2025年牛津譯林版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年牛津譯林版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷667考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、高等哺乳動物受精后不久；受精卵開始進行細胞分裂。經(jīng)桑椹胚；囊胚、原腸胚和組織器官的分化，最后發(fā)育成一個完整的幼體，完成胚胎發(fā)育的全過程，如圖為該過程中的某一時期示意圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細胞團B.高等哺乳動物胚胎發(fā)育中的細胞分化開始于圖示時期，終止于生命結(jié)束C.胚胎從①中伸展出來的過程叫做孵化D.進行胚胎分割時，應(yīng)選擇圖示時期之后的胚胎進行2、上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉(zhuǎn)基因牛。他們還研究出一種可以大大提高基因表達水平的新方法，使轉(zhuǎn)基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍，標志著我國轉(zhuǎn)基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標又邁進了一大步。以下與此有關(guān)的敘述，正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因牛的培育過程只涉及基因工程、胚胎工程的相關(guān)技術(shù)B.該培育過程一般需要用到乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件C.所謂“提高基因表達水平”主要是指提高人白蛋白基因在牛乳腺細胞中的含量D.人們只能在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中獲取到人白蛋白，是因為此基因只存在于乳腺細胞中3、下列有關(guān)植物細胞工程應(yīng)用的敘述，不正確的是（）A.利用組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗，獲得具有抗病毒的新品種B.利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得人工種子，能保持親本的優(yōu)良性狀C.利用細胞培養(yǎng)技術(shù)獲得紫草素，實現(xiàn)了細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)D.利用植物體細胞雜交技術(shù)獲得“白菜—甘藍”，克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙4、熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中某種DNA含量。其原理是：在PCR反應(yīng)體系中加入與某條模板鏈互補的TaqMan熒光探針，當Taq酶在延伸子鏈時遇到探針，會水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號，即熒光每擴增一次，就有一個熒光分子生成。下列敘述錯誤的是（）

A.每次模板DNA的擴增都需要用到一對堿基序列互補的引物B.Taq酶催化DNA的合成方向總是從子鏈5'端到3'端延伸C.引物與探針均具特異性，與模板結(jié)合時都遵循堿基互補配對原則D.若用cDNA作模板，上述技術(shù)也可檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平5、RNA干擾是指通過RNA的介導(dǎo)，特異性降解相應(yīng)mRNA，從而導(dǎo)致的基因沉默現(xiàn)象。miRNA能介導(dǎo)RNA干擾。篩選來源于伊蚊的負向調(diào)節(jié)自身免疫的miRNA，構(gòu)建表達伊蚊miRNA的工程菌株，可防治伊蚊。下列敘述錯誤的是（）A.RNA干擾導(dǎo)致基因沉默使相關(guān)基因雖能轉(zhuǎn)錄但無法翻譯B.使用伊蚊來源的miRNA進行菌株改良容易使伊蚊產(chǎn)生抗性C.使用伊蚊特異miRNA可提高工程菌的寄主靶向性和特異性D.伊蚊存在能負向調(diào)節(jié)自身免疫的miRNA說明免疫具有穩(wěn)態(tài)評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)6、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的安全性和倫理問題的敘述，不正確的是（）A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾病，不會出現(xiàn)負面影響C.我國禁止生殖性克隆人和有關(guān)人胚胎干細胞的研究D.世界各國都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲存和發(fā)展生物武器7、運用細胞工程技術(shù)獲得單克隆抗體時，必要的操作是（）A.對小動物注射特定抗原B.融合并篩選雜交瘤細胞C.原代培養(yǎng)效應(yīng)B細胞D.將胰蛋白酶注入小動物腹腔8、重疊延伸PCR技術(shù)是一種通過寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋；互為模板；經(jīng)過多次PCR擴增。從而獲得目的基因的方法。該技術(shù)在擴增較長片段的DNA、不同來源的DNA片段拼接、基因的定點誘變等方而具有廣泛的應(yīng)用前景，下圖表示利用重疊延伸PCR技術(shù)擴增某目的基因的過程。下列敘述正確的是（）

A.引物中G＋C的含量越高，引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性越高B.在第一階段由于引物2和引物3發(fā)生堿基互補配對，因此兩者置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中C.引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進行一次復(fù)制，共產(chǎn)生4種雙鏈DNA分子D.在引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經(jīng)過3次復(fù)制9、某些細菌能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶水解抗生素；給抗感染治療帶來很大困難。利用檢測試條可檢測細菌是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，試條左右兩側(cè)對稱含有一定濃度梯度的抗生素，并在一側(cè)添加克拉維酸（一種β-內(nèi)酰胺酶抑制劑）。將兩個含不同抗生素的檢測試條放置在涂布有待檢菌株的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時候后結(jié)果如下圖所示。下列說法正確的是（）

