生物分離技術(shù)習(xí)題庫

一、名詞解釋

2.凝聚：在電解質(zhì)作用下，破壞細胞菌體和蛋白質(zhì)等膠體粒子的分散狀態(tài),使膠體粒

子聚集的過程。

3.分配系數(shù):在一定溫度、壓力下，溶質(zhì)分子分布在兩個互不相溶的溶劑里，達到平

衡后，它在兩相的濃度為一常數(shù)叫分配系數(shù)。

5.CM-SephadexC-50:援甲基纖維素、弱酸性陽離子交換劑，吸水量為每克干膠

吸水五克。

6.絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成

坦大的絮凝團的過程

7.過濾：是在某一支撐物上放過濾介質(zhì)，注入含固體顆粒的溶液，使液體通過，固體

顆粒留下，是固液分離的常用方法之一。

8,萃取過程：利用在兩個互不相溶的液相中各種組分（包括目的產(chǎn)物）溶解度的不同,

從而達到分離的目的

1

9.吸附：是利用吸附劑對液哧或氣體中某一組分具有選擇性吸附的能力，使其富集在

吸附劑表面的過程。

10.反滲析：當外加壓力大于滲透壓時,水將從溶液一側(cè)向純水一側(cè)移動，此種滲透

稱之為反滲透。

1

11.離心沉降：利用懸浮液或乳濁液中密度不同的組分在離心力場中迅速沉降分層，

實現(xiàn)固液分離

12.離心過濾：使懸浮液在離心力場作用下產(chǎn)生的離心力壓力，作用在過濾介質(zhì)上,

使液體通過過濾介質(zhì)成為濾液，而固體顆粒被截留在過濾介質(zhì)表面，從而實現(xiàn)固液分離，

是離心與過濾單元操作的集成，分離效率更高

13.離子交換：利用離子交姿樹脂作為吸附劑，將溶液中的待分離組分，依據(jù)其電荷

差異，依靠庫侖力吸附在樹脂上，然后利用合適的洗脫劑將吸附質(zhì)從樹脂上洗脫下來，達

到分離的目的Q

15.助濾劑：助濾劑是一種具有特殊性能的細粉或纖維，它能使某些難以過濾的物料

變得容易過濾

16.沉降：是指當懸浮液靜置時,密度較大的固體顆粒在重力的作用下逐漸下沉,這

一過程成為沉降

17.色譜技術(shù)：是一組相關(guān)分離方法的總稱，色譜柱的一般結(jié)構(gòu)含有固定相（多孔介

質(zhì)）和流動相，根據(jù)物質(zhì)在兩相間的分配行為不同（由于親和力差異），經(jīng)過多次分配（吸

附-解吸-吸附-解吸…），達到分離的目的Q

2

18.有機溶劑沉淀：在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親水的有機溶劑，降低溶質(zhì)的

溶解度，使其沉淀析出。

19.等電點沉淀：調(diào)節(jié)體系pH值，使兩性電解質(zhì)的溶解度下降,析出的操作稱為等

2

目點沉淀。

20.膜分離：利用膜的選擇性（孔徑大?。阅さ膬蓚?cè)存在的能量差作為推動力，

由于溶液中各組分透過膜的遷移率不同而實現(xiàn)分離的一種技術(shù)。

21.化學(xué)滲透破壁法：某些化學(xué)試劑，如有機溶劑、變性劑、表面活性劑、抗生素、

金屬螯合劑等，可以改變細胞壁或細胞膜的通透性,從而使胞內(nèi)物質(zhì)有選擇地滲透出來。

22.超臨界流體：超臨界流體是狀態(tài)超過氣液共存時的最高壓力和最高溫度下物質(zhì)特

有的點一臨界點后的流體。

23.臨界膠團濃度：將表面活性劑在非極性有機溶劑相中能形成反膠團的最小濃度稱

為臨界膠團濃度，它與表面活性劑種類有關(guān).

24.反滲透：在只有溶劑能通過的滲透膜的兩側(cè),形成大于滲透壓的壓力差,就可以

使溶劑發(fā)生倒流,使溶液達到濃縮的效果，這種操作成為反滲透。

29.膜的濃差極化：是指但溶劑透過膜，而溶質(zhì)留在膜上，因而使膜面濃度增大，并

高于主體中濃度。

30.超濾：凡是能截留相對分子量在500以上的高分子膜分離過程稱為超濾,它主要

是用于從溶劑或小分子溶質(zhì)中將大分子篩分出來。（納濾：以壓力差為推動力，從溶液中分

離300~1000小分子量的膜分離過程,孑準分布在平均2nm）

31生物分離技術(shù)：是指從動植物與微生物的有機體或器官、生物工程產(chǎn)物（發(fā)酵液、

培養(yǎng)液）及其生物化學(xué)產(chǎn)品中提取、分離、純化有用物質(zhì)的技術(shù)過程。

32.離心分離技術(shù)：是基于固體顆粒和周圍液體密度存在差異，在離心場中使不同密

度的固體顆粒加速沉降的分離過程.

