DB32T-核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范 第8部分：外周血采集和生物劑量估算

Q/LB.□XXXXX-XXXXDB32/TXXXX.8—XXXX目次TOC\o"1-1"\h前言 II引言 III1范圍 42規(guī)范性引用文件 43術(shù)語(yǔ)和定義 44外周血采集前準(zhǔn)備 55外周血采集 56運(yùn)輸和保存 57生物劑量估算總則 68生物劑量估算流程 69生物劑量估算質(zhì)量控制 6附錄A（資料性） 8參考文獻(xiàn) 9前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是DB32/TXXXX《核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》的第8部分。DB32/TXXXX已經(jīng)發(fā)布了以下部分：第1部分：應(yīng)急隊(duì)伍建設(shè)；第2部分：應(yīng)急人員防護(hù)與個(gè)人劑量監(jiān)測(cè)；第3部分：現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查；第4部分：人員體表放射性核素污染監(jiān)測(cè)與去污；第5部分：食品和飲用水監(jiān)測(cè)；第6部分：輻射防護(hù)站設(shè)置；第7部分：穩(wěn)定性碘的使用指導(dǎo)；第8部分：外周血采集和生物劑量估算。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康委員會(huì)提出并組織實(shí)施。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本文件起草單位：江蘇省疾病預(yù)防控制中心、江蘇省腫瘤醫(yī)院、徐州市疾病預(yù)防控制中心、南京醫(yī)科大學(xué)。本文件主要起草人：陳維、周媛媛、劉雅紅、陳群、王進(jìn)、范向勇、繆雨季、馮子雅、史曉東、王福如、錢(qián)如倍、魏鑫狄、邱天元、張子豪。

引言隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和科技的進(jìn)步，核與輻射技術(shù)在各行各業(yè)的應(yīng)用日益廣泛。然而，核與輻射突發(fā)事件時(shí)有發(fā)生，對(duì)人類(lèi)的生命和健康造成了危害，對(duì)社會(huì)穩(wěn)定和發(fā)展構(gòu)成了威脅。為確保核能與核技術(shù)應(yīng)用的安全發(fā)展，我國(guó)制定了一系列的法律和法規(guī)，出臺(tái)了大量的安全防護(hù)和應(yīng)急標(biāo)準(zhǔn)等，做到安全防護(hù)和應(yīng)急有法可依、規(guī)則先行，為我國(guó)核與輻射技術(shù)應(yīng)急發(fā)展提供了堅(jiān)實(shí)保障。核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急是該類(lèi)事件應(yīng)急的重要組成部分，為人民群眾的身體健康和生命安全提供重要保障。DB32/TXXXX《核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》為完善我省核與輻射衛(wèi)生應(yīng)急隊(duì)伍建設(shè)，規(guī)范應(yīng)急處置工作流程，最大限度減少人員傷亡而制定，擬由八個(gè)部分構(gòu)成。第1部分：應(yīng)急隊(duì)伍建設(shè)。第2部分：應(yīng)急人員防護(hù)與個(gè)人劑量監(jiān)測(cè)。第3部分：現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查。第4部分：人員體表放射性核素污染監(jiān)測(cè)與去污。第5部分：食品和飲用水監(jiān)測(cè)。第6部分：輻射防護(hù)站設(shè)置。第7部分：穩(wěn)定性碘的使用指導(dǎo)。第8部分：外周血采集和生物劑量估算。在核與輻射突發(fā)事件應(yīng)急處置中，生物劑量估算是通過(guò)外周血淋巴細(xì)胞染色體畸變分析等方法，快速、準(zhǔn)確、有效地估算受照人員的受照劑量，為評(píng)估病情、制定治療方案提供依據(jù)。該標(biāo)準(zhǔn)的制定有助于完善核與輻射突發(fā)事件的應(yīng)急管理體系。通過(guò)規(guī)范應(yīng)急情況下受照人員外周血采集及生物劑量估算的要求和方法，提高應(yīng)急情況下人員外周血采集和生物劑量估算的效率和準(zhǔn)確性，在緊急情況下能夠迅速、有效地進(jìn)行劑量估算。核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范第8部分：外周血采集和生物劑量估算范圍本文件規(guī)定了核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急情況下受照人員外周血采集及生物劑量估算的要求和方法。本文件適用于核與輻射突發(fā)事件衛(wèi)生應(yīng)急情況下受照人員外周血采集和生物劑量估算。