2025屆高考生物一輪復(fù)習(xí)新考案-大單元11生物技術(shù)與工程第59講dna相關(guān)的兩個(gè)重要實(shí)驗(yàn)(人教版2019)

第59講DNA相關(guān)的兩個(gè)重要實(shí)驗(yàn)【課標(biāo)內(nèi)容】1．實(shí)驗(yàn)：DNA的提取與鑒定；2．實(shí)驗(yàn)：利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增DNA片段并完成電泳鑒定或運(yùn)用軟件進(jìn)行虛擬PCR實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)17DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)回歸1．實(shí)驗(yàn)思路、原理(1)提取的基本思路：DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面存在差異，利用這些差異，對(duì)DNA進(jìn)行提取。(2)相關(guān)原理2．材料選擇(1)依據(jù)：選用__DNA含量高_(dá)_的組織，成功的可能性更大。(2)常用材料：新鮮洋蔥、香蕉、菠菜、菜花、雞血和豬肝等(方法可能稍有不同)。3．實(shí)驗(yàn)過(guò)程解疑釋惑(1)研磨液的成分和作用研磨液成分作用SDS使蛋白質(zhì)變性EDTA抑制DNA酶Tris－HCl緩沖液穩(wěn)定DNA(2)研磨的目的：破碎細(xì)胞，使核物質(zhì)容易溶解在研磨液中。(3)低溫放置幾分鐘(或酒精預(yù)冷)的作用：①可抑制核酸水解酶的活性，進(jìn)而抑制DNA降解；②抑制DNA分子運(yùn)動(dòng)，使DNA易形成沉淀析出；③低溫有利于增加DNA的柔韌性，減少其斷裂。(4)攪拌時(shí)應(yīng)輕緩、并沿一個(gè)方向的目的：減少DNA斷裂，以便獲得較完整的DNA分子。實(shí)驗(yàn)延伸用雞血細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料的操作流程(蘇教版)步驟材料/方法說(shuō)明制備雞血細(xì)胞液新鮮雞血哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核(或不含有DNA)，故不能選用提取血細(xì)胞核物質(zhì)加入一定量的蒸餾水，破碎細(xì)胞，并用玻璃棒攪拌，過(guò)濾，獲取含有DNA的濾液細(xì)胞吸水漲破，玻璃棒攪拌加速細(xì)胞破裂析出DNA①取濾液加入物質(zhì)的量濃度為2mol·L－1的NaCl溶液；②緩緩加入一定量的蒸餾水，調(diào)節(jié)物質(zhì)的量濃度至0.14mol·L－1，析出DNA，絲狀物不再增加時(shí)停止加蒸餾水；③用玻璃棒挑起絲狀物，獲得含一定雜質(zhì)的DNADNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同向?yàn)V液中加入等體積的、冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精，靜置2～3min，并用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起白色絲狀物DNA酒精能夠減少DNA的降解，同時(shí)也能夠溶解雜質(zhì)實(shí)驗(yàn)素養(yǎng)一、實(shí)驗(yàn)基本理論——實(shí)驗(yàn)變量與原則取兩支20mL的試管，各加入2mol·L－1的NaCl溶液5mL。將絲狀物或沉淀物溶于其中一支試管的NaCl溶液中。然后，向兩支試管中各加入4mL的二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝?，將試管置于沸水中加熱5min。待試管冷卻后，比較兩支試管中溶液顏色的變化。1．上述實(shí)驗(yàn)中，自變量是__絲狀物或沉淀物的有無(wú)__，因變量是__溶液顏色__，無(wú)關(guān)變量是__2mol·L－1的NaCl溶液、二苯胺試劑和沸水及加熱5min__等。2．實(shí)驗(yàn)遵循的原則：兩支20mL的試管說(shuō)明實(shí)驗(yàn)需要__分組__，2mol·L－1的NaCl溶液5mL、4mL的二苯胺試劑和沸水中加熱5min中的數(shù)字則說(shuō)明實(shí)驗(yàn)要遵循__等量__原則，“將絲狀物或沉淀物溶于其中一支試管的NaCl溶液中”則說(shuō)明實(shí)驗(yàn)需遵循__單一變量__原則。二、試劑的選擇和使用DNA提取過(guò)程中可以選用雞血或者菜花作為實(shí)驗(yàn)材料。請(qǐng)回答下列關(guān)于DNA粗提取和鑒定的問(wèn)題：1．