A.抗生素的大量使用會導(dǎo)致產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶細菌的出現(xiàn)B.由實驗結(jié)果可知，越靠近試條兩端的抗生素濃度越大C.該菌能產(chǎn)生β-酰胺酶，試條1中克拉維酸添加在試條右側(cè)D.使用試條2中所含抗生素治療該菌感染的效果更好10、為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，下列敘述不合理的是（）A.將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率B.涂布用的菌濃度應(yīng)控制在30~300個/mLC.需通過預(yù)實驗考察輻射時間對存活率的影響，以確定最佳誘變時間D.挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進行降解效率分析評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)11、（1）致病菌：第二次世界大戰(zhàn)期間，侵華日軍在中國領(lǐng)土上修建了幾十座_____工廠，曾用數(shù)千名中國人做實驗，還曾在中國20多個地區(qū)使用了_____；造成了幾十萬中國老百姓死亡。日本戰(zhàn)敗投降時，侵華日軍又一次把培養(yǎng)的細菌釋放出來，在中國造成傳染病大流行。

（2）生化毒劑：如_____分子可以阻滯神經(jīng)末梢釋放_____；從而引起肌肉麻痹。

（3）病毒：如_____病毒；在年輕人普遍都沒有接種天花疫苗的情況下，若有人用天花病毒或某些動物的痘病毒作為生物武器，后果不堪設(shè)想。

（4）基因重組致病菌：這些致病菌是人類的_____致病菌，可讓大批受感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)。12、通過統(tǒng)計平板上的________________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進行計數(shù)。13、______——“分子縫合針”14、醋酸菌的最適生長溫度為____________________℃。15、基因工程操作一般經(jīng)歷如下四個步驟：_____。16、常用的轉(zhuǎn)化方法：

將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ莀______，其次還有______和______等。

將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ莀______。此方法的受體細胞多是_______。

將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是_______，最常用的原核細胞是_____，其轉(zhuǎn)化方法是：先用______處理細胞，使其成為______，再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。17、最后檢測目的基因是否翻譯成______，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取______，用相應(yīng)的______進行______。評卷人得分四、判斷題(共4題，共28分)18、釀酒酵母的最適生長溫度為30度。()A.正確B.錯誤19、動物細胞核移植技術(shù)是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中，使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)，體現(xiàn)了動物細胞的全能性。（選擇性必修3P52）()A.正確B.錯誤20、胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯誤21、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共40分)22、在釀酒；釀醋、制作腐乳、酸奶過程中都要涉及各種微生物；請回答下列問題。

（1）釀酒利用的微生物是酵母菌，制作過程中，酵母菌先在有氧條件下大量繁殖，然后再進行酒精發(fā)酵，檢測酒精的原理是：橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與酒精發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，變成________________色。如果葡萄酒釀造過程中葡萄汁中含有醋酸菌，在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸菌不能將葡萄汁中的糖發(fā)酵為醋酸，原因是_______________________________________________________。

（2）醋酸發(fā)酵時溫度一般應(yīng)控制為_______________。

（3）在臭豆腐的制備過程中，常用的微生物主要是________________，在此過程中，豆腐相當于微生物生長的______________________。

（4）民間制作腐乳時，豆腐塊上生長的微生物，在制作時一般要加鹽、酒，若加入的酒精濃度（含量）過低，會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？__________________________________。

（5）在腌制泡菜的過程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封壇的作用是__________________________，欲檢測泡菜在腌制過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量，使用檢測試劑后顏色變?yōu)開____________。23、β-苯乙醇是具有令人愉悅的玫瑰香味的高級芳香醇；廣泛用于食品和日化用品等生產(chǎn)領(lǐng)域?；瘜W(xué)合成β-苯乙醇會產(chǎn)生多種雜質(zhì)，而植物萃取則周期長；成本高，因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工業(yè)化新趨勢。研究小組從玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下腳料及其肥料堆放的土壤中篩選可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株（YDF-1），實驗過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)該實驗需制作多種培養(yǎng)基，這些培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無機鹽、__________等物質(zhì)，培養(yǎng)基制作后需使用__________法進行滅菌，滅菌后的培養(yǎng)基再添加相應(yīng)濃度的β-苯乙醇。由實驗?zāi)康目芍?，初篩、復(fù)篩及再次復(fù)篩的培養(yǎng)基中，添加的β-苯乙醇的濃度應(yīng)__________（填“保持不變”或“逐漸增大”或“逐漸降低”），理由是__________。

(2)若取稀釋倍數(shù)為104的0．1mL稀釋液涂布到含2g/L的YEPD培養(yǎng)基后培養(yǎng)至菌落穩(wěn)定，計算得出每毫升菌懸液中含4．5×106個菌體，則在該稀釋倍數(shù)下平板上的平均菌落數(shù)是__________個。將初篩獲得的菌株進行液體培養(yǎng)，其目的是________。

(3)若選用葡萄糖作為碳源，為確定YDF-1增殖的最佳濃度，請設(shè)計一個較為簡便的實驗進行探究，實驗設(shè)計思路是__________。24、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質(zhì)量分數(shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術(shù)擴增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中。2~3周后，這些細胞顯示出ES細胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細胞。在這個實驗過程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實驗設(shè)計思路______________25、微生物因具有體積??；易培養(yǎng)，繁殖快，且自身遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)簡單，經(jīng)人工處理或自然突變可獲得新性狀等特點，在發(fā)酵工程中應(yīng)用廣泛?；卮鹣铝袉栴}：

(1)大腸桿菌是發(fā)酵工程中應(yīng)用較為廣泛的菌種之一。培養(yǎng)大腸桿菌時，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至____性，再利用_________________法滅菌后進行接種。

