園藝植物遺傳育種 課件 實(shí)訓(xùn) 1-15

園藝植物遺傳育種第一章

緒論第二章經(jīng)典遺傳與細(xì)胞質(zhì)遺傳第三章數(shù)量遺傳第四章園藝植物種質(zhì)資源與引種馴化第五章選擇育種第六章有性雜交育種第七章雜種優(yōu)勢(shì)利用第八章誘變育種第九章現(xiàn)代生物技術(shù)育種第十章新品種的審定與推廣繁育實(shí)訓(xùn)1-15實(shí)訓(xùn)1分離定律的觀察性狀是生物體所表現(xiàn)的形態(tài)特征和生理特征的總稱。孟德爾的分離定律包括顯隱性法則和分離法則。顯隱性法則是指在雜種一代（F1）兩個(gè)親本的性狀中只有顯性一方的性狀得以表現(xiàn)。分離法則是指雜種一代通過自交產(chǎn)生的雜種二代（F２）中，就一對(duì)性狀而言，是以３顯性：１隱性的比例出現(xiàn)的。通過玉米雜交后代粒色的顯性和隱性性狀的觀察、統(tǒng)計(jì)，驗(yàn)證分離規(guī)律，加深對(duì)分離規(guī)律的認(rèn)識(shí)和理解。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目１．觀察玉米子粒的性狀。２．驗(yàn)證分離規(guī)律F2的顯隱性比例為３∶１。３．驗(yàn)證測(cè)交規(guī)律F2的顯隱性比例為１∶１。試材：玉米的白粒自交系與黃粒自交系雜交的雜種一代（F1）果穗、雜種二代（F2）果穗、黃粒雜種一代（F1）及白粒親本測(cè)交的果穗等。用具：計(jì)數(shù)器、計(jì)算器等。三、試材與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．觀察

F1果穗、F2果穗與測(cè)交果穗粒色有何不同。２．統(tǒng)計(jì)分別數(shù)出F2與測(cè)交多個(gè)果穗上白色與黃色子粒的數(shù)目，將統(tǒng)計(jì)結(jié)果填入表１和表２。五、作

業(yè)１．F1和F2果穗、測(cè)交果穗的粒色各有幾種？為什么？２．計(jì)算統(tǒng)計(jì)表中的比例，實(shí)際比例和理論比例為什么有偏差？實(shí)訓(xùn)2園藝植物遺傳率的估算數(shù)量性狀由于是受多基因控制的，并易受環(huán)境條件的影響，所以對(duì)數(shù)量性狀的遺傳研究中常用方差（變量）來表示各種因素的變異情況，在方差的基礎(chǔ)上再進(jìn)行一些遺傳參數(shù)的估算。常用的遺傳參數(shù)之一就是遺傳率，用h２表示，它是指遺傳因素所引起的方差占總（表型）方差的相對(duì)比例。遺傳率又分廣義遺傳率和狹義遺傳率。估算遺傳率可以了解一些數(shù)量性狀的遺傳變異與環(huán)境的相互關(guān)系，對(duì)選擇親本、預(yù)測(cè)后代的表現(xiàn)、提高選擇效率都有參考價(jià)值。百日菊重瓣性的遺傳為數(shù)量性狀的遺傳，其重瓣類型（Ｐ1）與單瓣類型（P２）雜交后，F(xiàn)２群體中呈現(xiàn)較大的變異幅度，且出現(xiàn)了兩種親本類型。因此通過對(duì)F２群體的分析，可以估算出百日菊重瓣性的遺傳率。學(xué)習(xí)觀察整理田間數(shù)據(jù)，掌握對(duì)園藝植物遺傳率估算的基本方法。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)并估算廣義遺傳率。百日菊的重瓣類型（P1）、單瓣類型（P２）、雜種F2的群體等。三、試材與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．統(tǒng)計(jì)全重瓣類型（P1）每朵花的花瓣數(shù)量（至少１０朵）。２．統(tǒng)計(jì)全單瓣類型（P2）每朵花的花瓣數(shù)量（至少１０朵）。３．統(tǒng)計(jì)F2群體中每朵花的花瓣數(shù)量（至少１００朵）。４．繪制花瓣數(shù)量頻率分布圖，并估算遺傳率。五、作

業(yè)每人數(shù)１０朵花，然后填入表3，全班匯總，估算遺傳率。實(shí)訓(xùn)3花卉種質(zhì)資源調(diào)查種質(zhì)資源是園藝植物材料中能將其特定的遺傳信息傳遞給后代并能表達(dá)的遺傳物質(zhì)的總稱。它是園藝植物育種工作的物質(zhì)基礎(chǔ)，是培育園藝植物新品種的物質(zhì)基礎(chǔ)。種質(zhì)資源調(diào)查主要是對(duì)園藝植物的自然環(huán)境及植物生長情況進(jìn)行調(diào)查。了解園藝植物種質(zhì)資源調(diào)查的意義，掌握?qǐng)@林植物種質(zhì)資源調(diào)查的方法。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目１．花卉種質(zhì)資源的概況調(diào)查。２．花卉種類、品種、代表植株的調(diào)查。試材：選擇本地區(qū)主要栽培花卉２～５種，如矮牽牛、三色堇、一串紅、石竹等。用具：記錄用具、測(cè)量用具、種子袋、標(biāo)本夾、照相機(jī)、有關(guān)工具書等。三、試材與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．選擇本地區(qū)有代表性的花卉２～５種，分別進(jìn)行其野生種和栽培種在當(dāng)?shù)氐姆诸?、生長、應(yīng)用、研究等狀況的調(diào)查。２．對(duì)花卉種類代表植株的調(diào)查（１）植株的一般概況來源、栽培歷史、分布特點(diǎn)、栽培比例、生產(chǎn)反應(yīng)等。（２）生物學(xué)特性生長習(xí)性、開花結(jié)果習(xí)性、物候期、抗病性、抗旱性、抗寒性等。（３）形態(tài)特征株型、葉、花、種子等。（４）經(jīng)濟(jì)狀況產(chǎn)量、品質(zhì)、用途、貯運(yùn)性等。３．按花卉各品種的形態(tài)特征，比較其典型特征并進(jìn)行分類。五、作

業(yè)１．填寫花卉種質(zhì)資源（以一串紅為例）植株形態(tài)特征登記表（表４）。２．每組完成１份被調(diào)查植物的種質(zhì)資源情況報(bào)告。實(shí)訓(xùn)4引種試驗(yàn)觀察園藝植物的種類和品種在自然界都有一定的分布范圍，把園藝植物的品種從原有分布范圍引入到新的地區(qū)栽種，通過試驗(yàn)鑒定，選擇其優(yōu)良者繁殖推廣，實(shí)現(xiàn)引種。通過對(duì)引種試驗(yàn)的觀察，加深對(duì)引種基本原理的理解，掌握引種的程序，學(xué)會(huì)進(jìn)行引種試驗(yàn)。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目調(diào)查品種的植物學(xué)性狀和經(jīng)濟(jì)性狀。試材：玉米、蔬菜或花卉等引種植物的有關(guān)資料、標(biāo)本、圖片、引種地的環(huán)境資料等。用具：計(jì)算器、計(jì)算機(jī)及相關(guān)軟件、照相機(jī)、天平、米尺、記錄本等。三、試材與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容每個(gè)品種調(diào)查1０～２0株，比較引進(jìn)品種和對(duì)照品種的植物學(xué)性狀和經(jīng)濟(jì)性狀。１．形態(tài)特征的觀察株高、株幅，葉片數(shù)、葉形、葉色等。２．生育期調(diào)查播種期、出苗期、定植期、開花期、采收期等。３．品質(zhì)的調(diào)查含糖量、風(fēng)味、質(zhì)地、外觀品質(zhì)等。４．抗病蟲的調(diào)查調(diào)查病蟲害情況、計(jì)算發(fā)病率和病情指數(shù)等。５．產(chǎn)量調(diào)查稱單株重、折算單位面積的產(chǎn)量等。五、作