35.鹽析：是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量

的中性鹽,使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù)。

36.有機聚合物沉析：利用生物分子與某些有機聚合物形成沉淀而析出的分離技術(shù)稱

為有機聚合物沉析。

39.功能基團：離子交換樹脂中與教體以共價鍵聯(lián)結(jié)的不能移動的活性基團，又稱功

能基團

40.平衡離子：離子交換樹脂中與功能基團以離子鍵聯(lián)結(jié)的可移動的平衡離子，亦稱

活性離子。

42，轉(zhuǎn)型；即按照使用要求人為地賦予樹脂平衡離子的過程。

43.洗脫：利用適當?shù)娜軇?將樹脂吸附的物質(zhì)釋放出來，重新轉(zhuǎn)入溶液的過程。

44,樹脂的再生：就是讓使用過的樹脂重新獲得使用性能的處理過程,樹脂的再生反

應(yīng)是交換吸附的逆反應(yīng)。

4

51.凝膠過濾：層析是以具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠顆粒作為固定相，根據(jù)物質(zhì)的分子大小

進行分離的一種層析技術(shù)。

52.離子交換層析：是以離子交換劑為固定相，根據(jù)物質(zhì)的帶電性質(zhì)不同而進行分離

4

的一種層析技術(shù)。

53.高效液相色譜：是指選用顆粒極細的高效耐壓新型固定相，借助高壓泵來輸送流

動相，并配有實時在線檢測器，實現(xiàn)色譜分離過程全部自動化的液相色譜法。

54.親和層析：是利用生物活性物質(zhì)之間的專一親和吸附作用而進行的層析方法,是

近年來發(fā)展的純化酶和其他高分子的一種特殊的層析技術(shù)。

57.過濾介質(zhì):是指能使固-液混合料液得以分離的某一介面,通常指濾布或膜過濾

中所用的膜。

58.等電點：是兩性物質(zhì)在其質(zhì)點的凈電荷為零時介質(zhì)的pH值，溶質(zhì)凈電荷為零,分

子間排斥電位降低，吸引力增大，能相互聚集起來，沉淀析出，此時溶質(zhì)的溶解度最低6

59.有機酸沉析：含氮有機酸（如苦味酸和鞅酸等）能夠與有機分子的堿性功能團形

成復(fù)合物而沉淀析出°

60.選擇變性沉析：是利用蛋白質(zhì)、酶與核酸等生物大分子對某些物理或化學(xué)因素敏

感性不同，而有選擇地使之變性沉析,以達到目的物與雜蛋白分離的技術(shù)，稱為選擇變性

沉杭

二，選擇

1.HPLC是?硼色譜的蹣(C)。C.高效液相色譜

2.針對配基的生物學(xué)特異性的蛋白質(zhì)分離方法是(C)。C.親和層析

3.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是（B）B.中和電荷，破壞水膜

4.從組織中提取酶時，最理想的結(jié)果是（C）0;匕活力最高

6,下列哪項酶的特性對利用醒作為親和層析固定相的分析工具是必需的？（B）

B..對底物有高度特異親合性

7.用于蛋白質(zhì)分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是（C）C.凝膠過濾色譜

45.適合小量細胞破碎的方法是（B）B超聲破碎法

8.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是（B）B,中和電荷，破壞水膜

9,蛋白質(zhì)分子量的測^可采用（C）方法。C,凝膠層析

11.氨基酸的結(jié)晶純化是根據(jù)氨基酸的（A）性質(zhì)。A.溶解度和等電點、

12.離子交換劑不適用于提取（.蛋白質(zhì)）物質(zhì)6

13.人血清清蛋白的等電點為464,在PH為7的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電，清

蛋白質(zhì)分子向（A）A:正極移動

14.蛋白質(zhì)具有兩性性質(zhì)主要原因是（B）B:蛋白質(zhì)分子有多個竣基和氨基

15.使蛋白質(zhì)鹽析可加入i璐！1（D）D:硫酸按

6

16.凝膠色譜分離斷熊是（B）。氏各物質(zhì)分子大〃環(huán)同

18,下列哪一嵋勵性陽離強換棚崩活性彷奐基團（A）A磺酸基團（-S03

H）

23.在蛋白質(zhì)初步提取的過程中，不能使用的方法（C）eC有機溶劑萃取

25.離子交換法是應(yīng)用離子交換劑作為吸附劑，通過（A）將溶液中帶相反電荷

的物質(zhì)吸附在離子交換劑上。A、靜電作用

27.絲狀（團狀）真菌適合采用（A）破碎。A、珠磨法

28.用來提取產(chǎn)物的溶劑稱（C）6C、萃瞄J

29.阻離子非刪（C）.C、可交換的為陽離子

31.凝膠色譜分離的施是（B）。B、告娠分子大“不同

32.洗脫體積是（C）,C.與該溶質(zhì)保留時間相對應(yīng)的藏相體積

34.吸附色譜分離的依據(jù)是（A）。A、固定相對各物質(zhì)的吸附力不同

37.下面哪一種是根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的純化方法（A）eA,蔚口層析

38.純化醒時，醯純度的主要指標是：（D）D,醒的比活力

39.鹽析法^化酶類是根據(jù)（B）進行純化。B調(diào)節(jié)酶溶解度的方法

44.工業(yè)上常用的過濾介質(zhì)不包括（D）。真空介質(zhì)