(2)在發(fā)酵工程中，常常需要對菌種數(shù)目進行統(tǒng)計。相對真菌來說，細菌的體積較小，因此對細菌數(shù)目進行統(tǒng)計時，適合使用_________________（填“細菌計數(shù)板”或“血細胞計數(shù)板”）進行計數(shù)，且統(tǒng)計的細菌數(shù)目往往比實際活菌數(shù)目_________________（填“多”或“少”）。

(3)人工處理或自然突變往往會使菌種成為營養(yǎng)缺陷型菌株；現(xiàn)欲設(shè)計實驗證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，請簡單描述實驗思路并預(yù)計實驗結(jié)果：

實驗思路：_____________________________；

實驗結(jié)果：_____________________________。評卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)26、利用基因工程技術(shù)可將不同種生物的優(yōu)良基因集合起來達到人類的生產(chǎn)目的。某科學(xué)家將人的血清白蛋白基因轉(zhuǎn)入牛的體內(nèi)構(gòu)建乳腺生物反應(yīng)器獲得血清白蛋白。請回答：

（1）在人體內(nèi)獲取目的基因時要用到的工具是________，為了確保該血清白蛋白只在牛乳汁中出現(xiàn)，在構(gòu)建基因表達載體時需要將__________等元件和人血清白蛋白基因重組在一起。乳腺生物反應(yīng)器有一定的局限性，只能在雌性動物中應(yīng)用，若要打破性別限制，科學(xué)家還可以構(gòu)建_________生物反應(yīng)器。

（2）要確認轉(zhuǎn)基因牛是否表達出相應(yīng)的血清白蛋白，可以采用的方法是__________，該方法的原理是____________。

（3）單克隆抗體的制備是細胞工程應(yīng)用的重要范疇，通常使用滅活病毒促進__________和骨髓瘤細胞的融合來制備單克隆抗體，單克隆抗體的優(yōu)點是__________。27、金黃色葡萄球菌是一種能耐相對較高濃度食鹽的致病菌；為探究某天然植物抗菌液對金黃色葡萄球菌；醉母曲的抑菌作用，某生物小組用無菌水將金黃色葡萄球菌、酵母菌稀釋成菌液，分別在固體培養(yǎng)基制成含菌平板，在平板上放置經(jīng)不同濃度的該天然植物抗菌液浸泡2?3h的濾紙片，培養(yǎng)一段時間后，測定抑菌圈的直徑，結(jié)果如下表所示（“一”表示未出現(xiàn)抑菌圈）?；卮鹣铝袉栴}:

。天然植物抗菌液濃度/%

5．0

2．5

1．0

0．5

0．0（無菌水）

0．0（無菌水）

抑菌圈直徑/

金黃色他的球菌。

2．8

2．7

2．3

1．4

1．2

—

mm

酵母菌。

3．3

3．1

2．7

0．8

—

（1）制備含菌平板時采用的接種方法是___________________。

（2）對吸管、培養(yǎng)基進行滅菌的方法分別是______、_______，為檢測培養(yǎng)基的滅菌效果，可對培養(yǎng)基進行_________。

（3）釀制果酒時，發(fā)酵后期酵母菌的代謝類型屬于________；自制果酒時，葡萄果瓶中的雜菌與酵母菌的種間關(guān)系主要是_________________。

（4）根據(jù)實驗結(jié)果_____（填“能”或“不能”）得出“相同濃度的該天然植物抗菌液對酵母菌的抑菌作用更大”的結(jié)論。簡述該天然植物抗菌液對金黃色葡萄球菌的抑菌作用的特點_________。28、腸道微生物對宿主健康具有重要影響；但目前缺乏對特定菌株進行基因編輯的有效手段。科研人員嘗試使用M13噬菌體作為載體，對大腸桿菌進行基因編輯。M13噬菌體與T2噬菌體相似；能夠侵染大腸桿菌，但被M13噬菌體侵染的大腸桿菌不發(fā)生裂解。

(1)科研人員將綠色熒光蛋白基因特異性序列（sgfp）；Cas酶基因與利用特定方法得到的M13噬菌體的環(huán)狀DNA進行重組；構(gòu)建重組基因編輯質(zhì)粒（pCG）、如圖1。

①構(gòu)建pCG需要用到的工具酶有_____。

②以pCG的綠色熒光蛋白基因特異性序列（sgfp）經(jīng)_____過程形成的RNA；會靶向結(jié)合綠色熒光蛋白基因，從而使Cas酶能夠切割綠色熒光蛋白基因。

(2)科研人員將綠色熒光蛋白基因和紅色熒光蛋白基因?qū)氪竽c桿菌，獲得GS菌株。先用添加GS菌株的飼料喂養(yǎng)小鼠，一段時間后，將小鼠分為實驗組和對照組。其中，實驗組小鼠用添加含_____的M13噬菌體和的_____飼料喂養(yǎng)，以篩選獲得腸道微生物被基因編輯的小鼠。本實驗對照組使用的質(zhì)粒不包括圖1中的_____。

