DB32T-傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范 第9部分：應(yīng)急檢測流程

Q/LB.□XXXXX-XXXXDB32/TXXXX—XXXX目次TOC\o"1-1"\h前言 II引言 III1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14總體要求 25發(fā)熱呼吸道癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測 26發(fā)熱伴出疹癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測 37發(fā)熱伴出血癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測 48腹瀉癥候群傳染病突發(fā)公共事件應(yīng)急檢測 59腦炎腦膜炎癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測 7附錄A（資料性）發(fā)熱呼吸道癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測流程 9附錄B（資料性）發(fā)熱伴出疹癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測流程 10附錄C（資料性）發(fā)熱伴出血癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測流程 11附錄D（資料性）腹瀉癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測流程 12附錄E（資料性）腦炎腦膜炎癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測流程 13參考文獻(xiàn) 14前言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是DB32/TXXX《傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》的第9部分。DB32/TXXX已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：監(jiān)測預(yù)警；——第2部分：事件報(bào)告和管理；——第3部分：風(fēng)險(xiǎn)評估；——第4部分：現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查；——第5部分：恢復(fù)評估；——第6部分：應(yīng)急消毒處置及應(yīng)急人員個(gè)人防護(hù)；——第7部分：媒介生物應(yīng)急監(jiān)測、評估與控制；——第8部分：樣本的采集、保存和運(yùn)輸；——第9部分：應(yīng)急檢測流程；——第10部分：病毒類應(yīng)急檢測技術(shù)；——第11部分：細(xì)菌類應(yīng)急檢測技術(shù)。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康委員會(huì)提出并組織實(shí)施。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本文件起草單位：江蘇省疾病預(yù)防控制中心、蘇州市疾病預(yù)防控制中心、無錫市疾病預(yù)防控制中心、淮安市疾病預(yù)防控制中心、徐州市疾病預(yù)防控制中心。本文件主要起草人：朱立國、崔侖標(biāo)、付建光、談忠鳴、沈強(qiáng)、肖勇、楊鵬飛、杜陽光、錢慧敏、李志鋒、李楚楚、秦圓方、洪捷、儲(chǔ)金金。引言傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件是公共衛(wèi)生安全的主要威脅，對社會(huì)、經(jīng)濟(jì)和人群健康會(huì)造成巨大影響。本文件貫徹落實(shí)《中華人民共和國傳染病防治法》《中華人民共和國突發(fā)事件應(yīng)對法》《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例》等法律法規(guī)中對傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件的應(yīng)急處置要求，提升江蘇省傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件的應(yīng)急處置能力，保障人民群眾的生命安全和社會(huì)穩(wěn)定而制定。DB32/TXXX《傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》分為以下11個(gè)部分：——第1部分：監(jiān)測預(yù)警；——第2部分：事件報(bào)告和管理；——第3部分：風(fēng)險(xiǎn)評估；——第4部分：現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查；——第5部分：恢復(fù)評估；——第6部分：應(yīng)急消毒處置及應(yīng)急人員個(gè)人防護(hù)；——第7部分：媒介生物應(yīng)急監(jiān)測、評估與控制；——第8部分：樣本的采集、保存和運(yùn)輸；——第9部分：應(yīng)急檢測流程；——第10部分：病毒類應(yīng)急檢測技術(shù)；——第11部分：細(xì)菌類應(yīng)急檢測技術(shù)。