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T28236染色體畸變估算生物劑量方法GBZ2.1工作場(chǎng)所有害因素職業(yè)接觸限值第1部分：化學(xué)有害因素GBZ98放射工作人員健康要求及監(jiān)護(hù)規(guī)范GBZ/T328放射工作人員職業(yè)健康檢查外周血淋巴細(xì)胞微核檢測(cè)方法與受照劑量估算標(biāo)準(zhǔn)WS/T615輻射生物劑量估算早熟染色體凝集環(huán)分析法WS/T661靜脈血液標(biāo)本采集指南術(shù)語(yǔ)和定義GB/T28236、WS/T615、WS/T661界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。采集前準(zhǔn)備耗材外周血采集所需耗材包括但不限于：一次性注射器、止血帶、75%醫(yī)用酒精、3%碘酊、真空采血管、試管架、抗凝試管、一次性乳膠手套、無(wú)菌棉簽或棉球、標(biāo)記筆、銳器盒。采集人員防護(hù)采集人員個(gè)人防護(hù)應(yīng)按照WS/T661執(zhí)行。采集場(chǎng)所應(yīng)選擇安全可靠、無(wú)污染的建筑物作為采集場(chǎng)所，特殊情況下可在野外搭建的臨時(shí)場(chǎng)所內(nèi)開(kāi)展采集工作。采集程序受照人員應(yīng)在現(xiàn)場(chǎng)盡早采集外周靜脈血。采樣人員應(yīng)核對(duì)受照人員信息，對(duì)樣品進(jìn)行標(biāo)識(shí)，告知受照人員采集目的和注意事項(xiàng)。采樣人員通過(guò)便攜式表面污染測(cè)量?jī)x測(cè)量采樣部位污染情況。如有污染應(yīng)在去污后采樣，具體方法按照DB32/TXXXX.4—2024的規(guī)定執(zhí)行。外周血采集時(shí)間宜在48h之內(nèi)。血樣應(yīng)使用肝素抗凝管，每項(xiàng)檢測(cè)方法需采血量2mL，采集后顛倒搖勻。采樣后使用無(wú)菌棉球或棉簽按壓采血部位。記錄血樣采集信息，包括采集時(shí)間、采集人員、受照人員信息。保存和運(yùn)輸標(biāo)本采集后應(yīng)立即放入鉛屏蔽生物采樣箱，保存溫度18℃～24℃，保存時(shí)間不宜超過(guò)72h。鉛屏蔽生物采樣箱應(yīng)放置在無(wú)污染區(qū)指定位置，專(zhuān)人保管。采樣箱表面應(yīng)張貼醒目的標(biāo)識(shí)：“生物樣品，易損，防損壞，避免X射線(xiàn)”。保管人員與轉(zhuǎn)運(yùn)人員交接血樣時(shí)應(yīng)核對(duì)標(biāo)本數(shù)量及完好狀態(tài)，雙方簽字確認(rèn)。應(yīng)由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的專(zhuān)人負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)，盡快運(yùn)輸?shù)街付ǖ攸c(diǎn)。運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)符合血樣儲(chǔ)存條件，關(guān)注樣本儲(chǔ)存狀態(tài)。移交轉(zhuǎn)運(yùn)人員到達(dá)實(shí)驗(yàn)室后，應(yīng)與專(zhuān)人核對(duì)移交，雙方簽字確認(rèn)。每份樣本應(yīng)有唯一編號(hào)，編碼規(guī)則由實(shí)驗(yàn)室制定。生物劑量估算基本要求外周血淋巴細(xì)胞染色體和微核培養(yǎng)條件、制片方法和分析判斷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)與建立刻度-曲線(xiàn)時(shí)相同。應(yīng)選擇和事故條件接近的刻度曲線(xiàn)進(jìn)行劑量估算，只能在曲線(xiàn)劑量范圍內(nèi)應(yīng)用，不得外推。綜合受照人員的早期癥狀及其嚴(yán)重程度（例如嘔吐出現(xiàn)時(shí)間）、臨床特征、外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)等綜合判斷，快速選擇生物劑量估算的方法。生物劑量估算流程生物劑量估算人員選擇事故現(xiàn)場(chǎng)所有人員連續(xù)3次全血細(xì)胞計(jì)數(shù)異常者應(yīng)進(jìn)行生物劑量估算,血細(xì)胞計(jì)數(shù)異常判斷按照GBZ98執(zhí)行。送到場(chǎng)外醫(yī)學(xué)應(yīng)急醫(yī)療機(jī)構(gòu)的傷情危重人員應(yīng)就地血常規(guī)檢查，該類(lèi)人員第一次淋巴細(xì)胞檢查應(yīng)在使用腎上腺皮質(zhì)激素或輻射損傷防治藥物前進(jìn)行。生物劑量估算方法染色體畸變分析法外周血淋巴細(xì)胞染色體畸變分析法估算按照GB/T28236執(zhí)行。淋巴細(xì)胞微核分析法外周血淋巴細(xì)胞微核檢測(cè)估算按照GBZ/T328執(zhí)行。早熟染色體凝集環(huán)分析法早熟染色體凝集環(huán)估算生物劑量按照WS/T615執(zhí)行。