業(yè)１．４～５人為１組進(jìn)行調(diào)查，將調(diào)查的結(jié)果列表記載。２．總結(jié)引進(jìn)品種與對(duì)照品種的比較情況，并作出結(jié)論。實(shí)訓(xùn)5果樹芽變選種芽變選種是對(duì)芽的分生組織自然發(fā)生的遺傳變異（體細(xì)胞突變）進(jìn)行人工選擇以獲得優(yōu)良新品種的育種方法。其最大特點(diǎn)就是利用無性繁殖園藝植物品種的現(xiàn)有變異，在保持原品種綜合優(yōu)良性狀的基礎(chǔ)上，改進(jìn)其個(gè)別性狀，起到“品種修繕”的作用。芽變選種的關(guān)鍵在于發(fā)現(xiàn)變異并分析變異的原因，區(qū)別性狀遺傳性變異（即芽變）和非遺傳性變異（即飾變）。此外，由于芽變常常以嵌合體形式存在，因此要對(duì)變異體進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性的測(cè)定，篩選變異穩(wěn)定的材料，并對(duì)變異性狀進(jìn)行綜合分析研究，以確定其利用價(jià)值。通過果樹芽變選種的實(shí)踐，進(jìn)一步掌握芽變的規(guī)律和特點(diǎn)，了解無性繁殖的園藝植物的品種、個(gè)體和枝條間的性狀特點(diǎn)，掌握芽變選種的方法和步驟，分析鑒別變異的性質(zhì)和特點(diǎn)，選出優(yōu)良變異的單株和枝條。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目１．明確選種的對(duì)象和目標(biāo)，確定選種時(shí)期，制定選種程序。２．組織選種實(shí)施。用具：卡尺、鋼卷尺、天平、折光儀、照相機(jī)、水果刀、枝剪、油漆、標(biāo)簽、采果袋、記載表等。地點(diǎn)：選用蘋果、柑橘或其他果樹集中栽培的成年果園。三、用具與地點(diǎn)四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．明確選種的對(duì)象和目標(biāo)芽變選種的目標(biāo)主要是針對(duì)當(dāng)?shù)卦耘嗟墓麡浞N類和品種在生產(chǎn)上存在的問題、市場(chǎng)需求以及果樹發(fā)展方向來確定。由于芽變選種主要是從原有優(yōu)良品種中進(jìn)一步選擇更優(yōu)良的變異，要求在保持原品種優(yōu)良性狀的基礎(chǔ)上，針對(duì)其存在的主要缺點(diǎn)，通過選擇而使之得到改善。蘋果：元帥系蘋果，主要選濃紅耐貯型和短樹豐產(chǎn)型?！畤狻x抗裂果的濃紅型?！饚洝x抗早期落葉病、抗果銹、耐貯藏不皺皮的高樁變通型和短技豐產(chǎn)型。柑橘：溫州蜜柑系品種主要應(yīng)選無核優(yōu)質(zhì)型變異、濃橙色大果型變異、緊湊豐產(chǎn)型變異。２．確定選種時(shí)期首先根據(jù)選種目標(biāo)，抓住最易發(fā)生芽變的有利時(shí)機(jī)進(jìn)行。一般可在果實(shí)采收期，該時(shí)期最易發(fā)現(xiàn)果實(shí)經(jīng)濟(jì)性狀的變異，如果實(shí)著色期、成熟期、果實(shí)的形狀、顏色、品質(zhì)、結(jié)果習(xí)性和豐產(chǎn)性等。其次可在災(zāi)害發(fā)生期，如霜凍、旱、澇、病蟲害等發(fā)生后，選擇抗性強(qiáng)的變異類型。例如，在凍害發(fā)生之后，到田間進(jìn)行觀察，如果發(fā)現(xiàn)一個(gè)枝條或者一個(gè)植株沒有被凍死，而其他的植株幾乎都被凍死了，則基本上可以認(rèn)為該枝條或者植株是一個(gè)抗凍性較強(qiáng)的芽變；然后從該植株上取下枝條進(jìn)行高接，待長成植株后再和其他的植株一起鑒定抗寒的強(qiáng)弱，如果其抗凍性仍然比較強(qiáng)，則可以斷定是遺傳性變異。在發(fā)現(xiàn)抗病性的芽變時(shí)，要在病蟲害發(fā)生特別嚴(yán)重的地段和病蟲害高發(fā)期，到田間進(jìn)行檢查，如果發(fā)現(xiàn)一些病蟲害發(fā)生較少的植株或枝條，就可以仔細(xì)分析這些變異發(fā)生的情況，作出是飾變還是芽變的初步判斷。３．制定選種程序芽變選種程序大致可按初選、復(fù)選和決選３個(gè)步驟進(jìn)行。（１）初選在育種實(shí)踐上，初選時(shí)首先要廣泛發(fā)動(dòng)群眾，向其說明選種的意義、目標(biāo)和要求，組織群眾選報(bào)變異；其次，根據(jù)選報(bào)情況，由調(diào)查選種人員到現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行核實(shí)，同時(shí)對(duì)變異進(jìn)行比較分析，篩除有充分證據(jù)可以肯定是一般環(huán)境影響的飾變，對(duì)有希望的變異植株或枝條進(jìn)行標(biāo)記和編號(hào)，作為選種材料，并將初選過程詳細(xì)記錄。以蘋果、柑橘為例，見表５和表６。（２）復(fù)選對(duì)初選材料集中在相對(duì)相似的條件下進(jìn)行科學(xué)的分析和鑒別，從中選出符合選種目標(biāo)要求或具有其他特點(diǎn)的優(yōu)良品系。復(fù)選工作主要是在高接鑒定圃和選種圃內(nèi)進(jìn)行，即對(duì)初選優(yōu)株高接鑒定其變異的穩(wěn)定性、變異的性質(zhì)和程度以及經(jīng)濟(jì)價(jià)值等。在進(jìn)行高接鑒定時(shí)要用原品種作為對(duì)照，經(jīng)結(jié)果鑒定有希望的優(yōu)良單株，應(yīng)盡快嫁接繁殖建立選種圃，以便對(duì)芽變系進(jìn)行系統(tǒng)觀察和全面鑒定。待結(jié)果后３年的連續(xù)觀察，同時(shí)參考原母本和高接鑒定圃的表現(xiàn)，復(fù)選出優(yōu)異的單株參加決選，并同時(shí)進(jìn)行多點(diǎn)試驗(yàn)以鑒定其風(fēng)土適應(yīng)性。（３）決選對(duì)經(jīng)過復(fù)選的優(yōu)良品系進(jìn)行最后的評(píng)定工作，以決選出最優(yōu)異的新品系。具體方法是先由選種組根據(jù)復(fù)選結(jié)果提出決選申請(qǐng)，并向鑒評(píng)委員會(huì)提供完整的記錄資料和實(shí)物材料以及有關(guān)的鑒定和評(píng)價(jià)。然后由主管部門組織專家進(jìn)行最后的鑒評(píng)。如認(rèn)為確屬優(yōu)良品系而有發(fā)展前途的，即可作為芽變新品系而命名和繁殖推廣。４．組織選種實(shí)施在選種目標(biāo)、程序和時(shí)期確定之后，即可按要求組織實(shí)施。在實(shí)施過程中，要根據(jù)不同階段的任務(wù)有條不紊地協(xié)調(diào)進(jìn)行。為此，應(yīng)周密地做好實(shí)施計(jì)劃，包括實(shí)施人員、實(shí)施地點(diǎn)、實(shí)施時(shí)間、實(shí)施經(jīng)費(fèi)等。本實(shí)訓(xùn)的周期較長，在具體的時(shí)間安排上，可分３個(gè)階段進(jìn)行。第１階段，在學(xué)生已充分了解芽變選種的方法、相關(guān)性狀的特點(diǎn)及其變異規(guī)律之后，由教師帶領(lǐng)學(xué)生到實(shí)訓(xùn)地，觀察各個(gè)具體芽變的性狀表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)具體的變異，做好標(biāo)記，并且根據(jù)預(yù)先設(shè)計(jì)好的表格填寫觀察的結(jié)果。第２階段，將標(biāo)記好的變異枝條剪取一部分芽進(jìn)行高接，同時(shí)剪取沒有變異的芽也進(jìn)行高接，高接在同一株樹上，同時(shí)觀察其性狀特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)其不同之處。第３階段，如果變異的性狀是果實(shí)特性，如顏色、大小等，第２年結(jié)果之后就可以觀察其果實(shí)的變異情況；如果變異形狀涉及抗逆性，如抗病性、抗凍性等，則可以在枝條高接之后進(jìn)行病菌的接種處理或者凍害處理，可以比較迅速地檢測(cè)其抗逆性的差異。五、作

業(yè)１．通過觀察性狀說明園藝植物的芽變主要有哪些特點(diǎn)？在進(jìn)行芽變選種時(shí)，如何根據(jù)這些特點(diǎn)來區(qū)分遺傳性變異和非遺傳性變異？２．如何鑒定芽變？如何純化芽變嵌合體？３．結(jié)合實(shí)訓(xùn)說明在實(shí)踐中如何簡(jiǎn)化芽變選種的程序。實(shí)訓(xùn)6選擇育種選擇育種就是利用現(xiàn)有種類、品種的自然變異群體，通過選擇的手段而育成新品種的途徑。園藝植物的群體中經(jīng)常存在一些變異類型。在栽培條件相對(duì)一致的環(huán)境條件下，如果某些個(gè)體的性狀表現(xiàn)與原始群體中的大多數(shù)植株有明顯差異，并且可以穩(wěn)定遺傳，則這一性狀為可遺傳變異，對(duì)其進(jìn)行選擇有可能獲得優(yōu)新品種。通過單株選擇與混合選擇的實(shí)際操作，使學(xué)生掌握單株選擇法與混合選擇法這兩種基本技能。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目１．單株選擇法。２．混合選擇法。試材：風(fēng)仙花、一串紅、香豌豆、金魚草、雞冠花、虞美人等。用具：量角器、掛牌、種子袋、鉛筆、放大鏡、游標(biāo)卡尺、記錄本、卷尺等。三、試材與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．播種在原始材料圃整地作畦，采用條播或撒播的方式播種，然后進(jìn)行田間管理。２．單株選擇法（１）選擇優(yōu)良單株根據(jù)育種目標(biāo)，選擇綜合性狀優(yōu)良、具有個(gè)別突出優(yōu)點(diǎn)的單株或單個(gè)花序。選擇一般不在田邊而要在田中間進(jìn)行。選擇要貫穿整個(gè)生長季節(jié)，如苗期、開花初期、開花盛期、開花末期及生長后期等，每個(gè)時(shí)期都要進(jìn)行多次選擇，而且還要抓住性狀表現(xiàn)的關(guān)鍵時(shí)期。發(fā)現(xiàn)符合標(biāo)準(zhǔn)的植株要及時(shí)做好標(biāo)記，一般是掛牌標(biāo)記，牌子上注明其主要特點(diǎn)。每次可選十幾株，種子成熟后對(duì)入選單株或單個(gè)花序分別采收，分別編號(hào)并保存。（２）株行試驗(yàn)將入選單株的種子分別種成株行，即每個(gè)單株的種子種成ｌ行或多行，一般行長５～１０ｍ，采用順序排列，原品種作為對(duì)照。在各個(gè)生育期進(jìn)行觀察鑒定，嚴(yán)格選優(yōu)。入選株行各成１個(gè)品系，參加品系鑒定試驗(yàn)。（３）品系鑒定試驗(yàn)將入選各品系種成小區(qū)，小區(qū)面積５～１０ｍ２，并設(shè)２次重復(fù)（品系多的可不設(shè)重復(fù)）和對(duì)照。在生育期間認(rèn)真觀察，凡比對(duì)照表現(xiàn)好、性狀整齊一致、基本符合育種目標(biāo)要求的品系均可入選，種子成熟時(shí)，分別采收。（４）品種鑒定試驗(yàn)將品系鑒定試驗(yàn)中入選的品系，采取隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)種成小區(qū)，小區(qū)面積10～20m２，設(shè)３次重復(fù)，每一重復(fù)內(nèi)設(shè)一對(duì)照。用統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)及時(shí)準(zhǔn)確地對(duì)各品系和對(duì)照進(jìn)行比較、鑒定，從中選出最優(yōu)良的品種。３．混合選擇法（１）選擇優(yōu)良單株在品種的群體中，根據(jù)育種目標(biāo)，在各個(gè)生育期內(nèi)進(jìn)行選擇，選擇株型、花期、觀賞特性等主要性狀相似的優(yōu)良單株或單個(gè)花序，符合標(biāo)準(zhǔn)的掛牌標(biāo)記?？蛇x優(yōu)良單株幾十株，種子成熟后，混合采收種子。選擇時(shí)應(yīng)注意入選的單株必須具有本品種的典型性，做到純中選優(yōu)，否則品種純度和性狀的整齊性便會(huì)顯著下降。（２）混合播種比較鑒定將混合收獲的優(yōu)良單株的種子播種在混選區(qū)內(nèi)，同時(shí)在相鄰小區(qū)內(nèi)種植標(biāo)準(zhǔn)品種（當(dāng)?shù)赝悆?yōu)良品種）及原始群體，進(jìn)行比較鑒定，選出比原品種及標(biāo)準(zhǔn)種優(yōu)異的新品種。如一次選擇未達(dá)到育種目標(biāo)的要求，可重復(fù)（１）、（２）過程，直到選出符合要求的品種為止，即多次混合選擇。五、作