使用雞血提取DNA時(shí)，需在雞血中加入檸檬酸鈉，目的是__防止血液凝固__；在雞血細(xì)胞溶液中加入蒸餾水，目的是__使雞血細(xì)胞破裂__。2．使用洋蔥提取DNA時(shí)，需要加入研磨液，研磨液能夠__防止DNA被水解__，另外有利于蛋白質(zhì)與DNA發(fā)生分離。3．DNA在物質(zhì)的量濃度為_(kāi)_0.14__mol·L－1的NaCl溶液中溶解度最低。使用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精可使DNA__析出__(選填“析出”或“溶解”)。4．此實(shí)驗(yàn)中二苯胺試劑的作用是__鑒定DNA__，需要現(xiàn)配現(xiàn)用。題組訓(xùn)練1．(2019·江蘇卷)下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是(A)A．用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近B．DNA析出過(guò)程中，攪拌操作要輕柔以防DNA斷裂C．預(yù)冷的乙醇可用來(lái)進(jìn)一步純化粗提的DNAD．用二苯胺試劑鑒定DNA需要進(jìn)行水浴加熱解析：兔屬于哺乳動(dòng)物，其成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核及各種細(xì)胞器，提取不到DNA，而雞屬于鳥(niǎo)類(lèi)，其紅細(xì)胞內(nèi)含有細(xì)胞核與各種細(xì)胞器，DNA含量較多，A錯(cuò)誤；DNA分子是非常容易斷裂的，輕柔攪拌的目的是獲得較完整的DNA分子，B正確；DNA不溶于酒精，蛋白質(zhì)可以溶于酒精，所以冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液可以進(jìn)一步純化粗提的DNA，C正確；將析出的DNA溶解在2mol·L－1的NaCl溶液中，加入二苯胺試劑后需要沸水浴加熱才會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。2．(2022·山東卷)關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(B)A．過(guò)濾液沉淀過(guò)程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了減少DNA降解B．離心研磨液是為了加速DNA的沉淀C．在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色D．粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)解析：低溫能夠降低酶的活性，故將過(guò)濾液沉淀過(guò)程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了減少DNA降解，A正確；離心研磨液的目的是加速細(xì)胞膜、細(xì)胞器、一些較大雜質(zhì)的沉淀，B錯(cuò)誤；DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)形成藍(lán)色，因此，二苯胺試劑可以鑒定DNA，C正確；若提取的絲狀物為黃色，說(shuō)明提取的DNA純度不高，可能含有蛋白質(zhì)等雜質(zhì)成分，D正確。實(shí)驗(yàn)18利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段并電泳鑒定實(shí)驗(yàn)回歸1．實(shí)驗(yàn)原理(1)擴(kuò)增原理：PCR利用了DNA的熱變性原理，通過(guò)調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。PCR儀實(shí)質(zhì)上就是一臺(tái)能夠__自動(dòng)調(diào)控溫度__的儀器。一次PCR一般要經(jīng)歷30次循環(huán)。(2)電泳原理：DNA分子具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)可以帶上正電荷或負(fù)電荷。在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與它所帶電荷__相反__的電極移動(dòng)，這個(gè)過(guò)程就是電泳。(3)鑒定原理：PCR的產(chǎn)物一般通過(guò)__瓊脂糖凝膠__電泳來(lái)鑒定。在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的__大小__和構(gòu)象等有關(guān)。凝膠中的DNA分子通過(guò)染色，可以在波長(zhǎng)為_(kāi)_300nm__的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)。