45.府」物雕瑙凝神（A）。A、明研

49.下列哪項不是蛋白質(zhì)的濃度測定的方法（D）。D核磁頗

50.供生產(chǎn)生物藥物的生物資源不包括（D）D.礦物質(zhì)

51,發(fā)酵液的預(yù)處理方法不包括（C）C離心

52.其他條件均相同時，優(yōu)先選用另附固液分離手段（B過濾）

53.另聃細胞破碎方法適用工業(yè)生產(chǎn)（A）A.高壓勻漿

54.高壓勻漿法破碎細胞，不適用于（D）D.青霉

55.關(guān)于萃取下列說法正確的是（C）C.兩性電解質(zhì)在等電點時進行提取

57.在葡聚糖與聚乙二醇形成的雙水相體系中，目標蛋白質(zhì)存在于（A）A.上相

59.超臨界流體萃取中，如何降低溶質(zhì)的溶解度達到分離的目的（C）C.升溫

61.鹽析操作中，硫酸錢在什么樣的情況下不能使用（B）B堿性條件

8

62.有機溶劑沉淀法中可使用的有機溶劑為（D）D.丙酮

63.有機溶劑為什么能夠沉淀蛋白質(zhì)（B）B介電常數(shù)小

65,若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陽離子，則等電點pH會（A）A，升高

66.若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陰離子，則等電點pH會（B）B降低

68.那一種膜孑咯最?。–）C.反滲透

69.超濾技術(shù)常被用作（C）C小分子物質(zhì)的純化

70.微孔膜過濾不能用來（D）D.分離離子與小分子

74.酚型離子交換樹脂則應(yīng)在（B）的溶液中才能進行反應(yīng)BpH>9

75.竣酸型離子交換樹脂必須在（C）的溶液中才有交換能力C.pH>7

76，離子交換樹脂適用（B）進行溶脹B乙醇

77.下列關(guān)于離子交換層析洗脫說法錯誤的是(D)D.若被交換的物質(zhì)用酸、堿

洗不下來，應(yīng)使用更強的酸、堿

78.陽樹脂在軟化中易受Fe3+污染，可通過(C)清除鐵化合物。CJ的制劑

的高濃度鹽酸

9

81.分子篩層析指的是（C）C.凝膠過濾

82.常用的紫外線波長有兩種（B）B254nm和365nm

88.通過改變pH值從而使與離子交換劑結(jié)合的各個組分被洗脫下來，可使用（A）

A.陽離子交換劑一般是pH值從低到高洗脫

94.氣相色譜的載氣不能用（C）C.氧氣

98.珠磨機破碎細胞，適用于（D青霉

99.為加快過濾效果通常使用（C）C惰性助濾劑

100.不能用于固液分離的手段為（C)C.超濾

101.最常用的干財;蜻（D）D、以上都是

104.物理萃取即溶質(zhì)根據(jù)（B）的原理進行分離的B相似相溶

105.納米過濾的濾膜孑噂(D)D<Inm

107.人血清清蛋白的等電點為4.64，在PH為7的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電，

清蛋白質(zhì)打l^](A)A:正極移動

108.單寧沉析法制備菠蘿蛋白醒實驗中，加入1%的單寧于鮮菠蘿汁中產(chǎn)生沉淀,屬

于（D）沉析原理。D有騰沉析

115.下列W?不屬于發(fā)酵液的預(yù)處理：（D）D.層析

124,能夠除去發(fā)酵液中鈣、鎂、鐵離子的方法是（C）C.離子交換

125.從四環(huán)素發(fā)酵液中去除鐵離子，可用（B）B加黃血鹽

126.當向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時，蛋白質(zhì)溶解度（C）C先增大，后減