業(yè)以組為單位進(jìn)行單株選擇與混合選擇試驗(yàn)，并總結(jié)選育的全過程，寫出試驗(yàn)報(bào)告。總結(jié)混合選擇法與單株選擇法有何不同。實(shí)訓(xùn)7園藝植物花粉的貯藏及花粉生活力的測(cè)定雜交中常因親本間花期不遇或遠(yuǎn)距離雜交給雜交工作造成困難，有的園藝植物可通過催延花期來解決，有的則不得不進(jìn)行花粉貯藏。在貯藏期內(nèi)，應(yīng)人為創(chuàng)造低溫、干燥、黑暗等條件以降低花粉代謝強(qiáng)度，延長其壽命。在使用外地花粉或經(jīng)過一段時(shí)間貯藏的花粉時(shí)，則應(yīng)事先測(cè)定花粉的生命力，以便雜交成果的分析與研究。了解花粉的貯藏原理與技術(shù)，掌握花粉生活力測(cè)定的方法。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目１．花粉的貯藏。２．花粉生活力的測(cè)定。試材：選用處于花期的部分園藝植物并采集部分花粉為實(shí)訓(xùn)的材料。藥品：蒸餾水、硼酸溶液（10μｇ/ｇ、50μｇ/ｇ及100μｇ/ｇ）、蔗糖（或葡萄糖）、瓊脂、聯(lián)苯胺、碳酸鈉、乙醇、過氧化氫、α－萘乙酚、氯化鈣等。用具：顯微鏡、冰箱、恒溫箱、干燥箱、天平、培養(yǎng)皿、酒精燈、燒杯、量筒、凹形載玻片、蓋玻片、脫脂棉、刀片、小鑷子等。三、試材藥品與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．花粉的貯藏（１）干燥將采集的花粉首先進(jìn)行干燥（可以放在散光下晾干、陰干或放入盛有氯化鈣的干燥器中初步干燥），一般以花粉不相互黏結(jié)為度。（２）去雜花粉在貯藏前要過篩去雜后分別裝在小瓶里，數(shù)量為小瓶容量的1/５，瓶口用雙層紗布封扎，并在小瓶外貼上小標(biāo)簽，注明花粉名稱和采集日期等，將其置于底部盛有無水氯化鈣等吸水劑的干燥器內(nèi)。（３）冷藏干燥器應(yīng)放在陰涼、干燥處，或置于０～２℃的冰箱內(nèi)貯藏。２．花粉生活力的測(cè)定方法（１）蔗糖瓊脂培養(yǎng)法①配制培養(yǎng)基取100ｍＬ蒸餾水中加入１～２ｇ（即質(zhì)量分?jǐn)?shù)為１％～２％）瓊脂煮開，使瓊脂溶解，然后再加入一定量的蔗糖或葡萄糖和0.01ｇ硼酸，制成不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)為（５％、１０％、１５％、２０％）的蔗糖瓊脂培養(yǎng)基。②制片用玻璃棒蘸少許培養(yǎng)基，趁熱滴入凹形載玻片，放置片刻，待其凝固后，撒上少許花粉粒。注意花粉粒要均勻，不可過多，否則在顯微鏡下不易分清數(shù)目。③培養(yǎng)將制好的載玻片置于培養(yǎng)皿，下面墊有脫脂棉，加入少量水以保持濕度。將培養(yǎng)皿蓋好，置于20～22℃恒溫箱中。不同植物種類其花粉發(fā)芽所需時(shí)間不同，發(fā)芽快的花粉，如鳳眼蓮、鳳仙花等，經(jīng)過數(shù)小時(shí)即可觀察；而有些則需經(jīng)過十幾小時(shí)或幾十小時(shí)才能觀察到發(fā)芽的花粉。需在顯微鏡下觀察花粉發(fā)芽。④鏡檢為了保證試驗(yàn)結(jié)果的代表性，應(yīng)隨機(jī)在顯微鏡下?。祩€(gè)視野，統(tǒng)計(jì)花粉總數(shù)及發(fā)芽數(shù)，計(jì)算出平均值。若花粉發(fā)芽率在５％以下為極弱，不能被采用。（２）染色法－過氧化氫酶測(cè)定法①配制藥液將0.20ｇ聯(lián)苯胺溶于100ｍＬ50％乙醇中，盛入棕色瓶中，放暗處備用。將0.15ｇα－萘乙酚溶于100ｍＬ95％乙醇中，盛入棕色瓶中，放暗處備用。將0.25ｇ碳酸鈉溶于100ｍＬ蒸餾水中，盛入白色瓶中備用。將以上３種溶液等量混合，為“甲液”，盛入棕色瓶中備用。將過氧化氫用蒸餾水稀釋成0.3％溶液，為“乙液”，隨配隨用。②制片取花粉少許撒入凹形載玻片，滴入“甲液”，片刻后再滴入“乙液”，３～５min后在顯微鏡下觀察。③確定發(fā)芽率在顯微鏡下觀察，凡是有生活力的花粉為紅色或玫瑰紅色，而黃色（即不著色）的為無生活力的花粉。發(fā)芽率標(biāo)準(zhǔn)同上。（３）染色法－氯化三苯基四氯唑（ＴＴＣ）法①?。裕裕?.5ｇ放入燒杯中，加入少許95％乙醇使其溶解，然后用蒸餾水稀釋至100ｍＬ，配制成０．５％的ＴＴＣ溶液，避光保存。②取少數(shù)花粉播于載玻片上，加幾滴ＴＴＣ溶液，蓋上蓋玻片。③將制片放置于35℃恒溫箱中15min，然后在顯微鏡下觀察。凡被染為紅色的花粉則活力強(qiáng)，淡紅色次之，無色者為沒有生命力或不育的花粉。④觀察２～３個(gè)制片，每片?。祩€(gè)視野并統(tǒng)計(jì)100粒花粉，計(jì)算花粉生活力。五、作