2．設(shè)備：__PCR儀__、電泳裝置等。3．實(shí)驗(yàn)過(guò)程(1)PCR操作過(guò)程循環(huán)程序變性復(fù)性延伸預(yù)變性__94__℃，5min——30次94℃，30s__55__℃，30s__72__℃，1min最后1次94℃，1min55℃，30s72℃，1min注：預(yù)變性可使DNA充分變性，以利于引物更好地和模板結(jié)合。(2)電泳鑒定：配制__瓊脂糖__溶液，加入核酸染料混合→制備凝膠→加緩沖液(沒(méi)過(guò)凝膠1mm為宜)→加樣(PCR產(chǎn)物與含指示劑的凝膠載樣緩沖液混合，留一個(gè)孔加__標(biāo)準(zhǔn)參照物__)→進(jìn)行電泳(根據(jù)電泳槽陽(yáng)極至陰極之間的距離來(lái)設(shè)定電壓，一般為1～5V·cm－1。待指示劑前沿遷移接近凝膠邊緣時(shí)，停止電泳)→__紫外燈__下鑒定。題組訓(xùn)練1．(2021·湖北卷)某實(shí)驗(yàn)利用PCR技術(shù)獲取目的基因，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示除目的基因條帶(引物與模板完全配對(duì))外，還有2條非特異條帶(引物和模板不完全配對(duì))。為了減少反應(yīng)中非特異條帶的產(chǎn)生，以下措施中有效的是(D)A．增加模板DNA的量 B．延長(zhǎng)熱變性的時(shí)間C．延長(zhǎng)延伸的時(shí)間 D．提高復(fù)性的溫度解析：PCR過(guò)程中，引物和模板不完全配對(duì)會(huì)形成非特異條帶，增加模板DNA的量不會(huì)減少反應(yīng)中非特異條帶的產(chǎn)生；延長(zhǎng)熱變性的時(shí)間有利于雙鏈DNA解聚為單鏈，不能減少反應(yīng)中非特異條帶的產(chǎn)生；延長(zhǎng)延伸的時(shí)間有利于合成新的DNA鏈，但不能減少反應(yīng)中非特異條帶的產(chǎn)生；在一定溫度范圍內(nèi)，選擇較高的復(fù)性溫度可減少引物和模板間的非特異性結(jié)合。2．巢式PCR擴(kuò)增反應(yīng)在兩次PCR反應(yīng)中使用兩組不同引物，先使用外引物對(duì)目標(biāo)區(qū)域DNA片段進(jìn)行第一次PCR擴(kuò)增，產(chǎn)生中間產(chǎn)物，然后使用內(nèi)引物對(duì)中間產(chǎn)物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，產(chǎn)生目標(biāo)產(chǎn)物。圖1是巢式PCR工作原理示意圖。請(qǐng)回答：eq\o(\s\up7(),\s\do5(圖1巢式PCR工作原理示意圖))eq\o(\s\up7(),\s\do5(圖2電泳結(jié)果圖示))(1)巢式PCR反應(yīng)體系中需加入模板、__dNTP(4種脫氧核苷酸)__、__Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)__、引物、Mg2+、緩沖液等。(2)巢式PCR進(jìn)行時(shí)，若用外引物擴(kuò)增產(chǎn)生了錯(cuò)誤片段，再用內(nèi)引物擴(kuò)增在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行引物配對(duì)并擴(kuò)增的概率__低__，因此，相較于常規(guī)PCR獲得的產(chǎn)物而言，巢式PCR獲得產(chǎn)物特異性__強(qiáng)__。(3)巢式PCR通常在一個(gè)試管中進(jìn)行第一階段反應(yīng)，然后將中間產(chǎn)物等轉(zhuǎn)移到第二試管中進(jìn)行第二階段反應(yīng)，不在同一試管中進(jìn)行的主要原因是__防止內(nèi)引物在第一階段PCR中發(fā)揮作用，無(wú)法實(shí)現(xiàn)巢式PCR高精確擴(kuò)增的目的__。(4)PCR技術(shù)的原理是__DNA半保留復(fù)制__。為使PCR產(chǎn)物能被限制酶切割，需在引物上添加相應(yīng)的限制酶的識(shí)別序列，該序列應(yīng)添加在引物的__5′端__(選填“3′端”或“5′端”)。(5)科研人員利用多重巢式PCR技術(shù)同時(shí)擴(kuò)增Y染色體上的性別決定基因(SRY)和常染色體上的酪蛋白基因(CSN1S1)，并進(jìn)行電泳。電泳結(jié)果如圖2所示，1～5號(hào)為取自不同胚胎的樣品進(jìn)行巢式PCR的結(jié)果，A和B條帶中代表SRY的是__B__?？梢源_定1～5號(hào)中的3和5號(hào)胚胎為_(kāi)_雄__性。