DB32/TXXX的制定是對傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件處置工作相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的有力補(bǔ)充，為開展傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件的監(jiān)測預(yù)警、報(bào)告和管理、風(fēng)險(xiǎn)評估、現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查、恢復(fù)評估、應(yīng)急消毒處置和個(gè)人防護(hù)、媒介生物的應(yīng)急監(jiān)測評估與控制、樣本的采集和檢測等應(yīng)急處置工作提供有力的科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支撐，對保障公眾健康和公共衛(wèi)生安全具有重要意義。傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范第9部分：應(yīng)急檢測流程范圍本文件規(guī)定了傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置中應(yīng)急檢測流程的總體要求和以發(fā)熱呼吸道癥候群、發(fā)熱伴出疹癥候群、發(fā)熱伴出血癥候群、腹瀉癥候群、腦炎腦膜炎癥候群為特征的傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測流程的技術(shù)要求。本文件適用于發(fā)熱呼吸道癥候群、發(fā)熱伴出疹癥候群、發(fā)熱伴出血癥候群、腹瀉癥候群、腦炎腦膜炎癥候群等五大類癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測。規(guī)范性引用文件本文件沒有規(guī)范性引用文件。術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。

傳染病infectiousdisease由病原微生物（如病毒、細(xì)菌、真菌、寄生蟲、朊病毒等）感染人體后產(chǎn)生的有傳染性、在一定條件下可造成流行的疾病。

傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件emergencypublichealtheventcausedbyinfectiousdiseases突然發(fā)生，造成或者可能造成社會(huì)公眾健康嚴(yán)重?fù)p害的事件。在一定時(shí)間內(nèi)，在某個(gè)相對集中的區(qū)域內(nèi)，同時(shí)或者相繼出現(xiàn)具有共同臨床表現(xiàn)病人，且病例不斷增加，范圍不斷擴(kuò)大，又暫時(shí)不能明確診斷的疾病。這類疾病往往具有傳播速度快、影響范圍廣的特點(diǎn)。

發(fā)熱呼吸道癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件emergencypublichealtheventcausedbyfeverwithrespiratorysyndromeinfectiousdiseases以發(fā)熱呼吸道癥候群為特征的傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件（3.2）。

發(fā)熱伴出疹癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件emergencypublichealtheventcausedbyfeverwithrashsyndromeinfectiousdiseases以發(fā)熱伴出疹癥候群為特征的傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件（3.2）。

發(fā)熱伴出血癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件emergencypublichealtheventcausedbyfeverwithbleedingsyndromeinfectiousdiseases以發(fā)熱伴出血癥候群為特征的傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件（3.2）。

腹瀉癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件emergencypublichealtheventcausedbydiarrheasyndromeinfectiousdiseases以腹瀉癥候群為特征的傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件（3.2）。