業(yè)１．用培養(yǎng)發(fā)芽法計(jì)算花粉生活力（取５個(gè)視野）。２．用染色法計(jì)算花粉生活力（取５個(gè)視野）。３．分析花粉發(fā)芽率高或低的原因（表７）。實(shí)訓(xùn)8有性繁殖園藝植物雜種一代育種計(jì)劃的制定優(yōu)勢(shì)育種是先使親本純化為自交系，然后使純化的兩個(gè)自交系雜交獲得雜種一代用于生產(chǎn)。當(dāng)然，親本也可以為品種，但自交系間的F1優(yōu)于品種間雜交。雜種優(yōu)勢(shì)的強(qiáng)弱主要決定于親本自交系或品種間的配合力。因此雜種一代的育種實(shí)際上包括兩個(gè)相互關(guān)聯(lián)的育種步驟：一是自交系的選育，有些作物還包括不育系、保持系、自交不親和系等的選育；二是配合力的測(cè)定，主要進(jìn)行自交系或品種間配合力的測(cè)定，篩選優(yōu)良雜交組合。考慮到Ｆ１種子生產(chǎn)的難易，在雜種一代選育的過程中，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)與親本繁殖和雜種配制有關(guān)性狀的選擇。通過利用所學(xué)習(xí)的雜種優(yōu)勢(shì)育種及相關(guān)章節(jié)的育種知識(shí)，制定具體的育種計(jì)劃，加深對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解。一、實(shí)訓(xùn)要求二、育種計(jì)劃制定的內(nèi)容育種工作者在開始工作之前，應(yīng)該有一個(gè)較為完整的育種計(jì)劃，以免事倍功半。育種計(jì)劃的制定因育種目標(biāo)、選育方法、環(huán)境、人力和物力條件而異，無固定模式可循。下面以蔬菜作物甘藍(lán)為例，說明甘藍(lán)雜種一代新品種選育計(jì)劃設(shè)計(jì)方案的制定以供參考。１．確定育種目標(biāo)及達(dá)到該育種目標(biāo)的技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)從目前甘藍(lán)生產(chǎn)及市場(chǎng)發(fā)展趨勢(shì)分析，今后甘藍(lán)的總需求量不會(huì)大量增加，但期望周年均有甘藍(lán)供應(yīng)，并且要求高品質(zhì)、小型化。因此，優(yōu)質(zhì)、抗病、豐產(chǎn)是目前及今后一個(gè)時(shí)期內(nèi)甘藍(lán)育種的主要目標(biāo)。具體的育種目標(biāo)為以下３個(gè)方面：（１）品質(zhì)葉球外觀符合當(dāng)?shù)叵M(fèi)者的要求，葉球的幫葉比不高于30％；葉球緊實(shí)度0.5以上，葉球內(nèi)中心柱長不超過球高的１/２：葉質(zhì)脆嫩，風(fēng)味品質(zhì)優(yōu)良，無異味；維生素Ｃ每100ｇ含量在45ｍｇ以上，粗纖維少。１．確定育種目標(biāo)及達(dá)到該育種目標(biāo)的技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)從目前甘藍(lán)生產(chǎn)及市場(chǎng)發(fā)展趨勢(shì)分析，今后甘藍(lán)的總需求量不會(huì)大量增加，但期望周年均有甘藍(lán)供應(yīng)，并且要求高品質(zhì)、小型化。因此，優(yōu)質(zhì)、抗病、豐產(chǎn)是目前及今后一個(gè)時(shí)期內(nèi)甘藍(lán)育種的主要目標(biāo)。具體的育種目標(biāo)為以下３個(gè)方面：（１）品質(zhì)葉球外觀符合當(dāng)?shù)叵M(fèi)者的要求，葉球的幫葉比不高于30％；葉球緊實(shí)度0.5以上，葉球內(nèi)中心柱長不超過球高的１/２：葉質(zhì)脆嫩，風(fēng)味品質(zhì)優(yōu)良，無異味；維生素Ｃ每100ｇ含量在45ｍｇ以上，粗纖維少。（２）抗病性抗病毒病（ＴｕＭＶ）兼抗黑腐病。（３）產(chǎn)量高于同類主栽品種１０％。２．技術(shù)路線及實(shí)施方案（１）種質(zhì)資源的廣泛搜集和觀測(cè)廣泛搜集甘藍(lán)種質(zhì)資源，對(duì)搜集到的材料進(jìn)行整理與觀察。在當(dāng)?shù)馗仕{(lán)種植季節(jié)，于田間設(shè)觀察圃地進(jìn)行栽培，按當(dāng)?shù)氐姆N植習(xí)慣，在同樣的栽培管理?xiàng)l件下，對(duì)其植物學(xué)性狀和生物學(xué)特性作觀察鑒定。觀察記錄項(xiàng)目有：①植物學(xué)性狀株高、開展度、外葉葉形、外葉數(shù)、葉片大小、葉色，葉面特征、葉球形狀等。②生物學(xué)特性整齊度、抗病性（主要是抗病毒病和黑腐病等）、產(chǎn)量（包括全株重、葉球重等）、凈菜率、緊實(shí)度、生育期等。通過觀察鑒定從中初步選出基本符合育種目標(biāo)并有利用價(jià)值的原始材料，進(jìn)一步自交純化，選出優(yōu)良的自交不親和系。（２）自交不親和系的選育甘藍(lán)是典型的異花授粉植物，雜種優(yōu)勢(shì)十分明顯，加之群體內(nèi)自交不親和基因的頻率較高，通過選擇可以得到穩(wěn)定的自交不親和系供配制雜種一代之用。因此，雜種優(yōu)勢(shì)已成為目前甘藍(lán)育種最為主要的育種途徑。甘藍(lán)雜交優(yōu)勢(shì)利用的正常工作程序是先從配合力強(qiáng)的品種中選育經(jīng)濟(jì)性狀好的自交不親和系，再用選出的自交不親和系配成不同的組合，測(cè)定其產(chǎn)量及其他經(jīng)濟(jì)性狀，最后選出最佳組合。但為了縮短育種年限，一般都采取經(jīng)濟(jì)性狀選擇純化、自交不親和系選育及配合力測(cè)驗(yàn)等工作同時(shí)進(jìn)行的育種程序。在以上程序中，自交不親和系的選育決定能否獲得理想的親本，是甘藍(lán)雜種一代選育的關(guān)鍵。（３）在自交不親和系選育以及經(jīng)濟(jì)性狀鑒定的同時(shí)，對(duì)甘藍(lán)材料抗病性進(jìn)行鑒定。利用危害當(dāng)?shù)馗仕{(lán)的蕪菁花葉病毒（ＴｕＭＶ）的代表性毒源以及黑腐病菌進(jìn)行苗期室內(nèi)人工接種鑒定，并與田間自然鑒定相結(jié)合，篩選出單抗和復(fù)合抗性表現(xiàn)較好的抗原材料。（４）品質(zhì)鑒定利用感官鑒定法進(jìn)行甘藍(lán)外觀、風(fēng)味和質(zhì)地的鑒定；利用理化方法分析幫葉比、葉球緊實(shí)度、中心柱長以及纖維素、維生素Ｃ、可溶性固形物的含量等，以篩選出符合要求的優(yōu)質(zhì)材料。（５）配合力測(cè)定用篩選出的符合育種目標(biāo)的自交不親和系，按照Griffing（1956）完全雙列雜交的第４種方案或格子方法制定雜交計(jì)劃，進(jìn)行配合力測(cè)定，選配優(yōu)質(zhì)、多抗（抗ＴｕＭＶ兼抗黑腐?。?、豐產(chǎn)的甘藍(lán)雜種一代組合。（６）品種比較試驗(yàn)和區(qū)域性試驗(yàn)將通過上述育種程序和鑒定方法選育出的優(yōu)良組合進(jìn)行品種比較試驗(yàn)和區(qū)域性試驗(yàn)，以確定其在生產(chǎn)上的應(yīng)用價(jià)值和品種的區(qū)域適應(yīng)性，這兩項(xiàng)工作可同時(shí)進(jìn)行，選育出符合育種目標(biāo)的甘藍(lán)雜種一代品種。（７）親本的擴(kuò)大繁殖及一代雜種生產(chǎn)從品種比較試驗(yàn)的后期開始，就要對(duì)表現(xiàn)突出的組合的親本適當(dāng)擴(kuò)大繁殖，一方面增加親本種子數(shù)量，另一方面擴(kuò)大Ｆ1種子量。在進(jìn)行生產(chǎn)試驗(yàn)的同時(shí)，研究該組合的雜交制種技術(shù)，建立雜交種生產(chǎn)基地，以便新品種迅速推廣。３．甘藍(lán)雜種一代選育程序三、作

業(yè)選擇一種有性繁殖的園藝作物，根據(jù)市場(chǎng)和生產(chǎn)需求，結(jié)合該物種的繁殖特性及現(xiàn)有種質(zhì)資源和品種現(xiàn)狀，制定一個(gè)雜種一代育種計(jì)劃。實(shí)訓(xùn)9園藝植物的有性雜交技術(shù)—菊花的雜交育種菊花栽培品種是高度雜合的異源多倍體或非整倍休，基因型極其復(fù)雜，雜交后代千變?nèi)f化，分離十分廣泛，常有超親現(xiàn)象。因此，只要按照育種目標(biāo)選配適當(dāng)?shù)挠H本，即可保證在１～２年的時(shí)間獲得大量變異后代，進(jìn)而選育出無性系新品種。目前，絕大部分菊花品種都是經(jīng)過人工雜交育而成的，該方法是菊花新品種選育最主要、最有效和最簡(jiǎn)便易行的途徑。菊花是天然異花授粉植物，自交不結(jié)實(shí)或結(jié)實(shí)率極低。菊花的管狀花為兩性花，舌狀花為雌雄花。雜交授粉時(shí)，父本的花粉來源于管狀花，管狀花和舌狀花的雌蕊均可作母本。在同一頭狀花序上，外輪舌狀花首先成熟開放，雌蕊先行羽裂（“展羽”）并分泌黏液，此時(shí)為舌狀花接受花粉的最佳時(shí)機(jī)。舌狀花開放由外輪推向內(nèi)輪，此時(shí)管狀花亦宣告成熟，其雄蕊先行散粉，是采集花粉的最佳時(shí)機(jī)。隨后１～２天由雌蕊展羽成熟，是管狀花接受花粉的最佳時(shí)機(jī)。由于同一頭狀花序上舌狀花先后成熟，可多次進(jìn)行授粉，每隔１～２天授粉１次，連續(xù)３～４次。一天中授粉的最佳時(shí)機(jī)是晴天上午１０—１２時(shí)。熟悉菊花的開花習(xí)性；掌握菊花的有性雜交技術(shù)。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目有性雜交技術(shù)。試材：根據(jù)育種目標(biāo)選擇雜交親本３～４個(gè)品種。用具：小鑷子、授粉器、花粉瓶、培養(yǎng)皿、放大鏡、溫箱、干燥器、紙袋、掛牌、回形針、脫脂棉、70％乙醇等。三、試材與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．親本的選擇根據(jù)育種目標(biāo)，選擇花形與花期一致、花色吻合的菊花作為雜交育種的親本。雜交中花色和花期會(huì)發(fā)生有趣的變化。如粉色與紫色雜交其后代可以出現(xiàn)粉色、紫色和黃色；黃色與紅色品種雜交，其后代會(huì)出現(xiàn)古銅色和金黃色；秋菊和夏菊進(jìn)行雜交后代以秋菊為主等。２．雜交技術(shù)（１）花瓣處理菊花多數(shù)品種的舌狀花的花冠筒較長，人工雜交過程中，應(yīng)于舌狀花大半開放時(shí)，將父、母本的舌狀花花冠剪去大部分，保留基部ｌ～２ｃｍ，以利筒狀花的發(fā)育，也便于采粉和授粉工作，但要注意不能傷及雌蕊柱頭。（２）套袋菊花雌、雄蕊成熟期不同，一般不會(huì)自花授粉，且自交結(jié)實(shí)率極低，因而雜交時(shí)可以不去雄，但在采粉及授粉前，需對(duì)父、母本進(jìn)行套袋，以防外來花粉污染和天然雜交。（３）采集花粉用作父本的花粉采自筒狀花。筒狀花的雄蕊通常于雌蕊成熟前２～３天先行成熟散粉，一般在下午３時(shí)左右散粉最盛，是采集花粉的最好時(shí)機(jī)。采粉時(shí)先去掉套袋，用毛筆將花粉掃落在培養(yǎng)皿中備用，然后再套上紙袋。將培養(yǎng)皿置于室內(nèi)溫暖干燥處，待花粉散出后裝入花粉瓶，在瓶上貼好標(biāo)簽，注明品種名稱和采集日期，置干燥器內(nèi)并放在冰箱中備用。（４）授粉在晴朗無風(fēng)、陽光充足的上午10—12時(shí)，于室內(nèi)進(jìn)行人工授粉。將父本花粉授到雌蕊呈“Ｙ”的柱頭上（不成熟雌蕊的柱頭是一條線，呈“Ｉ”狀；老化的柱頭呈“Ｔ”狀；最佳授粉時(shí)機(jī)的柱頭呈“Ｙ”狀）。每天授粉１次，連續(xù)進(jìn)行３次。每次授粉后套袋，掛牌標(biāo)明授粉次數(shù)及日期。最后一次授粉１周后摘去套袋。（５）雜交后的管理授粉后的母株要加強(qiáng)管理，多施鉀肥促使種子飽滿?？稍谑诜酆?5～20天當(dāng)花頭老熟時(shí)將眾多多余的花朵剪除以增加其營養(yǎng)，增加陽光透入，有利于種子成熟。自授粉以后澆水不能淋濕花朵，更不能淋雨，防止發(fā)霉影響種子成熟。（６）種子采收授粉后經(jīng)40～60天種子成熟后將花頭剪下，晾干后采收種子并記載、收藏。五、作