解析：巢式PCR通過(guò)兩輪PCR反應(yīng)，使用兩套引物擴(kuò)增特異性的DNA片段，第二對(duì)引物的功能是特異性的擴(kuò)增位于首輪PCR產(chǎn)物內(nèi)的一段DNA片段。第一輪擴(kuò)增中，外引物用以產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物，此產(chǎn)物在內(nèi)引物的存在下進(jìn)行第二輪擴(kuò)增，從而提高反應(yīng)的特異性，獲得的產(chǎn)物特異性更強(qiáng)。利用內(nèi)引物擴(kuò)增在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行引物配對(duì)并擴(kuò)增的概率降低。題中利用多重巢式PCR技術(shù)同時(shí)擴(kuò)增Y染色體上雄性決定基因(SRY)和常染色體上的酪蛋白基因(CSN1S1)進(jìn)行電泳，雌性個(gè)體沒(méi)有SRY，只有一個(gè)條帶，雄性有兩個(gè)條帶，因此1、2、4是雌性，3、5是雄性，雌性和雄性共有的是常染色體上的酪蛋白基因(CSN1S1)，因此A是CSN1S1，B是SRY。1．(2023·廣東卷)“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本過(guò)程是：裂解→分離→沉淀→鑒定。下列敘述錯(cuò)誤的是(D)A．裂解：使細(xì)胞破裂釋放出DNA等物質(zhì)B．分離：可去除混合物中的多糖、蛋白質(zhì)等C．沉淀：可反復(fù)多次以提高DNA的純度D．鑒定：加入二苯胺試劑后即呈現(xiàn)藍(lán)色解析：加入二苯胺試劑后，還需沸水浴處理才能出現(xiàn)藍(lán)色，D錯(cuò)誤。2．(2024·蘇州期初)下列關(guān)于瓊脂糖凝膠電泳的敘述，錯(cuò)誤的是(A)A．加熱熔化的瓊脂糖完全冷卻后加入適量的核酸染料B．電泳緩沖液加入電泳槽時(shí)，需沒(méi)過(guò)凝膠1mm為宜C．可調(diào)容量的微量移液器應(yīng)先做容量設(shè)定再安裝槍頭D．停止電泳后應(yīng)將凝膠置于紫外燈下，觀察和照相解析：瓊脂糖凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)，需待凝膠溶液冷卻至常溫后(不能完全冷卻后加入)，再加入適量的核酸染料攪拌混勻；將電泳樣液加入電泳槽中，電泳緩沖液太多則電流加大；移液槍的使用方法：設(shè)定移液的體積，進(jìn)行吸液及放液。3．(2024·海安期初監(jiān)測(cè))下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”“DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是(D)A．選取細(xì)胞分裂旺盛的菜花表層花進(jìn)行研磨是因?yàn)镈NA含量高B．研磨時(shí)需加入緩沖液，防止DNA在pH發(fā)生變化時(shí)降解或變性C．在凝膠中，DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān)D．PCR產(chǎn)物出現(xiàn)拖尾可能是非特異性擴(kuò)增過(guò)多，可適當(dāng)降低退火溫度解析：新鮮的菜花DNA含量豐富，易獲取，A正確；研磨時(shí)需加入緩沖液，穩(wěn)定溶液的pH，防止DNA在pH發(fā)生變化時(shí)降解或變性，B正確；電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)的作用下，會(huì)向著與它所帶電荷相反方向的電極移動(dòng)，因此在凝膠中，DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān)，C正確；退火溫度越低，引物和底物越容易結(jié)合，錯(cuò)配情況越多，造成PCR特異性降低，故PCR產(chǎn)物出現(xiàn)拖尾可能是非特異性擴(kuò)增過(guò)多，可適當(dāng)提高退火溫度，D錯(cuò)誤。4．下列與DNA相關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是(A)選項(xiàng)實(shí)驗(yàn)方法/原理A證明DNA半保留復(fù)制通過(guò)檢測(cè)14N和15N的放射性強(qiáng)度區(qū)分不同的DNA分子BDNA的粗提取與鑒定利用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精去除部分蛋白質(zhì)CDNA片段的PCR擴(kuò)增PCR反應(yīng)緩沖溶液中的Mg2+能夠激活TaqDNA聚合酶DDNA片段的電泳鑒定在凝膠溶液凝固前加入核酸染料以便對(duì)DNA進(jìn)行染色解析：證明DNA半保留復(fù)制利用的是同位素相對(duì)原子質(zhì)量的不同，結(jié)合密度梯度離心來(lái)區(qū)分不同的DNA分子。