(3)為確認M13噬菌體作為載體對大腸桿菌進行基因編輯的可行性和特異性；科研人員檢測腸道微生物的變化，結(jié)果如圖2；3所示。

①圖2中，標號為b、c的區(qū)域分別代表含有紅綠疊加色熒光的微生物和無熒光的微生物，a區(qū)代表含有_____熒光的微生物。

②解釋實驗組第0天到第14天腸道微生物熒光類型發(fā)生變化的原因：_____。29、科研人員通過設(shè)計來自小鼠腸道的天然大腸桿菌；然后將修飾過的工程原生細菌植入小鼠體內(nèi)后誘導(dǎo)了持續(xù)性的生理變化，從而改善了動物糖尿病等慢性病病理狀態(tài)。研究人員首先從實驗小鼠的糞便樣本中提取出天然大腸桿菌，并從中鑒定出一種遺傳上易馴化的菌株，然后通過基因工程修飾使其表達了在膽汁酸代謝中具有重要作用的膽汁鹽水解酶（BSH），將經(jīng)過修飾的天然細菌重新植入小鼠腸道。進行一次治療后，研究人員在小鼠的整個腸道中都發(fā)現(xiàn)了帶有BSH基因的大腸桿菌，它們在宿主的整個生命周期中都保持著BSH活性，BSH活性對治療小鼠糖尿病產(chǎn)生積極影響。回答下列問題：

(1)修飾大腸桿菌所用的BSH基因，不能直接從小鼠細胞內(nèi)提取。通常提取小鼠細胞內(nèi)的相應(yīng)mRNA來合成BSH基因，原因是_____。

(2)如圖是大腸桿菌的質(zhì)粒和通過R-PCR技術(shù)合成的BSH基因（目的基因），進行體外拼接時，不能選擇限制酶A，理由是_____；選用限制酶B和酶C切割質(zhì)粒和目的基因的優(yōu)點有_____。

(3)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，需用_____處理，使其處于_____。

(4)導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌需進行篩選后方可應(yīng)用于臨床治療，簡要說明重組大腸桿菌篩選的思路：_____。

(5)若科學(xué)家利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，研制出了新的BSH，與天然BSH相比，其效果更好，起效快，更好保存。獲得BSH基因的途徑是；從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→_____→推測應(yīng)有的氨基酸序列→_____。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

分析題圖；圖示為胚胎發(fā)育過程某一時期示意圖，該時期為囊胚期，其中①為透明帶；②為滋養(yǎng)層，將來發(fā)育成胎盤或胎膜；③為內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胎兒的各種組織。

【詳解】

A；如圖是囊胚期示意圖；①②③依次稱之為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細胞團，A正確；

B；細胞分化貫穿于整個生命歷程；在胚胎時期達到最大限度，高等哺乳動物胚胎發(fā)育中的細胞分化開始于囊胚期，終止于生命結(jié)束，B正確；

C；胚胎從①中伸展出來的過程叫做孵化；C正確；

D；進行胚胎分割時；應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，圖示細胞所處時期可以進行，D錯誤。

故選D。2、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因動物的受體細胞是受精卵；所以含有轉(zhuǎn)基因的受精卵在形成個體時，所有細胞都會含有轉(zhuǎn)入的基因，“提高基因的表達水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細胞表達出更多的人白蛋白，而不是含有更多的白蛋白基因。只在轉(zhuǎn)基因牛乳汁中才能獲取人白蛋白，因為人白蛋白基因只在牛乳腺細胞才表達。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因牛的培育過程涉及基因工程、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)以及配套工程的相關(guān)技術(shù)；A錯誤；

B；由題意“使轉(zhuǎn)基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍”可知：該培育過程一般需要用到乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件使目的基因在乳腺細胞內(nèi)表達；B正確；

C；提高基因表達水平是指設(shè)法使牛的乳腺細胞中含有的人白蛋白基因指導(dǎo)合成更多的人白蛋白；C錯誤；

D；人們只能在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中獲取到人白蛋白；是因為此基因只在乳腺細胞中表達，D錯誤。

故選B。3、A【分析】植物細胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖；作物脫毒；人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】

A；因為分生組織的病毒極少；甚至沒有病毒，所以將分生組織（如根尖、莖尖）進行離體培養(yǎng)能獲得脫毒植株，但不能獲得抗病毒的新品種，A錯誤；

B；經(jīng)細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的胚狀體可直接制作“人工種子”；由于該技術(shù)屬于無性生殖，因此能保持親本的優(yōu)良性狀，B正確；

C；組織培養(yǎng)技術(shù)除了在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用外；還可廣泛應(yīng)用于另一個重要的領(lǐng)域，即細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，如利用細胞培養(yǎng)技術(shù)可大量獲得紫草素，C正確；

D；白菜和甘藍不屬于同一物種；它們之間存在生殖隔離，因此利用植物體細胞雜交技術(shù)培育的“白菜一甘藍”，能夠克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙，D正確。

故選A。4、A【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

(1)概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；

(2)原理：DNA雙鏈復(fù)制；

(3)前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物；

(4)條件：模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)；

(5)過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；②復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR中所用的引物只能與相應(yīng)模板鏈的3'端互補；兩個引物之間不能互補，否則體系中加入引物后，引物之間形成雜合鏈，會影響引物與模板鏈的結(jié)合，不能正常擴增，A錯誤；