腦炎腦膜炎癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件emergencypublichealtheventcausedbyencephalitisandmeningitissyndromeinfectiousdiseases以腦炎腦膜炎癥候群為特征的傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件（3.2）?？傮w要求根據(jù)突發(fā)公共衛(wèi)生事件涉事人群的癥候群應(yīng)確定需要采集的樣本、檢測的目標(biāo)病原體，宜進(jìn)行多病原核酸檢測，并對核酸檢測結(jié)果陽性的樣本開展病原分離鑒定，對核酸檢測結(jié)果陰性的樣本開展宏基因組測序，及時(shí)報(bào)告檢測結(jié)果。附錄A~附錄E分別給出了發(fā)熱呼吸道癥候群、發(fā)熱伴出疹癥候群、發(fā)熱伴出血癥候群、腹瀉癥候群、腦炎腦膜炎癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測流程。發(fā)熱呼吸道癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測細(xì)菌學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)細(xì)菌所采集的樣本包括但不限于痰液、鼻咽拭子、口咽拭子、鼻咽抽吸物、支氣管肺泡灌洗液、胸腔穿刺液、全血和尿液。檢測的目標(biāo)細(xì)菌包括但不限于肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、釀膿鏈球菌、百日咳鮑特菌、流感嗜血桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、肺炎支原體、肺炎衣原體、鸚鵡熱衣原體、隱球菌、曲霉菌和肺孢子菌。多病原核酸檢測結(jié)合流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)樣本，提取核酸，使用普通聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、熒光定量PCR及測序等核酸檢測技術(shù)確定是否可檢測到5.1.1.2中目標(biāo)細(xì)菌的特異性核酸序列。分離培養(yǎng)采集的全血樣本，無菌操作接種血培養(yǎng)瓶進(jìn)行培養(yǎng)。對陽性血培養(yǎng)物進(jìn)行固體培養(yǎng)基分離純化，對陰性血培養(yǎng)物盲傳一代。痰液、鼻咽抽提物、支氣管肺泡灌洗液、胸腔穿刺液樣本經(jīng)預(yù)處理后，均接種到血瓊脂培養(yǎng)基、巧克力瓊脂培養(yǎng)基等相應(yīng)培養(yǎng)基，置于適宜的溫度、濕度和氣體環(huán)境中培養(yǎng)。常規(guī)使用下呼吸道樣本（深咳痰液、支氣管肺泡灌洗液等）進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，對百日咳鮑特菌宜使用鼻咽拭子進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)菌鑒定形態(tài)鑒定在選擇性培養(yǎng)基上，觀察菌落形態(tài)特征，并挑取典型菌落進(jìn)行細(xì)菌染色鏡檢。生化鑒定對于分離到的細(xì)菌，使用全自動(dòng)生化鑒定儀、商品化生化鑒定試劑進(jìn)行鑒定，確定細(xì)菌種屬和主要生化特征。質(zhì)譜鑒定對于分離到的細(xì)菌，使用全自動(dòng)質(zhì)譜儀快速鑒定細(xì)菌種屬。核酸鑒定對于分離到的細(xì)菌，提取核酸，使用普通PCR或熒光定量PCR進(jìn)行基于種屬的基因檢測。可使用商品化細(xì)菌特征基因檢測試劑、經(jīng)過驗(yàn)證的引物探針或基因測序?qū)?xì)菌特征基因進(jìn)行檢測。細(xì)菌免疫學(xué)檢測使用玻片凝集、乳膠凝集等方法，檢測血液樣本中細(xì)菌的特異性抗原，使用直接凝集、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）等方法，檢測血液樣本中特異性抗體。對尿液樣本，開展支原體、衣原體、嗜肺軍團(tuán)菌和肺炎鏈球菌尿抗原檢測。病毒學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)病毒所采集的樣本包括但不限于鼻咽拭子、口咽拭子、咽漱液、肺泡灌洗液、深部痰液、血清、全血。檢測的目標(biāo)病毒包括但不限于新型冠狀病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、偏肺病毒、其他人感染冠狀病毒、博卡病毒和鼻病毒。多病原核酸檢測結(jié)合流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)樣本，提取核酸，使用熒光定量PCR確定是否可檢測到5.2.1.2中病毒保守區(qū)特異性片段或者變異區(qū)目標(biāo)片段靶序列。病毒抗原檢測采用免疫學(xué)標(biāo)記技術(shù)直接檢測樣本中的病毒抗原，常用方法主要包括免疫層析、酶免疫測定、熒光免疫測定、放射免疫測定、化學(xué)發(fā)光和蛋白免疫印跡。病毒抗體檢測運(yùn)用酶免疫測定、化學(xué)發(fā)光等方法，開展中和試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)，檢測IgM、IgG和IgA等抗體。陰性樣本檢測策略在多病原核酸檢測結(jié)果均為陰性時(shí)，宜提取核酸進(jìn)行宏基因組測序。檢測結(jié)果報(bào)告檢測結(jié)束后應(yīng)報(bào)告檢測結(jié)果。