配套精練一、單項(xiàng)選擇題1．關(guān)于“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)，下列說(shuō)法正確的是(D)A．研磨時(shí)倒入的研磨液，是為了破壞細(xì)胞壁B．離心研磨液是為了加速DNA的沉淀C．在DNA提取物中加入二苯胺試劑，迅速呈現(xiàn)藍(lán)色D．提取DNA時(shí)要用玻璃棒沿一個(gè)方向緩緩攪動(dòng)解析：研磨液是用于破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和細(xì)胞膜的試劑，其作用是將細(xì)胞破壞，釋放出細(xì)胞內(nèi)的DNA，A錯(cuò)誤；離心研磨液是為了加速細(xì)胞膜、細(xì)胞器、一些較大雜質(zhì)等的沉淀，B錯(cuò)誤；需要沸水浴加熱才可以看到藍(lán)色，C錯(cuò)誤；提取DNA時(shí)用玻璃棒沿一個(gè)方向緩緩攪動(dòng)是為了使DNA分子不斷裂，D正確。2．(2024·高郵10月學(xué)情調(diào)研)某實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，如下為實(shí)驗(yàn)流程：取材→破碎細(xì)胞→獲得濾液→去除雜質(zhì)→進(jìn)一步提純→DNA鑒定，相關(guān)敘述正確的是(B)A．取材時(shí)可選用豬血、洋蔥、香蕉、菜花等富含DNA的材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)B．在液體培養(yǎng)液中培養(yǎng)的大腸桿菌也可作為實(shí)驗(yàn)材料C．提純時(shí)在濾液中加入2mol·L－1的NaCl溶液后會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物DNAD．DNA鑒定時(shí)可通過(guò)是否加入二苯胺試劑設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象解析：哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核和細(xì)胞器，因此不能采用豬血來(lái)提取DNA，A錯(cuò)誤；在液體培養(yǎng)液中培養(yǎng)的大腸桿菌也可作為實(shí)驗(yàn)材料，大腸桿菌是細(xì)菌，含有擬核和質(zhì)粒，DNA含量也較多，適合提取DNA，B正確；DNA在0.14mol·L－1的氯化鈉中溶解度最低，在2mol·L－1的氯化鈉中溶解度最大，因此在2mol·L－1的NaCl溶液中，不會(huì)析出白色絲狀物DNA，C錯(cuò)誤；DNA鑒定時(shí)可通過(guò)是否加入DNA設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。3．下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)“PCR片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的敘述，正確的是(D)A．PCR反應(yīng)中，變性階段需要耐高溫的解旋酶參與B．PCR反應(yīng)中，復(fù)性階段需要DNA聚合酶連接磷酸二酯鍵C．PCR反應(yīng)中，延伸階段可將脫氧核苷酸連接到引物的5′端D．電泳時(shí)，DNA分子在凝膠中的遷移速率與DNA的大小和構(gòu)象等有關(guān)解析：PCR反應(yīng)中，變性階段需要高溫解開(kāi)DNA雙螺旋，無(wú)需解旋酶，A錯(cuò)誤；復(fù)性階段是指引物與模板結(jié)合，無(wú)需DNA聚合酶，B錯(cuò)誤；延伸可將脫氧核苷酸連接到引物的3′端，C錯(cuò)誤；電泳時(shí)，DNA分子在凝膠中的遷移速率與DNA的大小和構(gòu)象等有關(guān)，瓊脂糖凝膠的濃度也會(huì)影響遷移速率，D正確。4．下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定、DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定的原理的敘述，正確的是(C)A．利用DNA溶于酒精，但蛋白質(zhì)不溶于酒精的原理，可分離DNA與蛋白質(zhì)B．將白色絲狀物加入二苯胺試劑后沸水浴，待試管冷卻后觀察顏色變化C．PCR擴(kuò)增四輪循環(huán)后，產(chǎn)物中同時(shí)含有兩種引物的DNA片段所占比例為7/8D．