DB3707T 078-2023 馬凍精人工授精技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.30CCSB433707RegulationoffrozensemenartificialinseminationinequineIDB3707/T078—2023 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語(yǔ)和定義 4授精基本條件 5輸精準(zhǔn)備 6母馬發(fā)情鑒定 7輸精 8妊娠檢查 9檔案管理 附錄A（資料性）母馬授精記錄 DB3707/T078—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由濰坊市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。本文件起草單位：山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院、濰坊市畜牧業(yè)發(fā)展中心、青島德瑞駿發(fā)生物科技股份有限公司。本文件主要起草人：索佳佳、王福江、董建寶、陶爽、高楠楠、楊萬(wàn)郊、王寶杰、姜八一、鄭艷玲、王文超、郭海鵬、張志鵬、鄒志鋼。3DB3707/T078—2023馬凍精人工授精技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了馬冷凍精液人工授精的術(shù)語(yǔ)和定義、授精基本條件、輸精準(zhǔn)備、母馬發(fā)情鑒定、輸精、妊娠檢查和記錄等操作技術(shù)要求。本文件適用于濰坊市馬凍精人工授精技術(shù)應(yīng)用。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T5458液氮生物容器3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1冷凍精液frozensemen將原精液用稀釋液梯度溫度稀釋、平衡后快速冷凍，在液氮生物容器中保存的精液。冷凍精液包括顆粒冷凍精液和細(xì)管冷凍精液。3.2冷凍精液解凍thawingoffrozensemen冷凍精液使用前使冷凍精子重新恢復(fù)活力的處理方法。4授精基本條件4.1精液品質(zhì)冷凍精液解凍活率大于35%，畸形率低于10%，符合授精精液的要求。4.2母馬應(yīng)選擇身體健康，體格健壯，發(fā)情周期規(guī)律，生殖機(jī)能正常的3歲~10歲未妊娠母馬。4.3授精人員授精人員應(yīng)繁育理論扎實(shí)，授精技術(shù)熟練，輸精操作時(shí)應(yīng)剪短指甲，佩戴長(zhǎng)臂手套。輸精過(guò)程應(yīng)密切關(guān)注馬匹狀態(tài)，確保自身及馬匹安全。4DB3707/T078—20235輸精準(zhǔn)備5.1器具清洗和消毒凡接觸精液和母馬生殖道的輸精用器具應(yīng)進(jìn)行清洗和消毒。5.2冷凍精液貯存冷凍精液應(yīng)貯存在液氮生物容器中，液氮生物容器應(yīng)符合GB/T5458的規(guī)定。包裝好的冷凍精液由一個(gè)液氮容器轉(zhuǎn)換到另一液氮容器時(shí)，在液氮容器外停留時(shí)間不應(yīng)超過(guò)5s。5.3冷凍精液解凍冷凍精液宜37℃水浴1min進(jìn)行解凍。5.4精液質(zhì)量檢查精液質(zhì)量應(yīng)符合4.1的要求。5.5母馬輸精準(zhǔn)備輸精前，應(yīng)將母馬打馬尾綁帶并吊起馬尾，技術(shù)員掏凈母馬直腸宿糞，溫水清洗母馬外陰部并擦拭干凈，用消毒液清洗并擦拭干凈，最后用溫水清洗并擦拭干凈。