小

130.下列細胞破碎的方法中，哪個方法屬于非機械破碎法（A）A.化學(xué)法

131.下列哪一項不是常用的濾布材料（C）C濾紙

132.超濾膜截留的顆粒直徑為（B）B0.001~0.02Rm

136.洗脫體積是（C）。C、與該溶質(zhì)保留時間相對應(yīng)的流動相體積

137.分子篩題蚓臧樹g(C)進彳遒化

C.根據(jù)酶分子大小、形狀不同的純化方法

138.用于蛋白質(zhì)分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是(C)C,凝膠過濾色

譜

140.微濾膜所截留的顆粒直徑為（A）A0.02-10pm

141.下列哪一項不是附離子殛樹脂（D）D羥型

142,適宇淘船物質(zhì)的分離的吸附劑是（B）eB.氧化鋁

144.關(guān)于分配柱層析的基本操作錯誤（D）0

D分配柱層析適用于分離極性比較小、在有機溶劑中溶解度大的成分,或極性很相似

的成分。

147.超臨界流體萃取法適用于提?。˙）B、極性小的成分

148.分離純化早期，由于提取液中成分復(fù)雜,目的物濃度稀,因而易采用分離量大

分辨率低的方法

149.蛋白質(zhì)類物質(zhì)的分離純化往往是多步驟的，其前期處理手段多采用下列哪類的

方法。（B）B負蝸

151,將四環(huán)素粗品溶于pH2的水中,用氨水調(diào)pH4.5-4.6,28-30℃保溫,即有

12

四環(huán)素沉淀結(jié)晶析出。此沉淀方法稱為B）B、等電點法

152.針對配基的生物學(xué)特異性的蛋白質(zhì)分離方法是（C）,C.親和層析

154.反滲透膜的孑混小于（C）C<2nm

12

157.活性炭在下列明附溶劑中吸附能力最強(A)A、水

160,在超濾過程中，主要的推動力是(C)C、壓力

162.在選用凝膠層析柱時，為了提高分辨率，宜選用的層析柱是(A)A、粗

且長的163.如果用大腸桿菌作為宿主細胞，蛋白表達部位為周質(zhì)，下面哪種細胞破碎的

方

法最佳(C)C.滲透壓休克法

164.鹽柝去與醐溶孤麻潮效，其優(yōu)點1(B)B,轆作用小

165.在萃取液用量相同的條件下，下列哪種萃取方式的理論收率最高三級逆流萃取

三，判斷題

1.胱酷Jd種可出解的儺。(x)

2.通跡［I入某些助劑麒麟進懶姐鞠方法之1(V)

3.珠磨法中適當?shù)卦黾友心┑难b量可提高細胞破碎率。(x)

4.高級海能被細胞壁中的類脂吸收，使胞壁膜溶脹，導(dǎo)致細胞破碎。(x)

5，雌翻與瞅轆膽溶。(x)

13

10.海湘為氣體則稱為氣相色譜。(V)

13.在生物制劑制備中，常用的緩沖系統(tǒng)有磷酸鹽緩沖液；碳酸鹽緩沖液；鹽酸鹽緩

沖液；醋酸鹽韁中液等。(X)

14.要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等電點附近進行提取。(x)

15.應(yīng)用有機溶劑提取生化成分時，T殳在較高溫度下進行.(x)

16，常壓干燥濃縮的缺點是設(shè)備投資及操作維護費用高，生產(chǎn)能力不太大。(x)

17.生物物質(zhì)中最常用的干燥方法是減壓干燥。(V)

18.冷凍干燥適用于高度熱敏的生物物質(zhì).(V)

19,溶劑的極性從小到大為西醇＞乙醇＞水＞乙酸。(V)

20,蛋白質(zhì)變性，一級、二級、三級結(jié)構(gòu)I瞰破壞。(x)

14

21.蛋白質(zhì)類的生物大分子在鹽析過程中,最好在高溫下進行,因為溫度高會增加其

(x)

25.離子交換劑是一種不溶于酸、堿及有機溶劑的固態(tài)學(xué)分子化創(chuàng)隊(V)

26.蛋白質(zhì)變性后溶解度降低，主要是因為電荷被中和及水膜被去除所弓I起的。(x)

14

28.當某一蛋白質(zhì)分子的酸性氨基酸殘基數(shù)目等于其堿性氨基酸殘基數(shù)目時，此蛋白

質(zhì)的等電點為7.0。(V)

31,板框壓濾機可過濾所有菌體。(x)

32.高壓勻漿法可破碎高度分枝的微生物。(x)

33.超聲波破碎法的有效能量利用率極低，操作過程產(chǎn)生大量的熱，因此操作需在冰

Z國有外部冷卻的容器中進行。(J)

35.有機溶劑被細胞壁吸收后，會使細胞壁膨脹或溶解，導(dǎo)致破裂，把細胞內(nèi)產(chǎn)物釋

海詠相林:(V)

36.蛋白質(zhì)為兩性電霰，改變pH可g荷電顏,pH>pl蛋白質(zhì)帶正電x)

37.蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì)，眥pH取荷轆氏pH>pl蛋白質(zhì)帶負電。)

38.蛋白鼠兩性頓質(zhì),峻pH可圖觸齦,pH<pl蛋白質(zhì)帶負電(x)

39.蛋白勵兩性幡質(zhì)，改變pH匝盹性質(zhì)邛H,pl局白質(zhì)帶正電。(V)

40.離心是基于固體顆粒和周圍液體密度存在差異而實現(xiàn)分離的。（V）

41.不同高分子化合物的溶液相互混合可形成兩相或多相系統(tǒng)，如葡聚糖與聚乙二醇

（PEG）按一定比例與水混合后，溶液先呈渾濁狀態(tài)，待靜置平衡后，逐漸分成互不相溶

的兩相,上相富含匹G,下相富含葡聚糖。（V）

15

42.不同高分子化合物的溶液相互混合可形成兩相或多相系統(tǒng)，如葡聚糖與聚乙二醵

(PEG)按一定比例與水混合后,溶液先呈渾濁狀態(tài),待靜置平衡后,逐漸分成互不相溶

的兩相，下相富含PEG，上相富含襦糖。(x)