業(yè)１．試述提高菊花雜交結(jié)實(shí)率的主要技術(shù)環(huán)節(jié)。２．在有性雜交工作中最容易發(fā)生失誤的技術(shù)環(huán)節(jié)有哪些？３．詳細(xì)記錄雜交過程。實(shí)訓(xùn)10園藝植物多倍體的誘變與鑒定人工誘變多倍體是現(xiàn)代育種的有效途徑之一。誘變多倍體的方法和藥劑很多，但以秋水仙堿應(yīng)用最普遍，效果也好。秋水仙堿能抑制紡錘體和膜的形成，但不妨礙染色體分裂，其結(jié)果因細(xì)胞不能相應(yīng)分裂使染色體得到加倍。處理材料一般選用處于細(xì)胞分裂狀態(tài)的芽或萌動(dòng)的種子。誘導(dǎo)成功的多倍體細(xì)胞隨著細(xì)胞的增殖與分化，便產(chǎn)生了多倍體的器官與組織。巨大性是多倍體器官的一個(gè)重要特征，通常表現(xiàn)為葉柄變粗或短縮、花器和果實(shí)變大，有時(shí)還表現(xiàn)為生長緩慢、出現(xiàn)花斑和葉基變寬、結(jié)實(shí)性下降等，所以鑒定多倍體是一項(xiàng)重要的工作。除了根據(jù)以上外部形態(tài)特點(diǎn)觀察鑒別多倍體外，更為可靠的指標(biāo)是看氣孔和花粉是否增大。如有條件，鏡檢細(xì)胞染色體的數(shù)目則是最直接、最可靠的鑒定方法。了解秋水仙堿誘變多倍體的原理，并初步掌握用秋水仙堿誘變多倍體的一般方法。掌握間接鑒定多倍體植物的方法。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目１．秋水仙堿誘變多倍體。２．間接鑒定多倍體植物。試材：園藝植物的植株、插條、種子或幼苗等。藥品：秋水仙堿、重鉻酸鉀、濃硝酸、濃硫酸、番紅、蒸餾水、0.2％～0.4％秋水仙堿水溶液、45％醋酸、醋酸洋紅染液、70％乙醇、0.1％～0.2％升汞、蒸餾水等。用具：米尺、測(cè)微尺、滴管、放大鏡、標(biāo)簽、脫脂棉、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、培養(yǎng)皿、顯微鏡、試劑瓶、酒精燈、吸水紙等。三、試材、藥品與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．秋水仙堿的處理（１）配制藥液稱取一定量的秋水仙堿，加蒸餾水配成１％的溶液備用。（２）處理液的配制通常按0.2％～１％的體積分?jǐn)?shù)配成２～３個(gè)處理液，每個(gè)處理重復(fù)３～４次，以蒸餾水為對(duì)照。（３）處理材料的選擇選用園藝植物的植株或插條上正處于分裂狀態(tài)的芽或生長點(diǎn)或剛萌動(dòng)的種子或剛展開子葉的小苗等進(jìn)行處理。（４）處理方法在芽部固定一個(gè)小棉球，每天清晨露水干后用滴管將處理液滴在棉球上，以能敷濕芽不外流為度（最好外罩一塑料袋防止蒸發(fā)），連續(xù)處理２～３天或更長，然后去除棉球。萌動(dòng)的種子則用0.2％秋水仙堿浸泡２４～３６ｈ（中間換氣１次），然后洗凈置于恒溫箱中催芽。小苗則滴于生長點(diǎn)，每天早、晚各一次，連續(xù)處理２～４天。（５）掛標(biāo)簽觀察每個(gè)處理的芽均要掛上標(biāo)簽，記載處理日期、次數(shù)與方法，并觀察其生長變異情況。２．多倍體誘變材料的鑒定（１）外部形態(tài)鑒定仔細(xì)觀察處理株與對(duì)照株在形態(tài)上的差異，如抽梢時(shí)間、梢長度、節(jié)間長度；葉的大小、厚度（用測(cè)微尺測(cè)量）、葉色深淺、是否有變形葉、鑲嵌葉，葉緣不規(guī)則，葉脈不對(duì)稱等，葉脈粗細(xì)、多少，著生葉序的變化，枝梢基部是否有提前脫落的退化葉片；花器的大小、形態(tài)、顏色；果實(shí)的大小、形態(tài)、顏色及成熟度等。（２）氣孔的鑒定撕取葉表皮放在載玻片上，于顯微鏡下觀察鑒定。多倍體的氣孔一般比二倍體長，單位面積氣孔數(shù)比二倍體少；多倍體保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)的葉綠體數(shù)一般多于二倍體。（３）花粉粒鑒定將新開花的花粉撒于載玻片上，于顯微鏡下觀察花粉粒大小。多倍體的花粉一般比二倍體大。五、作

業(yè)觀察誘變材料與對(duì)照株的外部形態(tài)特征，并比較二者差異。實(shí)訓(xùn)11植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是植物細(xì)胞的全能性。即植物體的每一個(gè)活細(xì)胞具有完整的遺傳信息，當(dāng)其脫離原來所在器官或組織的束縛成為游離狀態(tài)時(shí)，在一定培養(yǎng)基和激素的作用下，就能恢復(fù)其遺傳全能性而重建其完整的個(gè)體，有類似于合子發(fā)育的功能。植物組織在一定培養(yǎng)條件下，原來已經(jīng)停止分化生長的細(xì)胞又能重新分裂，形成沒有組織結(jié)構(gòu)的細(xì)胞團(tuán)，即愈傷組織，這一過程稱為“脫分化作用”。已經(jīng)脫分化的愈傷組織，在一定條件下又能重新分化形成輸導(dǎo)系統(tǒng)以及根和芽等組織和器官，這一過程稱為“再分化作用”。植物激素在此過程中起著重要的作用，生長素與細(xì)胞分裂素的比例決定了根和芽的分化。掌握植物組織培養(yǎng)的基本操作技術(shù)。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目紅掌、金邊扶芳藤、紅葉石楠、繡球、大巖桐、金葉連翹等植物的組織培養(yǎng)。藥品：配制培養(yǎng)基的各種藥品，NH4NO3、KNO3、ＭｇSＯ4·７Ｈ2Ｏ、KH2PO4、CａCL２·２Ｈ2O、FeFO4·７H2Ｏ、EDTA、ＭｎSO4·４H2O、ZｎSO4·７H２Ｏ、Ｈ3BO3、KI、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCL2·6H2O、甘氨酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆素、煙酸、肌醇、蔗糖、瓊脂、BA、KT、NAA、IAA、IBA等。用具：高壓蒸汽滅菌器、生物顯微鏡、電子天平、電熱干燥箱、光照培養(yǎng)箱、超靜工作臺(tái)、恒溫?fù)u床、冰箱、干燥器、三角瓶、培養(yǎng)瓶、燒杯、量筒、容量瓶、試劑瓶、精密試紙、滴瓶、酒精燈、鑷子、剪刀、解剖刀、接種針、試管刷等。無菌接種室及備有空調(diào)的無菌培養(yǎng)室各一間。三、藥品與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．培養(yǎng)基的選擇與初次培養(yǎng)（１）培養(yǎng)基的選擇與配制不同的材料所使用的基本培養(yǎng)基以及添加激素的種類和濃度都不相同。紅掌初代培養(yǎng)的培養(yǎng)基為：ＭＳ＋ＢＡ（2.0）＋ＮＡＡ（0.05）；紅掌繼代培養(yǎng)的培養(yǎng)基為：ＭＳ＋ＢＡ（0.5）＋ＮＡＡ（0.01～0.05）。根據(jù)培養(yǎng)基的配方，按照培養(yǎng)基的配置方法準(zhǔn)備培養(yǎng)基并消毒備用。（２）取材與滅菌選取當(dāng)年11月初抽出的葉片帶葉柄剪下，用自來水沖洗干凈后將葉柄切成1～２cm小段，葉片切成1～2cm小塊。然后將材料在超凈工作臺(tái)內(nèi)用70％乙醇浸泡30s左右，再用0.1％～0.2％的升汞消毒8～10min，最后用無菌水沖洗數(shù)次，濾干備用。（３）接種與培養(yǎng)在無菌條件下將葉柄、葉片接入消毒好的培養(yǎng)基中，每瓶２～３個(gè)材料，接種后置于培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)室條件為溫度（25+2）℃，光照度2000lx，每日10～16ｈ。培養(yǎng)40天左右即可長出愈傷組織和小芽點(diǎn)。２．芽的增殖將初次培養(yǎng)的愈傷組織或小芽點(diǎn)轉(zhuǎn)入ＭＳ＋ＢＡ（1.00）＋ＮＡＡ（0.01）對(duì)誘導(dǎo)出的叢生芽進(jìn)行繼代培養(yǎng)，一般５周繼代１次。３．生根培養(yǎng)把上述的粗壯幼苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基誘導(dǎo)生根，紅掌根的培養(yǎng)基為１/２MS＋I(xiàn)BA（0.5）（即ＭＳ培養(yǎng)基中的大量元素鈣、鐵用量減半，其余不變）。也可省去這一步，把苗直接移入介質(zhì)中生根。方法是當(dāng)芽苗長至１～２ｃｍ時(shí)，把其割下移植到溫室的生根介質(zhì)中。生根介質(zhì)有以下４種：泥炭∶蛭石＝１∶１；泥炭∶珍珠巖＝１∶１；泥炭∶苔蘚＝１∶１；泥炭∶蛭石∶珍珠巖＝１∶１∶１。在４種介質(zhì)中，芽苗生根率均可達(dá)到１００％，但最后一種介質(zhì)處理植株質(zhì)量最好。芽苗在溫室中培育３～４周后即可盆栽。４．小苗移栽經(jīng)過誘導(dǎo)培養(yǎng)長出的完整小苗取出，洗凈根上的培養(yǎng)基，在溫室或大棚煉苗，增強(qiáng)其適應(yīng)性后即可盆栽。五、作