5.6輸精管準(zhǔn)備一次性常規(guī)輸精管用于凍精淺部輸精，應(yīng)提前置于37℃環(huán)境中。一次性?xún)鼍斁苡糜诩?xì)管冷凍精液的深部輸精，應(yīng)提前置于37℃環(huán)境中。剪去細(xì)管精液封口，剪口應(yīng)正，斷面應(yīng)齊。如需輸入多支精液則精液應(yīng)保存在37℃環(huán)境中。6母馬發(fā)情鑒定6.1B超檢查通過(guò)B超監(jiān)測(cè)子宮體和子宮角狀態(tài)、卵泡大小形狀和卵泡壁狀態(tài)，對(duì)母馬發(fā)情周期進(jìn)行詳細(xì)記錄。通過(guò)對(duì)母馬發(fā)情周期監(jiān)測(cè)預(yù)測(cè)排卵時(shí)間，制定合理的輸精時(shí)間，適時(shí)輸精。6.2外部觀察通過(guò)母馬性情變化、運(yùn)動(dòng)量增大、外陰分泌物增多等變化判斷母馬是否發(fā)情和發(fā)情程度。5DB3707/T078—20237輸精7.1輸精時(shí)間確定B超監(jiān)測(cè)母馬發(fā)情情況及卵泡大小，母馬卵泡大于35mm，密切監(jiān)測(cè)，每6h檢查一次，卵泡壁增厚且開(kāi)始變形時(shí)每2h檢查1次，接近排卵時(shí)，宜增加檢查頻率。輸精時(shí)間應(yīng)盡可能接近排卵時(shí)間。7.2輸精方法7.2.1直腸把握深部輸精法輸精人員宜佩戴一次性長(zhǎng)臂手套，右手握緊輸精管，輸精管頂端壓于食指下方，拇指、中指握緊食指，涂布潤(rùn)滑劑，進(jìn)入陰門(mén)，食指定位子宮頸，以食指引導(dǎo)輸精管進(jìn)入子宮；右手從陰道中退出后進(jìn)入直腸，并在直腸中引導(dǎo)輸精管前進(jìn)方向，左手拇指食指慢慢推入輸精管使其接近卵巢位置；輔助人員將凍精管放入輸精管中，將輸精管內(nèi)芯對(duì)準(zhǔn)凍精管棉塞端，緩慢勻速推進(jìn)內(nèi)芯；如需輸多支凍精則以?xún)?nèi)芯取出凍精管，再放入另一支凍精，以此類(lèi)推，最后緩慢取出輸精管。7.2.2常規(guī)子宮淺部輸精法淺部輸精需輸8支凍精，凍精解凍后，擦干，剪掉封口端及棉塞端，精液自行流下；一次性注射器連接輸精管，先吸入5mL空氣，再吸入精液；輸精人員宜佩戴一次性長(zhǎng)臂手套，右手握緊輸精管，輸精管頂端壓于食指下方，拇指、中指握緊食指，涂布潤(rùn)滑劑，進(jìn)入陰門(mén)，食指定位子宮頸，以食指引導(dǎo)輸精管進(jìn)入子宮，將注射器中的精液全部推入子宮，最后緩慢取出輸精管。7.3輸精部位直腸把握深部輸精法輸精部位在子宮角，常規(guī)輸精法輸精部位在子宮頸以?xún)?nèi)4cm~5cm。8妊娠檢查8.1外部觀察母馬妊娠初期外部表現(xiàn)發(fā)情周期停止，食欲增進(jìn)，毛色潤(rùn)澤，性情變溫和，行為變安穩(wěn)。妊娠中后期腹圍增大，腹壁一側(cè)突出，可觀察到胎動(dòng)，乳房脹大。8.2直腸檢查輸精后連續(xù)2個(gè)情期（40d左右）未發(fā)情，直腸檢查可查出兩側(cè)子宮角不對(duì)稱(chēng)，孕側(cè)子宮角較另側(cè)略大，且柔軟。60d后直腸檢查可查出妊娠子宮增大、胎兒和胎膜。直腸觸摸同側(cè)卵巢較另側(cè)略大，并有妊娠黃體，黃體質(zhì)柔軟、豐滿(mǎn)，頂端能觸感突起物。8.3B超檢查B超檢查母馬的子宮及胎兒、胎動(dòng)、胎心搏動(dòng)，排卵的第11d使用B超應(yīng)檢測(cè)到胚胎，30d左右6DB3707/T078—2023應(yīng)檢測(cè)到胎心搏動(dòng)。9檔案管理母馬號(hào)、母馬