電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相同的電極移動(dòng)的原理解析：DNA不溶于酒精，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可將DNA與蛋白質(zhì)分離，A錯(cuò)誤；將白色絲狀物溶于2mol·L－1的NaCl溶液中，再加入二苯胺試劑后沸水浴，待冷卻后觀察顏色變化，B錯(cuò)誤；PCR擴(kuò)增四輪循環(huán)后，共合成了16個(gè)DNA，其中有2個(gè)DNA攜帶母鏈，只有一種引物，因此產(chǎn)物中同時(shí)含有兩種引物的DNA片段所占比例為14/16＝7/8，C正確；由于同性相斥、異性相吸，帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)，D錯(cuò)誤。5．(2023·江蘇大聯(lián)考)下列關(guān)于DNA的粗提取和DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是(C)A．新鮮的洋蔥、雞血、豬肝等均可作為DNA粗提取的實(shí)驗(yàn)材料B．在提取白色絲狀物時(shí)單向攪拌比雙向攪拌更有利于獲得結(jié)構(gòu)完整的DNAC．PCR實(shí)驗(yàn)中使用的槍頭、蒸餾水和移液器等在使用前都必須進(jìn)行高壓蒸汽滅菌D．PCR產(chǎn)物通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定，將電泳緩沖液加入電泳槽并沒(méi)過(guò)凝膠1mm后，電泳、觀察解析：理論上只要含有DNA的生物組織均可作為該實(shí)驗(yàn)的材料，因此洋蔥、雞血、豬肝等均可作為提取DNA的材料，A正確；由于DNA成絲狀，因此，在提取白色絲狀物時(shí)單向攪拌比雙向攪拌更有利于獲得結(jié)構(gòu)完整的DNA，B正確；PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水等在使用前都必須進(jìn)行高壓滅菌處理，移液器需要清洗，C錯(cuò)誤；PCR產(chǎn)物通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定，將電泳緩沖液加入電泳槽并沒(méi)過(guò)凝膠1mm后，電泳、觀察，這樣可以保證DNA片段在緩沖液中進(jìn)行遷移，D正確。6．如圖是堿裂解法提取大腸桿菌質(zhì)粒DNA的簡(jiǎn)要步驟。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(D)A．堿性試劑2可破壞大腸桿菌的細(xì)胞膜，從而釋放細(xì)胞內(nèi)容物B．試劑3利用了擬核DNA與質(zhì)粒DNA的長(zhǎng)度差異，僅使前者沉淀C．①步驟結(jié)束后應(yīng)敞開(kāi)管蓋，待殘余酒精完全揮發(fā)后再進(jìn)行②步驟D．可用任意濃度的NaCl溶液替換②步驟所用的水，以溶解質(zhì)粒DNA解析：細(xì)胞膜主要由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)構(gòu)成，堿性試劑可導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性而破壞細(xì)胞膜，A正確；擬核中的DNA較大，試劑3處理后在沉淀中，B正確；①步驟利用了DNA不溶解于酒精中的原理，結(jié)束后應(yīng)敞開(kāi)管蓋，待殘余酒精完全揮發(fā)后再進(jìn)行②步驟，可提取到質(zhì)粒DNA，C正確；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在高濃度的NaCl溶液中溶解度高，在特定濃度中處于析出狀態(tài)，需利用2mol·L－1的NaCl溶液溶解，不能用0.14mol·L－1，D錯(cuò)誤。7．大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時(shí)間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是(D)A．提取DNA時(shí)可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B．將提取的DNA溶于2mol·L－1NaCl溶液后，可用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定C．電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理D．