業(yè)１．植物組織培養(yǎng)成功與否的關(guān)鍵是什么？２．植物組織培養(yǎng)有何生產(chǎn)實(shí)踐意義？植物組織培養(yǎng)能否成為將來的發(fā)展方向？為什么？實(shí)訓(xùn)12園藝植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)植物基因轉(zhuǎn)化體系是指離體培養(yǎng)的植物組織、細(xì)胞及原生體作為受體，通過某種途徑和技術(shù)將外源基因?qū)胫参锛?xì)胞并使其在受體細(xì)胞或再生的植株中穩(wěn)定保留和表達(dá)，最后通過有性或無性繁殖傳遞給后代。植物的基因轉(zhuǎn)化方法有農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、電激法、基因槍法、激光微束穿孔法、顯微注射法、聚乙二醇法和花粉管通道法等。在所有遺傳轉(zhuǎn)化方法中，農(nóng)桿菌Ｔｉ或Ｒｉ質(zhì)粒轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的機(jī)制研究得最清楚，方法最成熟，應(yīng)用最廣泛。自從Horsch等（1985）以煙草為試材首創(chuàng)葉盤法后，這一經(jīng)典方法已成功應(yīng)用于番茄、馬鈴薯、棉花、萵苣、芹菜、擬南芥、芥菜、向日葵等多種植物的遺傳轉(zhuǎn)化，是目前雙子葉植物中較為常見也較為有效的方法。了解植物轉(zhuǎn)基因的各種方法，明確園藝植物番茄葉盤法轉(zhuǎn)基因的操作程序。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目番茄葉盤法轉(zhuǎn)基因的操作。試材：番茄種子。藥品：MS培養(yǎng)基的各種藥品，NH4NO3、KNO3、ＭｇSＯ4·７Ｈ2Ｏ、KH2PO4、CａCL２·２Ｈ2O、FeFO4·７H2Ｏ、EDTA、ＭｎSO4·４H2O、ZｎSO4·７H２Ｏ、Ｈ3BO3、KI、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCL2·6H2O、甘氨酸、鹽酸硫胺素、鹽酸吡哆素、煙酸、肌醇、蛋白胨、酵母浸膏、NaCl、卡那霉素（Carb）、頭孢霉素（Ｋｍ）、蔗糖、瓊脂、BA、KT、NAA、IAA、IBA等。用具：高壓蒸汽滅菌器、細(xì)菌培養(yǎng)搖床、低溫離心機(jī)、超凈工作臺(tái)、電子天平、電熱干燥箱、光照培養(yǎng)箱、冰箱、干燥器、三角瓶、培養(yǎng)瓶、燒杯、量筒、容量瓶、試劑瓶、精密試紙、滴瓶、酒精燈、鑷子、剪刀、解剖刀、接種針、試管刷等。無菌接種室及備有空調(diào)的無菌培養(yǎng)室各一間。三、試材、藥品與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．無菌苗的獲得有兩種方法第１種方法是將種子用10％的次氯酸鈉消毒20～30ｓ后，用無菌水沖洗至少３次。將滅菌種子播種在１/２ＭＳＯ培養(yǎng)基（礦物鹽，4.3ｇ/ＬＭＳ；維生素B５，１mL/Ｌ；蔗糖30ｇ/Ｌ；瓊脂，0.8％；PH5.7）上，在溫室和室內(nèi)光照下培養(yǎng)至子葉完全展平。用小鑷子或解剖針在子葉上穿刺數(shù)個(gè)孔。第２種方法是將種子播種在培養(yǎng)盤上，每１～２周播種１次，在適合的光照和較低的溫度下培育秧苗，在新培育的秧苗（及時(shí)淘汰老苗）上選用無斑痕的葉片，用10％次氯酸鈉消毒15～20min后，用無菌水沖洗至少３次，用打孔器或解剖刀將葉片切成圓形、條形或長方形，以增加傷口面積。２．選擇步驟在MS104培養(yǎng)基（MSO，1.0μｇ/Ｌ；BA，0.1μｇ／ＬN(yùn)AA）中預(yù)培養(yǎng)１～２天，使切傷葉片開始生長，并可減少由于滅菌中造成的葉片傷害。選取切口開始形成愈傷組織的用于接種。３．接種將農(nóng)桿菌菌種接種在含有適宜抗生素的LB培養(yǎng)基（蛋白胨，10ｇ／Ｌ；酵母浸膏，5ｇ/Ｌ；NaCl，10ｇ/Ｌ；PH7.2）過夜培養(yǎng)。取過夜培養(yǎng)菌液用MSO培養(yǎng)基按1:20的比例稀釋作為接種菌液。再將外植體傷口侵入接種菌液一定時(shí)間。番茄已侵入接種菌液５min為宜。４．滋養(yǎng)培養(yǎng)配備１～1.5ｍＬ番茄細(xì)胞懸浮培養(yǎng)液作為滋養(yǎng)培養(yǎng)，并將其加入含有25mlMS104培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)皿中，搖動(dòng)培養(yǎng)皿使懸浮液分散在培養(yǎng)基表面，再用一張與培養(yǎng)皿大小適合的滅菌濾紙蓋上。將準(zhǔn)備好的外植體倒置接種在滋養(yǎng)培養(yǎng)基（nurseculture）上培育２～３天。５．選擇培養(yǎng)將外植體轉(zhuǎn)入ＭＳ選擇培養(yǎng)基（ＭＳ104，500μｇ/Ｌ；頭孢霉素，300μｇ/Ｌ；卡那霉素）培養(yǎng)數(shù)周。培養(yǎng)２～３周后，在外植體傷口處切取轉(zhuǎn)化部分，并換上新鮮選擇培養(yǎng)基。外植體在誘導(dǎo)生芽后，將整個(gè)外植體轉(zhuǎn)入ＭＳ生根培養(yǎng)基（ＭＳＯ，500μｇ/Ｌ頭孢霉素；100μｇ/Ｌ卡那霉素；瓊脂0.6％）。６．生根培養(yǎng)當(dāng)肉眼可見芽已形成時(shí)，可用解剖刀將芽從外植體和愈傷組織上分出，接種在ＭＳ生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)。需要注意的是，為了避免來自同一細(xì)胞植株的再生，每一個(gè)外植體只?。眰€(gè)芽用于生根培養(yǎng)。在生根小苗轉(zhuǎn)接前，可取一小片葉接種在選擇培養(yǎng)基以鑒定其對(duì)卡那霉素的抗性，為此后植株基因表達(dá)研究提供信息。７．移栽當(dāng)芽生根后，就可移栽小苗。移栽時(shí)，要沖洗干凈根上的瓊脂，移栽于營養(yǎng)缽并用聚乙烯薄膜覆蓋保濕。7～10天后，在薄膜上逐漸開大通風(fēng)口使其適應(yīng)環(huán)境濕度。８．培育轉(zhuǎn)化植株在常規(guī)植物生長條件下，培育轉(zhuǎn)化植株。五、作

