCGTATCCCGTCCACTAGATCACGAGCTTGATCACCATG):GCAAAACACGTGATATAACCTTATGCGCTTGTAGTACATAAAATCAATGTACTATATAACAGTACATAAGTTAGCGTATAGGACATATTATGTATAATAGTACATAAATTAATGTGGACATATTATGTATAATAGTACATTATATTATATGCCCCATGCTTATAAGCATGTACTTTATCTAAAGTACATAGTACATAATGTTGTTCATCGTACATAGTACATTAAGTCAAATCAGTCCTTGTCAACATG
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