根據(jù)電泳結(jié)果，質(zhì)粒上一定沒(méi)有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位點(diǎn)，而有限制酶Ⅲ的切割位點(diǎn)解析：DNA在冷酒精中溶解度很低，提取DNA時(shí)加入酒精是為了讓DNA析出，蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解，A正確；將提取的DNA溶于2mol·L－1NaCl溶液后，可用二苯胺試劑在沸水浴條件下進(jìn)行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，B正確；DNA帶負(fù)電，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理，C正確；因?yàn)橘|(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，該質(zhì)粒上可能有一個(gè)切割位點(diǎn)，也可能沒(méi)有切割位點(diǎn)，D錯(cuò)誤。8．“SDS法”是提取DNA的常用方法，其提取液成分中的SDS能使蛋白質(zhì)變性，EDTA是DNA酶抑制劑，Tris作為緩沖劑。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(D)A．SDS能破壞蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)，從而促進(jìn)DNA和蛋白質(zhì)分離B．EDTA能減少DNA水解，提高DNA的完整性C．Tris作為緩沖劑能維持pH的穩(wěn)定，保證DNA結(jié)構(gòu)正常D．提取到的DNA可在常溫下用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定解析：SDS能使蛋白質(zhì)變性，破壞蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)，從而促進(jìn)DNA和蛋白質(zhì)分離，A正確；EDTA是DNA酶抑制劑，能減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量，B正確；Tris作為緩沖劑能維持pH的穩(wěn)定，可以防止DNA結(jié)構(gòu)被破壞，保證DNA結(jié)構(gòu)正常，C正確；鑒定DNA的方法是沸水浴下用二苯胺試劑鑒定，D錯(cuò)誤。二、多項(xiàng)選擇題9．“關(guān)于DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，下列敘述正確的是(BD)A．羊的成熟紅細(xì)胞可作為提取DNA的材料B．預(yù)冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，可防止DNA水解C．在切碎的洋蔥中加入適量研磨液進(jìn)行研磨，并過(guò)濾后棄去濾液D．沸水浴處理加入DNA粗提物、二苯胺試劑的2mol·L－1NaCl溶液會(huì)變成藍(lán)色解析：羊?yàn)椴溉閯?dòng)物，其成熟紅細(xì)胞不含細(xì)胞核，不能作為提取DNA的材料，A錯(cuò)誤；預(yù)冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止DNA水解，有利于提取更多的DNA，B正確；提取DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽，充分研磨，DNA溶解于氯化鈉溶液，過(guò)濾并取濾液，C錯(cuò)誤；在沸水浴條件下，DNA與二苯胺試劑反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色，D正確。10．(2024·南京六校10月聯(lián)調(diào))下列有關(guān)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的異常結(jié)果及其可能原因的分析，正確的是(ACD)選項(xiàng)實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)異常結(jié)果可能原因A綠葉中色素提取與分離濾紙條上未出現(xiàn)色素帶濾液細(xì)線(xiàn)沒(méi)入層析液中BDNA擴(kuò)增后檢測(cè)(電泳技術(shù))目的亮帶前后拖尾引物設(shè)計(jì)過(guò)短或退火溫度過(guò)高C纖維素分解菌的分離、純化平板培養(yǎng)基表面未出現(xiàn)菌落涂布器涂布時(shí)灼燒未冷卻DDNA粗提取與鑒定鑒定后未出現(xiàn)藍(lán)色實(shí)驗(yàn)未進(jìn)行水浴加熱解析：綠葉中色素提取與分離實(shí)驗(yàn)中，濾液細(xì)線(xiàn)沒(méi)入層析液中，使色素溶解到層析液中，會(huì)導(dǎo)致濾紙條上無(wú)色素帶出現(xiàn)，A正確；PCR過(guò)程中引物過(guò)短會(huì)引起錯(cuò)配現(xiàn)象，導(dǎo)致很多DNA并不是目標(biāo)DNA，如果