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酶的應(yīng)用和生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用1.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時不必知道基因的全部序列。()【答案】√分析:DNA復(fù)制沿著模板進(jìn)行,不必知道基因的全部序列。2.關(guān)于高中生物學(xué)試驗的基本原理,提取組織DNA是利用不同化合物在溶劑中溶解度的差異。()【答案】√分析:DNA在0.14mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低,使DNA析出;DNA不溶于酒精,而細(xì)胞中某些蛋白質(zhì)溶于酒精,從而得到含雜質(zhì)較少的DNA。3.探討加酶洗衣粉和一般洗衣粉的洗滌效果時,在相同pH時,加酶洗衣粉效果好于一般洗衣粉。()【答案】×分析:酶的活性受溫度、pH等其他因素的影響,所以只有pH相同時加酶洗衣粉的洗滌效果不肯定好于一般洗衣粉。4.在植物組織培育中,為了誘導(dǎo)菊花試管苗生根,培育基中一般不加入IAA。()【答案】×分析:在植物組織培育中,為了誘導(dǎo)菊花試管苗生根,培育基中一般加入生長素和細(xì)胞分裂素。5.在酶的制備和應(yīng)用中,透析、電泳和酸解等方法常用于酶的分別和純化。()【答案】×分析:多數(shù)酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì),所以透析和電泳法可用于酶的分別和純化,但酸解會破壞酶的結(jié)構(gòu)。6.在植物組織培育中,二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株。()【答案】×分析:二倍體植株的花粉細(xì)胞中只含有一個染色體組,培育得到的個體為單倍體,高度不育,其幼苗需用秋水仙素或低溫處理后才能穩(wěn)定遺傳。7.在植物組織培育中,以花粉作為外植體可得到單倍體植株。()【答案】√分析:以單個花粉粒作為外植體進(jìn)行離體培育,由于花粉已是單倍體細(xì)胞,誘發(fā)它經(jīng)愈傷組織或胚狀體發(fā)育而成的植株都是單倍體。8.利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵,糖類的作用只是作為反應(yīng)底物。()【答案】×分析:利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵時,糖類的作用除作為反應(yīng)底物外,還為酵母菌的生長繁殖供應(yīng)物質(zhì)和能量。酶的應(yīng)用及固定化技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用【典例1】(2022·哈爾濱模擬)下面是制備固定化酵母細(xì)胞的試驗步驟,請回答:酵母細(xì)胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞(1)在________狀態(tài)下,微生物處于休眠狀態(tài)?;罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復(fù)________________________狀態(tài)?;罨皯?yīng)選擇足夠大的容器,由于酵母細(xì)胞活化時________。固定化細(xì)胞技術(shù)一般接受________法,而固定化酶常用________法和________法。(2)影響試驗成敗的關(guān)鍵步驟是________。海藻酸鈉溶化過程的留意事項是________。假如海藻酸鈉濃度過低,形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞數(shù)目____________。假如形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,說明____________。(3)該試驗中CaCl2溶液的作用是____________________________________________________________________________________________________?!窘馕觥?1)在缺水的狀態(tài)下,微生物處于休眠狀態(tài)?;罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。活化前應(yīng)選擇足夠大的容器,由于酵母細(xì)胞活化時體積會增大,以免漲破容器或溢出。固定化細(xì)胞技術(shù)一般接受包埋法,固定化酶常用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。這是由于細(xì)胞個大,而酶分子很小;個大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合,而個小的酶簡潔從包埋材料中漏出。(2)影響試驗成敗的關(guān)鍵是配制海藻酸鈉溶液,這是由于假如海藻酸鈉濃度過高,很難形成凝膠珠;假如濃度過低,形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少,影響試驗效果。(3)CaCl2溶液的作用是使膠體聚沉?!