B；Taq酶可以催化子鏈沿著5’→3方向延伸；B正確；

C；引物與探針均具特異性；與模板結(jié)合時遵循堿基互補配對原則，C正確；

D；若用cDNA作模板；熒光定量PCR技術(shù)也可檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平，D正確。

故選A。5、B【分析】【分析】

RNA干擾是指通過RNA的介導(dǎo)；特異性降解相應(yīng)mRNA，從而阻礙了表達的過程。

【詳解】

A；由題干可知；RNA干擾是指通過RNA的介導(dǎo)，特異性降解相應(yīng)mRNA，mRNA是翻譯的模板，所以RNA干擾導(dǎo)致基因沉默使相關(guān)基因雖能轉(zhuǎn)錄但無法翻譯，A正確；

B；使用伊蚊來源的miRNA進行菌株改良；該菌株能表達伊蚊miRNA，所以不易使伊蚊產(chǎn)生抗性，B錯誤；

C；構(gòu)建表達伊蚊miRNA的工程菌株；該菌株能表達伊蚊miRNA，所以可提高工程菌的寄主靶向性和特異性，C正確；

D；伊蚊存在能負向調(diào)節(jié)自身免疫的miRNA；當伊蚊自身免疫強烈是可緩解自身免疫，說明免疫具有穩(wěn)態(tài)，D正確。

故選B。二、多選題(共5題，共10分)6、B:C【分析】【分析】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾??；但有可能被濫用，如用于設(shè)計嬰兒性別等，可能會出現(xiàn)負面影響﹔進行基因檢測時，可通過基因進行檢測，也可通過測定基因的表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)來進行;對于基因歧視現(xiàn)象，可通過正確的科學(xué)知識傳播；倫理道德教育和立法得以解決。

【詳解】

A；基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德；A正確；

B；設(shè)計試管嬰兒如專門用來設(shè)計嬰兒性別是不符合倫理道德的；可能會存在負面影響，B錯誤；

C；我國禁止生殖性克隆人；但允許人胚胎干細胞的研究在有關(guān)規(guī)定下進行，C錯誤；

D；生物武器危害巨大；世界各國都應(yīng)禁止生物武器，D正確。

故選BC。7、A:B【分析】【分析】

在制備單克隆抗體的過程中；需要先對小鼠進行特定抗原免疫，使機體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細胞；在誘導(dǎo)細胞融合時，除了異種細胞融合外，還有同種細胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞；效應(yīng)B細胞不能分裂；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細胞時，可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體。

【詳解】

A；在制備單克隆抗體的過程中；需要先對小鼠進行特定抗原免疫，使機體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細胞，A正確；

B；在誘導(dǎo)細胞融合時；除了異種細胞融合外，還有同種細胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞，B正確；

C；效應(yīng)B細胞不能分裂；C錯誤；

D；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細胞時；可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體，而不需要將胰蛋白酶注入小動物腹腔，D錯誤。

故選AB。8、A:B【分析】【分析】

PCR擴增運用DNA分子復(fù)制的原理；經(jīng)過變性；復(fù)性、延伸，最終獲得大量DNA的過程。

【詳解】

A；引物中G＋C的含量越高；C和G之間是三個氫鍵連接，因此引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性越高，A正確；

B；圖中可知；引物2和引物3分別作用同一段DNA的兩條鏈，會發(fā)生堿基互補配對，因此兩者置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中，B正確；

C；引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進行一次復(fù)制；共產(chǎn)生2種雙鏈DNA分子，C錯誤；

D；在引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中；經(jīng)第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經(jīng)過2次復(fù)制，D錯誤。

故選AB。9、B:C:D【分析】【分析】

題干分析；某些細菌能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶水解抗生素，從而產(chǎn)生抗藥性。試條兩側(cè)含有抗生素，并在試條一側(cè)添加β-內(nèi)酰胺酶抑制劑（能抑制β-內(nèi)酰胺酶的活性，從而不能水解抗生素），將其放在不含有抗生素的待測菌株上培養(yǎng)，一段時間后發(fā)現(xiàn)，試條1右側(cè)和試條2的左右兩側(cè)都出現(xiàn)了抑菌圈，說明該部位的菌株能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶。

【詳解】

A；基因突變具有不定向性；抗生素使用之前，產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的細菌已經(jīng)出現(xiàn)，抗生素只是起到選擇作用，A錯誤；

B；由實驗結(jié)果可知；越靠近試條兩端的抑菌圈較大，說明抗生素濃度較大，B正確；

C；該菌能產(chǎn)生β-酰胺酶；使用克拉維酸能抑制該菌產(chǎn)生的β-酰胺酶的活性，進而不能抵抗抗生素，試條1右側(cè)出現(xiàn)抑菌圈，左側(cè)沒有出現(xiàn)抑菌圈，說明試條1中克拉維酸添加在試條右側(cè)，C正確；

D；試條2左右兩側(cè)的抑菌圈菌大于試條1；說明使用試條2中所含抗生素治療該菌感染的效果更好，D正確。

故選BCD。

【點睛】10、A:B【分析】【分析】

培養(yǎng)基的配制：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。微生物的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。預(yù)實驗可以為正式實驗進一步的摸索條件；可以檢驗實驗設(shè)計的科學(xué)性和可行性，避免人力；物力和財力的浪費。