業(yè)１．各組根據(jù)實(shí)訓(xùn)的情況，寫出園藝植物番茄葉盤法基因轉(zhuǎn)化的程序。２．試比較各種基因轉(zhuǎn)化方法及葉盤法基因轉(zhuǎn)化的優(yōu)勢(shì)有哪些？實(shí)訓(xùn)13果樹良種苗木的鑒定與檢驗(yàn)果樹苗木是發(fā)展果樹生產(chǎn)的基本材料。果樹苗木品質(zhì)直接關(guān)系到果園的經(jīng)濟(jì)效益和建園成敗，對(duì)果樹栽植成活率、經(jīng)濟(jì)壽命、生長結(jié)果、果品品質(zhì)、抗逆性等都有重要影響。果樹種類繁多，生長習(xí)性各異，繁殖途徑和方法也不同。有的以嫁接繁殖方法為主（如蘋果、梨、李、杏），有的以扦插方法為主（如葡萄、穗醋栗等），有的以根蘗繁殖為主（樹莓等）。因此，鑒定和評(píng)價(jià)果樹苗木品質(zhì)指標(biāo)也不盡相同。苗木品種鑒定主要是通過對(duì)植株的形態(tài)特征、生物學(xué)特性等方面加以鑒定，必要時(shí)采用染色體觀察、同功酶分析等技術(shù)，確定品種的真實(shí)性和品種純度，淘汰混雜變異類型。苗木檢驗(yàn)是對(duì)引進(jìn)、引出苗木的病蟲害等檢疫對(duì)象以及苗木的等級(jí)進(jìn)行檢驗(yàn)。檢疫對(duì)象和苗木等級(jí)應(yīng)根據(jù)國家或地區(qū)政府的有關(guān)法規(guī)執(zhí)行。掌握果樹良種苗木的鑒定與檢驗(yàn)方法。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目果樹良種苗木鑒定與檢驗(yàn)。試材：各類果樹品種的苗圃和苗木等。用具：卡尺、米尺、標(biāo)簽、記錄紙和筆等。三、試材與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．品種鑒定為保證良種的典型性和純度，在良種繁育過程中，除了在采種、采穗和繁殖過程中都應(yīng)做好明確標(biāo)志，繁殖后除要繪制苗木品種分區(qū)種植圖外，還要在生長期和起苗出圃期各鑒定１次。前者在停止生長到落葉前，枝葉性狀有充分表現(xiàn)時(shí)進(jìn)行鑒定，按品種為單位劃分檢查區(qū)，超過0.33ｈｍ２的選２個(gè)檢查區(qū)，超過0.67ｈｍ２的選３個(gè)檢查區(qū)，每個(gè)檢查區(qū)內(nèi)苗數(shù)以500～1000株為宜，在劃定的檢查區(qū)內(nèi)按確定的取樣規(guī)劃，劃出取樣點(diǎn)，受檢查的株數(shù)不應(yīng)少于檢查區(qū)總數(shù)的30％。熟悉預(yù)鑒定品種的主要特征、特性。選擇其中容易區(qū)別的品種的幾項(xiàng)特征、特性，如枝條顏色、皮孔特征、節(jié)間長短、分支角度、葉片大小、厚薄、絨毛多少、芽的特征、新梢停止生長早晚、落葉早晚等。對(duì)取樣點(diǎn)植株進(jìn)行典型性和純度調(diào)查。把混雜的苗木系上標(biāo)簽，做好記錄，統(tǒng)計(jì)百分率。２．種苗檢驗(yàn)包括引進(jìn)和出圃苗木的檢驗(yàn)。本次實(shí)訓(xùn)只進(jìn)行出圃苗木的檢驗(yàn)。苗木落葉前，調(diào)查主要的檢疫對(duì)象。蘋果樹幾種對(duì)外檢疫對(duì)象有蘋果食蠅（PhylloxerapomonellaWalsh.）、蘋果蠹蛾（Carpocapsa

pomonella

Hampson）；對(duì)內(nèi)檢疫對(duì)象有蘋果綿蚜（Erisomalanigerum

Hausman）、蘋果吉丁蟲（Agrilus

maliMatsumura）、蘋果銹果病等。苗木出圃時(shí)，隨機(jī)抽取30～50株，對(duì)苗木的根、莖等項(xiàng)目進(jìn)行調(diào)查，并填入表８中。然后參照表９“蘋果苗木質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)”統(tǒng)計(jì)１、２、３級(jí)苗木各自的百分率。３．結(jié)果分析（１）良種的典型性和純度通過調(diào)查統(tǒng)計(jì)該苗圃品種純度百分率，并分析產(chǎn)生品種混雜的原因，了解保證品種純正的有效措施和方法。（２）出圃苗木的檢驗(yàn)不同苗木級(jí)別所占的百分率可以反映出圃苗木的總體品質(zhì)。進(jìn)而分析造成苗木品質(zhì)下降的原因，以及培育優(yōu)質(zhì)苗木的方法和措施。有條件的情況下，可以將調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)的問題和苗木對(duì)比情況拍成照片，以便相互交流。五、作

業(yè)提交實(shí)訓(xùn)報(bào)告１份。實(shí)訓(xùn)14花卉良種苗木的鑒定與檢驗(yàn)花卉苗木是城鎮(zhèn)園林綠化的物質(zhì)基礎(chǔ)，一般指在一定規(guī)模的育苗基地上，利用有性或無性繁殖技術(shù)人為培育的，具有一定根系和苗干或枝葉的幼齡個(gè)體，如播種苗、營養(yǎng)繁殖苗、移栽苗、組培苗等。此外，為園林綠化所培育的多年生大苗、截干苗等也統(tǒng)屬于苗木的范疇?；ɑ苊缒镜钠焚|(zhì)是保證花卉規(guī)?；a(chǎn)以及景觀形成的關(guān)鍵要素。品質(zhì)優(yōu)良的苗木除應(yīng)具有良好的遺傳品質(zhì)外，還必須具有良好的栽培品質(zhì)，即我們常說的壯苗。壯苗表現(xiàn)為苗株發(fā)育健壯，生活力旺盛，對(duì)逆境適應(yīng)性較強(qiáng)，移植成活率高，栽植后緩苗快、生長迅速等；對(duì)使用群體的花卉苗木而言，還表現(xiàn)為群體株型整齊，成花均勻，花期一致等。衡量苗木品質(zhì)的指標(biāo)主要包括苗木的物質(zhì)指標(biāo)和苗木的性能指標(biāo)兩大部分。其中苗木的物質(zhì)指標(biāo)是可以借助工具和儀器進(jìn)行直接測(cè)定的，包括苗木的形態(tài)指標(biāo)和生理指標(biāo)，間接反應(yīng)苗木的品質(zhì)；而苗木的性能指標(biāo)則是苗株處于特定環(huán)境條件下植株的表現(xiàn)狀況，是苗木品質(zhì)的直接體現(xiàn)。只有同時(shí)具有良好表現(xiàn)的物質(zhì)指標(biāo)和性能指標(biāo)的花卉苗木，才能成為花木的良種。通過對(duì)幾種常見花木品質(zhì)的鑒定和評(píng)價(jià)，掌握一般花卉苗木的品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)一步了解花卉種苗的相關(guān)知識(shí)；同時(shí)，通過對(duì)常見花卉種苗品質(zhì)的評(píng)價(jià)，了解花卉種苗標(biāo)準(zhǔn)化的初步概念。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目１．苗木外部綜合形態(tài)指標(biāo)的測(cè)定（１）地上性狀指標(biāo)的測(cè)定①苗木高度