敬鸢浮?1)缺水正常的生活體積會增大包埋化學(xué)結(jié)合物理吸附(2)配制海藻酸鈉溶液小火加熱(或間斷加熱或小火間斷加熱)不斷攪拌較少(海藻酸鈉濃度偏高)制作失敗(3)使膠體聚沉(或形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu))(1)固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)常用的方法有哪些?(2)加熱海藻酸鈉溶解的過程中,加熱方法有何要求?【答案】(1)提示:包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。(2)提示:使用小火加熱或間斷加熱(小火間斷加熱),防止加熱過快使海藻酸鈉焦糊,難以制成合適的凝膠珠?!究偨Y(jié)提升】固定化酶和固定化細(xì)胞(1)通常狀況下,酶都是在水溶液中與底物進(jìn)行反應(yīng),因此酶在反應(yīng)系統(tǒng)中是與底物、產(chǎn)物混合在一起的,反應(yīng)結(jié)束后,即使酶仍具有較高活力,也很難回收,同時給產(chǎn)品進(jìn)一步純化帶來了困難。而固定化酶則克服了這種不足,且酶可反復(fù)利用。(2)固定化細(xì)胞仍能進(jìn)行正常的生長、繁殖和代謝,可以像游離的細(xì)胞一樣用于發(fā)酵生產(chǎn)。植物組織培育技術(shù)在生產(chǎn)中的應(yīng)用【典例2】(2022·江蘇單科)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培育基中懸浮培育。請回答下列問題:(1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過程稱為________________________________________________________________________。(2)在愈傷組織懸浮培育時,細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如上圖所示。細(xì)胞干重在12d后下降的緣由有__________________________;培育液中蔗糖的作用是____________、____________。(3)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)________處理,會產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目,壓片前常用纖維素酶和________酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后,觀看到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,合理的解釋是______________、____________。(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,生產(chǎn)中接受植物細(xì)胞的固定化技術(shù),其原理與酵母細(xì)胞固定化類似。下列說法正確的有____________(填序號)。①選取旺盛生長的愈傷組織細(xì)胞包埋②必需在光照條件下培育③培育過程中需通空氣④固定化后植物細(xì)胞生長會變慢【解析】(1)外植體是植物體離體的組織、器官或細(xì)胞,誘導(dǎo)形成愈傷組織的過程稱為脫分化。(2)在培育過程中,蔗糖為細(xì)胞供應(yīng)能源。隨著蔗糖的消耗,養(yǎng)分供應(yīng)削減,同時,細(xì)胞代謝產(chǎn)物、廢物增加,使pH降低(偏酸),不利于細(xì)胞生長。培育基中的蔗糖還具有調(diào)整滲透壓的作用。(3)秋水仙素或低溫處理都可誘導(dǎo)細(xì)胞染色體數(shù)目加倍。纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞壁,可以使細(xì)胞之間易于分別(解離)。(4)獲得植物次生代謝產(chǎn)物應(yīng)選用生長旺盛的愈傷組織;愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸,故需要通氣;愈傷組織沒有葉綠體,產(chǎn)生次生代謝產(chǎn)物的過程不需要光照,固定化細(xì)胞所用包埋材料會影響?zhàn)B分物質(zhì)和氧氣的集中。使固定化后的植物細(xì)胞生長速度變慢?!敬鸢浮?1)脫分化(2)蔗糖濃度下降,pH降低供應(yīng)能源調(diào)整滲透壓(3)秋水仙素(低溫)果膠經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂中期(4)①③④(1)植物組織培育的基本過程主要包括________________和________________。(2)在植物培育過程中起重要調(diào)整作用的物質(zhì)是植物激素,主要包括________________和________________。(3)植物激素的用量和使用挨次對植物影響相同嗎?【答案】(1)提示:脫分化再分化(2)提示:生長素細(xì)胞分裂素(3)提示:不同?!究偨Y(jié)提升】影響植物組織培育的因素及成功的關(guān)鍵(1)影響因素。①內(nèi)部因素:材料的選取。②外部因素:養(yǎng)分成分的種類及配比,植物激素的用量及使用挨次,pH、溫度、光照等。