發(fā)熱伴出疹癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測細(xì)菌學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)細(xì)菌所采集的樣本包括但不限于咽拭子、血液、皰疹液、糞便、皮膚化膿性病灶膿液和尿液。檢測的目標(biāo)細(xì)菌包括但不限于釀膿鏈球菌、傷寒沙門菌和副傷寒沙門菌。多病原核酸檢測按照5.1.2執(zhí)行。分離培養(yǎng)宜在患者使用抗生素之前采集樣本。采集的樣本可直接劃線接種選擇性平板，或/和進(jìn)行選擇性增菌培養(yǎng)后分離鑒定。血液樣本宜接種血培養(yǎng)瓶。細(xì)菌鑒定按照5.1.4執(zhí)行。細(xì)菌免疫學(xué)檢測使用商品化病原菌診斷血清，通過玻片凝集試驗(yàn)，對病原菌進(jìn)行型、種（群）和屬鑒定。如分離到傷寒沙門菌、副傷寒沙門菌等均需進(jìn)行血清分型，釀膿鏈球菌可以使用M蛋白血清進(jìn)行血清分型。病毒學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)病毒所采集的樣本包括但不限于皰疹液、口咽拭子、咽漱液、肺泡灌洗液、血清、全血、糞便和肛拭子。檢測的目標(biāo)病毒包括但不限于漢坦病毒、登革病毒、猴痘病毒、麻疹病毒、風(fēng)疹病毒、腸道病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、人類小DNA病毒B19、EB病毒、人皰疹病毒6型和埃博拉病毒。多病原核酸檢測結(jié)合流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)的樣本，提取核酸，使用熒光定量PCR及測序等核酸檢測技術(shù)確定是否可檢測到6.2.1.2中病毒保守區(qū)特異性片段或者變異區(qū)目標(biāo)片段靶序列。病毒抗原檢測若有相關(guān)流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)的樣本，用膠體金或ELISA方法檢測6.2.1.2中的目標(biāo)病毒抗原。病毒抗體檢測結(jié)合流行病學(xué)史，若采集發(fā)病7d后的血樣或雙份血樣，用膠體金或ELISA檢測6.2.1.2中的目標(biāo)病毒IgG和/或IgM抗體。陰性樣本檢測策略按照5.3執(zhí)行。檢測結(jié)果報(bào)告按照5.4執(zhí)行。發(fā)熱伴出血癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測細(xì)菌學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)細(xì)菌所采集的樣本包括但不限于腦脊液、血液、組織樣本、咽拭子、糞便樣本和肛拭子。檢測的目標(biāo)細(xì)菌包括但不限于鼠疫耶爾森菌、腦膜炎奈瑟菌、鉤端螺旋體和豬鏈球菌。多病原核酸檢測結(jié)合流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)樣本，提取核酸，使用普通PCR、熒光定量PCR及測序等核酸檢測技術(shù)確定是否可檢測到7.1.1.2目標(biāo)細(xì)菌等特異性核酸序列。分離培養(yǎng)對腦脊液、血液、組織樣本、咽拭子、糞便樣本和肛拭子等樣本，通過直接培養(yǎng)或增菌培養(yǎng)的方式，針對不同細(xì)菌采用不同分離程序，得到細(xì)菌純培養(yǎng)物。細(xì)菌鑒定鑒定方法包括鏡檢、生化鑒定、質(zhì)譜鑒定、血清分型、噬菌體鑒定和基于種屬的核酸鑒定等。病毒學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)病毒所采集的樣本包括但不限于口咽拭子、咽漱液、肺泡灌洗液、血清和全血。檢測的目標(biāo)病毒包括但不限于漢坦病毒、登革病毒、克里米亞-剛果出血熱病毒、大別班達(dá)病毒和埃博拉病毒。多病原核酸檢測結(jié)合流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)的樣本，提取核酸，使用熒光定量PCR及測序等核酸檢測技術(shù)確定是否可檢測到7.2.1.2中目標(biāo)病毒保守區(qū)特異性片段或者變異區(qū)目標(biāo)片段靶序列。病毒抗原檢測若有相關(guān)流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)的樣本，用膠體金或ELISA檢測7.2.1.2中病毒抗原。病毒抗體檢測結(jié)合流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d后的血樣或雙份血樣，用膠體金或ELISA檢測7.2.1.2中病毒IgG與IgM抗體。陰性樣本檢測策略按照5.3執(zhí)行。檢測結(jié)果報(bào)告按照5.4執(zhí)行。腹瀉癥候群傳染病突發(fā)公共事件應(yīng)急檢測細(xì)菌學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)細(xì)菌所采集的樣本包括但不限于糞便、肛拭子。檢測的目標(biāo)細(xì)菌包括但不限于沙門菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、致瀉性弧菌、嗜水氣單胞菌、類志賀鄰單胞菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌、致瀉性大腸埃希菌、志賀菌、空腸彎曲菌、結(jié)腸彎曲菌等病原體。