《化妝品原料修護(hù)功效評(píng)價(jià)測(cè)試方法》（征求意見(jiàn)稿）

編制說(shuō)明

一、任務(wù)來(lái)源

《化妝品原料修護(hù)功效評(píng)價(jià)測(cè)試方法》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)（以下簡(jiǎn)稱“標(biāo)準(zhǔn)”）于2024年6月5日批準(zhǔn)立項(xiàng)。本標(biāo)準(zhǔn)由肽悅（生物）科技有限責(zé)任公司提出，由遼寧省品牌建設(shè)促進(jìn)會(huì)歸口，由遼寧省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)院、中科院沈陽(yáng)應(yīng)用生態(tài)研究所、沈陽(yáng)藥科大學(xué)、遼寧花青農(nóng)業(yè)科技有限公司、沈陽(yáng)艾米奧生物工程技術(shù)研發(fā)中心有限公司、沈陽(yáng)美研化妝品有限公司共同起草。

二、工作意義

國(guó)家于2021年4月8日發(fā)布的《化妝品功效宣稱評(píng)價(jià)規(guī)范》，對(duì)化妝品功效宣稱相關(guān)內(nèi)容提出了法律層面的要求。但現(xiàn)階段，國(guó)家尚未發(fā)布化妝品原料各種功效宣稱確定相應(yīng)的評(píng)價(jià)方法。鑒于此，對(duì)化妝品原料功效宣稱評(píng)價(jià)的技術(shù)方法研究十分必要。市面上化妝品修護(hù)功效宣稱受到消費(fèi)者青睞，具有修護(hù)的原料市場(chǎng)需求較大，進(jìn)行化妝品原料修護(hù)功效評(píng)價(jià)方法的研究能夠解決企業(yè)急需問(wèn)題。

三、主要過(guò)程

標(biāo)準(zhǔn)的全過(guò)程包括：前期籌備（完成）、標(biāo)準(zhǔn)提案（完成）、標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)（完成）、標(biāo)準(zhǔn)起草（完成）、征求意見(jiàn)（完成）、標(biāo)準(zhǔn)審查、標(biāo)準(zhǔn)批準(zhǔn)、標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布、標(biāo)準(zhǔn)復(fù)審、標(biāo)準(zhǔn)修訂、標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用、標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估等。

四、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和主要內(nèi)容

（一）編制原則

本方法規(guī)定了一種基于體外人皮膚模型的化妝品原料修護(hù)功效測(cè)試方法的試驗(yàn)原則、試劑及儀器設(shè)備、試驗(yàn)步驟、結(jié)果計(jì)算和結(jié)果判定等內(nèi)容。凡標(biāo)注日期引用文件，標(biāo)注日期的版本適用于本文件。凡是不標(biāo)注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

（二）標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容

將人皮膚表皮細(xì)胞用胰蛋白酶消化成為單細(xì)胞懸液，使其密度約為1×104個(gè)/mL。將細(xì)胞劃痕試驗(yàn)插件2孔插件置于24孔板底部，用微量移液器吸取細(xì)胞懸液接種到插件的孔中，然后置于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)約48h。觀察，待細(xì)胞生長(zhǎng)到融合度為95%時(shí)，取出插件，底部即產(chǎn)生均一的無(wú)細(xì)胞間隙。試驗(yàn)設(shè)置空白對(duì)照組和受試物組。將經(jīng)細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)確定最大使用濃度的受試物用培養(yǎng)基稀釋到試驗(yàn)濃度。用微量移液器吸干24孔板內(nèi)的培養(yǎng)基；加入0.5mLPBS清洗細(xì)胞一次，再吸干各孔。對(duì)照組每孔加入0.5mL空白培養(yǎng)基，受試物組每孔加入0.5mL含有受試物的培養(yǎng)基。隨后將24孔板置于CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)24h和48h。在給藥后的0h、24h和48h分別對(duì)制造的間隙在顯微鏡下進(jìn)行觀察和拍攝，并使用軟件對(duì)間隙面積進(jìn)行測(cè)量，以最終間隙面積與初始間隙面積的差值和初始間隙面積的比值為愈合率，比較受試物組間隙的

愈合率大于對(duì)照組，且具有顯著性差異，判定受試物具有修護(hù)功效。

（1）適用范圍

本方法適用于具有生物學(xué)修護(hù)作用的化妝品原料的修護(hù)功效測(cè)試，不適用于物理修護(hù)類化妝品原料。

（2）術(shù)語(yǔ)和定義

無(wú)。

（3）與有關(guān)的現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系

本標(biāo)準(zhǔn)與現(xiàn)行法律法規(guī)、政策及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)無(wú)沖突。

五、團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)先進(jìn)性說(shuō)明

化妝品原料修護(hù)功效評(píng)價(jià)測(cè)試方法，國(guó)內(nèi)首次用體外細(xì)胞學(xué)方法對(duì)修護(hù)功效進(jìn)行評(píng)價(jià)，彌補(bǔ)了我省化妝品相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的空缺，為化妝品原料檢