43.超臨界流體溫度不變條件下,溶解度隨密度(或壓力)的增加而增加，而在壓力

不變時,溫度增加情況下，溶解度有可能增加或下降。(V)

44.鹽析是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異，向溶液中加入一定量的

中性鹽，使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù).(V)

45.硫酸懶雌環(huán)境中可以應(yīng)用。(x)

46.在低鹽濃度時，鹽離子能增加生物分子表面電荷，使生物分子水合作用增強，具

有促進溶解的作用。(V)

47.向含有生化物質(zhì)的水溶液中加入一定量親水性的有機溶劑，能使生化物質(zhì)沉淀析

Ho(V)

48.而?晰乍用小于乙醇。(x)

49.有機溶劑與水混合要在低溫下進行。(V)

50.削I溶劑沉析分辨物比鹽析高。(V)

51.若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陽離子，則等電點pH降低。(x)

16

52.等電點沉淀在實際操作中應(yīng)避免溶液pH上升至5以上。(V)

53/蜘潮1加強小s(x)

61.陰樹脂易受瓠粒污染，可用有機溶劑浸泡或淋洗6(x)

64，層析分離是一種化學(xué)的分離方法。(x)

70.凝膠柱層析可進行生物大分子分子量的測定。(V)

79,滲透壓沖擊是各種細胞破碎法中最為溫和的一種，適用于易于破碎的細胞，如動

物細胞和革蘭氏陽性菌。(x)

85.當氣體的溫度超過其臨界溫度,壓力超過臨界壓力之后，物質(zhì)的聚集狀態(tài)就介于

氣態(tài)和液態(tài)之間，成為超臨界流體。(V)

86.鹽析反應(yīng)完全需要一定時間，硫酸技全部加完后,應(yīng)放置30min也t才可進

能?液分離。(V)

91.采用溶劑提取法提取中草藥有效成分時，選擇溶劑的原則是相"似相溶原則”。

(V)

92.凝聚與絮凝作用的原理是相同的，只是沉淀的狀態(tài)不同。(x)

93.凍結(jié)-融化法凍結(jié)的作用是破壞細胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu),增加其親水性和通透性來破

(V)

17

95.丙酮，介電常數(shù)較低，沉析作用大于乙醇，所以在沉析時選用丙酮較好。（x）

97.鹽析作用也能減少有機溶劑在水中的溶解度,使提取液中的水分含量減少。可以

促使生化物質(zhì)轉(zhuǎn)入有機相從而提高萃取率。（V）

98.珠磨法中適當?shù)卦黾友心┑难b量可提高細胞破碎率。（x）

99.要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等電點附近進行提取.（x）

102,凝膠層析會使得大分子物質(zhì)后流出，小分子物質(zhì)先流出。（x）

103.透析設(shè)備簡單、操作容易,可用于工業(yè)化生產(chǎn)（x）

106.蛋白質(zhì)變性后溶解度降低，主要是因為電荷被中和及水膜被去除所引起的a（x）

109,離心操作時,對稱放置的離心管要達到體積相同才能進行離心藤作。（x）

111.甲醇沉淀作用與乙醇相當，但對蛋白質(zhì)的變性作用比乙醵、丙酮都小，所以應(yīng)

酎泛（x）

15.鹽析一般可在室溫下進行，當處理對溫度敏感的蛋白質(zhì)或酶時，鹽析操作要在低

溫下(如0&4。。進行。(V)

116.蛋白質(zhì)類的生物大分子在鹽析過程中，最好在高溫下進行,因為溫度高會增加

其溶解度。(X)

18

118.沉淀法、吸附法、萃取法、超濾法都是進行初步純化。(V)

119,滲透壓沖擊是各種細脆破碎法中最為溫和的一種，適用于易于破碎的細胞,如

動物細嘛口革蘭氏陰性菌。(V)

121,化學(xué)萃取即溶質(zhì)根據(jù)相似相溶的原理在兩相間達到分配平衡,萃取劑與溶質(zhì)之

i環(huán)姓彳慍遠(X)

122.若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陽離子(如Ca2+、Mg2+、Zn2+等)，則等電點pH升

Mo(V)

123.采用凝膠過濾分離蛋白質(zhì)主要取決于蛋白質(zhì)分子的大小，先將蛋白質(zhì)混合物上

柱然后進行洗脫，小分子的蛋白質(zhì)由于所受排阻力較小首先被洗脫出來.(x)

124.棚旨使用后不可再回收。(x)

125.多肽和蛋白質(zhì)類藥物的純化包括兩部分內(nèi)容，一是蛋白質(zhì)與非蛋白質(zhì)分開，二

是將不同蛋白質(zhì)分開.(v)