生物劑量估算質(zhì)量控制人員要求檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有2名（含）以上專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員，專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員應(yīng)具有輻射細(xì)胞遺傳學(xué)的基本知識(shí)和實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)，受過(guò)專(zhuān)業(yè)訓(xùn)練，能準(zhǔn)確識(shí)別輻射誘發(fā)的各種染色體畸變、早熟染色體凝集環(huán)和微核細(xì)胞，準(zhǔn)確記錄染色體畸變細(xì)胞及微核細(xì)胞坐標(biāo)。儀器設(shè)備要求儀器設(shè)備要求應(yīng)符合附錄A的規(guī)定。染色體制片和閱片要求合格中期細(xì)胞的選擇。染色體數(shù)目為46±1；染色體分散良好，長(zhǎng)短粗細(xì)適中，背景干凈，各條染色體可清楚辨認(rèn)。染色體制片每樣本應(yīng)檢出不少于200個(gè)合格中期分裂細(xì)胞。人工閱片的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)畸變細(xì)胞拍照，并在原始記錄和圖片文件名中標(biāo)明顯微鏡編號(hào)、樣本編號(hào)、畸變細(xì)胞坐標(biāo)、畸變類(lèi)型和數(shù)目。全自動(dòng)染色體掃描分析系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室需要在原始記錄上記錄顯微鏡編號(hào)、樣本編號(hào)、畸變細(xì)胞號(hào)、畸變類(lèi)型和數(shù)目，對(duì)畸變細(xì)胞標(biāo)注后保存，并需保存所有樣本高倍中期細(xì)胞圖片。染色體畸變應(yīng)由兩名以上技術(shù)人員復(fù)核確認(rèn)。染色體畸變分析估算劑量范圍為0.1Gy～5.0Gy，事故后宜48h之內(nèi)取血，最遲不超過(guò)60天。染色體畸變分析劑量估算原始記錄的格式應(yīng)按照GB/T28236執(zhí)行。微核制片和閱片要求微核制片每樣本應(yīng)檢出不少于1000個(gè)合格單核淋巴細(xì)胞。人工閱片的實(shí)驗(yàn)室需對(duì)微核細(xì)胞拍照，并在原始記錄上記錄顯微鏡編號(hào)、樣本編號(hào)、微核細(xì)胞坐標(biāo)。使用微核自動(dòng)掃描分析系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室需要在原始記錄上記錄顯微鏡編號(hào)、樣本編號(hào)、微核細(xì)胞號(hào)，并需保存所有樣本單核淋巴細(xì)胞圖片。使用微核自動(dòng)掃描分析系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室需對(duì)單核淋巴細(xì)胞和微核圖像人工分析判定，不應(yīng)僅通過(guò)軟件識(shí)別。淋巴細(xì)胞微核法估算劑量范圍為0.25Gy～5.0Gy，事故后宜3天內(nèi)取血，最遲不超過(guò)4周。原始記錄的格式應(yīng)按照GBZ/T328執(zhí)行。早熟染色體制片和閱片要求早熟染色體制片每樣本應(yīng)檢出不少于200個(gè)合格中期分裂細(xì)胞。早熟染色體凝集環(huán)分為空心環(huán)和實(shí)心環(huán)。在分析時(shí)不應(yīng)計(jì)數(shù)實(shí)心環(huán)。檢測(cè)到早熟染色體凝集環(huán)時(shí)，需要進(jìn)行拍照。將選擇分析的每一個(gè)早熟染色體凝集分裂相記錄在早熟染色體凝集環(huán)分析記錄表中。早熟染色體凝集環(huán)分析法估算劑量范圍為4Gy～20Gy，事故后應(yīng)盡早取血，最遲不超過(guò)1月。早熟染色體凝集環(huán)分析記錄表和檢測(cè)報(bào)告應(yīng)按照WS/T615執(zhí)行。

（資料性）

儀器設(shè)備要求儀器設(shè)備要求見(jiàn)表A.1。儀器設(shè)備要求儀器設(shè)備技術(shù)指標(biāo)要求必備/選配生物安全柜或超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái)首選雙人雙面、垂直送風(fēng)必備恒溫培養(yǎng)箱應(yīng)選擇隔水式恒溫培養(yǎng)箱，二氧化碳培養(yǎng)箱更佳必備離心機(jī)應(yīng)選擇可放置15mL離心管的水平式離心機(jī)必備光學(xué)顯微鏡自帶電源和坐標(biāo)尺，油鏡清晰（63倍或100倍），配備高分辨率數(shù)碼攝像裝置必備冰箱4℃普通冰箱和-20℃低溫冰箱必備電子天平可讀性1mg必備負(fù)壓移液裝置或真空吸液泵/必備排風(fēng)裝置通風(fēng)櫥、排風(fēng)罩等，使工作場(chǎng)所有毒物質(zhì)濃度符合《工作場(chǎng)所有害因素職業(yè)接觸限值第1部分：化學(xué)有害因素》（GBZ2.1）要求必備便攜式培養(yǎng)箱溫度可控制在18℃-24℃選配滅菌設(shè)備電熱箱（有空氣強(qiáng)制對(duì)流裝置）、熱壓蒸汽滅菌器或環(huán)氧乙烷滅菌器等選配渦旋混合器/選配水浴鍋（箱）/選配全自動(dòng)染色體掃描分析系統(tǒng)、細(xì)胞自動(dòng)收獲儀、自動(dòng)制片機(jī)、自動(dòng)染片機(jī)