(2)獲得成功的關(guān)鍵。①植物組織培育所利用的植物材料體積小、抗逆性差,對培育條件要求較高。②培育材料一旦被微生物污染,就會導(dǎo)致試驗失敗。③無菌技術(shù)主要包括對操作空間、試驗用具、試驗材料以及操作者的消毒滅菌。生物技術(shù)在物質(zhì)提取及分別方面的應(yīng)用【典例3】下列是與芳香油提取相關(guān)的問題,請回答。(1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取,其理由是玫瑰精油具有________________的性質(zhì)。蒸餾時收集的蒸餾液________(填“是”或“不是”)純的玫瑰精油,緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量肯定時,蒸餾過程中,影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和________。當(dāng)原料量等其他條件肯定時,提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)假如蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,則精油提取量會________,緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時最好存放在溫度________的地方,目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)某植物花中精油的相對含量隨花的不同生長發(fā)育時期的變化趨勢如圖所示。提取精油時采摘花的最合適時間為________天左右。(6)從薄荷葉中提取薄荷油時________(填“能”或“不能”)接受從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法,理由是________________________________________________________?!窘馕觥?1)由于玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定(耐肯定程度高溫)、易揮發(fā)(水蒸氣可以將精油攜帶出來)、難溶于水(冷卻后油水會重新分層),所以玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取。(2)當(dāng)水和原料量肯定時,影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和蒸餾溫度,在肯定的時間內(nèi)隨著蒸餾時間的延長提取量不斷增加,肯定時間后不再增加。假如蒸餾溫度過高,提取量也會削減。(3)假如蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,部分精油會隨水蒸氣揮發(fā),則精油提取量會下降。(4)玫瑰精油具有揮發(fā)性,瓶裝精油若密封不嚴(yán),需要低溫保存,以削減揮發(fā)。(5)分析圖示可知,在該植物花的蓓蕾期與開放期之間(即a天)精油含量最高。(6)由于薄荷油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相像,易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,故可以用水蒸氣蒸餾法提取?!敬鸢浮?1)易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定不是玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來,所得到的是油水混合物(2)蒸餾溫度在肯定的時間內(nèi)提取量隨蒸餾時間的延長而增加,肯定時間后提取量不再增加(3)下降部分精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失(4)較低削減揮發(fā)(或防止揮發(fā))(5)a(6)能薄荷油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相像(1)植物芳香油的提取可接受的方法有________________、________________和________________。(2)提取玫瑰精油的試驗流程是:鮮玫瑰花和水→水蒸氣蒸餾→________________eq\o(→,\s\up7(加NaCl))分別油層eq\o(→,\s\up7(無水Na2SO4))____________→玫瑰精油。(3)植物芳香油提取的常用方法是什么,它的原理是什么?【答案】(1)提示:蒸餾壓榨萃取(2)提示:油水混合物除水、過濾(3)提示:水蒸氣蒸餾法,即利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來,形成油水混合物,冷卻后,混合物又會重新分出油層和水層?!究偨Y(jié)提升】水蒸氣蒸餾三種常用的方法比較基本原理相同,但原料位置不同。(1)水中蒸溜:原料放于蒸餾容器的水中,水完全浸沒原料。(2)水上蒸餾:容器中水的上方有篩板,原料置于篩板上,水量以沸騰時不浸濕原料為宜。(3)水氣蒸餾:蒸餾容器下方有一排氣孔,連接外源水蒸氣,上方有篩板,上面放原料。1.(2022·江蘇南通二調(diào))為了探究啤酒酵母固定化的最佳條件,科研人員爭辯了氯化鈣濃度對固定化酵母發(fā)酵性能的影響,結(jié)果如下圖。