多病原核酸檢測結(jié)合流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)樣本，提取核酸，使用普通PCR、熒光定量PCR及測序等核酸檢測技術(shù)確定是否可檢測到8.1.1.2中目標(biāo)細(xì)菌的特異性核酸序列。分離培養(yǎng)采集便樣本或肛拭子等樣本，通過直接培養(yǎng)或選擇性增菌培養(yǎng)的方式，針對不同細(xì)菌采用不同培養(yǎng)基和分離程序，得到細(xì)菌純培養(yǎng)物。細(xì)菌鑒定形態(tài)鑒定按照5.1.4.1執(zhí)行。生化鑒定按照5.1.4.2執(zhí)行。質(zhì)譜鑒定按照5.1.4.3執(zhí)行。核酸鑒定按照5.1.4.4執(zhí)行。細(xì)菌血清分型使用病原菌特異的分型血清進(jìn)行玻片凝集，進(jìn)行血清分型。分離到的非傷寒沙門菌、致瀉性大腸埃希菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、志賀菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌等均需進(jìn)行血清分型。病毒學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)病毒所采集的樣本包括但不限于糞便、肛拭子、嘔吐物。檢測的目標(biāo)病毒包括但不限于輪狀病毒、諾如病毒、星狀病毒、扎如病毒、腸道腺病毒。多病原核酸檢測結(jié)合流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)樣本，提取核酸，使用熒光定量PCR或RT-PCR檢測方法確定是否可檢測到8.2.1.2中目標(biāo)病毒保守區(qū)特異性片段或者變異區(qū)目標(biāo)片段靶序列。病毒抗原檢測采用免疫學(xué)標(biāo)記技術(shù)直接檢測樣本中的病毒抗原，主要針對輪狀病毒、諾如病毒及腸道腺病毒，常用方法包括免疫層析、酶免疫測定、熒光免疫測定、放射免疫測定、化學(xué)發(fā)光和蛋白免疫印跡。陰性樣本檢測策略按照5.3執(zhí)行。檢測結(jié)果報(bào)告按照5.4執(zhí)行。腦炎腦膜炎癥候群傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急檢測細(xì)菌學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)細(xì)菌所采集的樣本包括但不限于腦脊液、血液。不能及時(shí)送檢的樣本應(yīng)置于15℃~30℃的溫度環(huán)境，不應(yīng)冷藏或冷凍保存。疑似感染腦膜炎奈瑟菌病例的樣本應(yīng)置于25℃~35℃的溫度環(huán)境。檢測的目標(biāo)細(xì)菌包括但不限于腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌、b型流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、豬鏈球菌、大腸埃希菌。多病原核酸檢測結(jié)合流行病學(xué)史，可采集發(fā)病7d內(nèi)樣本，提取核酸，使用普通PCR、熒光定量PCR及測序等核酸檢測技術(shù)確定是否可檢測到9.1.1.2中目標(biāo)細(xì)菌的特異性核酸序列。不同樣本的細(xì)菌學(xué)檢測策略腦脊液樣本腦脊液樣本按兩種方法進(jìn)行接種，液體肉湯接種在采樣時(shí)完成，固體培養(yǎng)基平板接種在樣本送至實(shí)驗(yàn)室后進(jìn)行。對接種后的腦脊液進(jìn)行培養(yǎng)，陽性培養(yǎng)物再進(jìn)一步分離培養(yǎng)，將分離到的細(xì)菌根據(jù)其菌落形態(tài)、革蘭氏染色、生化反應(yīng)和質(zhì)譜等進(jìn)行鑒定。對于腦脊液，多余的沉淀和上清液不可丟棄，可留作乳膠凝集實(shí)驗(yàn)和PCR檢測。血液樣本全血樣本在采樣時(shí)應(yīng)置入血培養(yǎng)瓶。對接種后的血培養(yǎng)物進(jìn)行培養(yǎng)，無菌操作吸取少許陽性血培養(yǎng)物進(jìn)行革蘭染色鏡檢，并在血平板和巧克力平板上進(jìn)行分離培養(yǎng)，對于分離到的細(xì)菌應(yīng)根據(jù)其菌落形態(tài)、革蘭氏染色、生化反應(yīng)和質(zhì)譜等進(jìn)行鑒定。病毒學(xué)檢測檢測樣本和目標(biāo)病毒所采集的樣本包括但不限于腦脊液、血液、咽拭子和糞便。檢測的目標(biāo)病毒包括但不限于乙腦病毒、腸道病毒、腮腺炎病毒和單純皰疹病毒。多病原核酸檢測結(jié)合流行病學(xué)史，采集發(fā)病7d內(nèi)樣本，提取核酸，使用熒光定量PCR或RT-PCR檢測方法確定是否可檢測到9.2.1.2中病毒保守區(qū)特異性片段或者變異區(qū)目標(biāo)片段靶序列。病毒抗原檢測按照5.2.3執(zhí)行。病毒抗體檢測對于腦炎腦膜炎癥候群的病毒檢測，凡取到急性期與恢復(fù)期雙份血清的病例，應(yīng)用血清學(xué)方法檢測特異性抗體升高倍數(shù)。對乙腦病毒、腮腺炎病毒、腸道病毒和單純皰疹病毒等病原體可按推薦的ELISA試劑盒進(jìn)行雙份血清的抗體滴度