四、填空

1.發(fā)酵液常用的固液分離方法有(離心)和(過濾)等。

2.常用的蛋白質(zhì)沉析方法有（等電點沉淀），（鹽析）和（有機溶劑沉淀）。

3.陽離子交換樹脂按照活性基團分類,可分為（強酸型），（弱酸型）和（中等強度）；

19

其典型的活性基團分別有（磺酸基團），（竣基），（磷酸基）。

4.過飽和溶液的形成方式有：（飽和溶液冷卻），（部分溶劑蒸發(fā)），（化學(xué)反應(yīng)結(jié)晶法）

和（蹣法）。

6.為使過濾進行的順利通常要加入（惰性助濾劑）。

7.離子磅分離操作中，常用的洗脫方法有（pH梯度）和（離子強度（鹽）梯度）。

8.陰離子交換樹脂按照活性基團分類,可分為（強堿型），（號藏型）和（中等強度）；

其典型的活性基團分別有（季氨基）、（伯、仲、叔氨）、G弱疆團都具備）。

11.常用的化學(xué)細胞破碎方法有（滲透沖擊），（酶消化法），（憎溶法），（脂溶法）和

（堿處理法）。

12.DEAESepharose是（陰）離子交換樹脂，其活性基團是（二乙基氨基乙基）。

13.影響離子交換選擇性的因素有（離子化合價），（離子水化半徑），（溶液濃度），（離

子強度）,（溶液的pH值），（有機溶劑），（樹脂物理結(jié)構(gòu)）和（輔助力）,

14.CMSepharose是（陽）離子交換樹脂，其活性基團是（竣甲基）

15.工業(yè)離心設(shè)備從形式上可分為（管式），（套筒式），（碟片式），等型式。

16.膜分離過程中所使用的膜，依據(jù)其膜特性（孑宏）不同可分為（微濾膜）,蟠

潮點），（螭膜）和（醺遨莫）。

20

17.工業(yè)上常用的超濾裝置有（板式），（管式），（螺旋卷式）和（中空纖維式）。

18.影響吸附的主要因素有（吸附劑的性質(zhì)），（吸附質(zhì)的性質(zhì)），溫度），C容液pH

值），（鹽濃度）和（吸附物濃度和吸附劑用量）6

19.影響鹽析的因素有（溶質(zhì)種類），（溶質(zhì)濃度），（pH值）和（溫度）。

20.在結(jié)晶操作中,工業(yè)上常用的起晶方法有（自然起晶法），刺激起晶法）和（晶種

噩法）。

24超臨界流體的特點是與氣體有相似的（粘度（擴散系數(shù)））與液體有相似的（密度）6

25.離子交換樹脂的合成方法有（共聚（加聚））和（均聚（縮聚））兩大類；

28.根據(jù)分離機理的不同，色譜法可分為（吸附色譜），（離子交換色譜），（凝膠色譜）,

（分配色譜）和（親和色譜）。

29.典型的工業(yè)過濾設(shè)備有（板框壓濾機）和（真空轉(zhuǎn)鼓過濾機）。

21

30.常用離心設(shè)備可分為（離心沉降）和（離心過濾）兩大類；

32.根據(jù)吸附劑與吸附質(zhì)之間存在的吸附力性質(zhì)的不同，可將吸附分為（物理）、（化

學(xué)）、（極性）和（交換）吸附；

33.離子交換操作一般分為（動態(tài)）和（靜態(tài)）兩種;

21

34.蛋白質(zhì)等生物大分子，在溶液中呈穩(wěn)定的分散狀態(tài)，其原因是由于（分子表面電荷）

和（水修）；

35.鹽析用鹽的選擇需考慮（鹽析作用強）、（溶解度大）、（生物學(xué)情性）和（來源豐富、

經(jīng)濟）等幾個方面的因素；

36.影響有機溶劑沉淀的因素有（溫度溫（pH）、（樣品濃度）、（中性鹽濃度）和（金

屬e

37.結(jié)晶包括三個過程（過飽和溶液的形成）、（晶核的形成）和（晶體的生長）。

38.過飽和溶液的形成方法有（飽和溶液冷卻）、（部分筋嬲）、（解析）和（化學(xué)反

睦晶）6

41.液-液萃取從機理上分析可分為（物理萃取）和（化學(xué)萃?。﹥深?；

46根據(jù)膜結(jié)構(gòu)的不同,常用的膜可分為（對稱性膜）、（非對稱膜）和（復(fù)合膜）三類；

五.簡答

22

2.試述凝膠色譜的原理？

答；將混合原料加在柱上并用流動相洗脫，則無法進入孔隙內(nèi)部的大分子直接被洗脫

下來，小分子因為可以進入孔隙內(nèi)部而受到很大的阻滯，最晚被洗脫下來，而中等大小的

分子，雖然可以進入孔隙內(nèi)部但并不深入，受到的阻滯作用不強，因而在兩者之間被洗脫

下來。

22

3.在色譜操作過程中為什么要進行平衡？

答：1、流速平衡：流速是柱層析操作當中的主要影響因素，流速的快慢直接影響著分

離的效果，流速過快，混合物得不到完全的分離，流速過慢，整體分離的時間要延長，因

此在分離前首先要確定留宿。

2、液體環(huán)境：為了保持被分離物質(zhì)運動的均一性，以及好的吸附和解析效果，因此要

保持孔隙內(nèi)部和外部液體環(huán)境的一致，所以進行液體環(huán)境的平衡。

5?簡述軟水和無鹽水的制備方法？

答：①軟水的制備：利用鈉型磺酸樹脂除去水中的鈣離子和鎂離子等堿金屬后即可制

得軟水。

②無鹽水的制備：將原水通過氫型強酸性陽離子交換樹脂和羥型強堿或弱堿性陰離子

交換樹脂的組合,經(jīng)過離子交換反應(yīng),將水中所有的陰、陽離子除去，從而制得純度很高

的無鹽純水。

6.在離子交換色譜操作中，怎樣選擇離子交換樹脂？

答；L對陰陽離子交換樹脂的選擇：正電荷選擇陽離子交換樹脂，負電荷選擇陰離子

交換樹脂.