請回答:(1)與利用游離酵母生產(chǎn)啤酒相比,利用固定化酵母的優(yōu)點有____________________________。(2)本試驗結(jié)果表明,隨氯化鈣濃度的增大,凝膠珠機(jī)械強度增大,完整率__________。(3)結(jié)合發(fā)酵性能分析,制備凝膠珠適宜的氯化鈣濃度為__________。當(dāng)氯化鈣濃度過高時,發(fā)酵液中的糖度上升,酒精度下降,發(fā)酵受到影響,緣由是______________________________________________________________________。(4)用海藻酸鈉作為載體包埋酵母細(xì)胞,溶解海藻酸鈉時最好接受__________________的方法,以防發(fā)生焦糊。溶化好的海藻酸鈉溶液應(yīng)__________后,再與已活化的酵母細(xì)胞充分混合。若海藻酸鈉濃度過低,會導(dǎo)致____________________,固定效果大大降低?!窘馕觥?2)由曲線知,隨著氯化鈣濃度的增大,凝膠珠的完整率增加。(3)氯化鈣濃度為2.0mol/L時,發(fā)酵產(chǎn)生的酒精度最高;當(dāng)氯化鈣濃度過高時會使凝膠珠機(jī)械強度過大,影響凝膠珠的通透性從而影響糖進(jìn)入顆粒內(nèi)部。(4)為防止發(fā)生焦糊,溶解海藻酸鈉時最好接受小火或間斷加熱的方法;為愛護(hù)活化的酵母細(xì)胞的活性,溶化好的海藻酸鈉溶液必需冷卻到室溫后再與酵母細(xì)胞混合。【答案】(1)可多次使用、便于產(chǎn)物分別、提高產(chǎn)品質(zhì)量等(2)增加(3)2.0mol/L凝膠珠機(jī)械強度過大,通透性降低,影響糖進(jìn)入顆粒內(nèi)部(4)小火或間斷加熱冷卻至室溫酵母細(xì)胞從顆粒中漏出2.下圖是水稻的花藥通過無菌操作,培育產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題:(1)圖中的A是________,c過程是指________,B指________。(2)這兩種途徑之間沒有確定的界限,主要取決于_______________________________________________________________________________。(3)配制培育基時加瓊脂的目的是________________________________________________________________________。(4)組織培育要求無菌操作的緣由是________________________________________________________________________?!敬鸢浮?1)胚狀體誘導(dǎo)生根(2)培育基中激素的種類及其濃度配比(3)使培育基呈固體狀態(tài),有利于外植體的生長(4)如不無菌操作,微生物會在培育基上快速繁殖,與離體培育的植物組織競爭3.(2022·蘇州模擬)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分,負(fù)責(zé)血液中O2或CO2的運輸。請依據(jù)血紅蛋白的提取和分別流程圖回答問題。(1)將試驗流程補充完整。凝膠色譜法的基本原理是依據(jù)________________________________分別蛋白質(zhì)的有效方法。(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除________,洗滌潔凈的標(biāo)志是________。(3)分別血紅蛋白時,由上到下第________層是血紅蛋白水溶液。(4)下面是凝膠色譜法分別血紅蛋白時樣品的加入示意圖,正確的加樣挨次是________________________________________________________________________。(5)假如紅色區(qū)帶________,說明色譜柱制作成功。【解析】(1)樣品處理及粗分別包括:紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分別血紅蛋白溶液、透析,凝膠色譜操作包括:凝膠色譜柱的制作、凝膠色譜柱的裝填、樣品的加入和洗脫。凝膠色譜法的基本原理是依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分別蛋白質(zhì)。(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白,洗滌潔凈的標(biāo)志是上清液中沒有黃色。(3)分別血紅蛋白時,可明顯看到試管中的溶液分為4層:第1層為無色透亮?????的甲苯層;第2層為白色薄層固體,是脂溶性物質(zhì)的沉淀層;第3層是紅色透亮?????液體,是血紅蛋白的水溶液;第4層是其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。(4)加樣挨次是:調(diào)整緩沖液面、滴加透析樣品、樣品滲入凝膠床、再調(diào)整緩沖液面。(5)假如紅色區(qū)帶均勻全都地移動,說明色譜柱制作成功?!敬鸢浮?1)血紅蛋白的釋放凝膠色譜柱的裝填相對分子質(zhì)量的大小(2)雜蛋白(或
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