【詳解】

A；培養(yǎng)基應(yīng)先滅菌再分裝于培養(yǎng)皿中；A符合題意；

B、涂布用的菌濃度應(yīng)控制在106倍；以避免菌種重疊而不能得到單菌落，B符合題意；

C；輻射劑量和誘變時間都是正式實驗的無關(guān)變量；可通過預(yù)實驗確定，C不符合題意；

D；石油降解菌能分解石油獲得碳源；形成菌落，挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進行降解效率分析，以獲得能高效降解石油的菌種，D不符合題意。

故選AB。三、填空題(共7題，共14分)11、略

【分析】【詳解】

（1）早在第二次世界大戰(zhàn)中；侵華日軍就組建了從事細菌戰(zhàn)的731部位和100部隊，并在中國領(lǐng)土上修建了幾十座細菌武器工廠，大量培養(yǎng)鼠疫；霍亂、傷寒、炭疽和菌痢等一系列能使人致命的傳染性疾病。曾用數(shù)千名中國人做實驗，還曾在中國20多個地區(qū)使用了細菌武器，造成了幾十萬中國老百姓死亡。日本戰(zhàn)敗投降時，侵華日軍又一次把培養(yǎng)的細菌釋放出來，在中國造成傳染病大流行。

（2）某些國家或恐怖組織大量生產(chǎn)肉毒桿菌毒素；肉毒桿菌毒素分子可以阻滯神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿，從而引起肌肉麻痹。

（3）1978年天花就已經(jīng)在地球上消滅；但是某些國家至今保留著天花病毒菌株，今天，在年輕人普遍都沒有接種天花疫苗的情況下，若有人用天花病毒或某些動物的痘病毒作為生物武器，后果不堪設(shè)想。

（4）目前，有一些國家對重組基因技術(shù)制造全新的致病菌表現(xiàn)了極大的興趣，這些人類從來沒有接觸過的致病菌，可以讓大批受感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)?！窘馕觥竣?細菌武器②.細菌武器③.肉毒桿菌毒素④.乙酰膽堿⑤.天花⑥.從未接觸過12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30～30013、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】30～3515、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提取目的基因、目的基因與運載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細胞重組表達載體DNA分子17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)抗體抗原－抗體雜交四、判斷題(共4題，共28分)18、B【分析】【詳解】

釀酒酵母的最適生長溫度是28℃；但在發(fā)酵過程中，一般將溫度控制在18-30℃，這是因為果皮表面附著的野生酵母菌可能有多種（有多種酵母菌參與了發(fā)酵過程），從實踐的角度看，大致控制溫度范圍比較簡單易行。

故本說法錯誤。19、B【分析】【詳解】

動物細胞核移植技術(shù)體現(xiàn)了動物細胞核的全能性，不能體現(xiàn)動物細胞的全能性，高度分化的動物細胞的全能性受到了限制，故錯誤。20、A【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化。聚集在胚胎一端的細胞形成內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內(nèi)壁拓展和排列的細胞，稱為滋養(yǎng)層細胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤，為胚胎的發(fā)育提供營養(yǎng)，故該表述正確。21、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。五、實驗題(共4題，共40分)22、略

【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。在有氧條件下可生產(chǎn)二氧化碳和水，無氧條件下可生產(chǎn)酒精和二氧化碳。

2；腐乳制作中用鹽腌制的目的：①鹽能抑制微生物的生長；避免豆腐塊腐敗變質(zhì)；②加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期制作過程中不會過早酥爛；③有調(diào)味作用。

（1）

檢測酒精的原理是：橙色的重鉻酸鉀溶液；在酸性條件下與酒精發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，變成灰綠色。醋酸菌是好氧型細菌，而果酒發(fā)酵是無氧環(huán)境(或醋酸菌需要在有氧且溫度是30～35℃條件下，才能將糖轉(zhuǎn)化為醋酸或因為酒精發(fā)酵時的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長，且醋酸菌的發(fā)酵需要充足的氧氣），所以在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸菌不能將葡萄汁中的糖發(fā)酵為醋酸；

（2）

酵母菌的異化作用類型為兼性厭氧型；即在有氧條件下可生成水和二氧化碳，在無氧條件下生成酒精和二氧化碳；醋酸發(fā)酵的主要菌種是醋酸菌，醋酸菌的最適宜溫度是30-35℃，故醋酸發(fā)酵時溫度一般應(yīng)控制為30～35℃；

（3）

豆腐的發(fā)酵中參與的微生物很多如青霉；酵母、曲霉、毛霉等；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物將豆腐中的營養(yǎng)基質(zhì)如蛋白質(zhì)、脂肪等分解；豆腐相當于培養(yǎng)基，能提供毛霉等菌種生長的條件；

（4）

民間制作腐乳時；豆腐塊上生長的微生物，在制作時一般要加鹽；酒（酒的含量一般控制在12%左右），若加入的酒精濃度（含量）過低，會出現(xiàn)不足以抑制微生物的生長，導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)的現(xiàn)象；