2、對離子交換樹脂強弱的選擇：較強的酸性或堿性，選擇選用弱酸性成弱堿性樹脂。

3、對離子交換樹脂離子型的選擇：根據(jù)分離的目的，弱酸或弱堿性樹脂不使用H或

23

OH型。

7.簡述鹽析的原理及產(chǎn)生的現(xiàn)象？

答：當中性鹽加入蛋白質(zhì)分散體系時可能出現(xiàn)以下兩種情況：

(1)“鹽溶"現(xiàn)象T氐鹽濃度下,蛋白質(zhì)溶解度增大

(2)“鹽析"現(xiàn)象一高鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度隨之下降，原因如下：

(a)無機離子與蛋白質(zhì)表面電荷中和，形成離子對，部分中和了蛋白質(zhì)的電性，使蛋

白質(zhì)分子之間的排斥力減弱，從而能夠相互靠攏；

(b)中性鹽的親水性大，使蛋白質(zhì)脫去水化膜，疏水區(qū)暴露)由于疏水區(qū)的相互作用

導(dǎo)致沉淀；

8.簡述吸附色譜分離技術(shù)的原理？

24

答：利用溶質(zhì)與吸附劑之間的分子吸附力（范德華力，包括色散力、誘導(dǎo)力、定向力以

及氫鍵）的差異而實現(xiàn)分離

11.簡述過飽和溶液形成的方法？

答：（1）熱飽和溶液冷卻（等溶劑結(jié)晶）

適用于溶解度隨溫度升高而增加的體系；同時,溶解度隨溫度變化的幅度要適中；

24

(2)部分溶劑蒸發(fā)法(等溫結(jié)晶法)

適用于溶解度隨溫度降低變化不大的體系,或隨溫度升高溶解度降低的體系；

(3)真空蒸發(fā)冷卻法

使溶劑在真空下迅速蒸發(fā)，并結(jié)合絕熱冷卻，是結(jié)合冷卻和部分溶劑蒸發(fā)兩種方法的

一種結(jié)晶方法。

(4)僧員竭晶

加入反應(yīng)劑產(chǎn)生新物質(zhì)，當該新物質(zhì)的溶解度超過飽和溶解度時，即有晶體析出；

12.怎樣進行離子交換樹脂的預(yù)處理及轉(zhuǎn)型？

答：物理處理：水洗、過篩，去雜，以獲得粒度均勻的樹脂顆粒；

化學(xué)處理：轉(zhuǎn)型(氫型或鈉型)

陽離子樹脂酸一堿一酸陰離子樹脂堿一酸一堿最后以去離子水或緩沖液平衡

13何謂等電點沉析法？

答:蛋白質(zhì)再等電點下的溶解度最低,根據(jù)這一性質(zhì),再溶液中加入一定比例的有機溶

劑，破壞蛋白質(zhì)表面的水化層和雙電層，降低分子間斥力，加強了蛋白質(zhì)分子間的疏水相

互作用，使得蛋白質(zhì)分子得以聚集成團沉淀下來。

25

14.何謂超臨界流體萃取，并簡述其分離原理？

答：超臨界流體萃取是利用超臨界流體具有的類似氣體的擴散系數(shù),以及類似液體的

智度（溶解能力強）的特點，利用超臨界流體為萃取劑進行的萃取單元操作。其特點是安

全、無毒、產(chǎn)品分離簡單，但設(shè)備投資較大。

16.簡述凝膠色譜的分離原理？

答：凝膠排阻色譜的分離介質(zhì)（填料）具有均勻的網(wǎng)格結(jié)構(gòu),其分離原理是具有不同

分子量的溶質(zhì)分子，在流經(jīng)柱床是，由于大分子難以進入凝膠內(nèi)部,而從凝膠顆粒之間流

出，保留時間短；而小分子溶質(zhì)可以進入凝膠內(nèi)部，由于凝膠多孔結(jié)構(gòu)的阻滯作用，流經(jīng)

