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植物組織中超氧物歧化酶活性的測定,制作人:劉洪慶 單 位: 植物生理學(xué)教研室,一、實驗?zāi)康?掌握SOD酶活性測定方法。 掌握分光光度計、光照培養(yǎng)箱、冷凍離心機使用方法。,二、實驗原理,因此光還原反應(yīng)后,反應(yīng)液藍色愈深說明酶活性愈低,反之酶活性愈高。,本實驗依據(jù)超氧物歧化酶抑制氮藍四唑(NBT)在光下的還原作用來確定酶活性大小。,核黃素,被氧化物質(zhì),還原的核黃素,氧,氮藍四唑,藍色的化合物,(560nm),2 + 2H+ H2O2 + O2,SOD,三、實驗材料,綠豆芽下胚軸,四、 實驗步驟,1、酶液提取,2、顯色反應(yīng),表1 各溶液加入量,3、SOD活性測定,五、實驗結(jié)果計算,SOD總活性 =,單位:酶單位/g鮮重表示;,Ack照光對照管的光密度值; AE樣品管的光密度值; V樣液總體積(ml); a測定時樣品用量(ml); W樣重(g);,六、思考題,1、在SOD測定中為什么設(shè)暗中和照光兩個對照管? 2、影響本實驗準確性的主要因素是什么?應(yīng)如何克服?,

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