（5）

泡菜的制作的菌種是乳酸菌；屬于厭氧型細菌，用水封壇的作用是隔絕空氣，制造無氧環(huán)境，為乳酸菌的發(fā)酵提供無氧環(huán)境；在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮反應(yīng)生成重氮鹽，重氮鹽與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

【點睛】

本題主要考查果酒的制作、腐乳的制作、腌制泡菜等知識點，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運用所學(xué)知識，準確判斷問題的能力?！窘馕觥浚?）灰綠醋酸菌是好氧型細菌；而果酒發(fā)酵是無氧環(huán)境(或醋酸菌需要在有氧且溫度是30～35℃條件下，才能將糖轉(zhuǎn)化為醋酸或因為酒精發(fā)酵時的缺氧環(huán)境能抑制醋酸菌生長，且醋酸菌的發(fā)酵需要充足的氧氣）

（2）30—35℃

（3）毛霉培養(yǎng)基。

（4）不足以抑制微生物生長；使豆腐腐敗變質(zhì)。

（5）制造無氧環(huán)境玫瑰紅色23、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是指供給微生物；植物或動物（或組織）生長繁殖的；由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多，根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基；根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等；根據(jù)使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。

【詳解】

（1）培養(yǎng)基一般都含有水；無機鹽、碳源和氮源等物質(zhì)；以滿足生物生長的需求；培養(yǎng)基制作后需使用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；由于本實驗的目的是獲得可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株，因此實驗初篩、復(fù)篩和再次復(fù)篩時培養(yǎng)基中添加的β-苯乙醇濃度要逐漸升高。

（2）根據(jù)計算公式：（平均菌落數(shù)）÷涂布體積×稀釋倍數(shù)=每毫升菌液中的菌體數(shù)，可知：（平均菌落數(shù)）÷0．1mL×104=4．5×106個；所以平板上的平均菌落數(shù)是45個；液體培養(yǎng)是指將微生物直接接種于液體培養(yǎng)基中，并不斷振蕩或攪拌，可以迅速得到大量繁殖體。

（3）由實驗?zāi)康目芍搶嶒灥淖宰兞渴瞧咸烟侨芤旱臐舛?，因變量是YDF-1的增殖情況，可通過顯微鏡直接計數(shù)這一簡便的方法來確定其增殖情況，因此實驗的設(shè)計思路是設(shè)置一系列濃度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分別接種等量的YDF-1，每天定時用血細胞計數(shù)板統(tǒng)計溶液中的菌體數(shù)量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即為YDF-1增殖的最佳濃度?！窘馕觥?1)碳源；氮源高壓蒸汽滅菌逐漸增大只有將培養(yǎng)基中β-苯乙醇的濃度逐漸增大；才能篩選得到可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株。

(2)45增加目的菌株濃度。

(3)設(shè)置一系列濃度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分別接種等量的YDF-1，每天定時用血細胞計數(shù)板統(tǒng)計溶液中的菌體數(shù)量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即為YDF-1增殖的最佳濃度24、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項通過體外控制溫度擴增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中，該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞；分析題意，實驗?zāi)康氖莍PS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實驗的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細胞的產(chǎn)生情況，實驗設(shè)計應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故可設(shè)計實驗如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用。【解析】(1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用25、略

【分析】【分析】

1；利用顯微鏡進行直接計數(shù)；也是一種常用的、快速直觀的測定微生物數(shù)量的方法。該方法利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下觀察、計數(shù)，然后再計算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量，統(tǒng)計的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和。細菌計數(shù)板和血細胞計數(shù)板的計數(shù)原理相同。血細胞計數(shù)板比細菌計數(shù)板厚，常用于相對較大的酵母菌細胞、霉菌孢子等的計數(shù)。用細菌計數(shù)板可對細菌等較小的細胞進行觀察和計數(shù)。

2；滅菌則是指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物；包括芽孢和孢子。濕熱滅菌：高壓蒸汽滅菌（壓力為100kPa、溫度為121℃、15~30min）；干熱滅菌：160~170℃熱空氣維持2~3h。耐高溫的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等；灼燒滅菌：接種工具。接種過程中，試管口、瓶口等容易被污染的部位。

【詳解】

（1）大腸桿菌是細菌；培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性，對培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。

（2）細菌計數(shù)板和血細胞計數(shù)板的計數(shù)原理相同。血細胞計數(shù)板比細菌計數(shù)板厚；常用于相對較大的酵母菌細胞；霉菌孢子等的計數(shù)。用細菌計數(shù)板可對細菌等較小的細胞進行觀察和計數(shù)。該方法統(tǒng)計的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，所以統(tǒng)計的細菌數(shù)目往往比實際活菌數(shù)目多。

（3）本實驗為了證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后；可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，可將野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)一段時間后觀察大腸桿菌是否生長，如果在培養(yǎng)基上無大腸桿菌生長，說明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，獲得了組氨酸缺陷型突變菌株。具體實驗思路及結(jié)果如下：

實驗思路：使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上；標記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標記為乙組；將未接種的不含組氨酸的完全培養(yǎng)基標記為丙組；將甲；乙、丙組培養(yǎng)基放于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，一段時間后觀察并統(tǒng)計培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。