體積變大，保留時間延長。這樣，分子量不同的溶質(zhì)分子得以分離。

17.膜分離過程中，有那些原因會造成膜污染，如何處理？

答：（1）膜污染主要有兩種情況：一是附著層被濾餅、有機物凝膠、無機物水垢膠體

物質(zhì)或微生物等吸附于表面；另一種是料液中溶質(zhì)結(jié)晶或沉淀造成堵塞。（3分）

（2）膜污染是可頗臧嵋的,措施包括料液預(yù)處理、膜性質(zhì)的改善、操作條件改

鏤試（2分）

（3）膜污染所引起的通量衰減往往是不可逆的，只能通過清洗的處理方式消除，包括

物理方法沖洗和化學(xué)藥品溶液清洗等。（2分）

18.超臨界萃取的原理及SC-C02萃取的優(yōu)點？

26

答原理：溶質(zhì)在超臨界流體中的溶解度，與其密度有關(guān),密度越大，溶解度越大。在

臨界點附近，微小的壓力增加或溫度下降,則溶劑的密度大幅度增加，對溶質(zhì)的溶解度將

大幅度增加，有利于溶質(zhì)的萃取。而在臨界點附近,微小的壓力下降或溫度上升，則溶劑

的密度大幅度減少，對溶質(zhì)的溶解度將大幅減少,有利于溶質(zhì)的分離和溶劑的回收6

優(yōu)點：無毒無腐蝕性,不可燃燒，價格低廉，傳質(zhì)好萃取快，臨界溫度和臨界壓力較

低適合于熱敏生物制品,可獲萃取物或萃余物

20.何謂親和吸附，有何特點？

答：親和吸附是吸附單元操作的一種，它是利用親和吸附劑與目標物之間的特殊的化

學(xué)作用實現(xiàn)的高效分離手段.親和吸附劑的組成包括；惰性載體、手臂鏈、特異性親和配

基

親和吸附的特點是高效、簡便、適用范圍廣、分離速度快、條件溫和，但載體制備難

度大，通用性差，成本較高。

21簡述生物分離過程的特點？

答:1、產(chǎn)品豐富：產(chǎn)品的多樣性導(dǎo)致分離方法的多樣性

2、絕大多數(shù)生物分離方法來源于化學(xué)分離

3、生物分離一般比化工分離難度大（1）成分復(fù)雜（2）懸液中的目標產(chǎn)物濃度低（3）

生物活性,條件相對溫和（4）生物產(chǎn)品要求高質(zhì)量（5）獲得高純度的干燥產(chǎn)品（6）衛(wèi)

生

27

22.試t:融凝聚和絮凝兩過程的異同？

答：凝聚和絮凝一在電介質(zhì)作用下，破壞溶質(zhì)膠體顆粒表面的雙電層,破壞膠體系

統(tǒng)的分散狀態(tài)，使膠體粒子聚集的過程。

凝聚：簡單電解質(zhì)降低膠體向的排斥力。從而范德華引力起主導(dǎo)作用，聚合成較大的

膠粒，粒子的密度越大，越易分離.

絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗

天的絮凝團的過程

24.簡述有機溶劑沉析的原理？

答：1、概念：在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一強親水的有機溶劑，解氐溶質(zhì)的溶解度，

使其沉淀析出.

2、原理；

(1)降低了溶質(zhì)的介電常數(shù)，使溶質(zhì)之間的靜電引力增加，從而出現(xiàn)聚集現(xiàn)象,導(dǎo)致

沉淀。

(2)由于有機溶劑的水合作用，降低了自由水的濃度，降低了親水溶質(zhì)表面水化層的

厚度，降低了親水性，導(dǎo)致脫水凝聚。

25.膜分離技術(shù)的類型和定義？

28

答：膜分離過程的實質(zhì)是物質(zhì)透過或被截留于膜的過程，近似于篩分過程，依據(jù)濾膜

孔徑大小而達到物質(zhì)分離的目的，故而可以按分離粒子大小進行分類：

(1)微濾：以多孔細小薄膜為過濾介質(zhì)，壓力為推動力，使不溶性物質(zhì)得以分離的操

作,孔徑分布范圍在0,025~14pm之間；

(2)超濾：分離介質(zhì)同上，但孔徑更小，為0.001-0.02pm,分離推動力仍為壓力

差，適合于分離酶、蛋白質(zhì)等生物大分子物質(zhì)；

(3)反滲透：是一種以壓力差為推動力，從溶液中分離出溶劑的膜分離操作,孔徑范

圍在0.0001-0.001pm之間；(由于分離的溶劑分子往往很小，不能忽略滲透壓的作用，

故而成為反滲透)；

(4)納濾：以壓力差為推動力，從溶液中分離300~1000小分子量的膜分離過程,

孔徑分布在平均2nm;

(5)電滲析：以電位差為推動力，利用離子交換膜的選擇透過性，從溶液中脫除或富

集電解質(zhì)的膜分離操作；

28.鹽析的原理及影響因素？

1、親水性大于蛋白質(zhì)破壞水化層2、帶電離子中和蛋白質(zhì)表面電荷

影響因素：（1）鹽離子濃度（2）生物分子種類（3）生物分子濃度（4）pH值（五）

溫度

29

29.影響有機溶劑沉析的因素？（1）溫度（2）生物樣品的濃度（3）pH（4）離子

弓踱（5）纏離子

30.等電點沉析注意事項？（1）等電點的改變（2）目的物的穩(wěn)定性（3）鹽溶作用