苗木主干高度到頂芽基部的長度。③干徑比苗木莖干的高度與胸徑的比值。比值越小，苗木越粗壯。也可以采用徒長度表示，即１／２苗高與１／２苗高處的莖干粗度的比值。④弱度苗高與地上部分干重之比。弱度值越大說明苗木越纖細(xì)。⑤葉片數(shù)有些草本花卉沒有莖干，可以通過形成的葉片數(shù)量來表示幼苗的生長情況。⑥分支數(shù)分生側(cè)枝的數(shù)量，表示苗木的萌芽率與成枝率的高低，尤其是經(jīng)摘心培育的苗木，要求分支要達(dá)到一定標(biāo)準(zhǔn)，才能形成優(yōu)良的商品苗。⑦干重／鮮重（ＤＷ／ＦＷ）地上部分烘干后的質(zhì)量（干重）與鮮重的比值，比值越大，說明苗木糖類的貯藏水平越高，品質(zhì)越好。⑧單位面積葉重代表葉片的營養(yǎng)水平。（２）地下性狀指標(biāo)的測(cè)定①根系結(jié)構(gòu)不同花木根系形態(tài)不同，有的為須根系，有的為直根系，要根據(jù)花木的不同種類確定合理的根系結(jié)構(gòu)組成。其中細(xì)根比例對(duì)苗木生長影響較大，尤其對(duì)苗圃地培植的多年生大苗，要求細(xì)根量越多越好。②根系長度主根、側(cè)根以及須根的長度。（３）地上、地下混合指標(biāo)測(cè)定①根冠比地下部分鮮重與地上部分鮮重的比，根冠比越大，苗木越健壯，對(duì)逆境的適應(yīng)性也越強(qiáng)。②Dickson質(zhì)量指數(shù)２．苗木生理指標(biāo)的測(cè)定（１）苗木含水量測(cè)定苗木體內(nèi)水分狀況反映苗木的生活力水平，當(dāng)水分含量下降到一定水平，苗木的生活力就會(huì)受到嚴(yán)重影響。水勢(shì)可以作為衡量苗木含水量比較準(zhǔn)確的一個(gè)指標(biāo)。苗木水勢(shì)的測(cè)定目前普遍采用Scholander等人介紹的壓力室法。（２）糖類測(cè)定糖類是苗木光合產(chǎn)物的主要貯藏形式。在苗木貯藏過程中，植株體內(nèi)的糖類水平逐漸降低，苗木品質(zhì)呈下降趨勢(shì)。通過測(cè)定苗木糖類水平，可以準(zhǔn)確評(píng)價(jià)苗木的品質(zhì)。（３）苗木芽體的休眠狀態(tài)作為品質(zhì)優(yōu)良的花卉種苗，尤其是木本花卉，處于休眠態(tài)的芽體對(duì)苗木品質(zhì)的保持具重要作用。３．苗木性能指標(biāo)的測(cè)定（１）根生長潛力的測(cè)定這項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定主要是預(yù)測(cè)苗木在遠(yuǎn)途運(yùn)輸并移栽后苗木根系的發(fā)根潛力，是花卉苗木品質(zhì)鑒定的重要指標(biāo)之一。（２）抗逆指標(biāo)測(cè)定包括抗旱、抗寒能力，是苗木內(nèi)在活力水平的體現(xiàn)。試材：?jiǎn)棠绢惪蛇x擇雪松種子苗、雪松扦插苗、櫻花二、三年生苗、紫玉蘭嫁接苗和分蘗苗等；灌木類供選花木有紫薇、紫荊、木槿、瓜子黃楊、紅葉小檗、小龍柏等；一二年生草本花卉如矮牽牛、萬壽菊、一串紅、三色堇、雛菊等；宿根類花卉如大花萱草、鳶尾、地被菊、宿根福祿栲等。用具：游標(biāo)卡尺、卷尺、電子天平、水勢(shì)計(jì)、烘箱、冷藏室或冰箱等。三、試材與用具四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容１．苗木外部綜合形態(tài)指標(biāo)的測(cè)定（１）選取二年生雪松種子苗和扦插苗各６株，使用卷尺及游標(biāo)卡尺測(cè)定株高、干徑比或徒長度，計(jì)算單株分支數(shù)，測(cè)算主根、側(cè)根以及直徑３ｍｍ以下的細(xì)根量，根冠比或Dickson質(zhì)量指數(shù)，比較種子苗與扦插苗的差異。有條件可以再測(cè)定多代扦插苗的差異。（２）花木分支率測(cè)定選擇紫荊、紫薇、木槿或瓜子黃楊、小龍柏等具叢生習(xí)性的二三年生灌木6～10株，觀察并記錄測(cè)定花木的分支習(xí)性以及分支的粗度、長度、芽體飽滿度以及芽體休眠性。（３）選取一二年生草本花卉幼苗8～10株，測(cè)算每株幼苗葉片數(shù)、單位面積葉片質(zhì)量、鮮重、干重；用流水沖刷掉根部附著的土壤或基質(zhì)，測(cè)定每株根系組成、質(zhì)量為１g的根中根的條數(shù)和總長等。２．苗木生理指標(biāo)的測(cè)定（１）苗木含水量測(cè)定選取外觀性狀基本相近的木本花卉若干，從起苗時(shí)開始測(cè)定水勢(shì)，每天檢測(cè)１次，直至苗木含水量達(dá)到平衡。水勢(shì)測(cè)定方法參見植物生理學(xué)試驗(yàn)。（２）貯藏營養(yǎng)水平的測(cè)定選取一、二年生花卉苗木，將莖干剪碎混合置于烘箱105℃殺青10min，70℃烘干至恒重待用。測(cè)定干樣中可溶性糖的含量（苯酚顯色法）。３．苗木性能指標(biāo)測(cè)定（１）根生長潛力的測(cè)定選擇一二年生木本花卉幼苗，起苗后去掉所有新根尖，將苗木栽植于容器中（可以使用水培的方法），置于最佳生態(tài)條件下，２～４周后取出，檢測(cè)發(fā)生新根數(shù)量或生長情況。（２）抗逆性指標(biāo)測(cè)定測(cè)定游離脯氨酸含量（酸性水合茚三酮顯色法）和游離氨基酸總量（氰酸鹽－水合茚三酮顯色法）。五、作

業(yè)１．分析播種苗與扦插苗生長的差異性，從品質(zhì)表現(xiàn)對(duì)此類花卉苗木檢測(cè)給出鑒定標(biāo)準(zhǔn)。２．從地上、地下兩方面對(duì)花卉苗木外觀品質(zhì)綜合性狀進(jìn)行分析。３．花卉苗木生理指標(biāo)結(jié)合外觀性狀指標(biāo)進(jìn)行綜合分析，掌握良種苗木外在及內(nèi)部指標(biāo)的聯(lián)系及區(qū)別。４．良種苗木鑒定通用標(biāo)準(zhǔn)制定及輔助指標(biāo)的檢測(cè)分析。實(shí)訓(xùn)15蔬菜良種種子播種品質(zhì)檢驗(yàn)種子是園藝生產(chǎn)中基本的生產(chǎn)資料，同樣也是農(nóng)業(yè)和農(nóng)民賴以發(fā)展的最基本的生產(chǎn)資料。種子檢驗(yàn)則是判斷種子品質(zhì)高低的一套科學(xué)、標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)體系，對(duì)農(nóng)業(yè)尤其是種子的生產(chǎn)、使用、流通乃至國際性貿(mào)易等，有著重大的意義。蔬菜生產(chǎn)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中所占的比例和地位越來越高。蔬菜種子播種品質(zhì)檢驗(yàn)則是根據(jù)蔬菜種子外部的形態(tài)特征、內(nèi)在的生理生化狀態(tài)以及給定條件下的生長發(fā)育表現(xiàn)等，對(duì)發(fā)芽率、凈度、千粒重等品質(zhì)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，鑒定其是否符合播種要求，判斷其種用價(jià)值的一套科學(xué)的、標(biāo)準(zhǔn)的方法體系。了解種子檢驗(yàn)的程序及其在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的意義。初步掌握蔬菜種子播種品質(zhì)檢驗(yàn)的原理、方法及其實(shí)訓(xùn)技術(shù)。一、實(shí)訓(xùn)要求二、實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目１．凈度分析。２．含水量測(cè)定。３．發(fā)芽力測(cè)定。試材：２～３種蔬菜種子送驗(yàn)樣品各１份（如甘藍(lán)、西瓜和辣椒種子）。用具：檢驗(yàn)桌（可用表面平滑的木桌或水泥臺(tái)代替）、分樣器、天平（或電子天平）、套篩、小碟（或培養(yǎng)皿）、鑷子、放大鏡、毛刷（或毛筆）、光照培養(yǎng)箱、數(shù)種設(shè)備（可選）、濾紙或沙、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、鋁盒（直徑為８ｃｍ）、坩堝鉗、干燥器等。地點(diǎn)：相對(duì)濕度70％以下的實(shí)驗(yàn)室。三、試材、用具與地點(diǎn)四、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容蔬菜種子播種品質(zhì)包括凈度、發(fā)芽力、含水量、千粒重、生活力、活力及健康程度等各項(xiàng)指標(biāo)。在我國種子檢驗(yàn)項(xiàng)目中，前３項(xiàng)為必檢項(xiàng)目，實(shí)訓(xùn)過程中將主要針對(duì)此３項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行分析測(cè)定。１．凈度分析種子凈度分析主要是測(cè)定供檢樣品中凈種子、其他植物種子和雜質(zhì)３種成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。（１）凈種子據(jù)《1996國際種子檢驗(yàn)規(guī)程》（以下簡(jiǎn)稱規(guī)程）中定義，除已變成菌核、黑穗病孢子團(tuán)或線蟲癭外，下列構(gòu)造中即使是未成熟的、瘦小的、皺縮的、帶病的或發(fā)過芽的種子，如果能明確鑒別出它們是屬于所分析的種子，均為凈種子。具體標(biāo)準(zhǔn)為：①完整的種子單位包括真種子、瘦果、穎果、分果和小花等。②大于原來大小一半的破損種子單位。（２）其他植物種子除凈種子以外的任何植物種子。（３）雜質(zhì)除凈種子和其他植物種子外的種子以及所有其他物質(zhì)及構(gòu)造。①非常明顯不含真種子的種子單位。②破裂或受損的種子單位的碎片為原來種子大小的一半及其以下的。③對(duì)于豆科、十字花科蔬菜，沒有種皮的種子和碎塊。④對(duì)于豆科，不管是否附著胚芽、胚根的胚中軸和／或是否超過原來種子大小的一半，凡是分離的子葉均為雜質(zhì)。２．含水量測(cè)定種子含水量是影響其生活力和安全貯運(yùn)的一個(gè)重要指標(biāo)。其測(cè)定方法通常有烘干減重法（如低溫干燥法、130℃高溫快速法和高水分預(yù)先烘干法）和電子水分速測(cè)法。測(cè)定方法的選擇以種子的水分生理狀態(tài)和油分含量為依據(jù)。若種子中油分含量較高，溫度過高，則油分易揮發(fā)，使樣品水分散失量增加，水分百分率的計(jì)算結(jié)果偏高。所以，應(yīng)選擇適宜測(cè)定方法，嚴(yán)格控制溫度。３．發(fā)芽力測(cè)定測(cè)定發(fā)芽力的目的是測(cè)定種子發(fā)芽的最大潛力，估測(cè)田間種子用量。發(fā)芽力通常以發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率來表示。前者是指在發(fā)芽試驗(yàn)初期規(guī)定的日期內(nèi)正常發(fā)芽的種子數(shù)占供試種子數(shù)的百分率，其值高，表示種子生命力強(qiáng)。發(fā)芽率指在發(fā)芽試驗(yàn)終期長成正常幼苗的種子數(shù)占供試種子數(shù)的百分率，其值高，表示種子的出苗率高。規(guī)程對(duì)種子的發(fā)芽和出苗正常標(biāo)準(zhǔn)給出以下規(guī)定。（１）正常幼苗在良好土壤及適宜的水分、溫度和光照條件下，具有繼續(xù)生長成為良好植株潛力的幼苗。①完整幼苗幼苗所有主要構(gòu)造生長良好、完全、勻稱和健康。②帶有輕微缺陷的幼苗幼苗的