實驗結(jié)果：乙組培養(yǎng)基出現(xiàn)較多菌落；甲組培養(yǎng)基沒有出現(xiàn)菌落或出現(xiàn)菌落、但菌落數(shù)少于乙組；丙組培養(yǎng)基無菌落。【解析】(1)中性或弱堿高壓蒸汽滅菌（或濕熱滅菌）

(2)細菌計數(shù)板多。

(3)使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標記為乙組；將未接種的不含組氨酸的完全培養(yǎng)基標記為丙組；將甲、乙、丙組培養(yǎng)基放于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，一段時間后觀察并統(tǒng)計培養(yǎng)基上的菌落數(shù)乙組培養(yǎng)基出現(xiàn)較多菌落；甲組培養(yǎng)基沒有出現(xiàn)菌落或出現(xiàn)菌落、但菌落數(shù)少于乙組；丙組培養(yǎng)基無菌落六、綜合題(共4題，共16分)26、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作步驟包括：目的基因的獲?。换虮磉_載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。

（1）目的基因可以從自然界已有的物種中分離出來；也可以用人工方法合成。

（2）一個基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子、標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胫参锛毎话悴捎棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將目的基因?qū)雱游锛毎Ｓ蔑@微注射技術(shù)；將目的基因?qū)胛⑸锛毎Ｓ酶惺軕B(tài)細胞轉(zhuǎn)化法。

（4）目的基因的檢測與鑒定可采用DNA分子雜交技術(shù)；分子雜交技術(shù)、抗原—抗體雜交法、個體水平的鑒定。

【詳解】

（1）在人體內(nèi)獲取目的基因時要用到的工具是限制酶；它能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開；一個基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子、標記基因等，為了確保該血清白蛋白只在牛乳汁中出現(xiàn)，在構(gòu)建基因表達載體時需要將牛乳腺蛋白基因啟動子等元件和人血清白蛋白基因重組在一起；乳腺生物反應(yīng)器有一定的局限性，只能在雌性動物中應(yīng)用，若要打破性別限制，科學(xué)家還可以構(gòu)建膀胱生物反應(yīng)器，從尿液中收集人血清白蛋白。

（2）要確認轉(zhuǎn)基因牛是否表達出相應(yīng)的血清白蛋白；即檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可以采用的方法是抗原—抗體雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因表達出相應(yīng)的血清白蛋白；該方法的原理是抗原抗體的結(jié)合具有特異性。

（3）單克隆抗體的制備利用了動物細胞融合技術(shù)；通常使用滅活病毒促進已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的融合，通過多次篩選和抗體檢測，以獲得能產(chǎn)生專一抗體的能迅速大量繁殖的雜交瘤細胞，進而通過體外大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，獲得單克隆抗體。單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強；靈敏度高、可大量制備。

【點睛】

本題主要考查基因工程的應(yīng)用和單克隆抗體相關(guān)知識，要求考生掌握基因工程的基本工具和步驟以及相關(guān)應(yīng)用，能根據(jù)題干信息分析實際應(yīng)用過程中的各類問題，并明確單克隆抗體制備原理和特點?！窘馕觥肯拗泼概Ｈ橄俚鞍谆騿幼影螂卓乖贵w雜交抗原抗體的結(jié)合具有特異性已免疫的B淋巴細胞特異性強、靈敏度高、可大量制備27、略

【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體—菌落。

（1）

制備含菌平板時采用（稀釋）涂布平板法接種。

（2）

對吸管；培養(yǎng)基的滅菌方法分別是干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。為檢測滅菌效果可對培養(yǎng)基進行不接種培養(yǎng)（或空白培養(yǎng)）；若在適宜條件下培養(yǎng)無菌落出現(xiàn)，則培養(yǎng)基沒有被污染，否則培養(yǎng)基被污染了。

（3）

酵母菌在無氧時；進行無氧呼吸才能產(chǎn)生酒精，故釀制果酒時，發(fā)酵后期酵母菌的代謝類型屬于異養(yǎng)厭氧型；自制果酒時，葡萄果漿中的雜菌與酵母菌的種間關(guān)系主要是競爭關(guān)系。

（4）

實驗中沒有設(shè)置不同濃度的該天然植物抗菌液對酵母菌的抑菌作用影響；故根據(jù)實驗結(jié)果，不能得出“相同濃度的該天然植物抗菌液對酵母菌的抑菌作用更大”的結(jié)論。該天然植物抗菌液對金黃色葡萄球菌的抑菌作用的特點是：該天然植物抗菌液對金黃色葡萄球菌有抑制作用，且在一定范圍內(nèi)隨濃度增大，其抑制作用越明顯。

【點睛】

本題主要考查微生物的滅菌方法及其培養(yǎng)，考查學(xué)生的理解能力?！窘馕觥浚?）（稀釋）涂布平板法。

（2）干熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法不接種培養(yǎng)（或空白培養(yǎng)）

（3）異養(yǎng)厭氧型競爭。

（4）不能該天然植物抗菌液對金黃色葡萄球菌有抑制作用，且在一定范圍內(nèi)隨濃度增大，其抑制作用越明顯28、略

【分析】【分析】

1；目的基因：主要指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因；也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲??；②利用PCR技術(shù)擴增